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不同激素对树兰组织培养的影响



全 文 :342 2012 年第 3 期
收稿日期:2011-10-08
作者简介:孙瑶 (1979 -) ,女,浙江杭州人,农艺师,从事兰科植物生理生化研究工作。E-mail:sunyaohz@ 126. com。
文献著录格式:孙瑶,黄康康 . 不同激素对树兰组织培养的影响 [J]. 浙江农业科学,2012 (3) :342 - 343.
不同激素对树兰组织培养的影响
孙 瑶,黄康康
(浙江省杭州市农业科学研究院,浙江 杭州 310024)
摘 要:以树兰无菌苗为材料,探讨不同激素 NAA、6-BA 配比对原球茎诱导、芽分化和生根的影响。结果
表明,树兰的诱导、分化和生根可以使用同一种培养基,即 1 /2MS + 8 g·L - 1琼脂粉 + 30 g·L - 1蔗糖 + 2 g·L - 1
活性炭 + 1 mg·L - 1 NAA + 1 mg·L - 1 6-BA,pH 值 5. 8。
关键词:树兰;组织培养;NAA;6-BA
中图分类号:S 682. 31 文献标志码:B 文章编号:0528-9017(2012)03-0342-02
树兰为兰科树兰属热带兰,原产于厄瓜多尔,
是一种具有很高观赏价值的热带气生兰,深受台湾
兰花爱好者的青睐,但在国内尚属少见[1 - 2]。谷祝
平等[3]、潘学峰等[4]曾利用树兰种子诱导形成的原
球茎进行扩繁取得成功,但种子间差异很大,利用
种子扩繁不利于亲本性状的保持[1]。为了加速繁育
速度,缩短育种周期,在工厂化育苗中常采用组织培
养的方式[5 - 6]。树兰是濒危兰花物种,数量稀少,
因此研究树兰组织培养技术,构建一套简便高效的
再生体系,对树兰的快繁研究具有重要意义。现将
作者的试验结果总结如下。
1 材料与方法
1. 1 材料
供试材料为树兰 (Epidendrum Yellow)无菌苗
的茎段和丛芽,由课题组组培室提供。
1. 2 方法
取健壮无菌试管苗,以 1 /2 MS 为基本培养基,
每升附加 8 g 琼脂粉,30 g 蔗糖和 2 g 活性炭,添
加不同浓度的 NAA (0. 2,0. 5,1. 0 mg·L - 1)和 6-
BA (0. 5,1. 0,2. 0,3. 0,4. 0 mg·L - 1)。试验设 15
个处理。每瓶接种 5 个外植体,每处理接种 10 瓶,
pH 值调至 5. 8,培养温度 25 ℃左右,每天光照时间
14 h,光照强度 1 500 ~ 2 000 lx,培养 40 ~ 50 d 后
统计数据。
2 结果与分析
2. 1 对愈伤组织和芽诱导的影响
外植体接入诱导培养基上约 20 d 后开始膨大,
产生愈伤组织,但不同激素组合对树兰茎段愈伤组
织的诱导作用差异显著,以 NAA 1. 0 mg·L - 1 + 6-
BA 3. 0 mg·L - 1诱导出的愈伤组织最好,诱导率达
50. 0% (表 1) ,且愈伤组织呈黄绿色、表面湿润、
松软,生长状态好。
表 1 NAA、6-BA 不同配比组合对愈伤组织诱导的影响
组合代号 NAA / (mg·L - 1) 6-BA / (mg·L - 1) 诱导率 /% 组合代号 NAA / (mg·L - 1) 6-BA / (mg·L - 1) 诱导率 /%
1 0. 2 0. 5 17. 8 9 1. 0 2. 0 24. 0
2 0. 5 0. 5 15. 6 10 0. 2 3. 0 15. 0
3 1. 0 0. 5 32. 0 11 0. 5 3. 0 18. 0
4 0. 2 1. 0 8. 0 12 1. 0 3. 0 50. 0
5 0. 5 1. 0 8. 9 13 0. 2 4. 0 18. 0
6 1. 0 1. 0 30. 0 14 0. 5 4. 0 24. 0
7 0. 2 2. 0 6. 7 15 1. 0 4. 0 34. 0
8 0. 5 2. 0 13. 3
在激素对树兰茎段的诱导过程中发现,经 40 ~
50 d的培养后,有些茎段分化成芽 (表 2) ,且不同激
素组合对芽的诱导效果不同。以NAA 1. 0 mg·L - 1 +
6-BA1. 0 mg · L - 1 和 NAA 1. 0 mg·L - 1 + 6-BA
孙 瑶,等:不同激素对树兰组织培养的影响 343
0. 5 mg·L - 1诱导出的芽最多,诱导率分别达 52. 0% 和 48. 0%,且植物生长健壮。
表 2 NAA、6-BA 不同配比组合对芽分化的影响
组合代号 NAA / (mg·L - 1) 6-BA /mg·L - 1) 分化率 /% 组合代号 NAA / (mg·L - 1) 6-BA / (mg·L - 1) 分化率 /%
1 0. 2 0. 5 11. 1 9 1. 0 2. 0 26. 0
2 0. 5 0. 5 26. 7 10 0. 2 3. 0 10. 0
3 1. 0 0. 5 48. 0 11 0. 5 3. 0 20. 0
4 0. 2 1. 0 20. 0 12 1. 0 3. 0 24. 4
5 0. 5 1. 0 17. 8 13 0. 2 4. 0 14. 0
6 1. 0 1. 0 52. 0 14 0. 5 4. 0 8. 0
7 0. 2 2. 0 13. 3 15 1. 0 4. 0 24. 0
8 0. 5 2. 0 20. 0
2. 2 对生根的影响
从表 3可以看出,不同 NAA和 6-BA配比组合对
树兰组培苗生根的影响不同。NAA 0. 5 mg·L - 1 +
6-BA 2. 0 mg·L - 1的激素组合对生根的诱导率最
低,只有 87. 5%。其余各生长调节剂组合对生根
的诱导率均达 90%以上。
表 3 NAA、6-BA 不同配比组合对组培苗生根的影响
组合代号 NAA / (mg·L - 1) 6-BA / (mg·L - 1) 生根率 /% 组合代号 NAA / (mg·L - 1) 6-BA / (mg·L - 1) 生根率 /%
1 0. 2 0. 5 91. 7 9 1. 0 2. 0 100. 0
2 0. 5 0. 5 96. 0 10 0. 2 3. 0 100. 0
3 1. 0 0. 5 100. 0 11 0. 5 3. 0 92. 0
4 0. 2 1. 0 92. 0 12 1. 0 3. 0 96. 0
5 0. 5 1. 0 96. 0 13 0. 2 4. 0 95. 7
6 1. 0 1. 0 100. 0 14 0. 5 4. 0 100. 0
7 0. 2 2. 0 95. 8 15 1. 0 4. 0 100. 0
8 0. 5 2. 0 87. 5
3 小结和讨论
本实验中树兰原球茎的诱导率和芽的分化率较
低,这可能是由于这 2 个实验均是在同一种培养基
中统计所致,也即是说茎段培养 40 ~ 50 d 后,同
一个组培瓶中出现原球茎和芽并存的情况。如 NAA
1. 0 mg·L - 1 + 6-BA 1. 0 mg·L - 1培养基中原球茎的
诱导率为 30%,芽分化率为 52%,即在该培养基中
培养 40 ~ 50 d 后 30%茎段转变成原球茎,另外 52%
的茎段分化成芽,诱导和分化率总和则为 82%。表
明树兰的诱导和分化相对容易,可以在同一种培养
基 中 完 成。 其 中 NAA 1. 0 mg·L - 1 + 6-BA
1. 0 mg·L - 1配方 中 诱 导 和 分 化 总 和 最 高,达
82%。此外,树兰生根相对容易,在各培养基中的
生根率均在 87. 5% 以上,其中在培养基 NAA
1. 0 mg·L - 1 + 6-BA 1. 0 mg· L - 1 上的生根率达
100%。因此,推断树兰的诱导、分化和生根可以
在同一个培养基上完成。张先云等[7]的研究也表
明杂交兰的从诱导、增殖、分化到生根可以用同一
种培养基。这样大大缩短了生产和试验周期、简化
了操作程序、降低了成本。
根据已有研究可知,不同品种间的差异性较为
显著。本文仅对树兰的一个品种进行了研究,不能
对不同品种的培养效果进行评价。因此对具有广泛
品种适应性的培养基还有待于进一步研究。
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(责任编辑:张瑞麟)