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狭叶红景天的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月472
狭叶红景天的组织培养与快速繁殖
李建民1,* 李福安2 雷梅莉1 吕守成1 文清成1
1青海师范大学生命科学系,西宁 810008;1青海医学院中医系, 西宁 810001
Tissue Culture and Rapid Propagation of Rhodiola kirilowii
LI Jian-Min1,*, LI Fu-An2, LEI Mei-Li1, LÜ Shou-Cheng1, WEN Qing-Cheng1
Department of Biological Science, Qinghai Normal University, Xining 810008 ; 2Department of Chinese Medicine, Qinghai
Medicine College, Xining 810001
收稿 2003-12-29 修定   2004-04-02
资助  青海省科技厅项目(2003-N-112)。
* E-mail:beyond_3862740@163.com, Tel: 0971-6307617
1 植物名称 狭叶红景天(Rhodiola kirilowii)。
2 材料类别 顶芽。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)芽体启动培
养基:MS+6-BA 2 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5+
LH 300;(2) 不定芽增殖培养基:MS+6-BA 1.5+
NAA 0.05+LH 300;(3)生根培养基:1/2MS0。以
上培养基均含 3% 蔗糖、0.7% 琼脂,pH 5.8。培
养温度(22±2)℃,光照度2 000 lx,光照时间16
h ·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的制备与愈伤组织的诱导 供试材料为野
生狭叶红景天地下根。带回实验室后移于土壤
中,待新芽萌发后,剪取 2~3 cm 带芽茎段,用
洗衣粉漂洗5 min,流水冲洗10 min,在超净工
作台上经70% 酒精浸泡40 s,0.1% HgCl2 灭菌 5
min,无菌水冲洗 3 次后,于解剖镜下剥取生长
锥(1 mm左右)为外植体,立即接种到培养基(1)上
进行培养。3 d 后生长锥开始愈伤化,形成白色
愈伤组织。愈伤组织诱导率为 100%。10 d 后愈
伤组织周径达0.5 cm以上。继续培养,愈伤组织
逐渐变为浅绿色,25 d后在其表面产生密布绿色
芽点。继续培养 20 d,30% 左右的芽点生长分化
成芽,若不转移到新培养基上,可重新愈伤化。
4.2 不定芽的诱导与增殖 将诱导产生的愈伤组织
转移到培养基(2)上,2周后,愈伤组织体积显著
增大,同时出现大量绿色芽点。此时,可反复
切割、继代愈伤组织进行扩大培养。4~5 周后,
形成丛生不定芽,部分产生白色不定根。若以每
40 d为1个生长周期,每100 mL三角瓶愈伤组织
产生不定芽增殖数达 6 倍以上。若将形成的不定
芽按茎节切段微扦插于培养基(2)中,3周后不定
芽可迅速伸长,出现腋芽并生根。此时,可继
续进行切割、增殖培养。待不定芽达到一定数
目、高度 3~4 cm 时,可进行生根培养。
4.3 生根与移栽 切取高2~3 cm或2~4片叶的芽体
与带茎节切段,接种于培养基(3)上,7~12 d 即
可产生根原基突起。30~40 d 后,根长 2~3 cm,
平均每株生根 9 条,生根率达 85%。待苗高达 4
cm 以上时可进行移栽。移栽前将具生根苗的三角
瓶盖打开,于实验室温度、散射光下炼苗3~4 d;
用镊子取出小苗后,洗去根部培养基,移栽于疏
松腐殖质壤土中,并加盖透光塑料杯,1 周后去
杯。成活率达 9 5 % 以上。
5 意义与进展 狭叶红景天为景天科红景天属多年
生草本植物。分布于我国西藏、青海、四川、
云南等地海拔2 000~5 600 m 的高寒地区,为我
国著名的高寒中藏医药材。具有清热退烧、解
毒、防瘟作用,治肺炎、发烧、腹泻、四肢
肿胀等症。现代药理研究表明,红景天具有消热
解毒、抗疲劳、抗缺氧、抗衰老等功效。本文
材料采自青海省大通县斜沟海拔3 500 m 处,其
组织培养和快速繁殖技术可为探讨高山植物无性繁
殖的特点以及次生代谢产物和新物质的产生提供借
鉴。狭叶红景天为雌雄异株植物,种子微小,不
易得到,且难以人工栽培,目前主要以野生资源
为药源。由于其特殊的功效,需求量急剧加大,
野生资源日益减少。其快速无性繁殖的再生植株
苗壮、根系发达、成活率高,有利于这一植物
资源的持续开发和利用,且兼有保持水土和保护
生态环境的效果。狭叶红景天的组织培养尚未见
报 道 。