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不同溶剂提取对返魂草种子中抑制物质活性的影响



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第5期,2005年10月 629
不同溶剂提取对返魂草种子中抑制物质活性的影响
张秋菊1 秦佳梅1 徐克章2,*
1 通化师范学院生物系,吉林通化 134002;2 吉林农业大学农学院,长春 130118
收稿 2005-04-09 修定   2005-07-18
资助  吉林省科技厅“中药现代化”计划项目(20030909-10)。
*通讯作者(E-mail: kzx1954@163.com,Tel: 0435-
4531254)。
返魂草(Senecio cannabifolius Less.)系菊科千
里光属多年生草本植物,主要分布于吉林省长白
山区、黑龙江等地。在人工栽培生产中,常用
200~300 mg·L-1的赤霉素处理或用40~50℃的温水
浸种[1]可以提高发芽率。
本文所用返魂草种子于上一年 9 月采自长白
山海拔800~900 m处,白菜(Brassica campestris)
和小麦(Triticum sestivum)种子购自本地种子公司。
取返魂草种子每份 2.5 g,共 3 份,研碎,移入
250 mL 三角烧瓶中,分别加入 25 mL 甲醇、乙
醚和蒸馏水,用塑料薄膜密封瓶口,置于25℃恒
温箱中避光提取48 h,过滤去残渣,水提液定容
至 25 mL,甲醇和乙醚提取液挥发干净后,其浓
缩物用少量乙醇溶解,定容到 25 mL。3 种提取
液浓度均为0.1 g·mL-1,相当于每mL提取液中含
有返魂草种子质量数为 0.1 g。实验时,分别稀
释至 0.01 g·mL-1。用白菜和小麦种子作生物测
定,以蒸馏水浸种处理为对照,2 5℃下避光发
芽,24 h 时测发芽率,48 h 时测苗高、根长及
鲜重。另取 2 g 返魂草种子加入 20 mL 蒸馏水,
瓶口用薄膜封严,置于 35 和 45℃恒温条件下浸
提,分别于提取的第 1 、2 、3 、4 天抽取浸泡
液,用白菜种子作生物测定。每次抽取浸泡液
后,倒出残液,重新加入 20 mL 蒸馏水,继续
浸泡。以上发芽实验每处理均为 100 粒种子,重
复3次。按抑制活性=1-(发芽率/对照)计算[2]。
实验结果(表 1、2)如下:
1. 返魂草种子含有活性较强的内源抑制物
表1 返魂草种子粗提物对白菜和小麦种子萌发以及幼苗生长的影响
植物 不同溶剂提取物 发芽率/% 苗高/cm 根长/cm 鲜重/g·株-1
的浓度/g·mL-1
白菜 对照 98.0±1.00 0.391±0.08 1.355±0.16 0.019±0.01
甲醇 0.01 65.0±3.00 0.410±0.05 0.730±0.41 0.013±0.10
0.10 0 0 0 0
乙醚 0.01 69.2±1.80 0.345±0.02 0.795±0.32 0.012±0.05
0.10 43.8±0.90 0.237±0.08 0.377±0.69 0.010±0.06
蒸馏水 0.01 78.6±0.40 0.370±0.01 0.820±0.10 0.014±0.02
0.10 73.3±0.60 0.350±0.11 0.640±0.85 0.016±0.01
小麦 对照 99.0±0.80 0.398±0.12 0.358±0.11 0.120±0.01
甲醇 0.01 92.6±0.15 0.237±0.07 0.112±0.06 0.106±0.08
0.10 0 0 0 0
乙醚 0.01 96.2±0.82 0.245±0.03 0.169±0.12 0.102±0.04
0.10 69.5±0.76 0.233±0.15 0.155±0.11 0.105±0.07
蒸馏水 0.01 98.2±0.40 0.326±0.34 0.309±0.10 0.115±0.03
0.10 90.6±1.01 0.307±0.21 0.232±0.05 0.118±0.07
质,其抑制活性随着粗提物浓度的增加而增强。
溶剂中以甲醇提取液的抑制物质活性最强,乙醚
次之,水提液的作用不明显,其在极性溶剂中溶
解性较强,推断此抑制物质可能为极性化合物。
植物生理学通讯 第41卷 第5期,2005年10月630
各提取液对白菜种子萌发的抑制活性高于对幼根生
长的抑制活性,对地上部分幼苗生长和全株鲜重
影响不大。抑制作用总趋势为:发芽率>根长>苗
高>鲜重(表 1)。
2. 返魂草种子粗提物对小麦种子萌发和幼苗
生长也有明显的抑制作用,以甲醇提取物的抑制
表2 温水浸出液对白菜种子萌发
和幼根生长的抑制作用
浸种后 对种子萌发的抑制活性/% 对幼根生长的抑制活性/%
时间/d
35℃ 45℃ 35℃ 45℃
1 8.16 10.25 31.8 36.7
2 6.12 8.39 9.52 11.8
3 3.51 5.66 2.96 5.89
4 2.04 3.08 1.56 2.67
活性最强。但各粗提物对小麦幼根生长的抑制活
性大于对种子萌发的抑制活性,与白菜刚好相
反。不同溶剂处理对小麦幼苗及鲜重的影响不明
显。这些说明同种抑制物质对不同植物种类的抑
制作用有一定差别,推测可能与种子大小或其对
抑制剂的敏感程度有关(表 1)。
3. 温水(35和45℃)浸泡的返魂草种子中内源
抑制物质大部分可浸泡出来,随着浸种天数的增
加,浸提液抑制活性呈逐渐下降趋势,以45℃温
水浸种去抑制物质的效果较好(表 2)。
参考文献
1 王育民, 于鹏, 王贵臣. 返魂草种子生产技术操作规程. 中药
科技, 2004, (6): 18~23
2 赵敏. 防风种子中内源抑制物质活性的研究. 中草药, 2004,
35(4): 441~444