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益智的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第3期,2005年6月 335
益智的组织培养与快速繁殖
朱文丽1 刘小涛2 莫饶1,* 吴繁花1
1 华南热带农业大学农学院,海南儋州 571737;2 海南松涛水利管理局,海南儋州 571737
Tissue Culture and Rapid Propagation of Alpinia oxyphylla
ZHU Wen-Li1, LUI Xiao-Tao2, MO Rao1,*, WU Fan-Hua1
1College of Agronomy, South China University of Tropical Agriculture, Danzhou, Hainan 571737, China; 2Songtao Water Works
Management Bureau of Hainan Province, Danzhou, Hainan 571737, China
收稿 2004-06-21 修定   2004-10-11
资助  中国热带农业科学院,华南热带农业大学科技基金项
目(Rykj0264)。
*通讯作者(E-mail: xiaotaomo@163.net, Tel: 0898-
23302677)。
1 植物名称 益智(Alpinia oxyphylla)。
2 材料类别 笋芽。
3 培养条件 愈伤组织诱导及增殖培养基:(1)MS+
6-BA 3.0 mg·L-1(单位下同); (2)MS+6-BA 3.0+NAA
0.05;(3)MS+6-BA 3.0+NAA 0.1;(4)MS+6-BA 3.0+
NAA 0.2。不定芽分化及增殖培养基:(5)MS+6-BA 1.0+
NAA 0.01;(6)MS+6-BA 4.0+NAA 0.1;(7)MS+6-
BA 6.0+NAA 0.1;(8)MS+6-BA 8.0+NAA 0.1。生
根培养基:(9)1/2MS+NAA 0.2。以上培养基均添
加30 g·L-1 蔗糖、5.8 g·L-1 卡拉胶,pH 6.0。培
养温度 26~28℃,光照时间 8~10 h·d -1,光照度
1 500~2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织诱导及增殖培养 从室内沙盆培养的
益智母株中切下新抽出的笋芽,用清水洗净芽上
的杂物,接着用洗衣粉浸泡 20 min 左右后,用
清水冲。在超净工作台上,按常规方法消毒灭
菌,无菌水冲洗 4~5 次后,切取长约 1 cm 的芽
尖,接种于诱导培养基(1)~(4)上。培养30 d 左
右,培养基(1)~(4)中均见外植体膨大,但培养基
(1)上的外植体没有愈伤组织;培养基(2)上的有少
量愈伤组织产生;培养基(4)上的有较多的愈伤组
织产生,但愈伤组织色泽泛白,质地疏松;培
养基(3)的培养效果最佳,外植体明显膨大,愈伤
组织质地紧密。将膨大、愈伤化的外植体转接于
培养基(3)上进行愈伤组织的增殖培养,30 d后,
愈伤组织可增殖 2~3 倍。
4.2 不定芽的分化及增殖培养 将愈伤组织转接于
培养基(5)~(8)上进行不定芽分化培养,15 d后愈
伤组织逐渐转绿,30 d后形成许多绿色小芽。培
养基(7)效果最佳,愈伤组织不再增殖,分化的小
芽多而均匀,形成芽丛。将芽丛分切成小芽丛,
在培养基(7)上进行继代培养,30 d后每个不定芽
基部分化出2~3 个小芽。每 30 d 继代 1 次,2~3
代后,不定芽增殖系数可达 4~ 6。
4.3 生根培养 将丛生不定芽分切为单芽,接种于
培养基(9)上,1 周后抽出不定根,4 周后苗高 4
c m 以上,生根率 1 0 0 %。
4.4 移栽 在50%荫蔽度的大棚内炼苗1周后,将
小苗取出试管,用清水洗净附着在根系上的培养
基,再用0.2% 多菌灵浸泡20 min 后,栽植在装
满营养土(表土︰河沙︰椰糠=2︰2︰1)的营养杯
中,浇透定根水后覆盖 50% 遮荫网。1 周左右,
小苗恢复生长,以后按常规育苗方法管理。试管
苗移栽成活率达 100%。
5 意义与进展 益智是海南“四大南药”之一,为姜
科山姜属多年生草本植物。其蒴果呈纺锤形或球
形,可入药或制成保健食品,有益脾胃、理元
气、补肾虚等功用。益智可采用分株和播种进行
繁殖,但繁殖系数低。本文结果可供益智工厂化
生产种苗时参考。益智的组织培养与快繁尚未见
报 道 。