全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 2期,2004 年 4 月184
盐胁迫下木麻黄幼苗抗氧化酶活性的变化及Ca2+ 对它的调控
周希琴* 吉前华
肇庆学院生物学系,肇庆 526061
提要 在单纯 NaCl 处理下,随着 NaCl 浓度的加大,木麻黄幼苗的蛋白质含量逐渐升高,超氧化物歧化酶(SOD)活性下
降,过氧化物酶(POD)活性则逐渐增加,过氧化氢酶(CAT)活性在低盐下下降,高盐下明显升高。加入适量 Ca2+ 后,SOD
活性上升,POD 活性和蛋白质含量下降。CAT 活性低时加 Ca2+,CAT 活性增加; CAT 活性高时加 Ca2+,CAT 活性则降
低。
关键词 Ca2+;盐协迫;木麻黄幼苗;保护酶
Changes in Antioxidant Enzyme Activities in Casuarina equisetifolia Seed-
lings Under NaCl Stress and Ca2+ Regulation in Them
ZHOU Xi-Qin, JI Qian-Hua
Department of Biology, Zhaoqing College, Zhaoqing 526061
Abstract The activities of SOD , CAT and POD and protein concent of Casuarina equisetifolia seedlings under
NaCl stress and Ca2+ regulation in them were studied. The results showed that SOD activity decreased, protein
content and POD activity increased with the treatments of increased NaCl concentration. At the meantime, CAT
activity decreased at low NaCl concentrations and increased at high NaCl concentrations. When seedlings were
treated by Ca2+ with proper concentrations, negative effect on protein content and POD activity gradually
decreased, and SOD activity increased. The treatments of Ca2+ enhanced CAT activity when it was low, and
weakened it when it was high.
Key words Ca2+; NaCl stress; Casuarina equisetifolia seedling; protective enzymes
收稿 2003-12-22 修定 2004-03-08
* E-mail:zhouxiqin666@163.com, Tel:0758-2811052
一般认为,在盐胁迫条件下,植物通过吸
收、积累无机盐和合成有机物质作为渗透剂进行
渗透调节,以适应盐渍环境[1]。超氧化物歧化酶
(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)
等是酶促防御系统的保护酶[2],它们协同作用,
防御活性氧或其它过氧化自由基对细胞膜系统的
伤害,抑制膜脂过氧化,以减轻盐胁迫对植物
细胞的伤害[1]。Ca2+ 作为参与许多生命活动的第
二信使,在传递胞内信息、调节细胞代谢中起作
用。已有研究认为钙能增强植物的抗逆性[3]。本
文研究盐胁迫对木麻黄幼苗抗氧化酶的影响和外
源Ca2+在提高植物抗盐性中的使用,以期能为减
缓盐对植物生长的不良影响而采用防护措施作参
考。
材料与方法
实验材料为木麻黄(Casuarina equisetifolia)
“惠安 1 号”。将苗高为 12~40 cm 的木麻黄幼苗
移植入盆。每盆装5 kg固土和沙土的混合土,植
入 3 株木麻黄幼苗,分占盆中 3 部分,放在温室
中培养。大约 3 d 浇水 1 次,每天观察温室温度
及通风情况。培养温度为 25~38℃。培养 3 个月
后,进行盐胁迫及盐胁迫 +Ca2+ 处理。盐浓度分
别为0、5、10、15、20、25 g(NaCl).kg-1(土)。
盐胁迫 +Ca2+ 处理的浓度分别为:每公斤土10 g
NaCl +4 g Ca(NO3)2、10 g NaCl+8 g Ca(NO3)2、20
g NaCl+4 g Ca(NO3)2、20 g NaCl+8 g Ca(NO3)2。
每个处理6个重复。胁迫处理后,继续培养 3个
月的幼苗用于测定各种生理指标。实验所用试剂
NaCl、Ca(NO3)2 均为分析纯。
制备酶液时,从各实验组分别取1 g木麻黄幼
苗,加入适量62.5 mmol.L-1 磷酸缓冲液(pH 7.8)于
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冰浴中研磨,再以 14 000 × g 于 4℃下离心 15
m i n,上清液用于测定 SO D、P O D 和 C A T 活性
及可溶性蛋白质含量。可溶性蛋白质含量的测定
按照考马斯亮蓝G-250染色法[4]。SOD活性用 NBT
光还原法[5]测定,以抑制 NBT 50% 作为 1 个酶单
位(U)。POD 活性用愈创木酚法[6]测定。CAT 活
性用碘量法[7]测定。
结果与讨论
1 Ca2+对NaCl胁迫下木麻黄幼苗中3种保护酶活
性的影响
图 1 显示:
(1)NaCl 胁迫下,随NaCl 浓度升高,SOD 活
性逐渐下降,相关系数达到 -0.97(P<0.05)。在
NaCl 胁迫同时加入Ca2+,SOD 活性高于单纯NaCl
处理的。NaCl为10 g.kg-1(土)时,随着Ca2+浓度
的增加,SOD 活性下降;NaCl 为 20 g.kg-1(土),
随着 Ca 2+ 浓度的增加,SO D 活性增加。适宜浓
度的 Ca2+ 促进 SOD 活性上升,从而消除了 NaCl
胁迫下超氧负离子的增加,削弱了脂质过氧化作
用,减轻了膜伤害。
(2)在5~10 g.kg-1(土)NaCl胁迫下,CAT活性
略微降低。但随 NaCl 处理浓度的增加,CAT 活
性则急剧升高,而且在25 g.kg-1(土)NaCl处理时,
其活性升至最高点,两者相关系数为0.80,未达
到显著水平。NaCl 胁迫加 Ca2+ 处理的,在 CAT
图1 Ca2+对NaCl胁迫下木麻黄幼苗中3种保护酶活性的影响
Fig.1 Effects of Ca2+ on the activities of SOD, CAT and POD of Casuarina equisetifolia seedlings under NaCl stress
1. 对照;2~6. NaCl 5、10、15、20、25 g.kg-1(土) ; 7、8. NaCl 10 g.kg-1(土)+Ca(NO3)2 4、8 g.kg-1(土) ; 9、10. NaCl 20
g.kg-1(土)+Ca(NO3)2 4、8 g.kg-1(土)。图2同此。
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活性低时,Ca2+ 增加 CAT 活性;CAT 活性高时,
Ca2+ 削弱 CAT 活性。说明适宜浓度的 Ca2+ 可恢复
或基本恢复 CAT 活性,削弱 NaCl 对幼苗的毒害
作用。
(3)NaCl 胁迫下,POD 活性随着NaCl 浓度的
增加而逐渐升高,其相关系数为0.96(P<0.05)。
NaCl 胁迫加 Ca2+ 时,随着Ca2+ 浓度的增加,POD
活性降低。适宜浓度的Ca2+可减弱NaCl对幼苗的
毒害作用,减少有害物质的产生,减弱植物体对
图2 Ca2+对NaCl胁迫下木麻黄幼苗中蛋白质含量的影响
Fig.2 Effect of Ca2+ on protien content of Casuarina equisetifolia seedlings under NaCl stress
逆境的敏感性,因此 P O D 活性的激活亦有所减
弱 。
2 Ca2+对NaCl胁迫下木麻黄幼苗中蛋白质含量的
影响
图 2 表明,在 Na C l 胁迫下,幼苗蛋白质
含量随着 NaCl浓度的增加而升高,相关系数为
0.93(P < 0.05)。NaCl 胁迫加 Ca2+ 时,蛋白质
含量随着 Ca2+ 浓度的增加而逐渐降低。适宜浓
度的 Ca2+ 能降低盐毒害下的蛋白质含量,这可
能是 Ca2+ 对植物有保护作用、削弱 NaCl 对蛋白
质合成胁迫的结果。
总之,在盐胁迫下,木麻黄幼苗 S O D 活性
下降,C A T 、P O D 活性及蛋白质含量升高。适
宜的Ca2+可增加木麻黄幼苗对盐胁迫的耐受能力,
调节抗氧化酶活性并使之相对稳定,从而提高了
植物的抗逆性。根据本文结果,提高木麻黄幼苗
抗盐力的最适Ca(NO3)2浓度为4~8 g.kg-1(土)。
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