全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第2期，2006年4月 247
收稿 2005-07-08 修定 2005-09-26
资助 中国科学院知识创新工程重要方向项目(kscx2-sw-319)
和中国科学院华南植物园前沿项目(20023301)。
*通讯作者(E-mail: duanj@scib.ac.cn, Tel: 020-37252978)。
带叶兜兰的无菌播种和离体快速繁殖
曾宋君 陈之林 段俊*
中国科学院华南植物园，广州 510650
Asepsis Sowing and in vitro Propagation of Paphiopedilum hirsutissimum Pfitz
ZENG Song-Jun, CHEN Zhi-Lin, DUAN Jun*
South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China
化出芽。其中(9)形成的芽有部分玻璃化；(10)、(11)
中芽正常，(11)中的苗较为粗壮。
4.4 壮苗和生根培养 将小苗分成单株后转移到培
养基(12)~(14)中培养，生根率均可达95% 以上。
培养基(12)植株生长较慢，根系较差；(13)、(14)
中生长健壮，根系发达，(14)的效果略好。培养
基(14)配制简单，成本较低，可以在生产中使用。
4.5 移栽 将培养瓶置于温棚中炼苗1周后，取出
生根苗，洗净培养基，用 0.1% 的高锰酸钾溶液
浸泡 5 min，种植于直径为 5 cm 小盆中，种植
基质采用已用水浸泡并用1 000倍多菌灵液消毒的
树皮和火山石的混合基质，注意保持湿度和温
度，置于阴凉通风处，10 d 内不要浇水，成活率
达 75% 以上。30 d 左右，植株能产生新的根系，
此时可移入温棚进行正常水、肥、药管理。
5 意义与进展 带叶兜兰为兰科兜兰属植物，分
布于越南、老挝、泰国及我国云南、广西、贵
州等地。其叶带形，基部有紫斑；花单生，萼
片淡黄绿色，具暗褐色晕，花瓣匙形波状、淡
黄色、有紫褐色斑点，唇瓣拖鞋状、淡黄绿色、
有玫瑰色斑纹。其属“野生动植物濒危物种国际
贸易公约”(CITES)附录 I 的保护对象，十分珍
贵。带叶兜兰的种子无胚乳，在野外需与真菌共
生才能萌发，发芽率极低，人工无菌播种的难度
也较大，人工栽培用常规的分株繁殖的增殖率极
低。我们通过培养基的筛选已成功地播种出大量
的试管苗，并进行了原球茎的增殖和分化。带叶
兜兰的无菌播种和组织培养未见报道。
参考文献
Arditti J (1982). Orchid Biology, Reviews and Perspective II.
Ithaca, NY: Cornell University Press, 352
1 植物名称 带叶兜兰(Paphiopedilum hirsutissimum
Pfitz)。
2 材料类别 种 子 。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1) RE (Arditti 1982);
(2) VW；(3) 1/4MS；(4) MS；(5) RE+ 活性炭 2
g·L-1；(6) RE；(7) RE+活性炭2 g·L-1；(8) 花宝1
号(美国 Hapo ne x 公司产品，N∶P∶K =7∶6∶
19)2.5 g·L-1。原球茎增殖和分化成苗培养基：(9)
RE+6-BA 2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2；(10)
RE+活性炭2 g·L-1+6-BA 2.0 +NAA 0.2；(11) 花宝
1号 1.5 g·L-1+花宝 2号(美国Haponex公司产品，
N∶P∶K=20∶20∶20) 1.5 g·L-1+活性炭2 g·L-1 +
6-BA 2.0+NAA 0.2。生根壮苗培养基：(12) RE+
NAA 1.0+活性炭2 g·L-1；(13) RE+ NAA 1.0+活性
炭 2 g·L-1+10%香蕉汁；(14) 花宝 1号 1 g·L-1+花
宝2号1 g·L-1 +蛋白胨 2 g·L-1+NAA 1.0+活性炭2
g ·L -1+10% 香蕉汁。以上培养基均附加 2.0% 蔗
糖，0.65% 琼脂固化，pH 5.2~5.4。培养温度为
(25±2)℃，光强30~40 mmol·m-2·s-1，壮苗培养时为
40~50 mmol·m-2·s-1，光照12 h·d-1。培养基(1)~
(4)、(7)~(11)均加椰子乳200 mL·L-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 将带叶兜兰自花或异花人工授
粉后，150 d 左右荚果成熟，经自来水洗净，用
70% 酒精消毒30 s，0.1% 升汞溶液消毒15 min，
无菌水洗 5 次。吸干水分，切开荚果，将种子散
落到培养基中，先暗培养20 d，再转至光下培养。
4.2 种子萌发 在黑暗培养中，接种到培养基(1)~
(8)上的种子，20 d左右有白色原球茎长出；移至
光下培养时，7周左右有芽长出。培养基(4)上的极
少萌发；培养基(5)、(6)有少数萌发；其它的萌
发率达 30%~50%，其中(1)的效果最好，萌发率
50%；(7)萌发率为 45%，种子出芽后生长较快。
4.3 原球茎增殖和分化成苗 将原球茎和小芽的混
合体转移至培养基(9)~(11)上，原球茎迅速萌发成
芽，在芽的基部有新的原球茎产生，继而又能分