全 文 ：植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期，2004 年 8 月452
几种影响甘蓝再生分化体系的因素
朱艳* 张正英 陈玉梁
甘肃省农业科学院生物技术研究中心， 兰州 730070
收稿 2003-08-17 修定 2004-03-09
资助 甘肃省科学事业费项目(QS022-C31-48)。
* E-mail：zhuyan0102@163.com，Tel：0931-7618273
试验材料为甘蓝(Brassica oleracea var.capitata)
品种晚丰、庆丰、中甘 11 号。种子购于甘肃省
农业科学院飞天种业公司。
将预冷处理的种子于无菌条件下以 3 种方式
消毒处理：(1)75%乙醇处理1 min后，用 0.1%升
汞消毒 8 min，无菌水冲洗 6 次；(2)75% 乙醇处
理 1 min 后，加 1 滴吐温 80，再加入 0.1% 升汞
消毒8 min，无菌水冲洗 6 次；(3)75% 乙醇处理
1 min 后，加 1滴吐温80，再加入10% NaClO 消
毒 8 min，最后用0.1% 升汞处理8 min，无菌水
冲洗 6 次。消毒后接种于 1/2MS 培养基中发芽，
取七天龄苗的下胚轴和子叶分别接种于8种培养基
中培养。结果表明：
1. 下胚轴在前4种培养基中长势较好，子叶
在后 4 种培养基中长势较好。据此，确定 6-BA
和 N A A 的浓度后，以下胚轴取材时间和 Ag N O 3
浓度为可变因子，设计正交实验，确定出的甘蓝
高效分化再生最佳条件为：庆丰和中甘11号下胚
轴在培养基(2)中、晚丰在培养基(4)中分化率较
高；子叶为外植体的3个品种在培养基(8)中分化
率稍高，但分化长势较慢致使培养周期长，分化
率大大低于下胚轴，不宜采用(表 1)。
表1 甘蓝下胚轴和子叶的诱导出愈率和分化率 %
培养基成分 晚丰 中甘11号 庆丰
(浓度/ mg·L-1) 出愈率 分化率 成苗率 出愈率 分化率 成苗率 出愈率 分化率 成苗率
(1)MS+6-BA 2.0+NAA 0.5 93.00 45.45 100 94.50 41.67 100 93.00 42.86 100
(2)MS+6-BA 1.0+NAA 0.2+AgNO3 4.0 97.00 60.00 100 96.00 94.44 100 98.00 68.00 100
(3)MS+6-BA 1.0+NAA 0.2 93.90 55.56 100 94.70 83.33 100 94.00 46.67 100
(4)MS+6-BA 2.0+NAA 0.5+AgNO3 4.0 95.00 70.83 100 95.20 66.67 100 97.90 66.67 100
(5)MS+NAA 0.1+2,4-D 0.1 72.00 1.40 100 83.00 2.20 100 75.00 1.20 100
(6)MS+NAA 0.1+2,4-D 0.1+AgNO3 4.0 75.00 13.00 100 84.00 13.80 100 75.00 6.70 100
(7)MS+NAA 0.1+2,4-D 0.2 88.00 1.90 100 92.00 2.50 100 85.00 2.00 100
(8)MS+NAA 0.1+2,4-D 0.2+AgNO3 4.0 88.00 20.00 100 95.00 22.20 100 87.00 18.00 100
培养基(1)~(4)中各数值代表甘蓝下胚轴无菌培养的出愈率和分化率；培养基(5)~(8)中各数值代表甘蓝子叶无菌培养的出愈率和分化率。
2. 消毒法(2)的效果较优。
3. 以子叶为外植体时，用2,4-D可促进愈伤
组织生长，若与适量的 N A A 和 A g N O 3 配合时，
愈伤组织致密，表面多突起，易形成不定芽。以
下胚轴为外植体时，6-BA 与一定的生长素组合，
可以提高不定芽的分化率，两者比值较大的利于
生根，比值逐渐变小的不定芽数目相对增多。
4. 不同甘蓝品种和苗龄不同的外植体诱导分
化率不同，七天龄的外植体在AgNO3 浓度达到4.0
mg ·L-1 时分化率最高。但 AgNO3 浓度不宜过高，
否则外植体易玻璃化，芽分化率也会降低(表 2)。
表2 不同取材时间和不同浓度AgNO3对甘蓝下胚轴分化频率的影响 %
AgNO3/ mg·L-1
材料年 0 2.0 4.0 6.0 8.0 龄/d
晚丰 中甘11 号 庆丰 晚丰 中甘11号 庆丰 晚丰 中甘11号 庆丰 晚丰 中甘11号 庆丰 晚丰 中甘11号 庆丰
5 18.00 25.00 20.00 20.00 40.00 28.57 25.00 54.17 33.33 28.00 45.00 20.00 22.05 30.00 16.67
6 41.60 40.91 43.70 54.55 55.00 50.00 58.33 55.00 60.00 44.10 45.00 38.20 42.00 45.00 35.00
7 58.30 60.00 50.00 65.40 70.00 57.14 63.64 94.44 68.00 62.50 50.00 42.80 54.16 50.00 41.00
8 32.00 50.00 40.00 39.00 50.00 41.00 45.70 50.00 44.00 38.89 40.00 41.67 33.33 35.00 35.70
9 27.00 20.00 25.00 29.00 41.67 36.00 36.00 30.00 39.00 25.00 30.00 25.00 23.33 30.00 17.64