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紫萁(薇菜)的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 2期,2004 年 4 月194
紫萁(薇菜)的组织培养
张敏* 张曙光 孙红绪
宜昌职业技术学院, 宜昌 443003
Tissue Culture of Osmunda japonica
ZHANG Min*, ZHANG Shu-Guang , SUN Hong-Xu
Yichang Vocational and Technical College, Yichang 443003
收稿 2003-03-11 修定  2003-06-26
* E-mail:starlight649@sohu.com, Tel:0717-8535713
1 植物名称 紫萁(Osmunda japonica),又名薇
菜。
2 材料类别 孢子。
3 培养条件 (1)诱导孢子萌发培养基:1/4MS;
(2)诱导原叶体增殖培养基:1/2MS+KT 5.0 mg.L-1
(单位下同)+IBA 1.0+NaH2PO4 200;(3)壮苗生根培
养基:1/2MS+IBA 0.5。上述培养基均加入0.65%
琼脂;(1)和(2)加入 3% 蔗糖,(3)加入 2% 蔗糖;
(2)和(3)分别加入0.5 g.L-1活性炭;pH 5.8。培养
温度22~24℃,光照度1 000~1 500 lx,光照
时间14 h.d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 剪取穗状孢子,先用洗衣粉
水浸泡3~5 min,洗去表面灰尘,再用自来水冲
洗 10 min,无菌条件下用 0.1% 升汞溶液灭菌 8
min,无菌水冲洗 3~4 次,无菌吸水纸吸去表面
的水分,切成 0.5 cm 长的小段。
4.2 诱导孢子萌发 将上述小段作为外植体,在无
菌条件下接种在培养基(1)上。7 d后孢子开始萌
发,表面分化出一些绿色小点;30 d 后,绿色
小点形成直径约0.2 cm左右的原叶体;下面长有
淡棕黄色的绒毛。
4.3 诱导原叶体增殖及芽分化 将原叶体接种到培
养基(2)上。1周后原叶体开始增殖,从原叶体中
部和边缘分化出新的原叶体;2 个月左右原叶体
直径可增加1倍。原叶体在培养基(2)上可多次继
代增殖,经 4 个月的培养后,原叶体开始形成
芽,分化出小叶片(孢子体)。直径约1.5 cm左右
的原叶体球上平均可分化出13个孢子体小苗。但
小芽长势细弱,小芽基部长有少量白色不定根。
原叶体上同时也分化出少量羽叶小苗,但羽叶小
苗的分化率不高,每蔸小苗可抽茎10~15支。分
出小苗后的原叶体继续放入培养基(2)中,原叶体
可继续增殖,同时分化出大量孢子体小苗和少量
羽叶小苗。
4.4 壮苗和生根 将分化出的小苗转接到培养基(3)
上,20 d 后,小苗基部开始形成许多褐色的细
根,40 d 后,根系变得粗壮,生根率为 100%;
叶片也伸长长大,羽叶小苗约高 5 cm 左右,孢
子体小苗约高3.5 cm 左右。
4.5 炼苗及移栽 将生根后的试管苗打开瓶盖,在
实验室内炼苗 3 d 后,用镊子轻轻夹出,洗净根
部的培养基,移栽到消毒的基质上(腐殖土和椰茸
以 1∶1 混合)。注意遮荫保湿,温度保持 20~
30℃,湿度保持90%以上每隔2 d喷 1次 MS营养
液。半个月后,炼苗成活,移栽到酸性腐殖土
中,成活率可达 9 5 % 。
5 意义与进展 薇菜属紫萁科紫萁属多年生草本蕨
类植物,其嫩茎是一种著名的山野菜,味道鲜美
可口,营养丰富,经济价值高,是重要的出口
野菜。由于蕨类植物的自然繁殖力低,限制了薇
菜的规模化生产。以孢子作为繁殖材料,可大大
提高薇菜的繁殖系数,满足规模化生产的需要。
本试验还观察到,原叶体上能大量分化孢子体小
苗,而分化出的羽叶小苗则较少。如何提高羽叶
小苗的分化率还有待进一步探索。