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高斑叶兰的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 3期,2007年 6月 505
高斑叶兰的组织培养
高丽,李洪林,杨波﹡
中国科学院武汉植物园,武汉 430074
Tissure Culture of Goodyera procera (Ker-Gawl.) Hook.
GAO Li, LI Hong-Lin, YANG Bo*
Wuhan Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074, China
收稿 2007-01-26 修定  2007-04-28
* 通讯作者(E-ma il:yangbo@wbgcas.cn;T el:0 27 -
8 7 6 1 7 2 5 0 )。
1 植物名称 高斑叶兰[Goodyera procera (Ker-
Gawl.) Hook.]。
2 材料类别 茎段。
3 培养条件 (1 )芽诱导培养基:MS+6-BA 0.5
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.05;(2)增殖培养基:1/
2 MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+100 g·L-1椰汁;(3)生根
培养基:1/2MS+IBA 1.0+NAA 0.5+0.5 g·L-1活性
炭。以上培养基蔗糖浓度(1)和(2)为 3.0%,(3)为
2.0%;琼脂浓度为 5.5 g·L-1;pH 5.8。培养温
度为(24±2) ℃,连续光照 12 h·d-1,光照度为 40
µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 芽诱导培养 将高斑叶兰当年生带节茎段从母
株上采下,切成 1~2 cm,自来水下冲洗 1 h,然
后在超净工作台上用 75% 酒精消毒 30 s,无菌水
冲洗 3 次,再用 0.1% 升汞溶液(加 1 滴吐温)消毒
8 min,无菌水冲洗 4~5次后,用消毒滤纸吸干
表面水分,一节切一段,接种到培养基(1)中。10
d左右,茎节处开始萌动,逐渐长出绿色幼芽。
4.2 丛生芽诱导与增殖培养 将诱导出的幼芽从茎
段上切下转接入培养基(2)中进行丛生芽诱导及增
殖培养。20 d时基部膨大形成短粗的根状茎,同
时幼芽长成带 2~3个茎节高约 4 cm的幼苗;30 d
时根状茎上长出绿色的丛生芽,此时幼苗高 6
cm,茎段上带 3~4个节(图 1)。再将茎段切成带
节的数节,同时切下基部丛生芽一并转入新鲜培
养基(2)中继续培养,40 d为 1个继代增殖周期,
增殖倍数可至 8。
4.3 生根培养 将高约4 cm的幼苗单个切下转接入
培养基(3)中,15 d左右开始生根,25 d后幼苗
生根率达 90%以上,每苗的根数可达 3~4条,根
长 2~3 cm,根系粗壮。
4.4 炼苗与移栽 高斑叶兰移栽时应特别注意提前
将瓶盖打开,让组培苗在外界环境下适应一段时
间。2 d后再取出小苗移栽,洗去根部的琼脂后,
栽入透水性好的基质中。注意保持适宜湿度,温
度以 20~25 ℃ 和光照以 50%~70%自然光为宜,
阴凉通风处,成活率达 90 % 以上。
5 意义与进展 高斑叶兰为兰科斑叶兰属草本植
物,生长于海拔 250~1 550 m的林木下,是兰科
植物中被列入濒危野生动植物种国际贸易公约的物
种之一,属国家二级保护植物。高斑叶兰还具有
很高的药用价值,以全草入药,药名石凤丹,性
温,味苦辛,能够止咳定喘、祛风利尿、强筋
活血,具有治气管炎、哮喘、胃痛、尿路感染、
风湿骨痛、跌打肿痛等功效。目前,高斑叶兰
的繁殖一般采用分株繁殖方法,繁殖系数极低,
远远不能满足市场需求。而采用组织培养技术可
以快速繁殖大量优质种苗,可能有助于解决中药
材来源匮乏和缓解野生资源遭受严重破坏的压力,
以有效地保护好有限的野生资源。高斑叶兰的组
织培养尚未见报道。
图 1 高斑叶兰的增殖培养