全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 4期，2007年 8月752
收稿 2007-06-22 修定 　2007-07-10
资助 科技部国家重大基础研究前期专项(2003CCA02600)和
贵州大学研究生创新基金。
* 通讯作者(E-mail：dgzhao@gzu.edu.cn；Tel：085 1-
3 8 6 3 6 1 5 )。
黑龙骨的组织培养与植株再生
张明婧 1,2，杨霞 2，杨国峥 1,2，赵德刚 1,2,*
贵州大学 1贵州省农业生物工程重点实验室，2生命科学学院，贵阳 550025
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Periploca forrestii Schltr.
ZHANG Ming-Jing1,2, YANG Xia2, YANG Guo-Zheng1,2, ZHAO De-Gang1,2,*
1Guizhou Key Lab of Agro-Bioengineering, 2College of Life Sciences, Guizhou University, Guiyang 550025, China
1 植物名称 黑龙骨(Periploca forrestii Schltr.)。
2 材料类别 种胚萌发的无菌苗茎段。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)种子萌发培
养基：不含任何激素的M S；( 2 )诱导分化培养
基：MS+TDZ 2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1；
(3)增殖培养基：MS+6-BA 2.0+NAA 0.1；(4)生根
培养基：MS+NAA 0.2。以上培养基均附加 3.0%
蔗糖、0 .75% 琼脂固化，pH 5.8。培养温度为
(25±2) ℃，光照时间为 12 h·d-1，光照强度为
30~40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 供试材料来源于贵州地区。
挑选籽粒饱满的种子，先用 1%的洗衣粉水浸泡
10 min，流水冲洗 30 min，然后在超净工作台上
用 75%酒精消毒 1 min和无菌水冲洗 2~3遍，再
用 0.1%的升汞消毒 7 min，用无菌水冲洗 4~6遍，
放于无菌纸上吸干种子表面水分。一部分直接接
种于培养基(1)上，一部分用镊子和刀片切开种
皮，取出幼胚接种于培养基(1 )上。
4.2 种子萌发 直接接种于培养基(1)上的黑龙骨种
子，25 d后仅有极少数萌发，且污染率达 20%。
将剥开的种胚接种于培养基(1)，3 d后种胚由乳
白色变为绿色，25 d长至 3 cm左右，且污染率
降为 0。
4.3 芽的诱导与增殖 将种胚萌发的无菌苗茎切成
0.5 cm左右茎段，接入培养基(2)上。培养 20 d
后茎段切口处产生愈伤组织，再分化出芽，将芽
接入培养基(3)后芽迅速生长并增殖，增殖率达
2.25倍。
4.4 根的诱导 黑龙骨芽生长至 3 cm左右，将芽
切下接入生根培养基(4)上，培养 10 d后芽苗基部
产生白色不定根，20 d后不定根上长出侧根，生
根率达到 74%。
4.5 炼苗与移栽 幼苗长至 5 cm左右时，于培养
瓶中揭开封口膜，加入冷水至淹没培养基，在 20
℃左右温室炼苗 7 d后，洗去根部培养基，移栽
到蛭石:黄土 =1:1的基质中，移栽后的前 10 d可
用塑料薄膜覆盖，湿度保持在 80%以上，10 d后
揭开薄膜，成活率达 8 0 %。
5 意义与进展 黑龙骨为萝摩科杠柳属植物，又
名滇杠柳、黑骨头，黑龙骨生长于我国云贵高原
特有的潮湿避光环境处。此植物全株可药用，可
舒筋活血、祛风除湿，还可治疗风湿性关节炎、
跌打损伤、胃痛、消化不良、闭经和痢疾等。
目前，从黑龙骨的根中提取的有效成分已进入商
品化生产，市场上己开发出黑骨藤追风活络胶囊
和黑骨藤伸筋透骨液等产品，随着市场对黑龙骨
需求量的增加，生产中需要的黑龙骨材料也越来
越多，这对黑龙骨资源及生态环境都造成很大破
坏，因此扩大黑龙骨的原料来源成为急待解决的
问题。本文结果可能对黑龙骨的产业化生产有一
定的参考意义。黑龙骨的组织培养和植株再生尚
未见报道。