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黄山梅的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第6期,2005年12月 799
黄山梅的组织培养和快速繁殖
张小平* 潘超 李晓红 邵剑文
安徽师范大学生命科学学院,安徽芜湖 241000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Kirengeshoma palmata Yatabe.
ZHANG Xiao-Ping*, PAN Chao, LI Xiao-Hong, SHAO Jian-Wen
College of Life Science, Anhui Normal University, Wuhu, Anhui 241000, China
收稿 2005-10-17
资助 安徽师范大学科研专项基金(2004xzx07)和安徽省自然
科学基金(98242017、050430501)。
*E-mail: pinghengxu@sina.com.cn, Tel: 0553-3883539
1 植物名称 黄山梅(Kirengeshoma palmata Yatabe.)。
2 材料类别 成熟种子。
3 培养条件 (1)种子萌发培养基:MS+6-BA 1.0
mg·L-1 (单位下同)+IAA 0.5+活性炭(AC) 0.1%;(2)
增殖培养基:MS+6-BA 2.0+IAA 0.2;(3)壮苗培
养基:MS+6-BA 0.5+IAA 0.5;(4)生根培养基:
1/2MS+6-BA 0.1+NAA 1.0。各种培养基均附加3%
蔗糖和0.6%琼脂,pH 6.0。培养温度为(25±2)℃,
光强为30 mmol·m-2·s-1,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌苗的获得 将黄山梅的种子放入30℃的温
水中浸种 2 h 后,在超净工作台上以 75% 的酒精
表面消毒30 s,0.1%的氯化高汞溶液消毒6 min,
再用无菌水冲洗干净。取出置于培养皿内,先将
翅状的种皮剥离,再将各个成熟胚接种到培养基
(1)中进行培养。20 d 后,伸长的胚轴将 2 片绿
色的子叶推出培养基;再经过 10 d 的培养,真
叶开始出现,同时 2 片肥大的子叶逐渐萎缩死
亡。
4.2 继代增殖培养 将长高的幼苗根部切去,转入
继代增殖培养基中继续培养。14 d后,幼苗的基
部膨大形成绿色的致密愈伤组织,随着培养时间
延长,愈伤组织上面逐渐分化出许多不定芽,形
成芽丛(图 1)。20 d 后,将密生的芽丛切割成小
块,转入培养基(3)中进行壮苗培养。
4.3 根的诱导和移栽 将培养基(3)中株高2~3 cm
的幼苗(图2)转入培养基(4)中进行生根培养。20 d
后,即长出淡黄色的小根,每株 4~9 条不等,较
粗短。生根频率约为48%。继续培养10 d 后,就
可将其从瓶中取出,洗净培养基后,植入由河沙
和腐殖土各半混合的基质中,放入塑料大棚,前
10 d 保持 90% 左右的湿度,散射光照 10 h·d-1,
移栽成活率达 6 5 %。
5 意义与进展 黄山梅属于绣球花科单型属——黄
山梅属,为多年生草本植物,全世界仅分布于中
国皖、浙交界处,日本也有。该种为严重濒危
物种,是国家二级珍稀保护植物。作为典型的中
国 - 日本间断分布种,黄山梅在中日区系分布研
究中占有一定的地位。另外,作为绣球花科的单
型属,它对研究被子植物尤其是绣球花科的谱系
进化也有意义。它还具有很高的观赏和药用价
值。采用组织培养技术对满足市场需求,以及为
药物资源开发利用可能有潜在的应用前景。黄山
梅离体快速繁殖尚未见报道。
图2 黄山梅幼苗
图1 黄山梅芽丛