全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月 483
收稿 2005-10-31 修定 2006-05-08
资助 教育部重点项目(204158)、人事部留学人员科技行动
项目和中国热带农业科学院基金(Rky0526)。
* 通讯作者(E-mail: jianchunguoh@163.com, Tel: 0898-
66890635)。
黑籽雀稗品种‘热研 11 号’的组织培养与植株再生
侯海军 胡新文 段瑞军 符少萍 郭建春*
中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室,海口571101
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Paspalum atratum cv. Reyan No.11
HOU Hai-Jun, HU Xin-Wen, DUAN Rui-Jun, FU Shao-Ping, GUO Jian-Chun*
State Key Laboratory of Tropical Crop Biotechnology, Institute of Tropical Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural
Sciences, Haikou 571101, China
1 植物名称 黑籽雀稗‘热研 11 号’(Paspalum
atratum cv. Reyan No.11)。
2 材料类别 成熟种子。
3 培养条件 基本培养基为改良的 MS 培养基[MS
无机盐+维生素B1 9.0 mg·L-1 (单位下同)+维生素B6
9.5+尼克酸4.5+水解酪蛋白1.0+蔗糖30.0 g·L-1 +琼
脂 8.0 g·L-1]。(1)诱导愈伤组织培养基:改良的
MS培养基+2,4-D 2.0;(2)愈伤组织继代增殖培养
基:改良的MS 培养基 +2,4-D 2.0+KT 0.1;(3)
愈伤组织分化培养基:改良的 MS 培养基 +6-BA
6.0;(4)生根培养基:改良的MS培养基+NAA 0.5。
从愈伤组织形成到植株再生约需13周。所有培养
基的pH为 5.8。培养温度为(25±1)℃,光照时间
为16 h·d-1,光强为50 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 黑籽雀稗‘热研11 号’种
子以55℃温水浸种1 h,去除漂浮于水面的不饱
满种子,取成熟饱满的种子,用 7 0 % 的酒精消
毒2 min,再用0.1%~0.2% (W/V)的氯化汞消毒35
min,无菌水冲洗 5 次,每次 4~5 min。在无菌
的条件下,将种子接种到培养基(1)上,置于黑
暗、2 5℃条件下培养。愈伤组织长到米粒大小
时,将其剥离,切除伴生的小芽,将愈伤组织
转到培养基(2)上进行培养。这一过程约40 d 完
成,愈伤组织的诱导率达 6 5 % 。
4.2 愈伤组织的分化 愈伤组织长到半粒黄豆大小
时,转入培养基(3)上,30 d后分化出丛生芽。芽
的诱导率为 6 0 %。
4.3 根的诱导 把丛生芽切成单个芽移入培养基(4)
上,培养7 d 后,不定芽基部生出白色根;14 d
后,根长达到 5~6 cm,生根率 100%。
4.4 试管苗移栽 去掉瓶盖,在培养间炼苗3 d,然
后用自来水冲洗干净植株根基部的固体培养基,
将植株移栽到装有细沙的花盆中。在相对湿度
60% 的环境下, 黑籽雀稗的移栽成活率可达到
9 5 % 以上。
5 意义与进展 黑籽雀稗品种‘热研 11 号’属禾
本科雀稗属,是中国热带农业科学院于1994年从
印度尼西亚引进的品种,是湿热地区中等肥力或
贫瘠土壤的良好草种。能在偶尔淹水的土壤中种
植,并有一定的耐寒和耐旱性。黑籽雀稗‘热
研 11 号’在华南热带地区推广种植,并取得了
巨大的经济价值和社会价值。Can (1998)曾以雀
稗(Paspalum dilatatum Poir.)幼穗诱导愈伤组织和
植株再生,而黑籽雀稗的组织培养和植株再生尚
未见报道。
参考文献
Can E (1998). Adi yalancydary (Paspalum dilatatum Poir.)
bitkisinin genç salkymlaryndan kallus olusumu ve bitki
rejenerasyonuna genotip ve 2,4-D konsantrasyonunun
etkileri uzerinde bir arastyrma. Turk J Agr For, 24 (1):
113~119