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宽叶杜香的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 6期,2007年 12月 1135
宽叶杜香的组织培养和快速繁殖
张庆增,顾地周 *,王雅清,宋利丽,丛小力,何晓燕
通化师范学院生物系,吉林通化 134002
Tissue Culture and Rapid Propagation of Ledum palustre Linn. var. dilatatum
Wahlanberg
ZHANG Qing-Zeng, GU Di-Zhou*, WANG Ya-Qing, SONG Li-Li, CONG Xiao-Li, HE Xiao-Yan
Department of Biology, Tonghua Normal College, Tonghua, Jilin 134002, China
收稿 2007-09-06 修定 2007-10-26
资助 通化师范学院自然科学基金(XS06007 9)。
* 通讯作者(E-mail:gudizhou@163.com;Tel:0435-
3 2 0 8 0 7 3 )。
1 植物名称 宽叶杜香(Ledum palustre Linn. var.
dilatatum Wahlanberg),别名喇叭茶。
2 材料类别 新萌发幼叶。
3 培养条件 基本培养基为MS。(1)诱导分化培养:
1/2MS+6-BA 3.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.05+3%蔗
糖;(2)继代增殖培养基:1/2MS+6-BA 2.0+NAA
0.02+3%蔗糖;(3)壮苗生根培养基:1/4MS+IBA
0.05+KT 0.1+1.5%蔗糖。上述各培养基均加 0.8%
琼脂,pH 5.6,培养温度为(24±2) ℃,光照强
度为 20 µmol·m-2·s-1,光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 直接诱导分化培养 于春季,取宽叶杜香的新
生嫩叶,在超净工作台上用 70%酒精涮洗 30 s,
再用 1%次氯酸钠(含 2%链霉素)溶液浸泡10 min,
然后用无菌水冲洗 6 次,无菌滤纸吸干表面水
分,切除被杀菌消毒剂损伤部分,然后将其接种
到培养基(1)中进行诱导分化培养。30 d后叶片愈
伤组织化,继续培养至 50 d,愈伤组织再分化出
芽苗。培养至 70 d时,苗可长到 2.0~3.0 cm,
苗的形态及长势很好。
4.2 继代增殖培养 将带有芽苗的愈伤组织切割成
小块,转接到培养基(2)中,培养 20 d便长出大
量丛生芽。当苗长至 3.0~5.0 cm时,切下接入
培养基(3)中进行壮苗生根培养,小芽苗及愈伤组
织再切割转入培养基(2)中进行继代增殖培养,30
d为 1个继代增殖周期,增殖倍数平均达 100以
上。随着继代增殖次数的增加可将生长调节物质
浓度酌减,以免造成生长调节物质积累,而导致
以后分化的芽苗细弱和玻璃化。
4.3 壮苗与生根培养 将生长健壮的丛生苗切下,
然后将其移入培养基(3)中。培养 35 d,苗高可
达 3.0~5.0 cm以上;幼苗的主干长出 3~5条不定
根,生根率达 9 8 % 以上。
4.4 炼苗与移栽 壮苗生根后,从培养瓶中取出试
管苗,在含有 10 mg·L-1杀毒矾溶液中洗去苗上残
留的培养基,然后植入经 500倍多菌灵消毒过的
腐烂松针、泥炭土和细河砂(3:2 :1)混合的基质
中,用薄膜覆盖以保湿保温,湿度保持在 80%,
温度控制在(20±2) ℃,每天自然光照 6 h,3 d
后通风换气,10 d后可揭膜,每天适时喷洒清水
3 次。成活率达 9 5% 以上。
5 意义与进展 宽叶杜香是杜鹃花科杜香属植物。
杜香油中有十多种药用化合物,工业中,可用于
制革、作香料等;医学上可治疗皮肤病、咽喉
炎、百日咳等疾病;还可以作为观赏植物。另
外,其含有特殊的香气,是很好的香料,可用
于日用化工、制药皂、脚气水、洗发香波等。
宽叶杜香作为长白山区珍稀濒危植物,已列为省
级保护植物。大部分分布于自然保护区内,开发
及利用受到限制。本文结果对其开发和利用可能
有一定的参考意义,宽叶杜香的组织培养和快速
繁殖尚未见报道。