全 文 :植物生理学通讯 第 41卷 第 1期,2005年 2月 59
瑞香狼毒的组织培养及快速繁殖
于福科 马永清* 李秀维
中国科学院水利部水土保持研究所,西北农林科技大学,杨凌 712100
Tissue Culture and Rapid Propagation of Stellera chamaejasme
YU Fu-Ke, MA Yong-Qing*, LI Xiu-Wei
Institute of Soil and Water Conservation, Chinese Academy of Sciences, Ministry of Water Resource, Northwest Science and
Technology University of Agriculture and Forestry, Yangling 712100
1 植物名称 瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)。
2 材料类别 茎尖。
3 培养条件 培养基:(1)MS+6-BA 1.0 mg·L-1(单位
下同)+NAA 0.01+3.0% 蔗糖;(2)MS+6-BA 1.0~
2.0+NAA 0.02+3.0%~4.0% 蔗糖;(3)1/2MS(大量
元素减半)+NAA 0.1~0.5+2.0% 蔗糖。上述培养
基均附加5.0%~6.0% 琼脂,pH 5.6。培养温度为
25℃,光照12 h·d-1,光照度1 500~2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 10 月间选取生长健壮的狼毒
枝条。流水冲洗 3~5 h 后,在无菌条件下用 75%
酒精浸泡3 s,1.0% NaClO浸泡3 min,无菌水冲
洗5~6 次。最后用无菌刀片切取茎尖(长约 1 cm)
接 种 。
4.2 芽的诱导与增殖 将灭菌后的狼毒茎尖接种在
培养基(1)上初培养。约 10 d 后,形成小块愈伤
组织,同时,茎尖下部开始萌发不定芽;30 d
之内,多数不定芽可生长至 1 cm 以上。将生成
小块愈伤组织的培养材料转至培养基(2)培养,愈
伤组织可快速膨大并分化出丛生芽;约25 d,丛
生芽可生长至 1~2 cm。选取长约 1 cm 的无菌单
芽、分化芽或由丛生芽分割的小芽丛,置于培养
基(1)上培养,可不断诱导不定芽的产生;若将
其转接于培养基(2)培养,可诱导丛生芽不断分
化。若每 30 d 继代 1 次,上述两种增殖途径的
有效增殖倍数均大于 6。
4.3 生根与移栽 继代培养30 d后,选取高度超过
2 cm的小苗,转入培养基(3)上培养。不到20 d,
苗基部产生单根。培养 30 d,有 50% 以上幼苗
生根,平均根长约 1 cm。当生根苗长至 3~4 cm
高时,打开三角瓶,加入 1 mL 无菌水,在实验
室内散射光条件下炼苗 2~3 d 后,用镊子取出小
苗,并洗去根部粘着的培养基,转移到已消毒的
园土和粗沙(1∶1)混合的基质中, 浇足量无菌水和
适量 10% MS 大量元素培养液(已消毒),并加盖
塑料薄膜。每天喷水 1 次,1 周后,每天可揭开
薄膜通风1 h,15 d后可逐渐揭掉薄膜,30 d后
向大田移栽,有近 50% 的植株成活并正常生长。
5 意义与进展 瑞香狼毒又名断肠草、山丹花、一
把香等,是瑞香科狼毒属多年生草本植物,在我
国西藏、青海、宁夏、甘肃、内蒙古等草地上
广有分布,是我国重要的传统中药。由于其剧毒
会引起大量人畜死亡,给畜牧业生产造成很大损
失,因而,瑞香狼毒长期被归于草地毒草,视
为重点防除的对象。实际上,瑞香狼毒是草地退
化的指示植物;而退化草地恢复后,瑞香狼毒种
群又将自然消失。这显示随着我国大面积退化草
地的恢复与重建,瑞香狼毒作为一种宝贵的中药
资源将变得短缺。目前,我国尚无人从事狼毒人
工种植技术的研究。本文结果表明,从种子发芽
获得幼苗十分困难,而采用母株茎尖进行组织培
养可快速繁殖种苗。这不仅能解决上述问题,还
可能开辟人工种植瑞香狼毒的先例,具有很高的
经济效益和社会效益。瑞香狼毒的组织培养尚未
见报道。
收稿 2004-03-22 修定 2004-06-21
资助 中国科学院水利部水土保持研究所领域前沿项目
(C124)。
* 通讯作者(E-mail: yongqingma@nwsuaf.edu.cn , Tel:
029-87018218)。