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藤三七的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 6期,2007年 12月 1151
藤三七的组织培养与快速繁殖
蒋向辉 1,2,佘朝文 1,2,*,李定亮 1
怀化学院 1生物工程系,2怀化市生物育种与生物加工技术实验室,湖南怀化 418008
Tissue Culture and Rapid Propagation of Boussingaultia gracilis var.
pseudobaselloides Bailey
JIANG Xiang-Hui1,2, SHE Chao-Wen1,2,*, LI Ding-Liang1
1Department of Bioengineering; 2Key Laboratory of Huaihua for Breeding and Bioprocess Technology, Huaihua College, Huaihua,
Hunan 418008, China
收稿 2007-10-15 修定  2007-10-25
资助  怀化市科技局科技基础条件平台建设项目(06-6)和湖南
省教育厅项目(0 7 C5 0 2 )。
* 通讯作者(E-mail:shechaowen@tom.com;Tel:0745-
2 8 5 2 0 5 7 )。
1 植物名称 藤三七(Boussingaultia gracilis var.
pseudobaselloides Bailey),别名藤子三七、山豆
厨菜、野山葵、野落葵、落葵薯、洋葵薯。
2 材料类别 幼嫩叶片。
3 培养条件 基本培养基为MS。愈伤组织诱导培
养基:(1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA
0.4。丛生芽诱导培养基:(2) MS+6-BA 1.5+NAA
0.6。增殖培养基:(3) MS+6-BA 2.5+NAA 0.6;
(4) MS+6-BA 2.0+NAA 0.4。生根培养基:(5) 1/2
MS+NAA 0.5+IAA 0.5。以上培养基加 3.0%蔗糖
和 7 g·L-1琼脂,pH 5.8。培养温度(26±2) ℃,光
照时间 16 h·d-1,光照强度 40~50 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 将藤三七的幼嫩叶片用洗衣
粉液清洗 5 min,用自来水冲洗 50 min,用 70%
酒精浸泡 45 s,无菌水冲洗 1次,0.1%的HgCl2
消毒 8 min,无菌水冲洗 4次,吸干表面的水分,
切割为 0.5 cm×0.5 cm左右的叶片,接种于培养
基(1 )中,每瓶接种 4~5个外植体。
4.2 丛生芽的诱导 叶片外殖体接种 1周后,伤口
基部开始膨大,且出现愈伤组织;2周后,形成
直径 24 cm的愈伤组织块。将愈伤组织切成 1 cm
左右的小块接种到培养基(2)中,经过 15 d左右,
出现绿色芽点。培养 8~10 d即有大量的丛生芽分
化,形成不定芽丛。把丛生芽分割成 2~3个为一
丛的芽丛,转接到培养基(3)与(4)中进行继代培
养,3周左右可继代增殖 1次。培养 30 d后,2
种殖培养基的增殖系数没有显著性差异,培养基
(3)的试管苗生长较快,培养基(4)的生长缓慢。
4.3 生根与炼苗 取继代培养的芽苗接种于培养基
(5)中,2周后基部可长出数条 1~2 cm长的不定
根,株高可达 2 cm左右,生根率达 95%。培养
2~3周,将材料移到培养室外,在有充足散射光
的环境下打开瓶盖,加自来水炼苗,每天更换自
来水一次。
4.4 移栽 炼苗 7 d后从培养瓶中取出,洗去根部
培养基,移入蛭石和腐殖土(1:2)混合的基质中,
保湿遮阴,成活率可达 90%以上。苗成活后及时
地施加肥水,30 d后可获得 10 cm左右、带 8~10
片叶的健壮植株。
5 意义与进展 藤三七属落葵科落葵薯属多年生肉
质根缠绕植物,具有清热解毒、滋补、壮腰膝、
消肿散瘀、活血、抗炎症和保肝护肝作用。另
外,还发现藤三七醇具抗HIV活性成分,与三七
的药用功效相似,是云南白药的重要成分,有人
直接称其为“云南白药”。以嫩叶和嫩梢作菜
用,可炒食、做汤、凉拌。室内盆栽,不仅
可提供药品、保健蔬菜,还能调节室内湿度、美
化环境,因此在民间广泛栽培。滕三七花而不
实,栽培一般采用肉质根或珠芽繁殖和扦插繁殖
两种,其种质运输与保存大大受限。本文建立的
组培快繁体系,可能是三七优良种质保存和种苗
批量生产的一种途径,有潜在的应用前景。藤三
七的组织培养和植株再生尚未见报道。