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海南粗榧的离体快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第6期,2005年12月786
海南粗榧的离体快速繁殖
李志英 王祝年 徐立*
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海南儋州571737
In vitro Rapid Propagation of Cephalotaxus hainanensis Li
LI Zhi-Ying, WANG Zhu-Nian, XU Li*
Institute of Tropical Crops Genetic Resources, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Danzhou, Hainan 571737,
China
收稿 2004-12-16 修定  2005-07-22
资助 中国热带农业科学院院科技基金(Rky0403)和海南省自
然科学基金(80427)。
*通讯作者(E-mail: xllzy@263.net, Tel: 0898-
23300284)。
1 植物名称 海南粗榧(Cephalotaxus hainanensis
Li)。
2 材料类别 茎段。
3 培养条件 基本培养基为 MS。(1)启动培养基:
1/2MS+5% 椰子乳(CM); (2)芽的增殖培养基:
MS+6-BA 2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1+5%
CM+0.2% 活性炭; (3)生根培养基:1/2MS+IBA
1 0。上述培养基中麦芽糖浓度均为 3%,琼脂浓
度为0.6%,pH 5.8~6.0。培养温度为25~27℃,
光照时间16 h·d-1,光强为30~40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌培养物的建立 取海南粗榧当年生幼嫩茎
段,在流水下冲洗 40 min,滤纸吸干。75% 酒
精浸泡 30 s,5% 次氯酸钠浸泡 15 min,无菌水
漂洗 3~4 次,吸干水分。然后将茎段切成 1 cm
左右的小段,接种到启动培养基上。20 d后,腋
芽开始膨大,随后叶片展开,抽生新梢。
4.2 芽的增殖与嫩梢的生长 将启动培养40 d后的
海南粗榧茎段接种到增殖培养基(2)上进行继代培
养。当腋芽枝条伸长至 3~4 cm (图 1)时,利用
腋芽萌发与枝条伸长,不断进行切段培养,平均
增殖系数可达 2.5。
4.3 生根与移栽 芽长至3 cm左右即可切下转接到
生根培养基(3)上,进行不定根的诱导。生根培养
30 d 左右,即可长出 2~4 条约 1 cm 长的根,不
定根的诱导频率达 60%。将生根瓶苗打开瓶盖,
炼苗 3 d,洗净后移栽至育苗盘中。栽培基质为
椰糠和河沙(3∶1),移栽前浇透水,移栽后遮荫
保湿,小苗成活率达 8 0 % 左右。
5 意义与进展 海南粗榧是裸子植物三尖杉科粗榧
属植物。它的根、茎、叶和果实都含有生物碱,
具有较强的抗急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白
血病、单核细胞白血病、早幼粒细胞白血病、红
白血病等各种非淋巴型白血病的功效。由于海南
粗榧天然更新能力差,分布数量有限,加以遭到
过度的砍伐,现已陷入灭绝的边缘,1987年就被
列为第一批国家二级重点保护的濒危植物。目
前,除了种子繁殖以外,可选用扦插繁殖。但
是在种质资源濒临灭绝的情况下,通过扦插提供
大量苗木的难度很大,远远满足不了制药行业对
海南粗榧的需求,而且会对海南粗榧的有限资源
造成更大的破坏。选用海南粗榧的茎尖、芽、茎
段、幼苗根段的离体组织进行培养,最终只获得
了愈伤组织,未能进行离体繁殖[1,2]。国内外尚未
见有关海南粗榧离体快速繁殖的成功报道。
参考文献
1 惠月明,胡月红,吴耀平. 三尖杉组织培养的初步研究.
中草药,1989,20(1): 31~35
2 符文英,杜道林,符木均. 海南粗榧愈伤组织的诱导和培
养. 植物生理学通讯,2004,40(1): 34~36
图1 海南粗榧离体丛生芽