全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第5期，2006年10月906
收稿 2006-04-01 修定 　2006-05-25
资助 北京林业大学自选课题赞助基金(04YL005)和农业部农业基
因资源保护与种质创新利用研究基金(2004BA525B11)。
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牛耳朵的离体培养和快速繁殖
温放* 李湛东 张启翔
北京林业大学园林学院，北京 100083
In vitro Micropropagation of Chirita eburnea Hance
WEN Fang*, LI Zhan-Dong, ZHANG Qi-Xiang
College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China
1 植物名称 牛耳朵(Chirita eburea Hance)。
2 材料类别 幼叶及花梗。
3 培养条件 ( 1 ) 花梗诱导不定芽分化培养基：
MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1；(2)幼
叶诱导不定芽分化培养基：MS+6-BA 1.0+NAA
0.1；(3)生根培养基：1/2MS 或 1/2MS+0.5% 活性
炭(两者无显著区别)。上述培养基均加入3%蔗糖
和 0.7% 琼脂，pH 6.0，培养温度(24±3)℃；在
愈伤组织形成、芽分化和生根的过程中，光照时
间12 h·d-1；光强 26~30 µmol·m-2·s-1 (汤正辉等
2005a, b)。
4 生长与分化情况
4.1 材料处理 取牛耳朵幼嫩叶片及花梗，用自来
水和毛笔清除表面污物，之后放入盛满水的 200
mL 烧杯，加入3~5 滴洗洁精，轻轻震荡15 min，
流水冲洗 30 min。在超净工作台上，以 75% 乙
醇消毒 15 s，无菌水冲洗 1 次，然后加入 0.1%
HgCl2 使之浸没材料，同时加入 3 滴吐温，轻轻
震荡4~5 min，再以无菌水冲洗 5~6 次。将叶片
分成约0.5 cm×1 cm 的小块，花梗切成1~1.5 cm
的小段，接入诱导愈伤组织培养基中。
4.2 愈伤组织和不定芽的诱导 花梗在培养基(1)中
启动时间最短，约 13 d，诱导愈伤组织频率达
80%，嫩叶在培养基(2)中启动时间需要14 d，诱
导愈伤组织频率约为 73%。2 种外植体约 30 d 后
在致密的翠绿色愈伤组织上出现不定芽。采用花
梗作为外植体，培养基为MS+6-BA 0.5+NAA 0.1，
能够获得较为满意的结果。愈伤组织出现后2周，
大部分切口处出现不定芽。此时可无需特殊培养
基，不定芽丛即可在原瓶继续分化增殖，但是在
原瓶容易生长拥挤造成分化不良和玻璃化。将不定
芽切下，转到新的培养基(1)上，即可继续增殖。
4.3 生根培养 选择高约1 cm、生长健壮的不定
芽苗接种到培养基(3)上，一苗一瓶。1周后可见
叶片明显增大，根开始发生；一般 2 周内陆续出
叶2~3 对，根 4~5 条。5周后生根率达95% 以上。
培养基(3) 2 种配方的生根效果无显著差别。另
外，在实验中可观察到不定芽直接在原培养基上
生根，数量并不比转至生根培养基上的少，因
此，在生产上可以直接在原瓶中生根，但苗分化
数量太多往往导致苗大小不一，易玻璃化。
4.4 炼苗及移栽 将健壮生根苗小心自三角瓶中取
出，用25℃温水浸泡以除去根部剩余培养基。栽
培基质为50%珍珠岩+50%蛭石(经高压灭菌)。加
盖塑料薄膜保持空气湿度，2 d 浇水 1 次，保持
基质湿润。3 周后长势稳定，可每天掀开薄膜少
许，逐渐在 6 d 内完全揭去薄膜。更换培养土，
配比为：草炭土 3 份 + 粗河砂 1 份 + 园土 1 份，
成活率 10 0 %。
5 意义与进展 牛耳朵属苦苣苔科唇柱苣苔属，花
色天蓝，花梗高耸，开花时间长，观赏价值高，
适应能力强，有一定的室内观赏盆花开发价值。
用离体快繁技术有可能步入大规模化生产。此种
的组织培养快速繁殖未见报道。
参考文献
汤正辉, 石雷, 陈维伦, 苗琛, 李振宇(2005a). 半蒴苣苔的组织培
养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 41 (3): 333
汤正辉, 石雷, 陈维伦, 苗琛, 李振宇(2005b). 台闽苣苔的组织培
养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 41 (4): 497