全 文 ：·510· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
(18．23)，161(17．05)，152(5．05)，135(100．0)，131
(17．74)，103(14．79)，98(7．62)，70(1．12)。
1H—NMR(400MHz，CDCl。)6：1．82～2．00(4H，m，
H一2”，3”)，2．30～2．48(4H，m，H一4，5)，3．45～3．58
(4H，m，H一1”，4”)，5．91(2H，s)，6．09(1H，dt，J一
15．6，8．4Hz，H，6)，6．18(1H，d，J一15．0Hz，H一
2)，6．33(1H，d，J一15．6Hz，H一7)，6．58～6．75
(3H，m，H一27，57，67)，6．89(1H，brd，，一15．0Hz，
H一3)。13C—NMR(100Hz，CDCl3)艿：24．2、26．0(C一
2”，3”)，31．6、32．2(C一4，5)，100．8(一OCH20一)，
105．4(C一27)，108．1(C一57)，120．3(C一67)，122．3(C一
2)，127．4(C一7)，130．3(C一6)，132．1(C一17)，144．3
(C一3)，146．7、147．9(C一3’，47)，164．7(C一1)。综合以
上数据并结合文献E12，15-1，推定化合物V为
sarmentosine。
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牛耳朵化学成分的研究
蔡祥海，邓德山，马云保，罗晓东“
(中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验窒，云南昆明 650204)
牛耳朵ChiritaeburneaHance为苦苣苔科唇柱
苣苔属植物，根或全草入药，多年生草本，根粗壮；生
长丘陵、山地溪边或林中石上，分布于湖南、湖北，广
西、广东及四川贵州等地；性味甘、平，有补虚、止咳、
止血、除湿的功效口]。为了研究其活性化合物，我们
对其醋酸乙酯提取物进行分离得到7个甾体类和一
个三萜化合物，分别是：豆甾一5一烯一3p，7a一二醇(stig—
mast一5一an一3B，7a—diol，I)，豆甾一4一烯一6p醇一3一酮
(stigmast一4一en一6B—ol一3一one，Ⅱ)，豆甾一4一烯一3p醇一
7一酮(stigmast一4一en一3pol一7一one，Ⅲ)，环阿尔廷一23一
烯一3B，25一二醇(cyloart一23一en一3p，25一diol，Ⅳ)，麦角
甾一4一烯一3一酮(ergosta一4一an一3一one，V)，3p一羟基一5a，
8o【一表二氧化麦角甾一6，22一二烯(3phydroxy一50c，8e—
epidioxyergosta一6，22一diene，Ⅵ)，麦角甾一5，22一双
烯一3p，7p一二醇(ergost一5，22-dien一3p，7p—diol，Ⅶ)，
B一谷甾醇(pstiosterol，Ⅷ)。
1仪器和材料
XRC一1显微熔点测定仪；VGAutospec一
3000质谱仪；BrukerAM一400、500超导核磁共振
仪，TMS内标；色谱用硅胶为青岛海洋化工厂生产，
收稿日期：2004—06—16
作者简介：蔡祥海(1976一)，男，硕士研究生，主要从事天然产物研究。E—mail：xhcai@mail．kib．ac．cn
*通讯作者
万方数据
中草药 chineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
所用溶剂均为工业重蒸；对照品为本室提供；牛耳朵
采自广西，由本所邓德山博士鉴定。
2提取与分离
样品4kg，粉碎，95％工业乙醇冷浸3次，每次
2d，合并提取液减压浓缩，用醋酸乙酯萃取，得醋酸
乙酯层90g，用氯仿一丙酮粗分；再用石油醚一氯仿、
石油醚一醋酸乙酯、石油醚一丙酮进一步分离，得到化
合物I(28mg)、Ⅱ(30mg)、Ⅲ(10mg)、Ⅳ(12
mg)、V(15mg)、Ⅵ(20mg)、Ⅶ(3mg)、Ⅶ(3g)。
3结构鉴定
化合物I：C。。H。。O。，白色方晶(丙酮)，mp
132～133℃，EI—MSm屈：430[M]+(25)，412
(100)，398(35)，55(35)，1H—NMR(CDCl。，400
MHz)6：5．59(1H，dd，H一6)，3．83(1H，brs，H一7)，
3．55(1H，m，H一3)，和文献报道一致[2|，其13C—NMR
数据见表1，确定化合物I为豆甾一5一烯一3B，7a一二醇。
化合物Ⅱ：C。。H。。O：，白色方晶(丙酮)，mp
211～214℃，EI—MSm／2：4281Ml+，1H—NMR(CD—
C13，400MHz)6：5．79(1H，s，H一4)，4．32(1H，t，H一
6)，和文献报道一致[3“]，其13C—NMR数据见表1，故
确定化合物Ⅱ为豆甾一4一烯一6p一醇一3一酮。
化合物Ⅲ：C。。H。。0。，白色针晶(丙酮)，mp
215～217。C，EI—MSm屈：428[M]+，414(60)，396
(50)，329(52)，255(70)，213(97)，145(100)，
1H—NMR(CDCl。，400MHz)艿：5．32(1H，d，H一4)，
3．50(1H，m，H一3)，其13C—NMR数据见表1，故确定
化合物Ⅲ为豆甾一4一烯一3p一醇一7一酮。
化合物Ⅳ：C。。H；。O。，白色方晶(丙酮)，mp
204～206℃，1H—NMR(CDCl3，400MHz)6：5．58
(1H，m，H一24)，5．57(1H，m，H一23)，3．26(1H，m，
H一3)，和文献报道一致[5]，其13C—NMR数据见表1，
故确定化合物Ⅳ为环阿尔廷一23一烯一3p，25一二醇。
化合物V：C。。H。。O，白色方晶(丙酮)，mp77～
80℃，EI—MS优／z：398[M]+，1H—NMR(CDCl3，400
MHz)6：5．70(1H，s，H一4)，和文献报道一致[6]，其
13C—NMR数据见表1，故确定化合物V为麦角甾一4一
烯一3一酮。
化合物Ⅵ：C。。H。。O。，白色方晶(丙酮)，mp
152～155℃，EI—MSm屈：428[M]+1(4)，396
(100)，363(17)，1H—NMR(CDCl。，400Hz)8：6．48
(1H，d，t，一8．4Hz，H一7)，6．22(1H，d，t，一8．4Hz
H一6)，5．19(1H，dd，，一15．2，7．4Hz，H一23)，5．10
(】H，dd。。，=15．2，7．4Hz，H一22)，3．94(1H，m。H一
3)，和文献报道一致‘“，其13C—NMR数据见表1，故
确定化合物Ⅵ为3p羟基一5a，8a一表二氧化麦角甾一
6，22一二烯。
表1 化合物I～Ⅶ的”c—NMR数据(cDCl3)
TabIe1 13C—NMRdataofcompoundsI一Ⅶ(CDCl3)
碳序号 I I Ⅲ Ⅳ V Ⅵ Ⅶ
1 37．O(t)37．0(t)37．2(t)32．O(t)36．1(t)34．6(t)38．8(t)
2 31．3(t)34．2(t)31．6(t)30．4(t)34．O(t)30．1(t)30．3(t)
3 71．3(d)200．4(s)71．8(d)78．8(d)199．7(s)66．4(d)73．0(d)
4 42．O(t)126．3(d)140．8(d)40．5(s)123．7(d)6．9(t)42．6(t)
5 146．2(s)168．5(s)121．7(s)47．1(d)171．8(s)82．1(s)143．3(s)
6 123．8(d)73．2(d)42．3(t)21．1(t)32．9(t)135．4(d)117．3(d)
7 65．3(d)38．7(t)207．1(s)28．0(t)32．O(t)130．8(d)67．2(t)
8 37．5(d)29．8(d)34．2(d)47．9(d)35．6(d)79．4(s)39．1(d)
9 42．2(d)53．7(d)50．1(d)20．0(s)53．8(d)51．0(d)43．O(d)
10 37．5(s)38．O(s)37．0(s)26．1(s)38．7(s)37．O(s)36．9(s)
11 20．7(t)21．0(t)21．O(t)26．O(t)21．0(t)23．4(t)21．8(t)
12 39．2(t)39．7(t)39．7(t)35．6(t)39．6(t)39．3(t)40．3(t)
13 42．2(s)42．5(s)4Z．1(s)45．3(s)42．4(s)44．5(s)43．0(s)
14 49．4(d)56．1(d)56．O(d)48．8(s)55．8(d)51．6(d)49．4(d)
15 24．3(t)24．2(t)24．3(t)32．8(t)24．2(t)20．6(t)22．7(t)
16 28．5(t)28．1(t)28．2(t)26．4(t)28．2(t)28．6(t)29．8(t)
17 55．7(d)56．2(d)56．7(d)52．0(d)56．O(d)56．2(d)56．O(d)
18 11．6(q)11．9(q)11．8(q)18．O(q)11．9(q)12．9(q)12．1(q)
19 1 9．O(q)19．5(q)19．4(q)29．9(t)17．4(q)18．2(q)18．5(q)
20 36．1(d)36．1(d)36．2(d)18．3(q)36．1(d)39．7(d)40．3(d)
21 18．2(q)19．1(q)19．0(q)25．4(q)18．6(q)20．9(q)20．9(q)
22 33．9(t)34．O(t)33．9(t)39．O(d)33．8(t)135．2(d)135．3(t)
23 25．9(t)26．3(t)26．O(t)125．6(d)23．O(t)132．3(d)131．9(t)
24 45．8(d)45．8(d)46．1(d)139．3(d)45．8(d)42．7(d)42．7(d)
25 29．1(d)29．3(d)29．0(d)70．7(d)29．3(d)33．O(d)33．O(d)
26 18．8(q)18．8(q)18．7(q)30．O(q)19．8(q)19．8(q)19．8(t)
27 19．8(q)19．8(q)19．8(q)30．9(q)18．8(q)19．6(q)19．5(t)
28 23．O(t)23．1(t)23．O(t)19．3(q)17．4(q)17．5(q)17．4(q)
29 12．0(q)12．O(q)12．0(q)15．4(q)11．9(q)
30 14．O(q)
化合物Ⅶ：C。。H。。O。，无色粉末(丙酮)，mp
154～157℃，EI—MS优／2：414rM]+，1H—NMR(CD—
C13，400MHz)8：5．26(1H，H一6)，5．18(2H，m，H一
22，23)，3．94(1H，m，H。一7)，3．51(1H，H一3)，和文献
报道一致[8]，其13C—NMR数据见表1，故确定化合物
Ⅶ为麦角甾5，22一双烯一3口，7p一二醇。
化合物Ⅷ：mp136～138℃，与p谷甾醇对照品
有相同的Rf值，混合后熔点不下降，故确定化合物
Ⅶ为p谷甾醇。
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(下转第544页)
万方数据
·544· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
吸光度值，经计算得回归方程：A一0．0159C一
0．0101，r一0．9991。
2．5换算因素的测定：精密称取60℃干燥至恒重
的淫羊藿多糖30mg，置100mL量瓶中，加水稀释
至刻度，摇匀。分别精密吸取此溶液2mL于具塞试
管中，按标准曲线的绘制项下方法操作，测定吸光
度，根据回归方程计算多糖溶液中葡萄糖的质量浓
度，按下式计算换算因素，，测得厂一1．09(以一6)。
f=W／(CD)
式中形为多糖的质量(mg)，C为溶液中葡萄糖的质量浓度
(mg／mL)，D为稀释因素
2．6供试品溶液的制备：精密称取淫羊藿生品及6
种炮制品粉末(40目)各1．5g，按2．2项下方法脱
脂、除单糖，所得多糖置100mL量瓶中，加水至刻
度，即得。
2．7精密度试验：分别精密吸取生品供试品溶液2
mL，按标准曲线的绘制项下方法测定5次，计算得
多糖的质量分数为2．042％，RSD为0．18％。
2．8重现性试验：称取生品5份，每份1．5g，制备
供试品溶液，测定，计算得多糖的质量分数为
2．039％，RSD为0．24％。
2．9稳定性试验：取供试品溶液每30min测定1
次吸光度，结果2h内测定结果稳定，RSD为
1．20％。
2．10加样回收率试验：精密称取生品0．75g，共6
份，加入约15mg葡萄糖对照品，制备供试品溶液，
测定吸光度，计算得平均回收率为99．78％，RSD为
1．10％。
2．11样品的测定：精密吸取供试品溶液2mL于
10mL带塞试管中，按标准曲线的绘制项下的方法
操作，测定供试品溶液中葡萄糖的质量浓度，按下式
计算样品中的多糖，结果见表1。
多糖的质量分数一(CDZ／W)×100％
表1 粗毛淫羊藿生品及各炮制品中多糖的测定结果(棵一5)
Table1 DeterminationofpolysaccharideIn居·acuminatum
anditsdifferentprocessedpro ucts(席一5)
从测定结果看，淫羊藿及其炮制品中多糖的质
量分数依次为：羊脂炙>炒制>烘制>酥油制>酒
制>盐制>生品。统计分析结果表明，各炮制品中多
糖的量较生品有显著性增加。
3讨论
多糖为淫羊藿药效成分之一，在一定范围内多
糖的量与药效作用成正相关[4]。淫羊藿经炮制后，其
细胞大量破壁，促进了多糖的溶出，本实验证明，淫
羊藿经过炮制后入药较好。
《中华人民共和国药典>>2000年版采用羊脂炙
入药。从淫羊藿多糖的药理作用的角度和本实验结
果看，采用传统的羊脂炙，其多糖得量较生品显著增
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万方数据
牛耳朵化学成分的研究
作者： 蔡祥海， 邓德山， 马云保， 罗晓东
作者单位： 中国科学院昆明植物研究所,植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室,云南,昆明
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刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(4)
被引用次数： 4次
参考文献(8条)
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引证文献(4条)
1.王晓琴.白贞芳.刘勇.肖培根 牛耳朵和黄花牛耳朵的显微和化学鉴别[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2011(14)
2.陈文娟.文永新.陈月圆.黄永林.李典鹏 牛耳朵脂溶性成分的GC-MS分析[期刊论文]-广西科学 2009(2)
3.陈文娟.文永新.陈月圆.黄永林.李典鹏 牛耳朵苯乙醇苷类化学成分及其细胞毒活性研究[期刊论文]-中成药
2010(6)
4.康文艺.陈林.臧鑫炎 卷丝苣苔三萜类化学成分研究[期刊论文]-中国中药杂志 2009(20)
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