全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 3期，2007年 6月 517
兰属新种珍珠矮的组织培养与植株再生
和寿星，薛润光 *，李兆光，和加卫，李燕
云南省农业科学院高山经济植物研究所，云南丽江 674100
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Cymbidium nanulum Y. S. Wu et
S. C. Chen
HE Shou-Xing, XUE Run-Guang*, LI Zhao-Guang, HE Jia-Wei, LI Yan
Alpine Economic Plants Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Lijiang, Yunnan 674100, China
收稿 2007-03-14 修定 2007-05-21
资助 云南省重点基金(2003NG09)和云南省国际合作处项目
(SIARF2001)。
* 通讯作者( E-m a i l：x u e r g@ 1 6 3 . c om；T el：0 8 8 8 -
5 1 2 1 3 8 5 )。
1 植物名称 兰属植物新种珍珠矮(C y m bi d i u m
nanulum Y. S. Wu et S. C. Chen)。
2 材料类别 九成熟蒴果内种子。
3 培养条件 以 1/2MS (大量、微量元素均减半)为
基本培养基。(1)种子萌发培养基：1/2MS+6-BA 0.25
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5+活性炭 2 g·L-1+椰乳
100 mL·L-1；(2)根状茎增殖培养基：1/2MS+6-BA
0.5+NAA 2+活性炭 2 g·L-1+椰乳 100 mL·L-1；(3)
芽和根分化培养基：1/2MS+6-BA 5+NAA 0.5+椰
乳 100 mL·L-1；(4)壮苗培养基：1/2MS+NAA 2+
香蕉泥 100 g·L-1。上述培养基均附加 8 g·L-1琼脂
和 30 g·L-1蔗糖，pH 5.4。培养温度(23±2) ℃，
根状茎诱导阶段置黑暗中培养，增殖、分化和壮
苗阶段光照培养，光照强度 25~30 µmol·m-2·s-1，
光照时间 14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 2月，切取尚未开裂的珍珠
矮蒴果，切除花梗和残留柱头、花瓣，用 75 %
酒精擦拭干净后浸入 1 g·L-1 HgCl2溶液中 15 min，
无菌水清洗 3~4次。在超净台上，用滤纸吸干水
分，切除蒴果两端接触消毒液部分，然后剖开蒴
果，将种子直接撒播于培养基(1)上，播种密度以
大致铺满培养基，种子间不相互重叠为宜。
4.2 根状茎的诱导和增殖 接种 45 d后，部分种胚
膨大并突破种皮，先形成原球茎，再经过约 60 d后
原球茎一端伸长，分化出 1~2条根状茎。在培养
基(1)上不同种子萌发速度差异极大，萌发可持续
1年甚至更长时间，经抽样测定，平均萌发率为
35.2%。分批将诱导出的根状茎转接到增殖培养
基(2)上，根状茎伸长，并在先端或中间出现小突
起，伸长成为分枝状根状茎(图 1)，水平生长一
段时间后大多数会垂直向下生长。45 d继代一
次，在分枝处切下或分段切下，转入新鲜培养基
中，可继续分化成分枝状根状茎。珍珠矮增殖速
率受 NAA影响较大，在 1~5 mg·L-1的范围内，
NAA浓度越高，根状茎增殖速率越快。综合增殖
速率与生长情况，以培养基(2)效果较好，每代平
均增殖倍数为 3.6。
图 1 珍珠矮的根状茎增殖
4.3 芽和根的分化培养 在培养基(2)上也可分化出
少量芽和根，但为了提高分化率，可将增殖的根
状茎从分枝处切下，转接到分化培养基(3)上。约
30 d后，根状茎先端开始分化芽，接种 60 d后
测定芽平均分化率为 72%。新芽生长到约 3 cm
高、展开 1~2片叶后，叶片基部鞘叶内分化出根
并向培养基内生长。在培养基(3)中培养 90 d时，
新芽生根率可达 95%以上(图 2)。
4.4 壮苗培养与移栽 在分化培养基上培养约 90 d
后，选取健壮新苗转入壮苗培养基(4)中培养 45 d，
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促进新芽、新根生长。新芽生长到 10~15 cm高、
展开 2 ~3 片叶、根长满培养基时，逐渐揭开瓶
盖，过渡培养 2~3 d。然后取出组织培养苗，洗
净培养基，以 500倍 70%多菌灵溶液处理过的水
苔包裹根部，5~10株为一丛，合栽于 9 cm×9 cm
(口径 ×高)的营养钵中，置炼苗棚内培养。初期
遮去自然光的 90%左右，棚内温度控制在 25 ℃
以下，空气湿度 80%左右，每周喷洒 0.1%磷酸
二氢钾和 0.05%尿素混合溶液，每月喷 1 000倍
70%多菌灵溶液一次，移栽成活率可达 90% 以
上。
5 意义与进展 珍珠矮为吴应祥和陈心启(1991)命
名的兰科兰属新种，最早发现于云南文山，大致
分布于四川南部至云南西部和南部某些特殊环境
中。花期 6~9月，具有一年多次开花的特性，花
色多变，香味清纯。由于珍珠矮植株矮小，分
布地域狭窄，野生资源稀少，一直没有像兰属其
图 2 珍珠矮的生根壮苗
他种类一样得到重视，人工驯化、栽培很少(陈
心启等 1999)。珍珠矮分株繁殖较慢，用植株侧
芽组织培养时取材不易，且对植株伤害较大。用
种子人工无菌播种繁殖可迅速得到大量实生苗，
可能是快速繁殖珍珠矮的一个有效方法。本文结
果对珍珠矮大规模栽培和新优品种的选育可能有一
定的参考意义。与珍珠矮同属的其他种兰花组织
培养已多有报道(张菊野等 1993；张志胜 2000；
徐宏英等 2001；吴晓霞等 2002；宋卫平等 2003；
秦改花等2006)，但珍珠矮组织培养和快速繁殖的
报道迄今未见。
参考文献
陈心启, 吉占和, 罗毅波(1999). 中国野生兰科植物彩色图鉴. 北
京: 科学出版社, 182
秦改花, 田芳, 汤士勇(2006). 培养基中附加不同有机物对虎头
兰原球茎增殖的影响. 植物生理学通讯, 42 (3): 469
宋卫平, 万志刚, 顾福根, 许宏庆(2003). 素心建兰的组织培养及
快速繁殖. 植物生理学通讯, 39 (4): 355
吴晓霞, 姜敦云, 崔月花, 张彪(2002). 大花蕙兰的组织培养和快
速繁殖. 植物生理学通讯, 38 (2): 141
吴应祥, 陈心启(1991). 中国兰属两新种. 植物分类学报, 29 (6):
549~552
徐宏英, 王芳, 谢海军, 赵玉明(2001). 大花蕙兰的组织培养和快
速繁殖. 植物生理学通讯, 37 (6): 47
张菊野, 俞玲凤, 连宏坤(1993). 几种影响春兰原球茎生长与分
化的因素. 植物生理学通讯, 29 (3): 175~178
张志胜(2000). 兰花育种. 见: 程金水编. 园林植物遗传育种学.
北京: 中国林业出版社, 263~289