全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第5期，2006年10月914
水蕨的组织培养和快速繁殖
蔡汉权* 林燕文 刘发康 罗永根 欧阳情
韩山师范学院生物系，广东潮州521041
Tissue Culture and Rapid Propagation of Ceratopteris thalictroides (L.) Brongn
CAI Han-Quan*, LIN Yan-Wen, LIU Fa-Kang, LUO Yong-Gen, OUYANG Qing
Department of Biology, Hanshan Teachers College, Chaozhou, Guangdong 521041, China
1 植物名称 水蕨[Ceratopteris thalictroides (L.)
Brongn]。
2 材料类别 营养叶、孢子叶。
3 培养条件 基本培养基为 MS 培养基。(1)诱导愈
伤组织培养基：MS+6-BA 2 mg·L-1 (单位下同)+
NAA 0.5；(2)诱导芽培养基：MS+6-BA 0.25+IBA
0.25+ 活性炭(AC) 0.5 g·L-1；(3)生根培养基：
MS+6-BA 0.5+IBA 0.25+AC 0.5 g·L-1。以上培养
基均含0.92% 琼脂，pH 6.5~7.0，高压灭菌锅中
121℃下灭菌 20 min。培养温度为 23~24℃，光
照时间12 h·d-1，光强为20~30 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 孢子叶的离体萌发 剪取 2~3 cm 的孢子叶，
在自来水中荡洗，再用洗衣粉上清液荡洗 1 次，
自来水中清洗 4 次，去除尘垢。放入干净的烧杯
中，在超净工作台上，用 0. 1 % 升汞浸泡 2 次，
每次3 min，且每次浸泡后都用无菌水荡洗5次。
将材料修剪成0.5~1 cm 小段，接种于培养基(2)
上。14 d 左右，其孢子萌发，可见大量 2~5 mm
的配子体。30 d后，在配子体上形成孢子体。萌
发过程无需更换培养基，萌发量极大。
4.2 营养叶诱导不定芽 剪取 2~3 cm 的营养叶，
灭菌和修剪都按上述方法，接种于培养基(2)上培
养。14 d 后开始萌动，20 d 左右长出许多不定
芽。不定芽多由叶片边缘开裂处形成，其类型属
于由培养器官(叶片)直接产生的不定芽，与自然
状态下水蕨营养叶形成不定芽十分相似，但芽的
数量有明显的增加。30 d左右即可发育成茂盛的
丛生芽。以后，每隔 3周左右，在培养基(2)上
继代 1 次，便可得大量不定芽。
4.3 营养叶诱导愈伤组织再生植株途径
4.3.1 愈伤组织的诱导 剪取2~3 cm的营养叶，灭
菌和修剪都按上述方法，接种于培养基(1)上培
养。14 d后开始萌动，20 d左右即发育成绿色的
愈伤组织。愈伤组织质地致密，表面呈粒状或瘤
状突起，生长迅速。愈伤组织形成 3 周左右应及
时继代，否则，在愈伤组织表面形成许多气生
根，有老化现象。以后，每隔 3 周左右，在培
养基(1)上继代 1 次，便可得到大量愈伤组织。
4.3.2 丛生芽的诱导 将4.3.1中得到的愈伤组织接
种于培养基(2)中，15 d 左右，可在愈伤组织表
面长出不定芽。不定芽数量极多，但芽体小，生
长慢。因此，不定芽形成后，应及时将愈伤组
织上的丛生芽分开，并分别接种于培养基(2)上继
代培养，便可得到大量生长健壮的丛生芽。
4.4 生根培养 将由营养叶直接诱导得到的不定芽
以及由愈伤组织诱导得到的不定芽接种于生根培养
基(3)上培养，便可获得大量的带根试管苗。水蕨
容易生根，在芽诱导培养基(2)上生长的芽也有根
系形成，因此，大量繁殖时可省略生根步骤。
4.5 试管苗的移栽 将培养瓶移至室内散射光处，
敞瓶炼苗 3~4 d。然后，将带根的试管苗小心取
出，洗净培养基，移入苗床。苗床的泥土取自
水蕨自然产地的土壤，并混入等量粗沙，消毒灭
菌而成。移栽后，用多菌灵喷洒消毒，加遮光
网遮光、保温。2~3 d 后，去掉遮光网，小心浇
水和消毒护理，成活率达 8 5 % 以上。
5 意义与进展 水蕨为水蕨科水蕨属植物，水生或
半水生草本。根茎短，绿色多汁，叶近根生，
2~3 回羽状裂片，叶片长10~35 cm，有营养叶和
孢子叶 2 种，孢子叶里有大量孢子。但自然条件
下，受精率很低，濒于灭绝，1999 年，在国务
院公布的第一批《国家重点保护野生植物名录》
中被列为国家二级保护植物。水蕨可制成名贵可
口的菜肴；由于造型美观和稀有，也常用作园艺
观叶植物；还可药用，有活血，解毒，治痞积、
痢疾、胎毒和跌打损伤等功能。是经济价值较高
的可供开发和利用的植物。本文结果对濒危植物
水蕨的保护和大面积种植推广有潜在的参考价值。
目前，水蕨的组织培养在国内外尚未见报道。
收稿 2006-05-08 修定 2006-07-24
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