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费尔干猪毛菜的组织培养及植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 6期,2007年 12月 1127
费尔干猪毛菜的组织培养及植株再生
潘鑫艳,曾幼玲,高海波,张富春 *
新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐 830046
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Salsola ferganica Drob.
PAN Xin-Yan, ZENG You-Ling, GAO Hai-Bo, ZHANG Fu-Chun*
Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang
University, Urumqi 830046, China
收稿 2007-08-08 修定 2007-11-15
资助 教育部科学技术研究重点项目(205178)和国家自然科
学基金(30 4 60 0 1 5)。
* 通讯作者(E-mai l:zfcxju@xju.edu .cn;T el:09 91 -
8583259)。
1 植物名称 费尔干猪毛菜(Salsola ferganica
Drob .)。
2 材料类别 下胚轴,带下胚轴的子叶。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导培养基:MS+2,4-
D 2.0 mg·L-1 (单位下同)+6-BA 0.2;(2)愈伤组织
继代培养基:MS+NAA 0.1+6-BA 1.0;(3)愈伤组
织分化培养基:MS+6-BA 0.5+NAA 0.05;(4)丛
生芽诱导培养基:MS+6-BA 1.0;(5)生根培养
基:1/2MS+IBA 0.2。上述培养基均加入蔗糖
3.0%、琼脂 0.8%,pH 5.8~ 6.0。培养温度为 23~26
℃,光照时间为16 h·d-1,光照强度为34 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 将野外采集的费尔干猪毛菜
种子用 70%乙醇消毒 30 s后,无菌水冲洗3~4遍,
再用 0.1% (W/V)的HgCl2消毒 6 min,无菌水冲洗
6~7遍,随即将处理好的猪毛菜种子平铺在 1 cm
厚的MS琼脂培养基的三角瓶中。猪毛菜种子吸
涨后 3 h左右萌发,24 h后下胚轴及胚根伸长,
长出子叶。5~7 d后,截取无菌苗的下胚轴接种
于培养基(1) ;截取无菌苗带下胚轴的子叶置于培
养基(3)中,预培养 3 d后,再将带下胚轴的子叶
纵切接种于该培养基上继续培养。
4.2 不定芽的分化及增殖 下胚轴在培养基(1)上,
经培养 20 d后,出现黄绿色愈伤组织,将其转
入培养基(2)中继代培养 2次以上后,将生长一致
的愈伤组织接种到培养基(3)中,2周后长出绿色
的芽点并继续分化为不定芽。带下胚轴的子叶在
培养基(4)上,培养 14 d后,切口处出现丛生芽
点,平均每个外植体能分化出 4~5个芽。将这些
芽点再接种于培养基(4)上生长 20 d后,即分化为
0.5~1.0 cm高的不定芽丛。将这两种方法得到的
不定芽切成若干份后,继续在(4)上培养,每 20 d
继代 1次。费尔干猪毛菜带下胚轴的子叶诱导芽
苗再生频率可达 91.8%,而下胚轴诱导芽苗再生
频率只有 31.1%。
4.3 壮苗及生根 将产生的丛生芽分割成单芽,接
入培养基(3 )中壮苗,待其长成较健壮的小植株
后,将其切下移入培养基(5)中,20 d后生根率
为 72%,每株有 4~5条长 1.0~3.0 cm的不定根。
4.4 试管苗移栽 打开装有再生苗的培养瓶塞,室
温条件小心取出,洗净根上培养基的琼脂,移入
沙土和蛭石(3:1)的混合基质中,保证湿度,控制
温度和光照,其成活率在 90% 以上。
5 意义与进展 费尔干猪毛菜是藜科猪毛菜属一年
生的盐生植物,极其耐盐。我国西北荒漠是猪毛
菜集中分布的地区。在盐碱地种植猪毛菜可有效
降低土壤含盐量,增加土壤的有机质,具有明显
改良土壤性质降低侵蚀的功效。《中华本草》中
记载:猪毛菜味淡,性凉,具有平肝潜阳、润
肠通便之功效,主治高血压、头痛、眩晕、失
眠、肠燥便秘等病症。野外费尔干猪毛菜春季萌
发生长,秋后猪毛菜便干枯,利用率较差。目
前有关猪毛菜的研究主要集中在形态学的研究水平
以及其化学成分的分析。本文旨在建立费尔干猪
毛菜组织培养体系,为研究猪毛菜耐盐的生理生
化和分子机制提供实验材料,同时对猪毛菜扩大
繁殖也可能有一定的参考价值。费尔干猪毛菜的
组织培养尚未见报道。