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马蓝未成熟种子的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 3期,2007年 6月 521
收稿 2007-03-19 修定  2007-04-10 
资助 福建省重大科技专项(2 00 4YZ02 -1 )。
* 通讯作者(E-ma il:cjy6 6 01 @1 63 .com;T el:0 59 1 -
8 7 5 9 6 1 4 0 )。
马蓝未成熟种子的组织培养
张丽梅,陈菁瑛 *,陈熹
福建省农业科学院果树研究所,福州 350013
Tissue Cultuer of Immature Seeds from Baphicacanthus cusia [Nees] Bremek.
ZHANG Li-Mei, CHEN Jing-Ying*, CHEN Xi
Pomology Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350013, China
1 植物名称 马蓝[Baphicacanthus cusia (Nees)
Bremek.],又名板蓝、南板蓝根和大青叶。
2 材料类别 未成熟种子(种皮转色前,比采收期
大约提早 20 d采收)。
3 培养条件 萌发培养基:(1) 1/2MS;(2) 1/2MS+
0.5%活性炭;(3) MS;(4) MS+0.5%活性炭;(5)
MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同);(6) MS+KT 1.0;
(7) MS+NAA 1.0。继代增殖与分化培养基:(8)
MS+KT 1.0+NAA 1.0 ;(9) MS+6-BA 1.0+ NAA
1.0;(10) MS+6-BA 2.0+NAA 1.0;(11) MS+KT
2.0+NAA 0.5;(12) MS+6-BA 1.0+NAA 0.5;(13)
MS+6-BA 2.0+NAA 0.5。生根培养基:(14)
MS+IBA 0.5+0.5%活性炭;(15) MS+IBA 1.0+
0.5%活性炭。以上培养基均附加2.0%蔗糖和0.8%
琼脂,pH 值为 5 . 8,高压灭菌。接种后,置于
光照培养箱中培养,培养温度为(25±1) ℃,光照
强度 40~50 µmol·m-2·s-1,光照时间 8 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 种荚在超净工作台上用 70%
的酒精浸泡 30 s,0.1%升汞(附加 2滴吐温)消毒
5 min,无菌水冲洗 4次,吸干水分,切开种荚,
轻轻将种子接种到培养基上。
4.2 种子的萌发 7种萌发培养基均可使种子萌发,
但是培养基(5)~(7)更容易使种子萌发,7 d后种皮
开裂露白;14 d后下胚轴伸长,子叶展开,部
分已长出 2~3片真叶,比其余早 3~5 d;20 d后,
在培养基(2)、(4)上植株的根正常朝下生长,而其
余培养基上植株形态怪异,两端向上翘(即根部往
培养基外长),只有茎尖生长点处接触培养基,根
无法正常生长。其中加入KT的培养基(6)上的植
株最高,叶片最大。
4.3 增殖与分化培养 将萌发正常的无菌植株的
下胚轴、子叶、顶芽分别接种到增殖分化培养基
中,15 d后可见子叶卷曲,叶缘及叶背处形成致
密的浅黄色愈伤组织,下胚轴两端切口处也形成
致密的愈伤组织,顶芽有所伸长,基部也有愈伤
组织形成。培养基(13)的效果最好,1个月后顶
芽基部分化出3~5个小芽。2个月后下胚轴形成的
愈伤组织变疏松,分化出芽。
4.4 生根培养 将高 2 cm以上、生长健壮的小芽切
下,转到生根培养基中。15 d后开始长根,1个
月后根系发育良好,每株苗有 3~7条根,生根率
可达 100%。2 种培养基无明显差异。
4.5 试管苗移栽 打开封口膜,连瓶带苗放在室内炼
苗 2 周,然后将生根苗取出,洗净培养基,种
植到泥炭土、珍珠岩(2:1)的混合基质上,保持适
宜的温湿度,成活率可达 95% 以上。
5 意义与进展 马蓝是爵床科马蓝属草本植物,其
叶或茎叶经加工制得的干燥粉末或团块。具有清
热解毒、凉血、定惊之功效。福建省仙游县种
植马蓝加工青黛有十分悠久的历史,宋代的《仙
溪志》中就有记载。由于其产量大、质佳,素
有建青黛之美称,是福建的道地药材。传统的栽
培方式都是在春季采用扦插繁殖育苗移栽,需要
较多的繁殖材料扦插枝条,且繁殖速度慢,种质
退化严重。本文开展马蓝未成熟种子的组织培养
研究,旨在探讨马蓝的离体繁殖技术,为其资源
的研究应用提供技术借鉴。马蓝未成熟种子的组
织培养未见报道。