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尖萼唇柱苣苔的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 2期,2007年 4月 321
尖萼唇柱苣苔的组织培养和快速繁殖
梁桂友 *,温放,李湛东
北京林业大学园林学院,北京 100083
Tissue Culture and Rapid Propagation of Chirita pungentisepala W. T. Wang
LIANG Gui-You*, WEN Fang, LI Zhan-Dong
College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China
收稿 2006-12-10 修定  2007-03-14
资助 北京林业大学研究生自选课题资助基金和农业部农业
基因资源保护与种质创新利用研究基金(2004BA525B11)。
* E-mai l:j imylu@1 26 .com;Tel:01 0-62 39 00 35
1 植物名称 尖萼唇柱苣苔(Chirita pungentisepala
W. T. Wang)。
2 材料类别 花梗和带苞片的花蕾。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导和不定芽分化培养
基:MS+6-BA 0.1 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;
(2)生根培养基:1/2MS。上述培养基均加入 3.0%
蔗糖和 0.6%琼脂,pH 6.2。培养温度(25±3) ℃;
在愈伤组织形成、芽分化和生根过程中的光照时
间 12 h·d-1;光照强度 26~30 µmol·m-2·s-1 (温放等
2006)。
4 生长与分化情况
4.1 材料处理 取幼嫩花梗和带苞片的花蕾,用洗
洁精稀释液清除其表面污物,自来水冲洗后放入
盛满水的烧杯中,加入 3~5 滴洗洁精,震荡 15
min,流水冲洗 30 min。在超净工作台上,以 0.1%
升汞浸泡 5 min,无菌水冲洗 1次;再用 0.1%升
汞消毒 5 min,以无菌水冲洗 5~6次。将花梗切
成 1~1.5 cm的小段,接入培养基(1)中;而带苞
片的花蕾则直接接种至培养基(1)中。
4.2 愈伤组织和不定芽的诱导 带苞片的花蕾在培
养基(1)中启动时间较短,约 14 d,诱导愈伤组
织频率达 80%;花梗启动时间为 18 d左右,诱
导愈伤组织频率为 75%。2种外植体约 35 d后在
深绿色的愈伤组织上出现不定芽,且大部分出现
在切口处。此时无需更换培养基,不定芽丛在原
瓶继续分化增殖。但由于空间有限,会出现大量
不定芽分化不良和玻璃化的现象。将不定芽切
下,转到新的培养基(1)上继续增殖。
4.3 生根培养 选择高约 1 cm、生长健壮的不定
芽苗接种到培养基(2 )上,一苗一瓶。12 d后,
叶片明显增大,根开始发生;15 d内,陆续出
2~3对新叶,5~7条根;21 d后,生根率达 95%
以上。另外,不定芽能在原培养基上直接生根,
新根粗短,且数量不比转到生根培养基上的少。
因此,生产中可直接用培养基(1)同时进行继代增
殖和生根培养,但会出现不定芽和新根数量过
多,导致植株玻璃化。
4.4 炼苗和移栽 将健壮的生根苗从培养瓶中小心
取出,用 25 ℃温水浸泡去除培养基。栽入 50%
珍珠岩和 50%蛭石(经高压灭菌)基质中。盖上塑
料薄膜以保持空气湿度,2 d浇水 1次,保持基
质湿润。21 d长势稳定后,每天掀开薄膜少许,
7 d揭去薄膜。然后更换(草炭土:粗河砂:园土= 3:
1:1)培养土,成活率 100% (王俐和龙春林 2005)。
5 意义与进展 尖萼唇柱苣苔属苦苣苔科唇柱苣苔
属植物,目前查明仅广西龙州一个自然分布点,
野外现存植株数量稀少,加上其生境遭到严重破
坏,已面临濒危。此种植物的叶片表面有白色花
纹,花色白至深粉红;花梗高挺,花色多变,
花期长。花叶兼美,观赏价值高,具有一定的
室内观赏盆花开发前景;其野生资源稀少,急待
保护。用组织培养快速繁殖技术可能有助于此种
植物的种质资源保存。尖萼唇柱苣苔的组培快繁
尚未见报道。
参考文献
王俐, 龙春林(2005). 猫耳朵的组织培养. 植物生理学通讯, 39
(3): 233
温放, 李湛东, 张启翔(2006). 牛耳朵的离体培养和快速繁殖. 植
物生理学通讯, 42 (5): 906