全 文 :植物保护学报 Journal of Plant Protection, 2015, 42(3): 304 - 309 DOI: 10 13802 / j. cnki. zwbhxb. 2015 03 003
基金项目: 国家公益性行业(农业)科研专项(201403064),国家蚕桑产业技术体系(CARS⁃22)
∗通讯作者(Author for correspondence), E⁃mail: yumd@ 163. com
收稿日期: 2014 - 06 - 20
桑椹瘿蚊生物学特性及其化学防控
裴汭超 朱攀攀 赵爱春 吕蕊花 鲁 成 余茂德∗
(西南大学生物技术学院, 重庆 400715)
摘要: 为探索桑椹瘿蚊 Cotarina sp.生物学特性,并进行有效地化学防控,通过调查桑椹瘿蚊的发
生期,观察并记录其各部分形态特征,同时统计了乐果对桑椹瘿蚊的防治效果,并采用高效气相层
析法测定了成熟桑椹中乐果的残留量。 结果表明:桑椹瘿蚊为完全变态昆虫,经历卵、幼虫(休眠
体)、蛹、成虫 4 个阶段,每年 3 月开始羽化为成虫,成虫不取食桑椹,可存活 2 ~ 4 d,雌雄成虫傍晚
交配,产卵于桑椹小果中,卵经 6 ~ 7 d孵化为幼虫,幼虫从果柄中心取食桑椹,导致桑果局部畸形
(干瘪)、早熟;幼虫经历 3 个龄期,老熟幼虫弹跳入土,形成休眠体进行越夏越冬,翌年 2 月化蛹。
喷洒乐果乳剂 1 000 倍稀释液后,桑椹虫害率由 83 3%降低到 15 0% ,被害桑椹虫口密度下降了
89 3% ;经高效气相色谱法分析,乐果残留量仅为 0 75 mg / kg,低于国际标准,表明乐果对桑椹瘿
蚊的防治效果较好。
关键词: 桑椹瘿蚊; 生物学特性; 化学防控; 残留量分析
Biological characteristics and chemical control of the mulberry fruit
gall midge Cotarina sp.
Pei Ruichao Zhu Panpan Zhao Aichun Lü Ruihua Lu Cheng Yu Maode∗
(College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China)
Abstract: In order to explore the biological characteristics and provide an effective method for chemical
control of the mulberry fruit gall midge Cotarina sp. , the occurrence period and morphological
characteristics were investigated, and the effect of chemical prevention and control with 1 000⁃fold
dilution of 40% dimethoate pesticide was statistically evaluated, and the residual quantity of dimethoate
in the treated mature mulberry fruits were conducted by high performance gas chromatography (HPGC).
The results showed that Cotarina sp. is an insect with complete metamorphosis from egg, larva (hypopus
midge), pupa to adult. The adults of Cotarina sp. were characterized by eating no mulberry collective
fruits and able to survive for two to four days. Adults firstly occurred in March, and then females mated
with males and laid eggs in young mulberry fruits. Six to seven days after oviposition, eggs hatched into
larvae, and the latter developed and fed on mulberry fruits starting from the carpopodium⁃center, which
resulted in the deformation and early⁃maturation of the attacked fruits. These larvae became fully mature
after three instars, and then jumped into the soil surface and became resting bodies for passing through
the summer and winter. The resting bodies of larvae pupated on February in the next year. The treatment
of mulberry fruits infested by Cotarina sp. using 1 000⁃fold dilution of 40% dimethoate pesticide
decreased the rate of infestation from 83 3% to 15 0% . In addition, the density of Cotarina sp. in the
attacked fruits decreased by 89 29% . The results of HPGC analysis showed that the residual quantity of
dimethoate in the treated mature mulberry fruits was only 0 75 mg / kg, less than the international
standard, which suggested that it is feasible to prevent and control Cotarina sp. using the above
treatment.
Key words: Cotarina sp. ; biology characteristics; chemical prevention and control; analysis of residual
pesticide content
桑椹又名桑果,其花青素含量高达 3% ,是目前
花青素含量最高的水果之一(Mazza et al. ,2002),
并富含氨基酸、维生素、胡萝卜素、芸香甙等,具有抗
氧化、降血糖血脂、促进视力等多种药理作用,深受
人们的青睐(Kong et al. ,2003)。 我国果桑栽培面
积不断扩大,目前已达 1 5 万 hm2 (蒯元璋和吴福
安,2012)。
桑椹瘿蚊 Cotarina sp.又名桑椹浆瘿蚊,属双翅
目长角亚目瘿蚊科,是为害桑椹的主要害虫。 最早
发现于 20 世纪 80 年代,分布于陕西关中一带。 该
虫寄生于桑椹小果中,导致桑椹畸形,种子不能正常
发育,研究人员将其暂命名为椹瘿蚊(韩明斋等,
1994;焦峰等,1997);江兴培(1994)总结四川重要
经济瘿蚊名录时曾使用学名 Cotarina morulae Jiang,
并报道该昆虫分布于重庆市北碚区,导致被害桑椹
果实比正常果实大 1 ~ 1 5 倍;夏志松(2005)报道瘿
蚊在川陕地区为害严重,桑椹被害率严重时可达
90%,小果为害率高达 93%。 随着瘿蚊类害虫为害程
度和波及范围的加深与扩大,人们也一直在寻求对其
有效防控的方法。 王建新等(1987)使用 5%喹硫磷
拌锯木屑撒施于桑园土壤中,对瘿蚊蛹毒杀效果较
好,但对休眠体作用不显著;郑明儿等(1994)使用甲
基异柳磷和六六六粉分别对 2组试验桑园进行防治,
结果表明 2种农药对瘿蚊的作用效果无显著差异;此
外,研究人员还筛选出唯一的抗瘿蚊桑树品种———桑
农林 8号“青叶鼠返”(东城功,1983;缪盘春,1990)。
近几年来,曾秀丽和张明海(2011)、时冬莲和姬田成
(2012)相继报道了重庆、四川 2地果桑栽培中桑椹瘿
蚊虫害,但主要是关于发病区域、果桑品种选择、栽培
技术等方面,而关于桑椹瘿蚊的虫害症状、形态特征
和生活史、为害时期等生物学特性以及具体防控方法
的系统研究鲜见报道,因此,本试验对桑椹瘿蚊的生
物学特性及化学防控进行探索研究,以期为桑椹瘿蚊
的科学有效防控提供理论依据。
1 材料与方法
1 1 材料
供试虫源:于 2014 年 3 月 12 日—25 日在西南
大学桑树资源苗圃桑树(品种大十)桑果及嫩芽上
采集桑椹瘿蚊成虫;带回室内进行饲养,饲养条件为
光周期 L ∶ D = 12 h ∶ 12 h、温度 28 ± 0 5 ℃、湿
度(60 ± 5)% 。
药剂:40%乐果(dimethoate)乳剂,重庆农药化
工(集团)有限公司;乐果标准品,国家农药质量监
督检验中心。
仪器:GXZ⁃160A 智能型光照培养箱,宁波江南
仪器厂;OLYMPUS⁃MVX10 体视显微镜、OLYMPUS⁃
CX41 显微镜、OLYMPUS C⁃700 照相机,奥林巴斯
(中国)有限公司;Agilent7890 高效气相色谱仪,气
相色谱条件:色谱柱:HP⁃5,30 mm ×0 320 mm,检测
器:电子捕获检测器 ECD,载气:N2,进样量:2 μL,
安捷伦科技(中国)有限公司。
1 2 方法
1 2 1 桑椹瘿蚊生物学特性调查方法
成虫:采用 2 m ×3 m地膜覆盖于西南大学桑树
资源苗圃大十品种果桑相邻 2 株树冠下,设 4 个重
复,每天 16∶ 00—18∶ 00 观察并记录桑椹瘿蚊羽化时
间及羽化数量。 从虫害桑树树冠出现桑椹瘿蚊成虫
开始每天观察拍照,记录自然状态下成虫形态结构
及雌雄交配过程。 因桑椹瘿蚊成虫个体小,飞翔能
力较弱,一般停置在果实或幼叶背面,可直接用广口
瓶捕捉成虫( Jiao & Bu,2013),瓶内放入适量桑椹
及桑芽,于实验室 D ∶ L = 12 h ∶ 12 h、培养箱 28 ℃培
养,统计成虫存活天数,并观察其形态特征。
卵:观察树冠上有雌雄成虫交配时,采集成虫活
体并带回实验室饲养 24 ~ 48 h,显微镜下解剖雌虫,
收集卵进行形态观察,并统计雌虫平均含卵量,然后
将卵稀释后用移液枪注入桑果中在上述条件下饲养
观察。
幼虫:观察果实出现虫害症状时,随机采集虫害
桑椹,体视显微镜下解剖桑果,收集幼虫,观察其形
态特征。
休眠体:剪取幼虫寄生桑枝,于实验室内湿地扦
插培养,待幼虫老熟自然弹跳于盛有无菌土的容器
中,收集休眠体,观察其形态特征。
蛹:次年春季成虫羽化前,采集虫害桑树着生地
5033 期 裴汭超等: 桑椹瘿蚊生物学特性及其化学防控
土样,利用淘土 -过筛法(赵洪海等,2013)(网孔直
径≤2 5 mm)收集蛹并观察其形态特征。
1 2 2 化学防控与农药残留量测定
化学防控:选用 40%乐果乳剂稀释 1 000 倍液
(李怡萍等,2009),以喷洒药剂的桑树作为处理组,
以喷洒无菌水的桑树作对照组,于 2014 年 3 月 18
日分别在 2 块西南大学桑树资源苗圃大十桑树品种
种植区选取 10 行桑树进行试验。 待对照组桑椹表
现出为害症状时,采集各组桑椹(2014 年 4 月 17
日),每行随机选取 3 株,统计桑椹虫害率与虫害桑
椹平均虫口数。 具体方法:每株桑树随机选取 100
颗桑椹,分别统计正常、虫害桑椹数量,每行桑树虫
害率 = 3 株虫害桑椹数 / 300 × 100% ,总虫害率 =
∑每行桑树虫害率 / 10 × 100% ;每株桑树随机采集
虫害桑椹 30 颗,解剖桑果,收集幼虫;同时也可将桑
椹置于密闭性容器中,幼虫自行爬出桑果,每隔 2 h
收集、统计幼虫数量,虫害桑椹平均虫口数 =总虫口
数 / 900(马康生等,2013)。
乐果残留量测定:采用高效气相色谱法,对采集
的处理组桑椹进行乐果残留量分析。 样品制备:桑
椹样品可食用部分捣碎,称取 20 g 放入 200 mL 试
剂瓶中,加 50 mL乙腈,超声提取 30 min,将样品过
滤到含 10 g氯化钠的 100 mL三角瓶内,静置;待样
品分层后,取 10 mL上层有机相置于试管中,氮吹近
干,向其中加入 3 mL丙酮溶解样品。 用 5 mL 淋洗
液(丙酮 ∶正己烷 = 1 ∶ 9)预淋洗弗罗里硅土固相萃
取柱,再加入 5 mL 正己烷淋洗,加入样品溶液,用
15 mL 淋洗液分 3 次洗脱,收集洗脱液,氮吹至近
干,用色谱甲醇定容至 5 mL,过 0 2 μm 有机相滤
膜,上机待测。
标准曲线的制作及样品检测:将乐果标准品配
制成 0 01、0 1、0 5、1 0、2、5 和 10 mg / L 的标准系
列溶液,进行色谱测定,以峰面积为纵坐标,标准溶
液浓度为横坐标绘制标准曲线。
2 结果与分析
2 1 桑椹瘿蚊生活史及虫害症状
观察结果表明,桑椹瘿蚊在重庆地区 1 年仅有
1 个世代,3 月初桑椹瘿蚊开始羽化为成虫,不直接
取食桑椹,雌成虫可存活 3 ~ 4 d,雄成虫可存活 2 ~
3 d,雌雄成虫于下午 4 点至 6 点交配,交配后雌成
虫产卵于桑果中。 经 6 ~ 7 d,卵逐渐孵化为幼虫,经
6 ~ 10 d 老熟幼虫弹跳入土,在土中形成休眠体越
夏越冬,次年春季又转化为蛹,蛹羽化为成虫。 经生
活史世代观察,桑椹瘿蚊属于完全变态昆虫,整个生
活史为:卵→幼虫(休眠体)→蛹→成虫。 桑椹瘿蚊
在幼虫期为害桑椹,被害桑椹小果最初开始发红,后
局部变为畸形(干瘪)、早熟,桑椹果柄中心被虫食,
并有幼虫寄生于桑果中,被寄生的桑果发育形成的
桑籽不能发芽,最后导致早熟脱落。
2 2 桑椹瘿蚊不同发育阶段形态特征的观察
成虫:捕捉的 296 头成虫中雌虫 134 头,雄虫
162 头,雌雄比例为 0 83 ∶ 1。 成虫形状似蚊,一般
停留在桑椹或嫩芽上(图 1⁃a、b),体长 1 8 ~ 2 0
mm,胸背灰黑色,腹部橙色,全身密布细毛,头部小,
呈三角形,一对复眼(较大),无单眼,下颚须 4 节;
念珠状触角,雌雄异形,雌成虫触角 14 节(图 1⁃c),
每节呈圆柱状(图 1⁃d),中间微凹,近两端各着生一
圈辐射状刚毛,雄成虫触角 24 节(图 1⁃c),每节呈
球形(图 1⁃d),球形中部着生一圈放射状刚毛;前翅
橙色,膜质透明翅有 4 条纵脉(图 1⁃e),第 1 条是前
缘脉,第 2 条是径脉,直至翅边缘,第 3 条是中脉总
支,延伸至翅 1 / 3 处,第 4 条是肘脉,与中脉后支合
并为叉状,其中,中脉总支与径脉于端部相接,无横
脉;后翅退化为平衡棒(图 1⁃f);雌雄腹部各 9 节,雌
雄腹部形态有差异,雌成虫腹部肥大、尾尖,第 9 节
演化为含卵器(图 1⁃g),产卵时伸出,与腹部近等
长,雄成虫腹部瘦小,第 9 节演化为钳状交配器(图
1⁃g)。
卵:对 52 头雌成虫解剖并统计腹内卵数,平均
每个雌成虫含卵数为 46 个。 卵呈长椭圆形,具卵
柄,似蝌蚪状尾,长 0 2 ~ 0 26 mm,宽 0 06 ~ 0 09
mm,卵通体透明,略呈灰白色。
幼虫:幼虫具有 3 个龄期,1 龄幼虫白色透明
(图 2⁃a),0 3 ~ 0 5 mm,逐渐发育为黄色,2 龄幼虫
由黄色变为橙色(图 2⁃b),3 龄幼虫即老熟幼虫,橙
红色,体长 2 6 ~ 2 8 mm(图 2⁃c、g、h)。 幼虫有一呈
“Y”的胸骨片(图 2⁃d、e、f),此器官有助于幼虫弹
跳。 幼虫弹跳时,先蜷缩成“C”状,然后突然弹开,
其弹跳直径可达 12 cm。 幼虫在水中可存活 3 d
以上。
休眠体:幼虫老熟后弹跳入土,蜷缩成“C”状,
外包一层丝茧(图 3⁃a),形成休眠体,便于度过不良
环境。
蛹:离蛹或茧蛹,扁平椭圆形,一般雌性个体较
雄性个体大。 实验室人工饲养的幼虫(休眠体)于 2
月 25 日开始化蛹,为橙红色,头胸部颜色逐渐加深
变黑,经 3 ~ 5 d 发育为成熟蛹体,黑褐色,长约 2
603 植 物 保 护 学 报 42 卷
图 1 桑椹瘿蚊成虫及各部器官形态特征
Fig. 1 Morphological characteristics of Cotarina sp. adult
a: 桑椹瘿蚊(♀); b:雌雄成虫交配; c:触角(♂⁃24 节,♀⁃14 节); d:触角各节形态; e:前翅; f:平衡棒; g:腹部未
端。 a: Mulberry gall midge adult; b: the mating status of male and female; c: antenna (♂⁃24 knots, ♀⁃14 knots); d: character⁃
istic of each antennal knot; e: fore wing; f: poiser; g: abdominal apex.
图 2 桑椹瘿蚊幼虫形态特征
Fig. 2 Morphological characteristics of Cotarina sp. larvae
a: 1龄幼虫; b: 2 龄幼虫; c: 老熟幼虫; d: “Y”形
胸骨片(1龄幼虫); e: “Y”形胸骨片(2龄幼虫); f: “Y”
形胸骨片(老熟幼虫); g: 老熟幼虫(正面观); h: 老熟幼
虫(侧面观)。 a: First instar larvae; b: second instar lar⁃
vae; c: mature instar larvae; d: “Y”⁃like chest piece (first
instar larvae); e: “Y”⁃like chest piece (second instar lar⁃
vae); f: “Y”⁃like chest piece (mature larvae); g: mature
instar (anterior view); b mature instar (lateral view).
mm,1 对头前毛,前胸背部 1 对黑褐色呼吸管,较头
前毛粗,3 对细长的足从胸部伸到腹部中央。 蛹腹
部末端与成虫形态类似,雌蛹呈圆锥形,雄蛹有 2 个
钩状突起(图 3⁃b)。 3 月 5 日黑褐色老熟蛹开始
图 3 桑椹瘿蚊休眠体及蛹形态特征
Fig. 3 Morphological characteristics of Cotarina sp.
hypopus midge and pupae
a: 休眠体; b: 一对蛹 (♂ & ♀)。 a: Hypopus
midge; b: a pair of pupae.
羽化。
2 3 乐果防治效果及其残留量分析
2 3 1 防治效果
对照组虫害率高,平均虫害率为 83 3% ;而处
理组桑树平均虫害率近 15% ,表明乐果防治效果明
显;对照组每粒桑果平均虫口数为 28 头,处理组虫
口数为 3 头,比对照组的被害桑椹虫口密度下降了
89 29% ,说明乐果能有效防控桑椹瘿蚊的为害。
2 3 2 残留量分析
绘得标准曲线,该标准曲线的方程为: y =
10 930 5705x - 2 841 1169,R2 = 0 9965,乐果标准
品浓度在 0 1 ~ 10 mg / L之间,其含量与峰面积有良
好的线性关系,乐果标准品气相色谱保留时间为
4 225 min,测定样品气相色谱出峰时间为 4 237
7033 期 裴汭超等: 桑椹瘿蚊生物学特性及其化学防控
图 4 试验组成熟桑椹样品中的乐果残留量
Fig. 4 Measurement of the content of residual dimethoate
in the treated mature mulberry fruits
min(图 4),标准品和样品中有效成分与杂质间分离
良好,满足分析要求。 乐果回收率分别为 81 72% 、
85 46%和 84 16% ,平均回收率为 83 78% ,测定结
果显示,4 月 11 日采集的桑椹样品乐果残留量仅为
0 75 mg / kg。
3 讨论
桑椹瘿蚊生物学特性及生活史的探索作为一项
基础研究,不仅能丰富理论知识,同时也可为桑农识
别、鉴定桑椹瘿蚊虫害提供理论依据,并及时准确地
进行防治。 关于桑椹瘿蚊的生物学特性,韩明斋等
(1994)及焦峰等(1997)报道与本研究结果有几点
区别:第一,桑椹瘿蚊成虫触角 14 节,未明确雌雄成
虫触角节数是否相同,而本试验发现,桑椹瘿蚊雌雄
成虫触角不同,雌成虫触角 14 节,雄成虫触角 24
节;第二,本试验发现,雄成虫触角每节呈球形,而不
是哑铃形;雌成虫呈圆柱形,中间微凹,近两端具 2
圈发射状刚毛,这与其报道一致;第三,其报道膜状
透明翅具 4 条纵脉,无横脉,这与本试验结果一致,
但本试验观察前缘脉与径脉端部并未相接,而是径
脉与中脉端部相接,这一结果与其报道不同;第四,
其报道中描述幼虫“Y”形胸骨片呈直角,而本试验
观察“Y”胸骨片在幼虫 2 龄阶段(体色为黄色)呈锐
角而非直角,随后发育到橙色时,胸骨片角度逐渐张
大,近直角。
根据本课题组近年在西南大学种质资源苗圃对
桑椹瘿蚊的观察,其在重庆地区 1 年仅有 1 个世代,
为完全变态发育,整个生活史为卵→幼虫(休眠体)
→蛹→成虫,其中休眠体作为度过不良环境的载体,
是老熟幼虫到蛹的过渡形式,属于桑椹瘿蚊幼虫期
的特殊形态,不作为生活史中的一个独立时期。
在桑椹瘿蚊防控中,本试验只选择了乐果 1 种
农药,一是因为桑椹瘿蚊幼虫为咀嚼式口器,寄生于
桑果中,而乐果是毒性较低的有机磷杀虫剂,具有内
吸、触杀作用,对刺吸式口器害虫及部分咀嚼式口器
害虫均有良好防治效果(郭玉人,2006);二是因为
果桑除了产果外,还产叶养蚕,而纯乐果对家蚕无毒
害,家蚕的蝇蛆病主要使用“灭蚕蝇”农药防治,而
“灭蚕蝇”的主要成分即为乐果(仝德侠等,2011)。
王建新等(1987)首次采用 8%氧化乐果颗粒剂拌土
对瘿蚊的蛹、老熟幼虫和休眠体分别进行了防控试
验,其中试验组的蛹存活率为 41 67% ,防控效果最
显著,休眠体和幼虫的存活率分别为 91 30% 和
57 14% 。 因此,本试验使用乐果乳剂稀释液喷洒桑
椹法进行防控,大十果桑品种经 40%乐果乳剂1 000
倍稀释液于 3 月中旬喷洒青椹后,桑椹虫害率由
83 3%下降至 15% ,被害桑椹虫口密度下降了
89 29% ,防治效果良好,且与农药拌土法(王建新
等,1987;郑明儿等,1994)相比,可以直接将幼虫期
瘿蚊存活率控制到较低水平,使其不能转化为休眠
体和蛹,防控作用更显著。 成熟桑椹中乐果的残留
量测定表明,乐果残留量仅为 0 75 mg / kg,按照联
合国粮油组织规定,乐果在水果中的最高残留量为
1 mg / kg、国家标准(GB2763—2014)为 1 ~ 2 mg / kg,
因此本试验的农药残留量低于国际标准和国家标
准。 根据化学防控效果与农药残留量分析,在桑椹
瘿蚊的化学防控上,选择 40%乐果乳剂 1 000 倍稀
释液的浓度是可行的。
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(责任编辑:高 峰)
9033 期 裴汭超等: 桑椹瘿蚊生物学特性及其化学防控