全 文 ：收稿日期：!""#$"%$"% 接受日期：!""#$&"$!!
基金项目：农业部“%’#”项目（!""()*&）；国家“#+,”项目（!""+--&"*’&(）资助。
作者简介：张燕春（&%(#—），女，陕西西安人，硕士研究生，主要从事生物固氮与微生物肥料研究。
! 通讯作者 ./0："&"$#!&"#("&，1)2340：56789:;337< 3;< ;9
固氮芽孢杆菌 !"#$#的筛选鉴定及其固氮性能研究
张燕春，孙建光!，徐 晶，胡海燕
（农业部作物营养与施肥重点实验室；中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 北京 &"""#&）
摘要：对所选育出的一株固氮芽孢杆菌（编号为 =>!(!）进行了形态、生理生化测定和接种效果研究。通过 &+?
@>A-基因比对以及生理生化鉴定表明，该菌株属于芽孢杆菌 !"#$%%&’ 7B<。乙炔还原法测定显示该菌株具有较高的
固氮酶活性；小白菜盆栽试验看出，接种 =>!(!菌达到了施用化学氮肥的同等效果。菌株 =>!(!在固氮微生物肥
料生产中具有较好的开发应用前景。
关键词：生物固氮；芽孢杆菌；菌种选育；微生物肥料
中图分类号：C%,%D&&E , 文献标识码：- 文章编号：&""#$F"FG（!""%）"F$&&%+$"+
!"#$%&’#( %() ’)*(&’+’,%&’#( %() *-%$.%&’#( #+ (’&/#0*(1+’2’(0 3%,’$$." "&/%’( 45!(!
*H-A= I39);J89，?KA L439)68396!，GK L496，HK H34)M39
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7*8 9#/)"：O4N0N64;30 94P@N6/9 R4U3P4N9；O3;40087；7P@349 O@//Q496；24;@NO430 R/@P404S/@
选用高效固氮微生物菌种工厂化生产制成菌
剂，或进一步与其他富含植物营养的物料复合加工
成生物制品，用于农业生产可提供作物氮素营养，改
善作物根际生态环境，提高土壤肥力性状，这就是通
常所说的固氮微生物菌剂或固氮微生物肥料。菌种
是微生物肥料生产的技术核心，因此，菌种选育及其
生物学特性研究是一项支撑微生物肥料行业发展的
重要应用性基础工作。
与不产生芽孢的固氮菌类相比，芽孢菌具有耐
干燥、抗逆性强、货架期长等优点。目前发现的具有
生物固氮能力的微生物都是原核生物，多为细菌，有
&""多个属，占到细菌系统发育分支的一半以上［&］，
但能够产生芽孢的固氮微生物种类相对很少。本项
工作的目的是选育高效固氮的芽孢杆菌，并探讨菌
种的生物学特性和接种效果。
: 材料与方法
:;: 菌株
供试菌株为选育出的一株固氮芽孢杆菌，编号
为 =>!(!；阳性对照菌株为圆褐固氮菌（ /:-*-4"#*1+
#?+--#-##&@）源 于 前 苏 联，本 实 验 室（编 号：
-[[[&&&",）保藏，是微生物肥料常用的生产菌种。
:;< 固氮芽孢菌的分离与纯化
&D!D& 固氮菌富集培养 原始土样采自河北省高
碑店西红柿根际。取 &" 6土样放入 %" 2\无菌水中
摇床振荡 !" 249制成混浊液，吸取 F 2\放入 ," 2植物营养与肥料学报 !""%，&F（F）：&&%+$&!"&
""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""
]039P A8P@4P4N9 39Q ^/@P404S/@ ?;4/9;/
!"""## 固氮菌富集培养液（成份为蔗糖 $% &、
’()*+,·-)(+ %.# &、/0"1 %.( &、"0"+- $ &、2&3+,·
4)(+ %.( &、蒸馏水 $%%% 56、7) 4.%!4.(）［(］中，$%%
8 9 5:;，(<=进行摇床振荡培养，4( > 后换新鲜培养
液继续培养。重复培养 - 次后进行固氮芽孢菌分
离。
$.(.( 固氮芽孢菌的分离纯化 吸取 $ 56上述固
氮菌富集培养物放到 ? 56无菌水中制成稀释度为
$% @ $、$% @ (、$% @ -、$% @ ,、$%@ #的菌悬液，$%%=水浴加
热 $% 5:;，冷却后每个稀释度取 %.$ 56 涂布在固氮
菌分离培养基（成份为 !"""## 无氮液体培养基加
入 $.#A!(.%A水洗琼脂）平板上，(?=静置培养。
(!- B待菌落形成后，在改良的 !"""##固氮菌培
养基平板上（成份为蔗糖 $%&、’()*+,·-)(+ %.# &、
/0"1 %.( &、"0"+- $ &、2&3+,·4)(+ %.( &、酵母膏
%.#&、蒸馏水 $%%% 56、琼脂 $.#A! (.%A，7) 4.%
!4.(）用平板划线法进行菌种纯化。
!"# 菌株固氮酶活性测定与实验室盆栽选育
$.-.$ 固氮酶活性测定 根据许齐放的方法［-］，略
有改动。在 $# 55 C $#% 55 螺口玻璃管中加入 #
56改良固氮培养基制成斜面，接种上述固氮芽孢菌
分离物，(<=培养。以圆褐固氮菌为阳性对照，不接
种空白斜面为阴性对照，-个重复。培养 4( >后，换
橡胶塞，注入乙炔气体使终浓度为 $%A，用医用胶
布密封，继续培养 4( >，取 $%%!6反应气体，用气相
色谱仪测定乙烯生成量，按下式计算：
固氮酶活性［;5D1 9（5&·>）］E "(),（;5D1）9［菌
体蛋白量（5&）C反应时间（>）］，
其中 "(),（;5D1）E "(), 体积（!6）C (4- C * 9［((.,
C（(4- F G）C 4H%］［,］，*为气压（55汞柱），G为反应
温度（=）。
$.-.( 菌体蛋白含量测定 用 # 56生理盐水将试
管斜面上的菌苔洗入离心管中，收集菌体，向沉淀中
加入 - 56 %.# 5D1 9 6的 /0+)沸水煮沸 # 5:;，加入 -
56 %.# 5D1 9 6的 )"1混合，离心后取上清 $.% 56，加
入 # 56考马斯亮蓝溶液，在漩涡混合器上混合，显
色 - 5:;，测定 #?#;5处的吸光值 !#?#，根据牛血清
白蛋白标准曲线计算菌体蛋白含量。
$.-.- 高效固氮菌株的实验室盆栽选育 用口径
$% I5，高 < I5的塑料盆装土 (#% &，种植小白菜，接
种上述高固氮酶活性的固氮菌分离物，在智能光照
培养箱内进行培养，选育高效固氮芽孢菌。
数据分析采用 3*33统计分析软件完成。
!"$ 菌株形态、生理生化测定及 !%& ’()*基因序
列分析
$.,.$ 形态学分析 在固氮菌分离培养基上接种
上述固氮菌分离物，(?=培养 ,，观察记录菌
落形状、大小、颜色、边缘、表面光滑程度等。在光学
显微镜下观察记录菌体细胞特征，包括细胞形状、大
小、两端形状、是否有荚膜、芽孢位置、细胞的排列方
式等。
$.,.( 生理生化测定 主要参考《常见细菌系统鉴
定手册》［#］和《微生物学实验》［H］，略有改动。
$.,.- $H3 8J/!基因测序与系统学分析 *"K模
板制备：在 $.# 56 L77M;BD8N管中加 (%%!6无菌水，
加入单菌落一环和少量 %.# 55玻璃珠，震荡 - 5:;，
沸水浴中煮 $% 5:;，冰浴冷却，$$%%% 8 9 5:; 离心 -%
O，取上清液作为 *"K模板。引物：采用通用引物，
正向引物 (4N：#’P!Q!QRRRQ!R ""RQQ"R"!QP-’，
反向引物 $,?(8：#’PR!"QQR R!""RRQRR!"Q!"RRP
-’（上海生物工程有限公司合成）。扩增反应体系：
采用上海生物工程有限公司的 *"K扩增试剂盒，(
C 20OGM8 (#!6，引物（(%!5D1 9 6）(!6，模板 -!6，用
水补足到 #%!6。反应程序：?#= 预变性 # 5:;，然
后 ?#=变性 -%O、##=退火 $ 5:;、4(=延伸 ( 5:;，共
-%个循环，最后 4(=再延伸 $% 5:;，,=保存。用含
%.#!& 9 56溴化乙锭 $A琼脂糖凝胶电泳检测 *"K
产物。J/!序列测定和分析比对：测序由北京三博
远志生物技术有限责任公司完成；序列的拼接及相
似性分析使用 J/!3G08软件完成；基因比对采用美
国国家生物技术信息中心 /"ST数据库 S6!3R在线
完成（>GG7：9 9 UUUV ;IW: V ;15V ;:> V &DX）。
!"+ 选育菌株的接种效应试验
盆栽试验选用中国农科院试验地菜园土，全氮
%.<< & 9 Y&，有效磷 $%.H 5& 9 Y&，速效钾 $$$.# 5& 9 Y&。
过 ( 55筛，$($= 间歇灭菌 -次，每次 $ >，放置 $周
后备用。
供试作物为小白菜。选取大小一致的种子用
?#A酒精浸 # 5:;，倒去酒精用 -A /0"1+溶液表面
灭菌 ( 5:;，倒去次氯酸钠用无菌水洗 H次。在育苗
钵中装入上述灭菌土壤，浇透水每钵播种 -粒种子，
在智能光照培养箱中育苗，待真叶长到两叶一心时
进行移栽。移栽盆选用直径 $- I5，高 $( I5的塑料
盆，每盆装土约 4%% &，每盆移栽苗 $株，在温室中进
行培养。
试验设：$）无氮对照处理（"’$）；(）氮肥处理
（"’(）；-）选育菌种接种处理（QJ(4(）；,）参比菌圆
褐固氮菌 !"""$$$%- 对照处理（!"""$$$%-），每个
4?$$#期 张燕春，等：固氮芽孢杆菌 QJ(4(的筛选鉴定及其固氮性能研究
处理重复 !盆，每盆种小白菜 "株，完全随机排列。
小白菜移栽 # $后进行处理，方法为："）无氮对照处
理 %&"，每盆浇 ’( )* +,-.,/01 无氮植物营养液［2］
（成份：3,#4562·"#4#6 (7"’ 8，98:62·;4#6 (7"# 8，
柠檬酸铁 (7((’ 8，%,%<#·#4#6 (7" 8，&4#562 (7" 8，
=>?1@A微量元素 " )*，4#6 "((( )*，B4 C7’!;7(。
=>?1@A 微量元素液成分：4!D6! #7EC 8，FA:62·;4#6
(7## 8，%0:62·’4#6 (7(E 8，9A:62·24#6 #7(! 8，
3,#9@62·#4#6 "7#C 8，4#6 "((( )*）；#）氮肥处理
%&#每盆浇 ’( )*有氮全营养液（成份 在 "((( )*
+,-.,/01无氮植物营养液中加入 (7"# 8尿素）；!）选
育菌种接种处理 =G#;#，培养收集 =G#;# 菌体，用
+,-.,/01无氮植物营养液洗涤菌体，稀释到 6GC((
"7’，每盆浇 ’( )*；2）参比菌圆褐固氮菌对照处理
H%%%"""(!，培养收集 H%%%"""(! 菌体，用 +,-.,/01
无氮植物营养液洗涤菌体，稀释到 6GC(( "7’，每盆浇
’( )*。小白菜生长期间管理按照常规方法进行，!(
$后收获进行分析测试。
测定项目包括植株长势、生物量等。植株总含
氮量按常规法［;］采用 &GIJKE#(型凯氏定氮仪进行
测定；根际土壤全氮、有效磷、速效钾由国家化肥检
测中心完成。
数据分析采用 :5::统计分析软件完成。
!"# 接种固氮菌对根际细菌多样性影响的探讨
"7C7" 土壤总 G3H提取 土壤样品取自盆栽试验
的小白菜根际，每个重复取约 "(( 8，混匀后进行测
试。参照 9><=G#;#与不接种共 #个处理），加入 (7’ 8 (7’ ))的
玻璃珠，! )*磷酸盐缓冲液（"(( ))@< L * 3,4#562，
B4 E7(），!)* :G: 缓冲液（"(( ))@< L * 3,%<，’((
))@< L * M.>1N4%<，"(O :G:）和 ! )* 氯仿。在混合
振荡器上振荡 # )>A，C’P温育 "( )>A，冰浴 "( )>A；
重复 "次。""((( . L )>A离心 "( )>A，转移上清液于
新的离心管中，加入等体积氯仿 L异戊醇（#2 Q "），缓
慢颠倒混匀，""((( . L )>A离心 "( )>A，小心转移上清
液至新的离心管中，加入 (7C倍体积预冷异丙醇，混
匀，室温沉淀 G3H " -。""((( . L )>A 离心 "( )>A，弃
去上清，用 ;(O酒精洗涤，风干，溶于 " )* MR缓冲
液中，于 J #(P保存。
"7C7# "C: .G3H S! 区扩增 采用通用引物，正向
!2"T： ’ ’N%=%%%=%%=%=%=%==%===%====%===
==%H%======%%MH%===H=%H==%H=N!’，反 向
’!2 .：’’NHMMH%%=%==%M= %M==N!’（由上海生物工
程有限公司合成）。5%U反应体系："( V 5%U ?0TT/.
’!*，$3M5 )>W（#7’ ))@< L * /,X-）2!*，5.>)/."（"(
!)@< L *）’!*，5.>)/.#（"(!)@< L *）’!*，#’ ))@< L *
98%<# !!*，M,Y酶 #7’Z，G3H模板 #!*，用水补足 ’(
!*。反应程序：K2P预变性 ’ )>A，然后 K2P " )>A、
C’P " )>A、;#P ! )>A，每个循环降低 (7’P，#(个循
环，K2P ")>A、’’P " )>A、;#P ! )>A "’个循环，最
后 ;#P再延伸 ; )>A，2P保存。用含溴化乙锭的
"7’O琼脂糖凝胶电泳检测 5%U产物。
"7C7! 变性梯度凝胶电泳（G==R）分析 采用美
国 D>@NU,$公司的 GX@$/M9 突变检测系统对 5%U产
物进行 G==R 分析。步骤为：制备变性剂浓度为
!(O!C(O的 EO聚丙烯酰胺凝胶，待胶完全凝固后
将胶板放入装有 (7’ V MHR缓冲液的电泳装置中，
每个样孔加入 #(!* 5%U产物，#((S、C(P恒温电泳
’ -，采用银染方法［K］进行凝胶染色。
$ 结果与讨论
$"! 高效固氮芽孢菌筛选
经过富集培养、固氮芽孢菌的分离纯化、固氮酶
活性测定和实验室盆栽试验，筛选到了 "株固氮酶
活性较高、接种小白菜效果较好的固氮芽孢菌，菌株
编号为 =G#;#。该菌株的固氮酶活性为 ""7EC %#42
A)@< L（)8·-），B.@[/>A，显著高于目前微生物肥料生产
中使用的圆褐固氮菌 H%%%"""(! 的固氮酶活性
"7C! %#42 A)@< L（)8·-），B.@[/>A（图 "）。小白菜接种
试验也显示 =G#;# 明显优于 H%%%"""(! 和其他新
筛选的固氮芽孢菌。
图 ! 固氮芽孢杆菌 %&$’$的固氮酶活性
()*+! ,)-./*01230 24-)5)-6 /7 ,87)9)1* :24);;<3 %&$’$
$"$ 菌株 %&$’$ 的形态特征、生理生化特性与系
统发育
#7#7" 形态及生理生化特征 菌株 =G#;# 在无氮
EK"" 植 物 营 养 与 肥 料 学 报 "’卷
培养基平板上形成圆形、不透明、脐状凸起菌落，易
挑起，表面光滑湿润有光泽，边缘整齐。菌体细杆
状，大小为 !"#$!% & ’"$!("$!%，芽孢偏端生，芽
孢囊膨大，革兰氏染色阳性。其生理生化特性见表
)。
’"’"’ 系统发育研究 *+’#’菌的 ),- .+/0基因
电泳图谱如图 ’ 所示，基因片段大小约 )"$ 12。经
+/0测序、/345 数据库在线基因比对和系统学分
析，结果显示，*+’#’与 !"#$%%&’ ()*+,)-,."*’ 的同源
性达到 667。采用固氮微生物肥料常用菌种和
/345数据库基因比对高同源菌株作为参比菌进行
的系统学分析也表明，*+’#’ 与芽孢杆菌属亲缘关
系较近，与根瘤菌、固氮菌和固氮螺菌亲缘关系较远
（图 (）。根据 *+’#’ 菌的形态特征、生理生化特性
测定结果，以及 ),- .+/0 基因比对结果，参照
《48.98:’; <=>?=@ AB -:;C8%=CDE 4=EC8.DA@A9:》［)!］和《常
见细菌系统鉴定手册》［$］，新分离筛选到的高效固氮
芽孢菌 *+’#’初步鉴定为芽孢杆菌 !"#$%%&’ ;FG。
!"# $%!&!菌的接种效果
接种 *+’#’菌小白菜长势明显比无氮对照 3H)
植株高，叶片大，茎叶色泽浓绿健壮；与化学氮肥对
照处理 3H’ 和圆褐固氮菌 0333)))!( 处理相当。
说明 *+’#’菌接种小白菜后，通过生物固氮作用为
小白菜生长提供了较充足的氮素营养。
表 ’ 固氮芽孢菌 $%!&!的生理生化特征
()*+, ’ -./012+2314)+ )56 4.,714)+ 4.)8)49,8109140 2: 098)15 $%!&!
生化特征
4DAEI8%DE=@ EI=.=EC8.;
生理特征 JI:;DA@A9DE=@ EI=.=EC8.;
糖醇类发酵产酸
-?9=. B8.%8>C=CDA>
生长温度
*.AKCI C8%F8.=C?.8
耐盐性
-=@C CA@8.=>E8
接触酶反应
3=C=@=;8 .8=ECDA> L
+ L葡萄糖
+L 9@?EA;8 L MN L ’7 L
氧化酶反应
OPDQ=;8 .8=ECDA> R
+ L蔗糖
+L ;?E.A;8 L ’SN L $7 L
TJ反应
TJ C8;C L
+ L乳糖
+L @=ECA;8 R (#N L #7 L
吲哚实验
5QA@ C8;C R
+ L半乳糖
+L 9=@=ECA;8 R ,!N R )!7 R
明胶液化
*8@=?>8 @DU?8B=ECDA> R
+ L核糖
+L .D2A;8 R
淀粉水解
;C=.EI I:Q.A@DV=CDA> R
W L阿拉伯糖
W L =.=2D>A;8 R
卵磷脂酶
W8EDCID>=;8 C8;C R
+ L果糖
+L B.?ECA;8 L
硝酸盐还原
/DC.=C8 .8Q?ECDA> C8;C R
+ L甘露醇
+L %=>>DCA@ L
甲基红
<8CI:@ .8Q C8;C L
+ L山梨醇
+L ;A.2DCA@ R
石蕊牛奶反应
WDC%?; %D@1 R
+ L麦芽糖
+L %=@CA;8 L
柠檬酸盐利用
3DC.=C8 C8;C R
+ L纤维二糖
+L E8@@A2DA;8 L
苯丙氨酸脱氨酶
JI8>:@=@=>D>8 Q8=%D>=;8 C8;C R
甘油
*@:E8.A@ R
产二羟基丙酮
+DI:Q.AP:=E8CA>8 C8;C L
葡萄糖产气
*=; F.AQ?ECDA> A> 9@?EA;8 R
FX $"#生长测定
*.AKCI =C FX$"# L
!"!!)7溶菌酶
W:;AV:%8 C8;C R
“ L”表示阳性 JA;DCDY8；“ R”表示阴性 /89=CDY8
66))$期 张燕春，等：固氮芽孢杆菌 *+’#’的筛选鉴定及其固氮性能研究
图 ! "#!$!菌 %&’ (#)*基因电泳图
+,-.! /0123(4564(17,7 48 "#!$! %&’ (#)*
［!—"#$ %&’()’；*+—#),&-./) 012-’13；4—5"676］
图 9 固氮芽孢菌 "#!$!的系统学分析
+,-.9 :6;04-1<13,2 3(11 48 <,3(4-1<=8,>,<- ?@2,00A7 "#!$!
植株生物产量和全氮含量（表 6）进一步看出，
接种 5"676处理比无氮对照 *+4均有提高，植株鲜
重和干重增产率达到 4789，全氮含量增加 4489，
达到了显著水平。与施用化肥和接种圆褐固氮菌处
理相比，接种 5"676处理植株生物产量和全氮含量
无统计学差异。
表 ! 小白菜植株鲜重、干重和全氮含量
B@?01 ! +(176 C1,-63，D(; C1,-63 @处理 :’)&-%)2-
鲜重 ;’)<= >).,=- 干重 "’? >).,=- 含氮量 # 012-)2-
（, @ A1-） （9） （, @ A1-） （9） （, @ A1-） （9）
无氮对照 *+4 BCD4 $ 488 8CB6 & 488 8CEB & 488
化学氮肥对照 *+6 48CF8 G 6HH 8C7F I 6B4 BCJ7 I BHF
圆褐固氮菌 $***4448B 48C78 G 6ED 4C8F I B6J BCJ7 I BHJ
固氮芽孢菌 5"676 ECH8 G 674 8CHD I 6DE 6CHH I B48
注（#1-)）：同列数值后不同大、小写字母分别表示差异达到 49和 J9显著水平 K&3L)< M1331>)N I? N.MM)’)2- 0&A.-&3 &2N <%&33 3)--)’< .2 -=) <&%)
013L%2 &’) <.,2.M.0&2- &- 49 &2N J9 3)/)3<，’)!FG 接种固氮菌使根际细菌多样性增加
根际细菌 4DP ’"#$ KB区 Q*R扩增产物 "55S
分析表明，接种固氮芽孢菌 5"676使小白菜根际细
菌的生物多样性发生了显著变化。图 F看出，不接
种的 *+4处理在图谱中只有较明显的 B条 "#$谱
带，而接种固氮芽孢菌 5"676处理有 H条较明显的
谱带。说明接种固氮芽孢菌 5"676 使根际土壤细
菌多样性显著增加。
我国固氮微生物肥料生产中允许使用的菌种主
要有共生固氮类微生物，自生及联合固氮菌类微生
物如圆褐固氮菌 !"#$#%&’$() ’*)##’#’’+,、巴西固氮螺
菌 !"#-./)/00+, %)&-/0(1-(、拜氏固氮菌 !"#$#%&’$() %(/2
34()/1’5//、生脂固氮螺菌 !"#-./)/00+, 0/.#6()+,、雀稗固
氮菌 !"#$#%&’$() .&-.&0/、棕色固氮菌 !"#$#%&’$()
7/1(0&18//、印度贝氏固氮菌 9(/3()/1’5/& /18/’& 等［44］。
图 G 接种 "#!$!处理样品的 #""/图谱
+,-.G #""/ 5(48,01 @831( ,<42A0@3,<- "#!$!
产芽孢是某些微生物的特性，由特殊的基因决定，这
些微生物具有很强的抵御冷、热、干旱、盐碱、寡营养
等不良环境的能力。在自然界众多固氮微生物中，
同时具备产芽孢特性的并不多。目前已知的具有固
氮能力的芽孢杆菌多数分布在类芽孢杆菌属
（ :&(1/%&’/00+-），如 早 年 发 现 的 有 :&(1/%&’/00+-
8864 植 物 营 养 与 肥 料 学 报 4J卷
!"#$%$&’、( ) %’*+,’-. 和 ( ) ’/"0"12&’-.［!"#!$］；近年
来又陆续发现了 ( ) !+",2’+、( ) 3,’%2-2.、( ) "4",5
21+,、( ) 6,’.2#+-.2.、( ) /’-07"&$#2 和 ( ) 1",.$072’+［!%#!&］
也有固氮能力。在芽孢杆菌属（8’*2##9.）也发现了
一些固氮菌，如陈三凤等［"’］在巨大芽孢杆菌 8 )
%+3’0+,29%、蜡样芽孢杆菌 8 ) *+,+9. 和 8 ) %’,2.1#’:2
检测到了固氮微生物特有的 -21; 基因；并且发现巨
大芽孢杆菌 8 ) %+3’0+,29% 可以在水稻和玉米的根
际和植株体内大量定殖［"!］。
! 结论
固氮微生物肥料具有生产成本低，环境友好，减
少氮素化肥用量，培肥地力等优点，是化学肥料的一
个重要补充，在农业生产中具有实用性和可行性。
本研究选育到 !株固氮酶活性较高的固氮芽孢
菌（编号：()"*"），初步鉴定为芽孢杆菌 8’*2##9.
+,-。()"*"菌株能够在 $.生长，耐盐达到 */；小
白菜接种 ()"*" 菌株与无氮对照相比植株干重增
加 !0&/，全氮含量增加 "!’/，差异显著。接种效
果与施用化学氮肥和接种圆褐固氮菌 1222!!!’3
相同，具有较好的生产应用前景。
接种固氮芽孢菌使盆栽小白菜根际土壤细菌种
类和数量显著增加，丰富了根际微生物类群，促进了
作物生长，值得进一步研究探讨。
参 考 文 献：
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