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,2016,36(6):1206-1215
犃犮狋犪犅狅狋.犅狅狉犲犪犾.犗犮犮犻犱犲狀狋.犛犻狀.
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FANShi1,2,ZUOJiapu1,RAOLiqun2
(1LandscapeDepartment,HunanPolytechnicofEnvironmentandBiology,Hengyang,Hunan421005,China;2ColegeofBio
logicalScienceandTechnology,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:TheHPLCfingerprintof犘犺狔犾犾犪狀狋犺狌狊狌狉犻狀犪狉犻犪fromdifferenthabitats,differentharvesttimes,
differentpartswasdeterminedandcomparedbyRPHPLC.Thecomparativestudywasdonewiththe
HPLCfingerprintofYexiazhuCapsulesalso.TherepresentativeHPLCfingerprintof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪wases
tablished.Theresultsshowed:(1)Therewere18mutualpeaks,fourofwhichwereidentifiedbyrefer
encesubstance.Thesimilarityof11samplesfromdifferenthabitatswasintherangeof0.89to0.99.(2)
Thesimilarityof7samplesfromdifferentharvesttimeswasgreaterthan0.94.Thepeakareaofmostmu
tualpeaksincreasedwithgrowthperiod,thehighestwasin5October.Itwassuggestedthebestharvest
timewasonearlyOctoberannualy.(3)Thesimilarityofsamplesfromdifferentpartswasanalyzedande
valuated.Thesimilarityofleafandfruitwashigherintherangeof0.98to0.99,andthesimilarityofroot
andstemwasintherangeof0.86to0.87.Lowercontentofcomponentsinrootandstembroughtabout
thedifferenceinsimilarity.Itwassuggestedonlycolectingtheaerialparts.(4)Thechemicalconstituents
ofYexiazhuCapsuleswerenearlyconsistentwiththatofreferenceherbof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪,butthepeakarea
ofsomepeaksvariedverymuchbecauseofprocessingofYexiazhuCapsules.So,thismethodissimple,
accurate,andreproducible,whichcanbeusedforthequalitycontrolandevaluationof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪andits
Chineseproprietarymedicines.
犓犲狔狑狅狉犱狊:犘犺狔犾犾犪狀狋犺狌狊狌狉犻狀犪狉犻犪L.;highperformanceliquidchromatography;fingerprint
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Q1 45678RSTUQ
Table1 Sampleinformationtableof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.
WX
Samplenumber
Habitatareaofsamples
1 "YZ Wuchang,Hubei
2 [\]Zhongshan,Guangdong
3 ^_`a Hangzhou,Zhejiang
4
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ControlMedicinalHerbs
(ChinaInstituteofPharmaceuticalandBiological
Products)
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6 e(fa Danzhou,Hainan
7 _!ghJian,Jiangxi
8 i(jÄ Kunming,Yunnan
9 (k2Shaoyang,Hunan
10 [\l_Zhanjiang,Guangdong
11 (maChenzhou,Hunan
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20060102B08、20051001B06、20050904B04、20050902B20、
20050601B12、20050502B23、20050403B02、20050203B21、
20050102B08。
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45minÓ13%ª´21%,45~55minÓ21%ª´
31%,55~65minÓ31%ª´50%;¬35℃;¦
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C.Mixtureofreferencesubstances;S.犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.;2.Galicacid;3.Protocatechuic;6.Caffeicacid;8.Corilagin
Fig.1 HPLCfingerprintofmixtureofreferencesubstancesandrepresentativeHPLCfingerprintof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.
Q2 11
45678|}~i
Table2 Resultsofrelativeretentiontimeofmutualpeakof11samples
X
Peaknumber
WXSamplenumber
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
¥¦
Average
1 0.123 0.124 0.123 0.123 0.124 0.124 0.123 0.123 0.124 0.123 0.123 0.123
2 0.319 0.317 0.316 0.316 0.317 0.317 0.318 0.315 0.317 0.316 0.318 0.317
3 0.447 0.444 0.445 0.445 0.445 0.445 0.445 0.445 0.445 0.446 0.445 0.445
4 0.563 0.561 0.562 0.561 0.562 0.562 0.561 0.561 0.562 0.562 0.561 0.562
5 0.652 0.650 0.651 0.652 0.647 0.654 0.653 0.649 0.649 0.652 0.648 0.651
6 0.824 0.830 0.824 0.824 0.821 0.827 0.824 0.829 0.832 0.823 0.838 0.827
7 0.983 0.981 0.984 0.981 0.981 0.982 0.984 0.980 0.982 0.982 0.981 0.982
8(S) 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
9 1.151 1.148 1.149 1.148 1.150 1.150 1.148 1.147 1.149 1.153 1.148 1.149
10 1.294 1.298 1.290 1.291 1.292 1.292 1.293 1.293 1.295 1.291 1.295 1.293
11 1.418 1.408 1.415 1.409 1.409 1.411 1.408 1.421 1.413 1.407 1.412 1.412
12 1.432 1.426 1.426 1.427 1.428 1.436 1.427 1.426 1.428 1.422 1.433 1.428
13 1.485 1.473 1.473 1.472 1.476 1.476 1.475 1.473 1.478 1.476 1.472 1.475
14 1.515 1.509 1.509 1.513 1.515 1.505 1.506 1.511 1.514 1.524 1.506 1.512
15 1.582 1.570 1.573 1.573 1.576 1.582 1.578 1.580 1.573 1.581 1.572 1.576
16 1.619 1.628 1.618 1.618 1.622 1.622 1.615 1.625 1.622 1.611 1.624 1.620
17 1.641 1.633 1.647 1.638 1.635 1.638 1.647 1.633 1.643 1.634 1.645 1.639
18 1.681 1.672 1.681 1.680 1.677 1.673 1.679 1.687 1.684 1.683 1.686 1.680
90216w 8 9,*:nopqr HPLCz{|kFGH
Q3 11
456789:;<|}~i~
Table3 Resultsofrelativeareaofmutualpeakof11samples
X
Peaknumber
WXSamplenumber
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
¥¦
Average
1 0.157 0.156 0.170 0.157 0.157 0.157 0.158 0.165 0.157 0.156 0.155 0.159
2 0.263 0.267 0.263 0.263 0.265 0.265 0.263 0.263 0.264 0.264 0.262 0.264
3 0.247 0.247 0.251 0.250 0.244 0.246 0.248 0.244 0.246 0.248 0.245 0.247
4 0.127 0.124 0.125 0.120 0.121 0.122 0.123 0.122 0.124 0.123 0.125 0.123
5 0.102 0.107 0.103 0.109 0.103 0.105 0.107 0.104 0.103 0.106 0.103 0.105
6 1.042 1.036 1.031 1.039 1.046 1.037 1.049 1.035 1.029 1.058 1.057 1.042
7 0.616 0.604 0.617 0.611 0.614 0.603 0.615 0.614 0.621 0.615 0.611 0.613
8(S) 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
9 5.824 5.716 5.786 5.711 6.212 5.921 5.725 5.824 6.023 5.732 5.882 5.847
10 0.465 0.483 0.461 0.463 0.468 0.471 0.463 0.466 0.465 0.463 0.462 0.466
11 0.365 0.367 0.371 0.375 0.370 0.375 0.367 0.373 0.373 0.373 0.367 0.371
12 0.235 0.234 0.238 0.235 0.234 0.241 0.234 0.235 0.238 0.235 0.232 0.236
13 0.202 0.192 0.205 0.198 0.193 0.196 0.192 0.206 0.195 0.208 0.198 0.199
14 0.119 0.125 0.122 0.120 0.126 0.126 0.125 0.123 0.121 0.125 0.122 0.123
15 0.247 0.236 0.241 0.245 0.241 0.250 0.243 0.242 0.243 0.245 0.243 0.243
16 0.773 0.766 0.763 0.764 0.768 0.772 0.766 0.763 0.765 0.761 0.774 0.767
17 1.639 1.644 1.631 1.626 1.647 1.631 1.634 1.646 1.634 1.652 1.647 1.639
18 0.274 0.267 0.281 0.279 0.275 0.275 0.277 0.273 0.281 0.277 0.279 0.276
Q4 11
45678|}~~>
Table4 Mutualpeakarearatiooftotalpeakarea
of11samplesof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.
WX
Sample
number
1®
Total
area(106)
®
Mutualpeak
area(106)
#
Percentage/%
1 8.83 8.17 92.5
2 9.03 8.65 95.8
3 10.01 9.27 92.6
4 8.81 8.36 94.9
5 18.57 17.31 93.2
6 9.66 8.74 90.5
7 17.65 16.48 93.4
8 12.89 11.77 91.3
9 8.01 7.42 92.7
10 14.40 13.26 92.1
11 9.03 8.20 90.8
Þß|$¸
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~0.9839¨©;AEu$,2、10XôT[
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、
_!FqràmqrâÆß
。
&ÉßÓ1、
|2 stEunopqrHPLCz{|kÞß
þÿ|
Fig.2 Hierarchicalclusteringanalysisof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.
fromdifferenthabitats
3、8、11X,1、11Xf ¡g,§
0.95ª«(f、y¤),Euåuóy°«(
)F"
、
(
,3、8Xf ¡Â,èå
0.8859、0.8387(f、y¤),Euå^_、
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&DßÓ5、6、9X,f ¡ôsg,
§0.8877~0.9463¨©(f、y¤),Eu
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、
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2.3 xy%(45678犎犘犔犆9:;<
2.3.1 ijklm 7stdvQ©Fnop
qrF HPLCz{|kí|4,f ¡ãäí
P6,AP6Ȫ$Â,7stdvQ©Fnopq
0121 ! " # $ % & 36!
1~11ånopstEuqrWX;Råm|k(-j:¥¦l;.j:y¤l)
|3 stEunopqr HPLCz{|k/³|
1to11issamplenumberof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.fromdifferenthabitats;Riscontrolfingerprint(red:averagemethod;blue:medianmethod)
Fig.3 SuperimposedHPLCfingerprintof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.fromdifferenthabitats
1.7µ20¶;2.8µ5¶;3.8µ20¶;4.9µ5¶;5.9µ20¶;6.10µ5¶;7.10µ20¶;
Råm|k(-j:¥¦l;.j:y¤l)
|4 stdvwnopqr HPLCz{|k/³|
1.20July;2.5August;3.20August;4.5September;5.20September;6.5October;7.20October;
Riscontrolfingerprint(red:averagemethod;blue:medianmethod)
Fig.4 SuperimposedHPLCfingerprintof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.indifferentharvesttimes
rÐf ¡§0.9483~0.9963,!òdKó"f
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Ðf ¡ô§0.94ª«,ÃÄ
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2.3.2 xy%(456789:;<>?
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11216w 8 9,*:nopqr HPLCz{|kFGH
Q5 xyz{45678犎犘犔犆9:;
f ¡
Similarity
WXSamplenumber
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
f
(
y¤
)
Correlationcoefficient(median)0.9852 0.9662 0.8859 0.9839 0.9463 0.8877 0.9746 0.8387 0.9057 0.9690 0.9526
f
(
¥¦
)
Correlationcoefficient(average)0.9853 0.9641 0.8959 0.9836 0.9330 0.9104 0.9627 0.8453 0.9278 0.9755 0.9626
f¢£¤
(
y¤
)
Congruentcoefficient(median) 0.9892 0.9748 0.9188 0.9875 0.9592 0.9200 0.9788 0.8847 0.9322 0.9777 0.9619
f¢£¤
(
¥¦
)
Congruentcoefficient(average)0.9890 0.9727 0.9282 0.9883 0.9489 0.9372 0.9686 0.8933 0.9487 0.9825 0.9681
Q6 xy%(45678犎犘犔犆9:;
f ¡
Similarity
WXSamplenumber
1 2 3 4 5 6 7
f
(
y¤
)
Correlationcoefficient(median) 0.9797 0.9818 0.9963 0.9740 0.9799 0.9477 0.9900
f
(
¥¦
)
Correlationcoefficient(average) 0.9830 0.9848 0.9612 0.9740 0.9841 0.9483 0.9618
f¢£¤
(
y¤
)
Congruentcoefficient(median) 0.9843 0.9845 0.9662 0.9796 0.9805 0.9671 0.9612
f¢£¤
(
¥¦
)
Congruentcoefficient(average) 0.9869 0.9866 0.9702 0.9794 0.9833 0.9583 0.9628
5
:1~7Xt|4
Note:Sample1~7arethesameasthatofFigure4
Q7 xy45678犎犘犔犆9:;
fromdifferentparts
f ¡
Similarity
À
Root
Á
Stem
n
Leaf
Fruit
f
(
y¤
)
Correlationcoefficient(median)0.86220.88410.94860.9885
f
(
¥¦
)
Correlationcoefficient(average)0.84230.83290.98700.9889
f¢£¤
(
y¤
)
Congruentcoefficient(median)0.88380.91440.95850.9884
f¢£¤
(
¥¦
)
Congruentcoefficient(average)0.86890.87310.98930.9909
2.3.3 xy%(456789:;
®¦TñSPSS20.0ØÐ,ëK wardlÞßÚ
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ßÓdvwå8µ20¶、9µ5¶、9µ20¶F3、
|5 stdvwnopqr HPLCz{|kÞß
þÿ|
Fig.5 Hierarchicalclusteringanalysisof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.
fromdifferentharvesttimes
4、5X,&Dßådvw10µ5¶F6X
,
&pßådvw10µ20¶F7X。&
îßF1、2X、&ÉßF3、4、5XÐdv
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、
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,
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°Sbw±²³
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2121 ! " # $ % & 36!
1~16.X
|6 stdvwnopqrx®
1-16.Peaknumber
Fig.6 Comparisonofsomemutualpeakof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪
L.indifferentharvesttimes
X.nop(S7X);Y.nopqr(4X);3.789:;
4.I:;8.;<=>
|8 nopnopqrF HPLC|k
X.YeXiaZhuCapsules(sampleS7);Y.犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.(sample4);
3.Galicacid;4.Protocatechuic;8.Corilagin
Fig.8 ComparisonofrepresentativeHPLCfingerprint
ofYeXiaZhuCapsulesand犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.
A.À;B.Á;C.n;D.
|7 stxynopqr HPLCz{|k/³|
A.Root;B.Stem;C.Leaf;D.Fruit
Fig.7 SuperimposedHPLCfingerprintof犘.狌狉犻狀犪狉犻犪L.fromdifferentparts
«Â
”
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2.4.1 ijklm nopqrstxyF
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