全 文 ：植物病理学报
ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ ４４(６): ６０９￣６１９(２０１４)
Ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｄａｔｅ: ２０１３￣０９￣２５ꎻ Ｒｅｖｉｓｅｄ ｄａｔｅ: ２０１４￣０８￣２４
Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｉｔｅｍ: Ｐｕｂｌｉｃ ｓｅｒｖｉｃｅ ｓｅｃｔｏｒｓ (ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ) ｓｐｅｃｉａｌ ｐｒｏｊｅｃｔ (Ｇｒａｎｔ Ｎｏ. ２０１００３０６７) ｆｒｏｍ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅｓ Ｒｅｐｕｂ￣
ｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａꎻ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｕｎｄ (Ｇｒａｎｔ Ｎｏ. ３１２０１４８０) ｂｙ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ (ＮＳＦＣ) .
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ: ＤＥＮＧ Ｘｉａｏ￣ｌｉｎｇꎬ ｐｒｏｆｅｓｓｏｒꎬ ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ ｉｎ ｃｉｔｒｕｓ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｄｉｓｅａｓｅｓꎻ Ｅ￣ｍａｉｌ: ｘｌｄｅｎｇ＠ｓｃａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ
Ｆｉｒｓｔ ａｕｔｈｏｒｓ: ＸＵ Ｍｅｉ￣ｒｏｎｇꎬ ｆｅｍａｌｅꎬ Ｐｈ. Ｄ.ꎬ ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ ｉｎ ｐｌａｎｔ￣ｐａｔｈｏｇｅｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎꎻ Ｅ￣ｍａｉｌ: ｍｒｘｕ１２３４５＠１２６.ｃｏｍ
ＺＨＥＮＧ Ｚｈｅｎｇꎬ ｍａｌｅꎬ Ｐｈ. Ｄ. ｓｔｕｄｅｎｔꎬ ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ ｉｎ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎻ Ｅ￣ｍａｉｌ: ｗｅｉｆｅｎｇ１５１２１０＠１２６.ｃｏｍ.
ｄｏｉ:１０.１３９２６ / ｊ.ｃｎｋｉ.ａｐｐｓ.２０１４.０６.００７
Ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ
‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｙ
Ｓｈｏｒｔ Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ ａｎｄ ＰＡＧＥ
ＸＵ Ｍｅｉ￣ｒｏｎｇ＃ꎬ ＺＨＥＮＧ Ｚｈｅｎｇ＃ꎬ ＬＩ Ｘｉｎ￣ｙｕꎬ ＨＯＮＧ Ｈｏｎｇ￣ｘｉａꎬ ＤＥＮＧ Ｘｉａｏ￣ｌｉｎｇ∗
(Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｓｉｇｎａｌｓ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌꎬ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔꎬ
Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６４２ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｐｒｅｖａｌｅｎｔ ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ ｐｈｌｏｅｍ￣ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｔｒｕｓ ｈｕａｎｇｌｏｎｇ￣
ｂｉｎｇ (ＨＬＢ) ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ ｉｓ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｒｉａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ . Ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａ ｓｅｔ ｏｆ ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔ
(ＳＴＲ) ｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ａｎｄ ｆａｃｉｌｉｔａｔｅ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｉｔｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ＨＬＢꎬ
Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ Ｆｉｎｄｅｒ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ＳＴＲ ｌｏｃｉ. ＳＴＲ ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ
ｂｙ Ｐｒｉｍｅｒ Ｐｒｅｍｉｅｒ ５. ０. ＰｏｐＧｅｎｅ ａｎｄ ＰｏｗｅｒＭａｒｋ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ
(ＰＡＧＥ) ｂａｎｄｓ ｏｆ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ６ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ. Ｔｈｉｒｔｙ￣ｔｈｒｅｅ ｏｆ ｔｈｅ ３６ ＳＴＲ ｌｏｃｉ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｅｆｆｅｃ￣
ｔｉｖｅｌｙ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ. Ｔｗｅｎｔｙ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＳＴＲ ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ３２ Ｃｈｉｎｅｓｅ ‘Ｃａ. Ｌ.
ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ. Ｔｈｅ Ｎｅｉ’ｓ ｍｅａｓｕｒｅ ｏｆ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｖａｌｕｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅｓｅ ２０ ＳＴＲｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０.０６ ｔｏ ０.８１ꎬ
ｗｉｔｈ ａ ｍｅａｎ ｏｆ ０.３８. Ｔｈｅ ｓｈａｎｎｏｎ’ ｓ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘｅｓ ｗｅｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ０.１４ ａｎｄ １.９０ꎬ ｗｉｔｈ ａ ｍｅａｎ ｏｆ ０.６８. Ｉｎ
ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎꎬ ｔｈｅ ２０ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＳＴＲ ｌｏｃｉ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ
ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ. Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｗａｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ. Ｔｈｅ
ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ｔｈａｔ ｗａｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ｔｏ ｂｅ ＨＬＢ ｏｒｉｇｉｎ ｗｅｒｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ. Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｆｕｊｉａｎꎬ Ｇｕａｎｇｘｉ ａｎｄ
Ｙｕｎｎａｎ ｗｅｒｅ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｏ ｂｅ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ. Ｐｓｙｌｌｉｄ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｍａｙ ｐｌａｙ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｐｒｅａｄ ｏｆ
‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｅｔｗｅｅｎ ｎｅｉｇｈｂｏｒ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇꎻ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ꎻ ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓꎻ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
基于短串联重复和 ＰＡＧＥ的柑橘黄龙病菌‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’种间遗传
多样性分析 许美容ꎬ 郑 正ꎬ 李昕昱ꎬ 洪虹霞ꎬ 邓晓玲 (华南农业大学资源环境学院ꎬ广东省微生物信号与
作物病害防控重点实验室ꎬ广州 ５１０６４２)
摘要:韧皮部杆菌亚洲种(‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｒｉａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ꎬ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’)是目前流行范围最广、危害最严重的柑橘黄
龙病致病菌ꎮ 本研究利用‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’基因组中全套串联重复基因(ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔꎬ ＳＴＲ)开发了一套系统的方法
用于‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’遗传多样性和黄龙病分子流行学研究ꎮ ＰＣＲ和 ＰＡＧＥ分析筛选到的 ３６个 ＳＴＲ位点中ꎬ有 ３３个获得
了有效扩增ꎮ 其中 ２０对引物对不同来源的 ３２个样品的扩增产物多态性较好ꎬ最多的可扩增出 ９种条带类型ꎮ 采自我国 ６
省的 ３２个‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’阳性样品之间的 Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数为 ０.１４~ １.９０ꎬ平均为 ０.６８ꎻＮｅｉ’ｓ基因多样性指数为 ０.０６
~ ０.８１ꎬ平均为 ０.３８ꎬ各省的菌株表现出较高的遗传多样性ꎬ特别是来自福建、广西和云南三省的ꎮ 聚类分析发现可能为中
植物病理学报 ４４卷
国黄龙病发源地的广东省的黄龙病菌株具有一定的遗传特异性ꎻ其余邻省之间存在由木虱传播引起的菌株交流的可能性
可以解释该病害在省际间传播ꎮ 研究表明ꎬ开发的 ＳＴＲ标记结合 ＰＡＧＥ的方法可作为今后菌株遗传多样性和病害分子流
行学分析的高效方法ꎮ
关键词:黄龙病ꎻ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ꎻ 短串联重复ꎻ 遗传多样性
中图分类号: Ｓ４３６.６６１.１ 文献标识码: Ａ 文章编号: ０４１２￣０９１４(２０１４)０６￣０６０９￣１１
Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ (ＨＬＢ) (ｙｅｌｌｏｗ ｓｈｏｏｔ ｄｉｓｅａｓｅ)
ｈａｓ ｂｅｅｎ ａ ｓｅｒｉｏｕｓ ｐｒｏｂｌｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ’ ｓ ｃｉｔｒｕｓ ｉｎ￣
ｄｕｓｔｒｙ ｆｏｒ ｈｕｎｄｒｅｄ ｙｅａｒｓ. Ｉｎ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ １９ｔｈ ｃｅｎｔｕｒｙꎬ
ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ ｙｅｌｌｏｗｉｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ ｗａｓ ｒｅｃｏｒｄｅｄ ｉｎ
Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ [１] . Ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｓ ｎｏｗ ｗｉｄｅｌｙ ｄｉｓｔｒｉｂｕ￣
ｔｅｄ ｉｎ ｍｏｓｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ａｓｉａꎬ Ａｆｒｉｃａｎ ａｎｄ Ａｍｅｒｉｃａ ｗｈｅｒｅ
ｃｉｔｒｕｓ ａｒｅ ｇｒｏｗｎ. ＨＬＢ￣ａｆｆｅｃｔｅｄ ｔｒｅｅｓ ｓｈｏｗ ｓｙｍｐｔｏｍｓ
ｏｆ ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅꎬ ｓｅｖｅｒｅ ｃｈｌｏｒｏｓｉｓ ｏｆ ｆｏｌｉａｇｅ ｏｒ ｄｉｅ￣
ｂａｃｋꎬ ｗｈｉｃｈ ｃａｕｓｅｓ ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌ ｅｃｏｎｏｍｉｃ ｌｏｓｓｅｓ.
Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ ＨＬＢ ｉｎ Ａｓｉａ ａｎｄ Ａｆｒｉｃａ
ｗａｓ ｆｉｒｓｔ ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ａｓ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉ￣
ａｔｉｃｕｓ’ (‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’) ａｎｄ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｆｒｉｃａｎｕｓ
[２~４] . Ａ ｔｈｉｒｄ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｓｐｅｃｉｅｓꎬ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｍｅｒｉｃａ￣
ｎｕｓ’ ｗａｓ ｅｖｅｒ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｔｏ ｂｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ Ｓãｏ Ｐａｕｌｏ
Ｓｔａｔｅ ｏｆ Ｂｒａｚｉｌ [５] . ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓ ａｌｓｏ ｔｈｅ
ｍｏｓｔ ｗｉｄｅｓｐｒｅａｄ ａｎｄ ｐｒｅｖａｌｅｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ [６] . Ｇｕａｎｇ￣
ｄｏｎｇ ｈａｓ ｌｏｎｇ ｂｅｅｎ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ
ｐｒｅｖａｌｅｎｔ ａｒｅａ ｆｏｒ ｔｈｅ Ａｓｉａｎ ｆｏｒｍ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅ [１ꎬ７] .
Ｔｈｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ “Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ” ｔｏ ＨＬＢ ｗａｓ
ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｉｎ １９９６[８ꎬ ９] .
Ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＨＬＢ ｈａｖｅ ａｔｔｒａｃｔｅｄ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ａｔｔｅｎｔｉｏｎ
ｏｆ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ. Ｍｏｓｔ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｅｖｉｏｕｓ ｓｔｕｄｉｅｓ ｆｏｃｕｓｅｄ
ｏｎ ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ｇｅｎｅｓ ａｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｍａｒｋｅｒｓꎬ
ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ １６Ｓ ｒＲＮＡꎬ １６Ｓ / ２３Ｓ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ
ｒｅｇｉｏｎｓꎬ ｔｈｅ ｏｕｔｅｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ( ｏｍｐ) ｇｅｎｅꎬ
ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅｓꎬ ａｎｄ ψｓｅｒＡ￣ｔｒｍＵ￣ｔｕｆＢ￣
ｓｅｃＥ￣ｎｕｓＧ￣ｒｐｌＫＡＪＬ￣ｒｐｏＢ ｇｅｎｅ ｃｌｕｓｔｅｒ[１０~２１] . Ｉｎ
２００９ꎬ ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｇｅｎｏｍｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ.
ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｉｃ ａｐ￣
ｐｒｏａｃｈｅｓ[２２]ꎬ ａｎｄ ｔｈｅｎꎬ ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈａｇｅ￣ｔｙｐｅ ＤＮＡ
ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｒｅｇｉｏｎ ａｎｄ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｒｅ￣
ｇｉｏｎｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ ｗｅｒｅ ｅｍ￣
ｐｌｏｙｅｄ ｆｏｒ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｉｓ
ｐａｔｈｏｇｅｎ[２３] . Ｉｎ ２０１１ꎬ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｏｆ ‘Ｃａ.
Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ａ ｐｒｏｐｈａｇｅ ｇｅｎｅ
[２４] ｏｒ ｔｗｏ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｐｒｏｐｈａｇｅ ｇｅｎｅｓ (ｈｙｖＩ ａｎｄ
ｈｙｖＩＩ) ｗｉｔｈ ｉｎｔｒａｇｅｎｉｃ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ [２５] .
Ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｕｓｉｎｇ ｓｈｏｒｔ ｔａｎ￣
ｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ (ＳＴＲ)ꎬ ａｌｓｏ ｋｎｏｗｎ ａｓ ｖａｒｉａｂｌｅ ｎｕｍｂｅｒ
ｏｆ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ (ＶＮＴＲ) ｉｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆｏｒ ｅｐｉｄｅ￣
ｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ. Ｏｎｅ ｇｅｎｅｔｉｃ
ｍａｒｋｅｒ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｍａｌｌ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ (ＡＧＡＣＡＣＡ)
ｗａｓ ｆｉｒｓｔ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ ｔｈｅ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｆｌｏｒｉｄａ (ＵＳ) ｆｒｏｍ ｔｈｏｓｅ ｏｆ Ｇｕａｎｇ￣
ｄｏｎｇ ( ｉｎ Ｃｈｉｎａ) [２３] . Ｉｎ ２０１１ꎬ Ｋａｔｏｈ ｅｔ ａｌ.[２６] ｓｅ￣
ｌｅｃｔｅｄ ４ ｈｉｇｈｌｙ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｌｏｃｉ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ８４
‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｊａｐａｎꎬ ａｎｄ １６ ｉｓｏ￣
ｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｔａｉｗａｎ ｏｒ Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ. Ｓｅｖｅｎ ＳＴＲ ｍａｒｋｅｒｓ
ｗｅｒｅ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｒｅｅ ｍａｊｏｒ
ｇｅｎｅｔｉｃ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ２８７ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ
ｆｒｏｍ ９ ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ[２７] .
Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙꎬ ３３ ｏｆ ７８ ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ ＳＴＲ ｌｏｃｉ ｗｅｒｅ
ｓｃａｎｎｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅｉｒ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｔｈｒｏｕｇｈ ｐｏｌｙａｃｒｙｌａ￣
ｍｉｄｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ (ＰＡＧＥ)ꎬ ａ ｈｉｇｈｌｙ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡ ｆｒａｇｍｅｎｔ
ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ. Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｌｏｃｉꎬ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒ￣
ｓｉｔｙ ａｍｏｎｇ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ６ ｐｒｏｖｉ￣
ｎｃｅｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ｗａｓ ｅｓｔｉｍａｔｅｄ. Ｇｅｎｅｔｉｃ ｇｒｏｕｐｓ ａｃｃｏｒｄ￣
ｉｎｇ ｔｏ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｏｒｉｇｉｎｓ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ.
１ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ
１.１ Ｐｌａｎｔ ｍａｔｅｒｉａｌ ａｎｄ ＤＮＡ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
Ｌｅａｆ ｏｒ ｆｒｕｉｔ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｉｔｈ ｔｙｐｉｃａｌ ＨＬＢ ｓｙｍｐｔｏｍｓ
ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｏｎ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ｐｌａｎｔ ｆｒｏｍ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｏｆ
Ｆｕｊｉａｎꎬ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇꎬ Ｇｕａｎｇｘｉꎬ Ｊｉａｎｇｘｉꎬ Ｙｕｎｎａｎꎬ ａｎｄ
Ｚｈｅｊｉａｎｇ (Ｔａｂｌｅ １). ＤＮＡ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ
ＨＰ ｐｌａｎｔ ＤＮＡ ｋｉｔ (Ｄ２４８５￣０２ꎬ ＯＭＥＧＡ ｂｉｏ￣ｔｅｋ). Ｂａ￣
ｓｉｃａｌｌｙꎬ ０. １５ ｇ ｍｉｄｒｉｂｓ ｗｅｒｅ ｅｘｃｉｓｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｌｅａｆ
ｂｌａｄｅꎬ ｍｉｘｅｄ ｗｉｔｈ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒꎬ ａｎｄ ｇｒｏｕｎｄ ｉｎ
０１６
６期 ＸＵＭｅｉ￣ｒｏｎｇ ｅｔ ａｌ:Ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｙ Ｓｈｏｒｔ Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ ａｎｄ ＰＡＧＥ
ｔｕｂｅｓ ｏｎ ＭＰ ＦａｓｔＰｒｅｐ￣２４ ｍａｃｈｉｎｅ. Ｔｈｅ ｆｉｎａｌ ＤＮＡ ｐｅｌ￣
ｌｅｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ ＴＥ ｂｕｆｆｅｒ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｅｄ ｂｙ ｅｌｅｃ￣
ｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ｉｎ １％ (ｗ/ ｖ) ａｇａｒｏｓｅ ｇｅｌ. ＨＬＢ￣ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ￣ｆｒｅｅ ＤＮＡ ｓａｍｐｌｅｓ ｏｆ Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅ
Ｂｌａｎｃｏ ｃｖ. Ｓｈａｔａｎｇｊｕ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌｓ.
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｗａｓ
ｂａｓｅｄ ｏｎ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒｓ ＯＩ１/ ＯＩ２ｃ [２] .
１.２ ＳＴＲ ｍａｒｋｅｒｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
Ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｇｅｎｏｍｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｗｏ ‘Ｃａ. Ｌ.
ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｓｔｒａｉｎｓ (ＣＰ００１６７７. ５ ａｎｄ ＣＰ００４００５. １)
ｗｅｒｅ ｄｏｗｎｌｏａｄｅｄ ｆｒｏｍ ＧｅｎＢａｎｋ ｄａｔａｂａｓｅ. Ａ ｇｅ￣
ｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅ ｓｅａｒｃｈ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ａｌｌ ｐｕｔａ￣
ｔｉｖｅ ＳＴＲ ｌｏｃｉ ｂｙ Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ Ｆｉｎｄｅｒ ( ｖｅｒｓｉｏｎ
４.０７ｂ) [２８] . ＳＴＲ ｌｏｃｉ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ
ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ: Ａ) Ｗｈｅｎ ‘Ｐｅｒｃｅｎｔ Ｍａｔｃｈｅｓ’ ｉｓ １００％ꎬ
ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ｒｅｐｅａｔｅｄ ｍｏｔｉｆｓ ｉｓ ４ ~ １０ ｂｐꎻ Ｂ) Ｉｆ ‘Ｐｅｒ￣
ｃｅｎｔ Ｍａｔｃｈｅｓ’ ａｒｅ ａｍｏｎｇ ９０％￣９９％ꎬ ｔｈｅ ｍｏｔｉｆ ｓｉｚｅ
ｉｓ ｂｉｇｇｅｒ ｔｈａｎ １０ ｂｐꎻ Ｃ) Ｒｅｐｅａｔ ｎｕｍｂｅｒ ｉｓ ｍｏｒｅ
ｔｈａｎ ２. Ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ａｍｐｌｉｆｙ ｔｈｅ
ｓｃｒｅｅｎｅｄ ＳＴＲ ｌｏｃｕｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｓｅａｒｃｈ ｃｒｉｔｅｒｉａ:
ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ １５ ~ ２５ ｂｐꎬ Ｔｍ ｏｆ ４５℃ ~ ６５℃ꎬ ＧＣ％ ｏｆ
４０％~ ６５％ꎬ ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔ ｓｉｚｅ ｏｆ １００ ~ ５００ ｂｐ ( ｆｏｒ
ｌｏｃｉ ＳＴＲ ３４~ ＳＴＲ ３６ ｗｉｔｈ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｌａｒｇｅｒ ｍｏｔｉｆ ｓｉｚｅꎬ
ｐｒｏｄｕｃｔ ｓｉｚｅｓ ｗｅｒｅ ｅｎｌａｒｇｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇｌｙꎻ ＳＴＲ ２８ ｉｓ
ａ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｇｅｎｏｍｉｃ ｌｏｃｉ. Ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔ ｓｉｚｅ ｆｏｒ
ｔｈｅ ｐｒｉｍｅｒ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｗａｓ １ ７４２ ｂｐ ｉｎ ＣＰ００４００５.１) .
Ｔｏ ｔｅｓｔ ｔｈｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ
ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｐｒｉｍｅｒｓꎬ ｔｗｏ ＤＮＡ
ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ ＨＬＢ￣ｉｎｆｅｃｔｅｄ ａｎｄ ＨＬＢ￣ｆｒｅｅ Ｃｉｔｒｕｓ
ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅ Ｂｌａｎｃｏ ｃｖ. Ｓｈａｔａｎｇｊｕ ｔｒｅｅｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ
ＰＣＲ ｔｅｍｐｌａｔｅｓ. Ｔｗｅｎｔｙ￣ｆｉｖｅ μＬ ｍｉｘｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ
ｆｏｒ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ＰＣＲ. Ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ＳＴＲ ｐｒｉｍｅｒｓꎬ ｔｈｉｒｔｙ￣ｔｗｏ ＤＮＡ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ
ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ＨＬＢ￣ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ ｉｎ ６ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｏｆ
Ｃｈｉｎａ. Ｐｒｉｍｅｒｓ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｗｅｒｅ
ｎａｍｅｄ ａｓ ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒｓ.
１.３ ＰＣＲ ｂａｓｅｄ ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ
ＰＣＲ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ １５ μＬ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｍｉｘｔｕｒｅ
ｖｏｌｕｍｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ １ × ｒｅａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ ( ＬＯＴ ＃
Ｌ０４２５Ｃꎬ ＴＩＡＮＧＥＮ ＢＩＯＴＥＣＨ ＣＯ.ꎬ ＬＴＤ)ꎬ １. ５
μＬ ｏｆ ０.２ ｍＭ ｄＮＴＰｓ (ＬＯＴ＃Ｌ０６２５Ｃꎬ ＴＩＡＮＧＥＮ
ＢＩＯＴＥＣＨ ＣＯ.ꎬ ＬＴＤ)ꎬ １ ｐｍｏｌ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒｓꎬ
ａｂｏｕｔ ５ ｎｇ ｄｉｌｕｔｅｄ ＤＮＡ ｓａｍｐｌｅｓꎬ ０.１５ Ｕ Ｔａｑ ＤＮＡ
ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ (ＬＯＴ＃Ｌ０３２８Ｃꎬ ＴＩＡＮＧＥＮ ＢＩＯＴＥＣＨ
ＣＯ.ꎬ ＬＴＤ) . Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ＰＣＲ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ａ
ＰＴＣ￣１００ ｏｒ ＰＴＣ￣２００ Ｔｈｅｒｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒ ( ＭＪ Ｒｅ￣
ｓｅａｒｃｈ) ｗｉｔｈ ａｎ ｉｎｉｔｉａｌ ５ ｍｉｎ ｄｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｔ ９５°Ｃꎬ
ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ ３４ ｃｙｃｌｅｓ ｏｆ ｅａｃｈ (９５°Ｃꎬ ３０ｓꎻ ５６°Ｃꎬ
３０ｓꎻ ７２°Ｃꎬ ３０ｓ)ꎬ ｔｈｅｎ ｅｘｔｅｎｄｅｄ ａｔ ７２°Ｃ ｆｏｒ ７ ｍｉｎ.
Ｅｘａｃｔｌｙ ０. ８ μＬ ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｍｉｘｅｄ ｗｉｔｈ ｌｏａｄｉｎｇ
ｂｕｆｆｅｒ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｏｎ ６％ (ｗ / ｖ) ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ
ｇｅｌｓ ｆｏｒ ６ ｈ ｗｉｔｈ １１０ Ｖ ｖｏｌｔａｇｅ ( Ｆｏｒ ＳＴＲ３４ ~
ＳＴＲ３６ꎬ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ｔｉｍｅ ｗａｓ ｓｅｔ ａｓ ８ ｈ) . Ｓｉｌｖｅｒ
ｓｔａｉｎｉｎｇ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｖｉｓｕａｌｉｚｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ａｌｌｅｌｅｓ.
Ｔｈｅ ｓｔａｉｎｅｄ ｇｅｌ ｗａｓ ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｅｄ ｂｙ ａ ｃｏｌｏｒ ｄｉｇｉｔａｌ
ｃａｍｅｒａ (Ｎｉｋｏｎꎬ ＤＸ ＳＷＭ ＥＤ Ａ ｓｐｈｅｒｉｃａｌ) ａｎｄ
ＤＮＡ ｂａｎｄｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ. Ａｇａｒｏｓｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏ￣
ｒｅｓｉｓ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｒｅｓｏｌｖｅ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ ｆｒｏｍ ＳＴＲ２８ꎬ ａｓ
ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｔｏｏ ｌａｒｇｅ (８００￣２ ２００ ｂｐ) ｆｏｒ ＰＡＧＥ.
１.４ Ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉ￣
ｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｅｓ
Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ
ｏｆ ａｌｌｅｌｉｃ ｄａｔａ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｆｒｏｍ ａｌｌ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｐｒｉｍｅｒｓ.
Ａ ｄａｔａ ｓｅｔ ｒｅａｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｂａｎｄ ｎｕｍｂｅｒ ａｎｄ
ｂａｎｄ ｓｉｚｅ ｗｅｒｅ ｂｕｉｌｔ ａｎｄ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ
ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ ｌｉｎｋａｇｅ ｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ. Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐｏｐｇｅｎｅ １. ３２ (ｈｔｔｐ: / / ｗｗｗ.
ｕａｌｂｅｒｔａ.ｃａ / ~ ｆｙｅｈ / ｉｎｄｅｘ.ｈｔｍｌ) ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ
ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｂａｎｄｓ ( ＰＰＢ)ꎬ Ｎｅｉ ’ ｓ
ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ( Ｈ )ꎬ ａｎｄ ｓｈａｎｎｏｎ ’ ｓ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｉｎｄｅｘｅｓ(Ｉ) ａｔ ｅａｃｈ ｌｏｃｕｓ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ａｃｒｏｓｓ ａｌｌ ｌｏｃｉ ｆｏｒ
ａｌｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ. Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒｅｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ｂｙ
ｕｓｉｎｇｔｈｅ ＰｏｗｅｒＭａｒｋ Ｖ３.０ ｓｏｆｔｗａｒｅ (ｈｔｔｐ: / / ｓｔａｔｇｅｎ.
ｎｃｓｕ.ｅｄｕ / ｐｏｗｅｒｍａｒｋｅｒ / ｉｎｄｅｘ.ｈｔｍｌ) .
２ Ｒｅｓｕｌｔｓ
２.１ Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｅ￣
ｏｇｒａｐｈｉｃ ａｒｅａｓ
Ｆｏｒｔｙ￣ｆｉｖｅ ｏｆ ５０ ｌｅａｆ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｔｏ ｂｅ
‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｐｏｓｉｔｉｖｅ. Ｔｈｉｒｔｙ￣ｔｗｏ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｗｅｒｅ
ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ. Ｔｈｅ ３２ ｉｓｏ￣
ｌａｔｅｓ ｏｆ ８ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ６
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ (Ｔａｂｌｅ １) .
１１６
植物病理学报 ４４卷
Ｔａｂｌｅ １ Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ “Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ” ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ
Ｉｓｏｌａｔｅ Ｃｏｄｅａ Ｌｏｃａｔｉｏｎ Ｖａｒｉｅｔｙ Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｐｏｓｉｔｉｏｎ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｄａｔｅ
ＪＸ￣１ Ｘｕｎｗｕ Ｔａｎｇｅｒｉｎｅ Ｌｅａｆ Ｖｅｉｎ ｃｏｒｋｉｎｇꎬ ｓｌｉｇｈｔ ｙｅｌｌｏｗｉｎｇ ２０１２.０６.１９
ＪＸ￣２ Ｘｕｎｗｕ Ｔａｎｇｅｒｉｎｅ Ｌｅａｆ Ｖｅｉｎ ｃｏｒｋｉｎｇꎬ ｙｅｌｌｏｗｉｎｇ ２０１２.０６.１９
ＪＸ￣３ Ｘｕｎｗｕ Ｎａｖｅｌ ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.０６.１９
ＪＸ￣４ Ｘｉｎｆｅｎｇ Ｎａｖｅｌ ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.０６.１９
ＪＸ￣５ Ｘｉｎｆｅｎｇ Ｎａｖｅｌ ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.０６.１９
ＧＸ￣１ Ｇｕｉｌｉｎ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ ‘Ｇｒｅｅｎ ｉｓｌａｎｄ’ ２０１２.１０.１５
ＧＸ￣２ Ｇｕｉｌｉｎ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ ‘Ｇｒｅｅｎ ｉｓｌａｎｄ’ ２０１２.１０.１５
ＧＸ￣３ Ｇｕｉｌｉｎ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１０.１５
ＧＸ￣４ Ｇｕｉｌｉｎ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｖｅｉｎ ｃｏｒｋｉｎｇꎬ ｍｏｔｔｌｉｎｇ ２０１２.１０.１５
ＧＸ￣５ Ｇｕｉｌｉｎ Ｎａｖｅｌ ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１２.３０
ＺＪ￣１ Ｗｅｎｚｈｏｕ Ｍａｎｄａｒｉｎ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１１.１６
ＺＪ￣２ Ｗｅｎｚｈｏｕ Ｍａｎｄａｒｉｎ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１１.１６
ＦＪ￣１ Ｓｈａｎｇｈａｎｇ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１０.０３
ＦＪ￣２ Ｓｈａｎｇｈａｎｇ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｚｉｎｃ￣ｐａｔｔｅｒｎ￣ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ２０１２.１０.０３
ＦＪ￣３ Ｙｏｎｇｃｈｕｎ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｙｅｌｌｏｗｉｎｇ ２０１２.０２.２１
ＦＪ￣４ Ｙｏｎｇｃｈｕｎ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.０３.２３
ＦＪ￣５ Ｓａｎｍｉｎｇ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１０.２９
ＦＪ￣６ Ｓａｎｍｉｎｇ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１０.２９
ＹＮ￣１ Ｂｉｎｃｈｕａｎ Ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｓｌｉｇｈｔ ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.０４.１５
ＹＮ￣２ Ｂｉｎｃｈｕａｎ Ｏｒａｎｇｅ Ｆｒｕｉｔ Ｇｒｅｅｎｉｎｇ ２０１２.０４.１５
ＹＮ￣３ Ｊｉａｎｓｈｕｉ Ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｚｉｎｃ￣ｐａｔｔｅｒｎ￣ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ２０１２.０９.２５
ＹＮ￣４ Ｊｉａｎｓｈｕｉ Ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｍｏｔｔｌｉｎｇꎬ ｚｉｎｃ￣ｐａｔｔｅｒｎ￣ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ２０１２.０９.２５
ＹＮ￣５ Ｊｉａｎｓｈｕｉ Ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｍｏｔｔｌｉｎｇꎬ ｙｅｌｌｏｗｉｎｇ ２０１２.０９.２５
ＹＮ￣６ Ｊｉａｎｓｈｕｉ Ｏｒａｎｇｅ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１０.１５
ＹＮ￣７ Ｊｉａｎｓｈｕｉ Ｍａｎｄａｒｉｎ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１０.１５
ＹＮ￣８ Ｊｉａｎｓｈｕｉ Ｐｕｍｍｅｌｏ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１２.１０.１５
ＧＤ￣１ Ｙｕｎｆｕ Ｔａｎｇｅｒｉｎｅ Ｌｅａｆ Ｍｏｔｔｌｉｎｇꎬ ｚｉｎｃ￣ｐａｔｔｅｒｎ￣ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ２０１３.０１.２９
ＧＤ￣２ Ｙｕｎｆｕ Ｔａｎｇｅｒｉｎｅ Ｌｅａｆ Ｚｉｎｃ￣ｐａｔｔｅｒｎ￣ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ２０１３.０１.２９
ＧＤ￣３ Ｄｅｑｉｎｇ Ｔａｎｇｅｒｉｎｅ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１３.０３.１０
ＧＤ￣４ Ｄｅｑｉｎｇ Ｔａｎｇｅｒｉｎｅ Ｌｅａｆ ‘Ｇｒｅｅｎ ｉｓｌａｎｄ’ꎬ Ｚｉｎｃ￣ｐａｔｔｅｒｎ￣ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ２０１３.０３.１０
ＧＤ￣５ Ｄｅｑｉｎｇ Ｍａｎｄａｒｉｎ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１３.０３.１０
ＧＤ￣６ Ｄｅｑｉｎｇ Ｍａｎｄａｒｉｎ Ｌｅａｆ Ｂｌｏｔｃｈｙ ｍｏｔｔｌｅ ２０１３.０３.１０
ａＹＮ: Ｙｕｎｎａｎ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＦＪ: Ｆｕｊｉａｎ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＪＸ: Ｊｉａｎｇｘｉ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＧＸ: Ｇｕａｎｇｘｉ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＺＪ: Ｚｈｅｊｉａｎｇ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＧＤ:
Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ｐｒｏｖｉｎｃｅ.
２１６
６期 ＸＵＭｅｉ￣ｒｏｎｇ ｅｔ ａｌ:Ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｙ Ｓｈｏｒｔ Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ ａｎｄ ＰＡＧＥ
２.２ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｏｒ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ
Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ７８ ＳＴＲ ｍｏｔｉｆｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ ｆｒｏｍ
ｔｗｏ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｇｅｎｏｍｅｓ. Ｏｆ ｔｈｅ ７８ ＳＴＲ ｍｏ￣
ｔｉｆｓꎬ ３６ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｆｏｒ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｂｙ ｔｈｅ
ｍｅｔｈｏｄｓ ｍｅｎｔｉｏｎｅｄ ａｂｏｖｅ (Ｆｉｇ. １ꎬ Ｔａｂｌｅ ２) . Ｔｈｒｅｅ
ｏｆ ｔｈｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｐｒｉｍｅｒｓ ( ＳＴＲ９ꎬ ＳＴＲ１１ꎬ ａｎｄ
ＳＴＲ２６) ｈａｄ ｎｏ ｔａｒｇｅｔ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｅｃｔｅｄ ｓｉｚｅ
( Ｆｉｇ. １ ) . Ｆｏｕｒ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒｓ ( ＳＴＲ８ꎬ ＳＴＲ１０ꎬ
ＳＴＲ２０ꎬ ａｎｄ ＳＴＲ３２) ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ
ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ ｅｘｐｅｃｔｅｄ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ. Ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔ
ｓｉｚｅｓ ｗｅｒｅ ａｍｏｎｇ １５０ ~ ３００ ｂｐ ｅｘｃｅｐｔ ｆｏｒ ＳＴＲ２８ꎬ
ＳＴＲ３４ꎬ ＳＴＲ３５ꎬ ａｎｄ ＳＴＲ３６. ＰＡＧＥ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎｎｏｔ
ｂｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ ＳＴＲ２８ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ ｂｅｃａｕｓｅ ｔｈｅ
ｓｉｚｅ ｉｓ ａｂｏｕｔ ２ ｋｂ.
Ｆｏｒ ｔｈｅ ３３ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｐｒｉｍｅｒｓꎬ １４ꎬ ３ꎬ ａｎｄ ３ ｐａｉｒｓ
ｐｒｏｄｕｃｅｄ １ꎬ ２ꎬ ａｎｄ ３ ｂａｎｄｓꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｉｎｔｅｒｅｓｔｉｎｇ￣
ｌｙꎬ ８ꎬ ３ꎬ ２ꎬ ａｎｄ １ ｐａｉｒｓ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒｓ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ
ｗｉｔｈ １~２ꎬ １~３ꎬ １~４ꎬ ａｎｄ １~５ ｂａｎｄｓꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.
Ｔｗｅｎｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ３３ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒｓ (６０. ６１％)
ｗｅｒｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ３２ ｓａｍｐｌｅｓꎬ ａｓ ｒｅｐｒｅ￣
ｓｅｎｔａｔｉｖｅｌｙ ｓｈｏｗｎ ｉｎ Ｆｉｇ. ２. Ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｐｒｉｍｅｒｓ
ｗｅｒｅ ｎａｍｅｄ ａｓ ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒｓ (Ｔａｂｌｅ ２) .
Ｆｉｇ. １ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ＰＣＲ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ３６ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒｓ ｏｎ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ
ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｙ ａｇａｒｏｓｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ
Ｍ: ＤＳ２０００ ＤＮＡ ｍａｒｋｅｒꎻ ‘＋’: Ｍｉｄｒｉｂ ＤＮＡ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ ｌｉｂｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｎｆｅｃｔｅｄ Ｃｉｔｒｕｓ
ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅ Ｂｌａｎｃｏ ｃｖ. Ｓｈａｔａｎｇｊｕꎻ ‘ ￣‘: Ｍｉｄｒｉｂ ＤＮＡ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｈｅａｌｔｈｙ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅ Ｂｌａｎｃｏ ｃｖ. Ｓｈａｔａｎｇｊｕ.
３１６
植物病理学报 ４４卷
Ｆｉｇ. ２ ＤＮＡ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｒｅｓｏｌｖｅｄ ｂｙ ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ａｍｏｎｇ ３２
‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｂｙ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔ ｐｒｉｍｅｒｓ
Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗｅｒｅ ｆｒｏｍ Ｊｉａｎｇｘｉ (１~５)ꎬ Ｇｕａｎｇｘｉ (６~１０)ꎬ
Ｚｈｅｊｉａｎｇ (１１~１２)ꎬ Ｆｕｊｉａｎ (１３~１８)ꎬ Ｙｕｎｎａｎ (１９~２６)ꎬ ａｎｄ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ (２７~３２) ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ.
２.３ Ｇｅｎｏｔｙｐｅ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ３２
ｉｓｏｌａｔｅｓ
Ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ３２ ｉｓｏｌａｔｅｓꎬ ２ ~ ９ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｗｅｒｅ ｉ￣
ｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｆｏｒ ｅａｃｈ ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ. Ｔａｂｌｅ ３ ｓｈｏｗｓ ｔｈｅ
Ｓｈａｎｎｏｎ’ ｓ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘｅｓ ａｎｄ Ｎｅｉ’ ｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉ￣
ｖｅｒｓｉｔｙ ( Ｈ ) ｏｆ ａｌｌ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｍａｒｋｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ
ｓｃｒｅｅｎｅｄ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ. Ｔｈｅ Ｓｈａｎ￣
ｎｏｎ’ ｓ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘｅｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０.１４ ｔｏ １.９０ꎬ
ｗｉｔｈ ａ ｍｅａｎ ｏｆ ０. ６８. Ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ Ｈ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆ ｔｈｅ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ａｍｏｎｇ ０.０６ ａｎｄ ０.８１ꎬ ｗｉｔｈ ａ ｍｅａｎ
ｏｆ ０.３８. Ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ
ｗｅｒｅ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ６ ｒｅｇｉｏｎｓ. Ｔｈｅ
ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｇｒｏｕｐｓ
ｗａｓ ０.４８~０.９７ꎬ ｗｉｔｈ ａ ｍｅａｎ ｏｆ ０.７６. Ｏｖｅｒａｌｌ ｇｅｎｏ￣
ｔｙｐｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎ Ｊｉａｎｇｘｉ
ｐｒｏｖｉｎｃｅ ( ０. ８１ ~ ０. ９７)ꎬ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ
ｐｒｏｖｉｎｃｅ (０.８１~０.９５) . Ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ
ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｌｏｗｅｒ ｉｎ ｏｔｈｅｒ ３ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓꎬ ｗｉｔｈ Ｇｕａｎｇｘｉ
ｏｆ ０.７０ ~ ０.９７ꎬ Ｆｕｊｉａｎ ｏｆ ０.６２ ~ ０.９７ ａｎｄ Ｙｕｎｎａｎ ｏｆ
０.６４~０.９０. Ｎｏ ｄａｔａ ｗａｓ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｆｏｒ Ｚｈｅｊｉａｎｇ ｐｒｏｖｉ￣
ｎｃｅ ｂｅｃａｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｍａｌｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｉｚｅ. Ｔｈｅ ｏｖｅｒａｌｌ
ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｄａｔａ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｅｘｉｓ￣
ｔｅｄ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ａｎｄ
ｗｉｔｈｉｎ ｏｎｅ ｐｒｏｖｉｎｃｅ. Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｆｕｊｉａｎꎬ Ｇｕａｎｇｘｉꎬ
ａｎｄ Ｙｕｎｎａｎ ｗｅｒｅ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｏ ｂｅ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ.
２.４ Ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｅｇｉｏｎｓ
Ａ ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ａｎａｌｙｓｉｓ ｍａｄｅ ｂｙ ＰｏｗｅｒＭａｒｋ Ｖ３.０
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｆｉｖｅ ｍａｊｏｒ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’
( Ｆｉｇ . ３ ) . Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ｗｅｒｅ ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ
４１６
６期 ＸＵＭｅｉ￣ｒｏｎｇ ｅｔ ａｌ:Ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｙ Ｓｈｏｒｔ Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ ａｎｄ ＰＡＧＥ
Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔ ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ
‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’
Ｐｒｉｍｅｒ Ｆｏｒｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ / ５￣ ３ Ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｒｉｍｅｒ / ５￣ ３
Ｅｘｐｅｃｔ
ｓｉｚｅ / ｂｐ
Ｒｅｐｅａｔ ｕｎｉｔ
ｓｉｚｅ / ｂｐ
Ｐｒｉｍｅｒ ｔｙｐｅ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１ ＴＣＧＣＴＴＧＡＡＡＧＴＴＡＴＴＡＴＴＧＧＧ ＧＣＡＴＡＡＧＡＡＴＡＧＡＡＧＡＡＣＣＴＡ １８１ ４ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２ ＴＴＴＣＣＡＡＧＴＣＡＴＴＴＣＣＧ ＣＡＣＣＧＡＣＣＡＡＴＡＣＡＡＣＧ ２１９ ４ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３ ＡＴＴＣＡＴＧＧＧＡＡＧＣＧＴＡＡ ＡＴＧＣＴＣＡＧＡＡＣＡＣＴＧＣＡ ２５３ ４ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ４ ＴＴＴＴＧＧＧＡＡＧＡＧＴＴＧＣ ＴＣＴＴＴＣＧＴＴＡＴＴＴＣＴＧＧＴＡ ２０５ ４ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ５ ＡＣＡＧＧＧＡＣＧＧＴＧＡＡＡＣＡ ＴＧＣＣＴＴＧＡＣＧＣＡＡＴＣＴＡ １７６ ４ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ６ ＧＡＴＡＴＧＧＧＴＡＴＧＣＴＣＧ ＴＡＧＴＧＴＴＴＣＴＴＧＴＧＣＴＧ ２３６ ４ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ７ ＣＧＣＣＴＡＴＡＡＡＴＣＣＣＴＴ ＣＴＧＴＴＧＣＡＣＣＣＧＡＣＴ １４０ ５ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ８ ＡＡＧＧＧＡＴＴＣＴＴＡＣＴＡＴＧＴＧ ＴＣＧＴＧＣＴＧＣＴＴＴＧＴＴ ２２６ ６ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ９ ＡＣＧＡＴＴＴＡＣＡＡＧＴＴＣＡ ＡＴＴＡＴＴＧＧＧＡＧＧＧＡＡ ２４９ ６ Ｕｎｕｓａｂｌｅ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１０ ＴＧＴＡＣＧＴＴＣＧＧＡＧＡＡＧ ＧＧＴＣＴＧＴＡＴＣＴＧＧＴＧＣ ２５０ ６ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１１ ＧＴＴＴＣＡＣＡＧＴＣＣＡＡＡＡＴ ＡＡＣＧＣＡＣＡＧＡＴＡＡＧＣ ２５２ ６ Ｕｎｕｓａｂｌｅ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１２ ＧＴＴＧＣＴＴＣＧＴＴＴＡＴＣＣ ＧＣＡＴＴＣＴＧＴＧＣＣＴＣＴＴ ２３９ ７ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１３ ＧＴＡＧＧＡＧＴＣＣＣＣＧＡＡＡＴ ＧＣＣＴＧＴＡＣＧＡＧＧＴＴＴＧＡ ２４６ ７ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１４ ＴＴＴＴＧＧＡＧＧＡＡＣＴＡＡＣＧ ＴＣＡＣＡＴＧＡＡＴＡＴＧＡＡＣＣＣ ２３５ ７ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１５ ＴＧＧＧＡＧＡＴＴＣＧＴＧＡＴＧＴ ＡＴＡＧＣＣＧＴＴＧＧＡＧＧＴＡＧ ２８７ ７ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１６ ＧＴＡＣＴＡＴＧＴＴＴＡＧＣＣＴＧＴＡ ＣＴＴＣＴＡＡＴＣＡＡＴＡＧＡＣＣＣ ２２８ ８ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１７ ＡＧＧＧＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＣ ＡＴＡＡＡＡＴＣＡＡＴＧＴＧＧＣ １５５ １０ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１８ ＣＡＧＡＴＧＣＣＧＡＣＣＴＴＣ ＧＴＧＡＧＣＴＧＴＡＧＴＣＣＣＴＡＴ ２３４ １０ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１９ ＣＣＡＴＡＧＧＴＴＧＧＧＡＡＴＣ ＴＧＣＣＧＡＡＴＡＡＧＴＣＧＴＴＴ ２４７ １１ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２０ ＣＣＧＴＣＣＴＧＡＴＧＴＧＧＴ ＴＴＧＡＴＣＴＴＡＡＴＣＧＧＴＣＴＣ ２２４ １３ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２１ ＡＡＴＡＡＧＴＡＴＴＡＡＡＡＧＧＴＣＧＧ ＧＣＴＡＡＧＧＡＧＧＧＴＡＣＡＧＡＧ １９５ １３ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２２ ＧＴＡＡＡＴＧＡＴＣＣＡＣＣＡＣ ＣＡＡＡＡＣＣＡＡＧＡＴＡＧＡＣＴ １８６ １５ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２３ ＡＴＧＧＣＡＧＡＣＧＧＴＧＡＡＡＴＴ ＴＡＴＣＣＴＣＡＡＧＧＣＡＡＡＣＡＡ ２５３ １６ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２４ ＴＧＣＧＴＣＡＧＴＴＴＣＴＣＧＴＴＴ ＣＧＴＴＣＣＡＧＧＴＧＴＴＣＡＴＴＣ ２８０ １８ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２５ ＴＣＡＧＴＴＣＧＴＣＣＴＴＧＣ ＴＣＡＴＡＣＣＴＡＴＴＣＡＣＣＧＴ ２５２ ２１ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２６ ＧＧＣＡＡＧＣＣＡＴＡＣＡＡＡ ＡＡＧＡＡＡＧＣＧＴＡＡＧＣＡＡ １７８ ２１ Ｕｎｕｓａｂｌｅ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２７ ＴＧＣＣＡＣＣＧＡＡＴＡＧＡＡ ＴＡＣＡＴＣＧＴＧＴＡＡＴＡＧＡＴＧＡＡ ２２３ ２１ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２８ ＣＡＴＣＣＴＴＧＴＣＧＴＣＡＴＡＧＡＡ ＧＧＡＡＧＴＡＡＡＴＣＡＧＧＴＡＧＣＣ １７４２ ２４ꎬ ４８ꎬ ９６ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２９ ＴＣＣＡＡＧＣＴＧＴＴＡＴＣＣＡ ＧＣＧＡＡＡＴＣＡＧＴＡＴＧＣＣ １９１ ２７ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３０ ＴＴＴＣＣＴＴＴＧＧＴＴＴＣＴＴＣＴ ＣＡＣＣＡＣＣＡＣＡＡＡＣＡＴＴＡＧ １７１ ３３ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３１ ＡＴＧＡＧＴＣＧＧＧＡＣＧＧＡＡＧＧ ＣＧＧＧＣＴＡＡＣＧＣＡＣＡＡ １９２ ３９ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３２ ＴＧＡＴＡＡＣＡＡＧＣＡＣＣＴＣＴ ＣＴＡＡＴＣＴＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣ ２２９ ５７ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３３ ＴＴＴＧＴＣＣＴＧＴＡＴＴＣＧＴＡ ＡＣＴＣＣＣＣＴＣＴＴＡＴＣＡＡ ２００ ６３ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３４ ＡＣＡＴＡＡＡＣＣＣＡＡＡＣＴＡＧＣ ＧＧＣＡＴＴＧＴＴＣＴＴＧＡＣＣＧＴ ３２９ ８６ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３５ ＧＡＧＡＣＧＧＡＣＡＣＴＣＡＡＣＡ ＧＣＡＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＧＣＴ ４２９ １４７ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３６ ＡＧＡＴＡＴＴＣＣＣＡＡＡＧＣＡＣＧ ＡＴＴＴＧＧＴＴＴＧＴＣＣＧＡＡＧＧ ６６１ ２５２ Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ
Ｋｅｙ ｐｒｉｍｅｒ: Ｐｒｉｍｅｒｓ ｔｈａｔ ｐｒｏｄｕｃｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍꎻ Ｏｒｄｉｎａｒｙ ｐｒｉｍｅｒ: Ｐｒｉｍｅｒｓ ｔｈａｔ ａｍｐｌｉｆｙ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｐｒｏｄｕｃｔ ａｍｏｎｇ ａｌｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｉｎ
ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔꎻ Ｕｎｕｓａｂｌｅ ｐｒｉｍｅｒ: Ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｔａｒｇｅｔ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ.
５１６
植物病理学报 ４４卷
Ｔａｂｌｅ ３ Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ３２ ｉｓｏｌａｔｅｓ ａｎａ￣
ｌｙｚｅｄ ｕｓｉｎｇ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｓｈｏｒｔ ｔａｎ￣
ｄｅｍ ｒｅｐｅａｔ ｐｒｉｍｅｒｓ
Ｐｒｉｍｅｒ
Ｓａｍｐｌｅ
ｓｉｚｅ
Ｎｅｉ’ｓ ｇｅｎｅｔｉｃ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ (Ｈ)
Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘ ( Ｉ)
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１ ２９ ０.３８ ０.６５
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３ ３０ ０.５５ １.０５
Ｌａｓ￣ＳＴＲ４ ２８ ０.２９ ０.４７
Ｌａｓ￣ＳＴＲ５ ３０ ０.３２ ０.５０
Ｌａｓ￣ＳＴＲ７ ３２ ０.１２ ０.２３
Ｌａｓ￣ＳＴＲ８ ３２ ０.４３ ０.６２
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１２ ２９ ０.６８ １.３４
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１３ ３２ ０.８１ １.９０
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１４ ２５ ０.４４ ０.７８
Ｌａｓ￣ＳＴＲ１８ ３２ ０.５５ １.０４
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２２ ２８ ０.１９ ０.３４
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２７ ２５ ０.２１ ０.３７
Ｌａｓ￣ＳＴＲ２９ ３２ ０.０６ ０.１４
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３０ ２１ ０.０９ ０.１９
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３１ ２４ ０.７５ １.４９
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３２ ３２ ０.１２ ０.２３
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３３ ３２ ０.４５ ０.６４
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３４ ３２ ０.１２ ０.２３
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３５ ３０ ０.５０ ０.６９
Ｌａｓ￣ＳＴＲ３６ ３１ ０.５０ ０.６９
Ｍｅａｎ ３０ ０.２４ ０.４３
Ｓａｍｐｌｅ ｓｉｚｅ: Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｂａｎｄｓ
ｕｓｅｄ ｆｏｒ ａｎａｌｙｓｉｓ.
ｉｎｔｏ ａ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｇｒｏｕｐ (Ｇｒｏｕｐ ＩＶ) . Ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ ｃｏｎ￣
ｔａｉｎ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｍａｉｎｌｙ ｆｒｏｍ ｎｅｉｇｈｂｏｒ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ: Ｇｒｏｕｐ
Ｉ ( ｆｒｏｍ Ｆｕｊｉａｎ ａｎｄ Ｊｉａｎｇｘｉ )ꎬ Ｇｒｏｕｐ ＩＩＩ ( ｆｒｏｍ
Ｇｕａｎｇｘｉ ａｎｄ Ｙｕｎｎａｎ)ꎬ ａｎｄ Ｇｒｏｕｐ Ｖ ( ｆｒｏｍ Ｊｉａｎｇｘｉ
ａｎｄ Ｚｈｅｊｉａｎｇ) . Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ３ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｃｌｕｓ￣
ｔｅｒｅｄ ｉｎｔｏ Ｇｒｏｕｐ ＩＩ. Ｍｏｓｔ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｉｎ ｔｈｉｓ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ
ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｓｅａｓｅｄ ｐｕｍｍｅｌ ｔｒｅｅｓ. Ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
ｏｆ ‘ Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ ’ . Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ
ｇｒｏｕｐｉｎｇ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｗａｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｇｅｏ￣
ｇｒａｐｈｉｃ ｏｒｉｇｉｎｓ ａｎｄ ｃｉｔｒｕｓ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ. Ｐｓｙｌｌｉｄ ｔｒａｎｓｍｉｓ￣
ｓｉｏｎ ｗａｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｏ ｅｘｐｌａｉｎ ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒ ‘Ｃａ. Ｌ.
ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｎｅｉｇｈｂｏｒ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ.
３ Ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ
Ｔｈｒｅｅ ｓｐｅｃｉｅｓꎬ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ꎬ ‘ Ｃａ. Ｌ.
ａｍｅｒｉｃａｎｕｓ’ ａｎｄ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｆｒｉｃａｎｕｓ’ ｗｅｒｅ ｒｅｓｐｏｎｓｉ￣
ｂｌｅ ｆｏｒ ＨＬＢ ｄｉｓｅａｓｅ. Ｍｏｓｔ ｓｔｕｄｉｅｓ ｆｏｃｕｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎ￣
ｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ｓｐｐ.’ꎬ ｏｒ ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉ￣
ｆｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ‘ Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ [１０ꎬ １２ꎬ １７ꎬ ２１ꎬ ２３] . Ｆｅｗ ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｓ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｔｈｅ
ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｉｓ ｂａｃｔｅｒｉａ ｗｉｔｈｉｎ ｏｎｅ ｃｏｕｎｔｒｙ
ｏｒ ｐｒｏｖｉｎｃｅ [１３] . Ｌｉｍｉｔｅｄ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｒ ＳＴＲ ｓｉｔｅｓ ｗｅｒｅ
ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｍｏｓｔ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ. Ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅꎬ １６Ｓ
ｒＤＮＡ ａｎｄ １６Ｓ / ２３Ｓ ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ ｒｅｇｉｏｎ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ
ｃｏｕｌｄ ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ ｏｎｌｙ ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｒ ‘Ｃａ.
Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ
[１０ꎬ １５ꎬ ２９] . Ｔｈｅ ｏｍｐ ｇｅｎｅｓ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｗｉｔｈ￣
ｉｎ ｏｎｅ ｃｏｕｎｔｒｙ ｗｅｒｅ ｕｓｕａｌｌｙ ｈｉｇｈｌｙ ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ[２０] .
Ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｏｕｒ ｓｔｕｄｙꎬ Ｉｓｌａｍ ｅｔ ａｌ. [２７] ｕｓｅｄ ｓｅｖｅｎ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｍａｒｋｅｒｓ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ２８７
ｉｓｏｌａｔｅｓꎬ ｂｕｔ ｍａｉｎｌｙ ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ ｔｈａｔ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃ￣
ｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｅｘｉｓｔｅｄ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ. Ｃｈｉｎａ ｈａｓ ａ
ｌｏｎｇ ｃｉｔｒｕｓ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｈｉｓｔｏｒｙ ａｎｄ ｃｉｔｒｕｓ ＨＬＢ ｈｉｓｔｏｒｙ.
‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓ ｗｉｄｅｌｙ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｉｎ １１ ｏｆ ｔｈｅ
１８ ｃｉｔｒｕｓ ｇｒｏｗｉｎｇ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｏｒ ｍｕｎｉｃｉｐａｌｉｔｉｅｓ. Ｔｈｅｒｅ￣
ｆｏｒｅꎬ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ‘Ｃａ.
Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ
Ｃｈｉｎａ ｉｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆｏｒ ｕｓ ｔｏ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒ￣
ｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ＨＬＢ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｉｓ
ｓｔｕｄｙ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈｅ ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＳＴＲ￣ＰＡＧＥ ｉｎ
ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ.
Ｓｅｖｅｒａｌ ｅｆｆｏｒｔｓ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｍａｄｅ ｔｏ ｒｅｖｅａｌ ｇｅｎｅｔｉｃ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ‘Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ . Ｏｆ ｔｈｅｍꎬ Ｋａｔｏｈ ｅｔ
ａｌ. [２６] ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ４ ｌｏｃｉ ｗｉｔｈ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｌａｒ￣
ｇｅｒ ｓｉｚｅ ｏｆ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ. Ｍｏｒｅｏｖｅｒꎬ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｐｒｏｃｅ￣
ｄｕｒｅｓ ａｒｅ ｕｓｕａｌｌｙ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｃｈｉｅｖｅ ｈｉｇｈ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｔａｎ￣
ｄｅｍ ｒｅｐｅａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ. Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｌｙꎬ ｔｈｅ ＰＣＲ￣
ＰＡＧＥ ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｉｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅꎬ ｓｉｍｐｌｅꎬ ａｎｄ
ｅｃｏｎｏｍｉｃａｌ. Ｈｏｗｅｖｅｒꎬ ｉｔ ｓｔｉｌｌ ｈａｓ ｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓ.
Ｓｏｍｅ ＤＮＡ ｂａｎｄｓ ( ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅꎬ ＳＴＲ１２) ａｒｅ ｔｏｏ
ｆａｉｎｔ ｔｏ ｒｅａｄꎬ ｌｅａｄｉｎｇ ｔｏ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔｙ ｉｎ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｄｅｔｅｒ
ｍｉｎａｔｉｏｎ. Ｐｒｉｍｅｒｓ ａｒｅ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｄｕｅ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｖｏｌｖｅ￣
ｍｅｎｔ ｏｆ ｓｈｏｒｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ. Ｔｈｅ ａｍｐｌｉｃｏｎｓ ｌａｒｇｅｒ ｔｈａｎ
５００ ｂｐ ａｒｅ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ ｔｏ ｂｅ ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｅｄ.
６１６
６期 ＸＵＭｅｉ￣ｒｏｎｇ ｅｔ ａｌ:Ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｙ Ｓｈｏｒｔ Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ ａｎｄ ＰＡＧＥ
Ｆｉｇ. ３ Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ
ｆｒｏｍ ｓｉｘ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ ｂｙ ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ＹＮ: Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｙｕｎｎａｎ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＦＪ: Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｆｕｊｉａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＪＸ: Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｊｉａｎｇｘｉ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ
ＧＸ: Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｕａｎｇｘｉ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＺＪ: Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｚｈｅｊｉａｎｇ ｐｒｏｖｉｎｃｅꎻ ＧＤ: Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ｐｒｏｖｉｎｃｅ.
Ｉｔ ｉｓ ｅｘｐｅｃｔｅｄ ｔｈａｔ ‘ Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ ’ ｗａｓ
ｓｐｒｅａｄ ｆｒｏｍ ｏｎｅ ｌｏｃａｔｉｏｎ ｔｏ ａｎｏｔｈｅｒ ｉｎ Ｃｈｉｎａ. Ｉｓｏ￣
ｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ６ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ ｉｎｔｏ ５ ｓｕｂ￣
ｇｒｏｕｐｓ. Ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ⅰꎬ Ⅲꎬ ｏｒ Ⅴ ｗｅｒｅ ｆｒｏｍ
ｎｅｉｇｈｂｏｒ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓꎬ ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇ ｔｈｅ ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ
ｍｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ “Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ” . Ｂｅｓｉｄｅｓꎬ ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ
ｏｆ ＳＴＲ ｌｏｃｉ ａｒｅ ｐｒｏｂａｂｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｂａｃｔｅｒｉａｌ
ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ａｄａｐｔａｔｉｏｎ. Ｔｈｉｓ ｍａｙ ｅｘｐｌａｉｎ ｔｈｅ
ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ＳＴＲ ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ ｌｏｃａｔｉｏｎｓ. Ｏｕｒ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｓｅｅｍｓ
ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｒｏｂｕｓｔ ｆｒａｍｅｗｏｒｋ ｆｏｒ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ
ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ
ｏｆ ＨＬＢ.
ＨＬＢ ｗａｓ ｆｉｒｓｔ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ａｎｄ ｓｔｕｄｉｅｄ ｉｎ Ｇｕａｎｇ￣
ｄｏｎｇ[１ꎬ ７ꎬ ３０]ꎬ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｊｏｒ ｃｉｔｒｕｓ￣ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ
ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａꎬ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｓｐｒｅａｄ ｆｒｏｍ ｓｏｕｔｈ ｔｏ
ｎｏｒｔｈ ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ａｎｄ ｎｏｗ ｐｒｅｓｅｎｔ ｉｎ ａｌｌ １２ ｐｒｅ￣
ｆｅｃｔｕｒｅ ｃｉｔｉｅｓ [３１] . Ｉｎ ｏｕｒ ｒｅｃｅｎｔ ｓｔｕｄｙ [３２]ꎬ “Ｃａ. Ｌ.
ａｓｉａｔｉｃｕｓ” ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ｗａｓ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ
ｔｏ ｂｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｒｏｍ ｔｈａｔ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｓｅｖｅｎ
ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ. Ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｌｙꎬ ａｌｌ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗｅｒｅ
ｉｎ ｏｎｅ ｃｌｕｓｔｅｒ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ. Ｂｕｔ ｉｔ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｎｏｔｅｄ
ｔｈａｔ ｓａｍｐｌｅ ｓｉｚｅ ｆｒｏｍ ｅａｃｈ ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｉｓ
ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｓｍａｌｌ. Ｔｈｅ ｒｏｂｕｓｔｎｅｓｓ ｏｆ ｔｈｉｓ ＳＴＲ￣ＰＡＧＥ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｍａｙ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｔｏｏｌ ｔｏ ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｎ￣
ｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ “Ｃａ. Ｌ. ａｓｉａｔｉｃｕｓ” ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｖａｒｉａｔｉｏｎ
７１６
植物病理学报 ４４卷
ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ｗｉｔｈ ｍｏｒｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｆｒｏｍ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｅｇｉｏｎｓ ａｎｄ ｃｉｔｒｕｓ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ.
Ａｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅｍｅｎｔｓ
Ｗｅ ａｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅ Ｄｒ. Ｊｉａｎｃｈｉ Ｃｈｅｎ ｆｒｏｍ Ｕｎｉｔｅｄ
Ｓｔａｔｅｓ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅꎬ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅ￣
ｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅꎬ ｆｏｒ ｅｄｉｔｏｒｉａｌ ａｓｓｉｓｔａｎｃｅ. Ｗｅ ｗｏｕｌｄ
ｌｉｋｅ ｔｏ ｔｈａｎｋ Ｄｒ. Ｊｉａｎｌｏｎｇ Ｘｕ ( Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｒｏｐ Ｓｃｉ￣
ｅｎｃｅꎬ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ)
ｆｏｒ ｄａｔａ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｓｓｉｓｔａｎｃｅ. Ｔｈｉｓ ｗｏｒｋ ｉｓ ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ
ｂｙ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ
ｏｆ Ｃｈｉｎａ (２０１００３０６７) ａｎｄ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ
Ｆｕｎｄ ( ３１２０１４８０ ) ｂｙ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ
Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ (ＮＳＦＣ) .
Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ
[１] Ｒｅｉｎｋｉｎｇ Ｏ Ａ. Ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ ｅｃｏｎｏｍｉｃ ｐｌａｎｔｓ ｉｎ ｓｏｕｔｈｅｒｎ
Ｃｈｉｎａ [ Ｊ] . Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｉｓｔꎬ １９１９ꎬ ８: １０９ －
１３４.
[２] Ｊａｇｏｕｅｉｘ Ｓꎬ Ｂｏｖｅ Ｊ Ｍꎬ Ｇａｒｎｉｅｒ Ｍ. Ｔｈｅ ｐｈｌｏｅｍ￣ｌｉｍｉ￣
ｔｅｄ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｏｆ ｇｒｅｅｎｉｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ ｉｓ ａ ｍｅｍｂｅｒ
ｏｆ ｔｈｅ α ｓｕｂｄｉｖｉｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ [Ｊ] . Ｉｎｔｅｒｎａ￣
ｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙꎬ １９９４ꎬ ４４:
３７９－３８６.
[３] Ｍｕｒｒａｙ Ｒꎬ Ｓｃｈｌｅｉｆｅｒ Ｋ. Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｎｏｔｅｓ: ａ ｐｒｏｐｏｓａｌ
ｆｏｒ ｒｅｃｏｒｄｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｔａｘａ ｏｆ ｐｒｏ￣
ｃａｒｙｏｔｅｓ [ Ｊ ] . Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃꎬ
１９９４ꎬ ４４: １７４－１７６.
[４] Ｇａｒｎｉｅｒ Ｍꎬ Ｊａｇｏｕｅｉｘ－Ｅｖｅｉｌｌａｒｄ Ｓꎬ Ｃｒｏｎｊｅ Ｐ Ｒꎬ ｅｔ ａｌ.
Ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｐｒｅｓｅｎｔ ｉｎ ａｎ
ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ ｒｕｔａｃｅｏｕｓ ｔｒｅｅꎬ Ｃａｌｏｄｅｎｄｒｕｍ ｃａｐｅｎｓｅꎬ ｉｎ
ｔｈｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｃａｐｅ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｏｆ Ｓｏｕｔｈ Ａｆｒｉｃａ. Ｐｒｏｐｏｓａｌ
ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｆｒｉｃａｎｕｓ ｓｕｂｓｐ. ｃａｐｅｎｓｉｓ’
[ Ｊ ] . Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ａｎｄ
Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ ２０００ꎬ ５０: ２１１９－２１２５.
[５] Ｔｅｘｅｉｒａ Ｄ Ｃꎬ Ａｙｒｅｓ Ｊꎬ Ｋｉｔａｊｉｍａ Ｅꎬ ｅｔ ａｌ. Ｆｉｒｓｔ ｒｅｐｏｒｔ
ｏｆ ａ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ￣ｌｉｋｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ ｉｎ Ｓａｏ Ｐａｕｌｏ
Ｓｔａｔｅꎬ Ｂｒａｚｉｌ ａｎｄ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｓｐｅ￣
ｃｉｅｓꎬ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｍｅｒｉｃａｎｕｓ’ꎬ ｗｉｔｈ ｔｈｅ
ｄｉｓｅａｓｅ [Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅꎬ ２００５ꎬ ８９: １０７－１０７.
[６] Ｇｏｔｔｗａｌｄ Ｔ Ｒ. Ｃｕｒｒｅｎｔ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ
ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ [Ｊ] . Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｐｈｙｔｏ￣
ｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２０１０ꎬ ４８: １１９－１３９.
[７] Ｌｉｎ Ｋ Ｈ. Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ ｏｎ ｙｅｌｌｏｗ ｓｈｏｏｔ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ. Ｅｔｉｏ￣
ｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｙｅｌｌｏｗ ｓｈｏｏｔ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ (植物病理学报)ꎬ
１９５６ꎬ ２: １－４２.
[８] Ｄｅｎｇ Ｘ Ｌꎬ Ｔａｎｇ Ｗ Ｗ. Ｔｈｅ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ
ｒｅａｃｔｉｏｎ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [ Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ (华南农业大学学报)ꎬ １９９６ꎬ
１７(３): １１９－１２０.
[９] Ｔｉａｎ Ｙ Ｎꎬ Ｋｅ Ｓꎬ Ｋｅ Ｃ. Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ
ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅ￣
ａｃｔｉｏｎ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ
(植物病理学报)ꎬ １９９６ꎬ ２６(３): ２４３－２５０.
[１０] Ａｄｋａｒ－Ｐｕｒｕｓｈｏｔｈａｍａ Ｃ Ｒꎬ Ｑｕａｇｌｉｎｏ Ｆꎬ Ｃａｓａｔｉ Ｐꎬ ｅｔ
ａｌ. Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｍｏｎｇ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ
ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒ￣
ｐｈｉｓｍｓ ｉｎ １６Ｓ ｒＲＮＡ ａｎｄ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅｓ [Ｊ] .
Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ ２００９ꎬ ５９: ６８１－６８８.
[１１] Ｈｕ Ｗ Ｚꎬ Ｗａｎｇ Ｘ Ｆꎬ Ｚｈｏｕ Ｙꎬ ｅｔ ａｌ. Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ
ｏｍｐ ｇｅｎｅ ｉｎ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ
[Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２０１１ꎬ ９３: ２１１－２１４.
[１２] Ｂａｓｔｉａｎｅｌ Ｃꎬ Ｇａｒｎｉｅｒ￣Ｓｅｍａｎｃｉｋ Ｍꎬ Ｒｅｎａｕｄｉｎ Ｊꎬ ｅｔ ａｌ.
Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ‘ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓꎬ’
ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｏｍｐ ｇｅｎｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ [Ｊ] . Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎ￣
ｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ ２００５ꎬ ７１: ６４７３－６４７８.
[１３] Ｆｕｒｕｙａ Ｎꎬ Ｍａｔｓｕｋｕｒａ Ｋꎬ Ｔｏｍｉｍｕｒａ Ｋꎬ ｅｔ ａｌ. Ｓｅ￣
ｑｕｅｎｃｅ ｈｏｍｏｇｅｎｅｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ψｓｅｒＡ￣ｔｒｍＵ￣ｔｕｆＢ￣ｓｅｃＥ￣
ｎｕｓＧ￣ｒｐｌＫＡＪＬ￣ｒｐｏＢ ｇｅｎｅ ｃｌｕｓｔｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｌａｎｋｉｎｇ ｒｅ￣
ｇｉｏｎｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ａ￣
ｒｏｕｎｄ Ｏｋｉｎａｗａ ｍａｉｎ ｉｓｌａｎｄ ｉｎ Ｊａｐａｎ [ Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｇｅｎｅｒａｌ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２０１０ꎬ ７６: １２２－１３１.
[１４] Ｇｈｏｓｈ Ｄꎬ Ｂｈｏｓｅ Ｓꎬ Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ Ｋꎬ ｅｔ ａｌ. Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ
ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ＤＮＡ ｆｒｏｍ
Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ (ＨＬＢ) ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｉｎｄｉａ [ Ｊ] .
Ｐｈｙｔｏｐａｒａｓｉｔｉｃａꎬ ２０１３: １－１１.
[１５] Ｊａｇｏｕｅｉｘ Ｓꎬ Ｂｏｖｅ Ｊ Ｍꎬ Ｇａｒｎｉｅｒ Ｍ. Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｅ
１６Ｓ / ２３Ｓ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ
Ｌｉｂｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｍ’ ａｎｄ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｏｂａｃｔｅｒ
ａｆｒｉｃａｎｕｍꎬ’ ｔｈｅ ｔｗｏ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｔｒｕｓ
ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ ( ｇｒｅｅｎｉｎｇ) ｄｉｓｅａｓｅ [ Ｊ] . Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙꎬ １９９７ꎬ ４７: ２２４－２２７.
８１６
６期 ＸＵＭｅｉ￣ｒｏｎｇ ｅｔ ａｌ:Ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｂｙ Ｓｈｏｒｔ Ｔａｎｄｅｍ Ｒｅｐｅａｔｓ ａｎｄ ＰＡＧＥ
[１６] Ｔｏｍｉｍｕｒａ Ｋꎬ Ｍｉｙａｔａ Ｓ￣ｉꎬ Ｆｕｒｕｙａ Ｎꎬ ｅｔ ａｌ. Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ
ｏｆ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｍｏｎｇ ‘ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ
ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｉｎ Ｓｏｕｔｈｅａｓｔ Ａｓｉａ [ Ｊ] .
Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２００９ꎬ ９９: １０６２－１０６９.
[１７] Ｓｕｂａｎｄｉｙａｈ Ｓꎬ Ｉｗａｎａｍｉ Ｔꎬ Ｔｓｕｙｕｍｕ Ｓꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｏｍ￣
ｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ １６Ｓ ｒＤＮＡ ａｎｄ １６Ｓ / ２３Ｓ ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ ｒｅｇｉｏｎ
ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ａｍｏｎｇ ｃｉｔｒｕｓ ｇｒｅｅｎｉｎｇ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ ｉｎ Ａｓｉａ
[Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅꎬ ２０００ꎬ ８４: １５－１８.
[１８] Ｓｈａｎ Ｚ Ｊꎬ Ｆｅｎｇ Ｚꎬ Ｚｈｏｕ Ｇꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｓｅ￣
ｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ １６Ｓ ｒＤＮＡ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ
ａｇｅｎｔｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｆｉｖｅ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｉｎ ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ ( ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉ￣
ｖｅｒｓｉｔｙ (华南农业大学学报)ꎬ ２００８ꎬ ２９(２): ２５－２９.
[１９] Ｋｏｎｇ Ｗ Ｗꎬ Ｄｅｎｇ Ｘ Ｌꎬ Ｌｉａｎｇ Ｚ Ｈꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ
ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ ｐａｔｈｏｇｅｎ ＤＮＡ
( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [ Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ (植
物病理学报)ꎬ ２０００ꎬ ３０(１): ７１－７５.
[２０] Ｗａｎｇ Ｚ Ｚꎬ Ｚｈｏｕ Ｂ Ｂꎬ Ｔｉａｎ Ｓ Ｃꎬ ｅｔ ａｌ. Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒ￣
ｓｉｔｙ ｏｆ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ ｒｅｇｉｏｎｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ (植物病理学报)ꎬ
２００９ꎻ ３９ (６): ５９３－５９９.
[２１] Ｔｅｉｘｅｉｒａ Ｄꎬ Ｅｖｅｉｌｌａｒｄ Ｓꎬ Ｓｉｒａｎｄ￣Ｐｕｇｎｅｔ Ｐ ｅｔ ａｌ. Ｔｈｅ
ｔｕｆＢ￣ｓｅｃＥ￣ｎｕｓＧ￣ｒｐｌＫＡＪＬ￣ｒｐｏＢ ｇｅｎｅ ｃｌｕｓｔｅｒ ｏｆ ｔｈｅ
ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒｓ: ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓꎬ ｐｈｙｌｏｇｅｎｙ ａｎｄ
ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ [Ｊ] . Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ａｎｄ
Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ ２００８ꎬ ５８: １４１４－１４２１.
[２２] Ｄｕａｎ Ｙ Ｐꎬ Ｚｈｏｕ Ｌ Ｊꎬ Ｈａｌｌ Ｄ Ｇꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｇｅ￣
ｎｏｍｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉｕｍꎬ
‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ
ｍｅｔａｇｅｎｏｍｉｃｓ [ Ｊ] . Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｌａｎｔ￣Ｍｉｃｒｏｂｅ Ｉｎｔｅｒａｃ￣
ｔｉｏｎｓꎬ ２００９ꎬ ２２: １０１１－１０２０.
[２３] Ｃｈｅｎ Ｊ Ｃꎬ Ｄｅｎｇ Ｘ Ｌꎬ Ｓｕｎ Ｘꎬ ｅｔ ａｌ. Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ａｎｄ
Ｆｌｏｒｉｄａ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃ￣
ｕｓ’ ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｅｄ ｂｙ ａ ｇｅｎｏｍｉｃ ｌｏｃｕｓ ｗｉｔｈ ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ
ｒｅｐｅａｔｓ [Ｊ] . Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２０１０ꎬ １００(６): ５６７－５７２.
[２４] Ｌｉｕ Ｒꎬ Ｚｈａｎｇ Ｐꎬ Ｐｕ Ｘ Ｌꎬ ｅｔ ａｌ. Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａ
ｐｒｏｐｈａｇｅ ｇｅｎｅ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｖａｒｉａｔｉｏｎ
ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｆｒｏｍ ｔｗｏ ｃｉｔｒｕｓ￣
ｇｒｏｗｉｎｇ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ [Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅꎬ ２０１１ꎬ
９５: ４３１－４３５.
[２５] Ｚｈｏｕ Ｌ Ｊꎬ Ｐｏｗｅｌｌ Ｃ Ａꎬ Ｈｏｆｆｍａｎ Ｍ Ｔꎬ ｅｔ ａｌ. Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ａｎｄ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎ ａｎｄ ｉｎ￣
ｓｅｃｔ ｓｙｍｂｉｏｎｔ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ａｓ
ｒｅｖｅａｌｅｄ ｂｙ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｐｒｏｐｈａｇｅ ｇｅｎｅｓ ｗｉｔｈ ｉｎｔｒａ￣
ｇｅｎｉｃ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ [ Ｊ] . Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ２０１１ꎬ ７７: ６６６３－６６７３.
[２６] Ｋａｔｏｈ Ｈꎬ Ｓｕｂａｎｄｉｙａｈ Ｓꎬ Ｔｏｍｉｍｕｒａ Ｋꎬ ｅｔ ａｌ. Ｄｉｆｆｅｒｅｎ￣
ｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｓｏｌａｔｅｓ
ｂｙ ｖａｒｉａｂｌｅ￣ｎｕｍｂｅｒ ｔａｎｄｅｍ￣ｒｅｐｅａｔ ａｎａｌｙｓｉｓ [ Ｊ] . Ａｐ￣
ｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ ２０１１ꎬ ７７:
１９１０－１９１７.
[２７] Ｉｓｌａｍ Ｍ￣Ｓꎬ Ｇｌｙｎｎ Ｊ Ｍꎬ Ｂａｉ Ｙꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｕｌｔｉｌｏｃｕｓ
ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ‘ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ
ａｓｉａｔｉｃｕｓ ’ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ
ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ [Ｊ] . ＢＭＣ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ ２０１２ꎬ １２: ３９.
[２８] Ｂｅｎｓｏｎ Ｇ. Ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ ｆｉｎｄｅｒ: ａ ｐｒｏｇｒａｍ ｔｏ ａｎａ￣
ｌｙｚｅ ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ [ Ｊ ] Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
１９９９ꎬ ２７(２): ５７３－５８０.
[２９] Ｄｉｎｇ Ｆꎬ Ｄｅｎｇ Ｘ Ｘꎬ Ｈｏｎｇ Ｎꎬ ｅｔ ａｌ. Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙ￣
ｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ (ＨＬＢ) ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂａｓｅｄ
ｏｎ ｔｈｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ １６Ｓ ｒＤＮＡ ａｎｄ １６Ｓ / ２３Ｓ ｒＤＮＡ ｉｎ￣
ｔｅｒｇｅｎｉｃ ｒｅｇｉｏｎｓ ａｍｏｎｇ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ [Ｊ] . Ｅｕｒｏｐｅａｎ
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２００９ꎬ １２４: ４９５－５０３.
[３０] Ｃｈｅｎ Ｑ Ｐ. １９４３. Ａ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ａ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｙｅｌｌｏｗ ｓｈｏｏｔ
ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ ｉｎ Ｃｈａｏｓｈａｎ [ Ｊ] . Ｎｅｗ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ
Ｑｕａｒｔｅｒｌｙ Ｂｕｌｌｅｔｉｎꎬ ３: １４２－１７７.
[３１] Ｄｅｎｇ Ｘ Ｌꎬ Ｇａｏ Ｙ Ｄꎬ Ｃｈｅｎ Ｊ Ｃꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｕｒｅｎｔ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ
ｏｆ ‘Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇꎬ
Ｃｈｉｎａꎬ ｗｈｅｒｅ ｃｉｔｒｕｓ Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ ｗａｓ ｆｉｒｓｔ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ
[Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅꎬ ２０１２ꎬ １１(３):
４２４－４２９.
[３２] Ｍａ Ｗ Ｑꎬ Ｌｉａｎｇ Ｍ Ｄꎬ Ｇｕａｎ Ｌꎬ ｅｔ ａｌ. Ｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ
ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ‘ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ
Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ ａｓｉａｔｉｃｕｓ’ ｉｎ ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｃｈｉｎａ [Ｊ] . Ｐｈｙｔｏｐａ￣
ｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２０１４ꎬ １０４(２): １５８－１６２.
责任编辑:李晖
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