全 文 ：植物病理学报
ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ　 ４３(４): ４４４￣４４８(２０１３)
收稿日期: ２０１２￣０７￣０８ꎻ 修回日期: ２０１３￣０３￣１０
基金项目: 国家自然科学基金资助项目(３０８７０２７４)
通讯作者: 郑经武ꎬ教授ꎬ主要从事植物线虫学及线虫病害研究ꎻ Ｔｅｌ: ０５７１￣８８９８２５８０ꎬ Ｅ￣ｍａｉｌ: ｊｗｚｈｅｎｇ＠ｚｊｕ. ｅｄｕ. ｃｎꎮ
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研究简报
４ 种短体线虫形态及 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ的 ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ鉴定
李戌清１ꎬ２ꎬ 郑经武１∗
( １浙江大学农业与生物技术学院ꎬ 杭州 ３１００５８ꎻ ２ 杭州市农业科学研究院ꎬ 杭州 ３１００２４)
Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｕｒ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｓｐｅｃｉｅｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ ｏｆ
ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ　 ＬＩ Ｘｕ￣ｑｉｎｇ１ꎬ２ꎬ ＺＨＥＮＧ Ｊｉｎｇ￣ｗｕ１ 　 ( １Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ
Ｈａｎｇｚｈｏｕ ３１００５８ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２Ｈａｎｇｚｈｏｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｈａｎｇｚｈｏｕ ３１００２４ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｓꎬ ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ ａｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｏｆ ｒＤＮＡ ＩＴＳ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｆｏｕｒ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｐｏｐｕ￣
ｌａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ Ｚｈｅｊｉａｎｇ ａｎｄ Ｈａｉｎａｎ ｉｎ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｗｅｒｅ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ. Ｆｏｕｒ ｓｐｅｃｉｅｓꎬ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｃｏｆｆｅａｅꎬ Ｐ. ｓｃｒｉｂ￣
ｎｅｒｉꎬ Ｐ. ｖｕｌｎｕｓ ａｎｄ Ｐ. ｚｅａｅꎬ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ. ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆ ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ ｗｅｒｅ １ ２４８ ｂｐꎬ １ １２７ ｂｐꎬ ９１５ ｂｐ ａｎｄ
９０４ ｂｐ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. ＲＦＬＰ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｖａｒｉｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｓｐｅｃｉｅｓ. Ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｘ ｅｎｚｙｍｅｓꎬ ＡｌｕⅠꎬ
ＣｆｏⅠꎬ ＤｄｅⅠꎬ Ｈｉｎｄ Ⅲꎬ ＨｐａⅡａｎｄ ＰｓｔⅠꎬ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｉｓ ｆｏｕｒ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｓｐｅｃｉｅｓ.
Ｔｈｉｓ ｉｓ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ Ｐ. ｃｏｆｆｅａｅꎬ Ｐ. ｓｃｒｉｂｎｅｒｉ ａｎｄ Ｐ. ｖｕｌｎｕｓ ｉｎ Ｚｈｅｊｉａｎｇ ｐｒｏｖｉｎｃｅ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙꎻ ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ ｏｆ ＩＴＳꎻ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｓｐｐ.
文章编号: ０４１２￣０９１４(２０１３)０４￣０４４４￣０５
　 　 短体线虫隶属于垫刃目(Ｔｙｌｅｎｃｈｉｄａ Ｔｈｏｒｎｅꎬ
１９４９)ꎬ垫刃亚目(Ｔｙｌｅｎｃｈｉｎａ Ｃｈｉｔｗｏｏｄꎬ １９５０)ꎬ短
体科 ( Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｉｄａｅ Ｔｈｏｒｎｅꎬ １９４９ )ꎬ短体亚科
(Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｉｎａｅ Ｔｈｏｒｎｅꎬ １９４９)ꎬ短体线虫属(Ｐｒａ￣
ｔｙｌｅｎｃｈｕｓ Ｆｉｌｉｐｊｅｖꎬ １９３６)ꎬ是一类重要的迁移性内
寄生植物病原线虫 [１]ꎮ 国内外已报道该属线虫百
余种ꎮ 其中我国已报道种类有 Ｐ. ａｌｌｅｎｉ、 Ｐ. ａｒｔｅｍｉ￣
ｓｉａｅ、 Ｐ. ｃｏｆｆｅａｅ、 Ｐ. ｃｒｅｎａｔｕ、 Ｐ. ｃｒｕｃｉｆｅｒｕｓ、 Ｐ. ｄｉ￣
ｏｓｃｏｒｅａｅ、 Ｐ. ｈｅｘｉｎｃｉｓｕｓ、 Ｐ. ｌｏｏｓｉ、 Ｐ. ｐｅｎｅｔｒａｎｓ、 Ｐ.
ｐｒａｔｅｎｓｉ、 Ｐ. ｎｅｇｌｅｃｔｕｓ、 Ｐ. ｐｅｎｅｔｒａｎｓ、 Ｐ. ｓｃｒｉｂｎｅｒｉ、
Ｐ. ｔｈｏｒｎｅｉ、 Ｐ. ｖａｒｉｃａｕｄａｔｕｓ、 Ｐ. ｖｕｌｎｕｓ 及 Ｐ. ｚｅａｅ １７
种ꎮ 近年来ꎬ随着世界各地贸易往来日益频繁ꎬ植
物线虫的传播机会大大增加ꎬ我国口岸也先后从进
境植物根围截获 Ｐ. ｂｒａｃｈｙｕｒｕｓ、 Ｐ. ｎｅｇｌｅｃｔｕｓ、 Ｐ. ｚｅ￣
ａｅ、 Ｐ. ｃｏｆｆｅａｅ、 Ｐ. ｐｅｎｅｔｒａｎｓ、 Ｐ. ｐｉｎｇｕｉｃａｕｄａｔｕｓ等ꎮ
基于本类群线虫的重要性和国内以往的鉴定都主
要单纯依据形态学特征ꎬ本研究结合形态学和
ｒＤＮＡ的 ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ及序列分析技术对浙江和海南
不同寄主上植物线虫调查时发现的 ４ 个短体线虫
群体进行了鉴定ꎮ
１　 材料与方法
１. １　 材料
土壤样品采集于浙江和海南不同的寄主植物
根围(表 １)ꎬ每个样品约 １ ０００ ｇꎬ取样深度 １０ ~
３０ ｃｍꎮ
１. ２　 方法
采用改良的 Ｂｒｏｗｎ ＆Ｂｏａｇ分筛法[２]分离供试
土壤样品中线虫ꎬ体视显微镜下挑取短体线虫ꎬ经
温热杀死后制片ꎬ在徕卡研究显微镜 (ＣＴＲ５０００
型)下进行形态观察和测量ꎬ按 ｄｅ Ｍａｎ 公式计测
形态测量值等ꎮ
参照 Ｊｉａｎｇ等[３]方法提取线虫 ＤＮＡꎬ对其 ＩＴＳ
　
　 ４ 期 　 　 李戌清ꎬ等:４ 种短体线虫形态及 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ的 ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ鉴定
Ｔａｂｌｅ １　 Ｓｐｅｃｉｅｓꎬ ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｃｏｄｅ ｏｆ ｎｅｍａｔｏｄｅｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ
Ｃｏｄｅ Ｓｐｅｃｉｅｓ Ｏｒｉｇａｎ Ｈｏｓｔｓ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ
１ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｃｏｆｆｅａｅ Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｊｉａｎｄｅ Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ ＪＱ９６６８９０
２ Ｐ. ｓｃｒｉｂｎｅｒｉ Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｈａｎｇｚｈｏｕ Ｐｏａ ｐｒａｔｅｎｓｉｓ ＪＱ９６６８９１
３ Ｐ. ｖｕｌｎｕｓ Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｈａｎｇｚｈｏｕ Ｏｓｍａｎｔｈｕｓ ｆｒａｇｒａｎａ ＪＱ９６６８９２
４ Ｐ. ｚｅａｅ Ｈａｉｎａｎ Ｄａｎｚｈｏｕ Ｓａｃｃｈａｒｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｒｕｍ ＪＱ９６６８９３
５ Ｐ. ｃｏｆｆｅａｅ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＦＪ７９９１１９
６ Ｐ. ｖｕｌｎｕｓ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＦＲ６９２３２２
７ Ｐ. ｚｅａｅ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＪＮ０２０９３５
８ Ｐ. ａｇｉｌｉｓ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＪＱ０３９３３０
９ Ｐ. ｌｏｏｓｉ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＦＪ７９９１１８
１０ Ｐ. ｂｒａｃｈｙｕｒｕｓ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＪＮ０２０９２７
１１ Ｐ. ｎｅｇｌｅｃｔｕｓ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＦＲ６９２２９７
１２ Ｐ. ｐｅｎｅｔｒａｎｓ ＧｅｎＢａｎｋ ￣￣ ＦＪ７９９１１７
区进行 ＲＣＲ 扩增和分析ꎮ ＰＣＲ 反应体系为 ２. ５
μＬ １０ × ＰＣＲ Ｂｕｆｆｅｒꎬ２. ５ μＬ ２５ ｍｍｏｌ / Ｌ ＭｇＣｌ２ꎬ
０􀆰 ５ μＬ ５０ × ｄＮＴＰ(１０ ｍｍｏｌ / Ｌ)ꎬ１ μＬ 上游引物
(５′￣ＴＴＧ ＡＴＴ ＡＣＧ ＴＣＣ ＣＴＧ ＣＣＣ ＴＴＴ￣３′)(１２. ５
μｍｏｌ / Ｌ)ꎬ１μＬ 下游引物(５′￣ＴＴＴ ＣＡＣ ＴＣＧ ＣＣＧ
ＴＴＡ ＣＴＡ ＡＧＧ￣３′) (１２. ５ μｍｏｌ / Ｌ) [４]ꎬ１ Ｕ ＴａｑＥ
(５ Ｕ / μＬ)ꎬ ２ μＬ ＤＮＡ 粗提上清液ꎬ １５. ３ μＬ
ｄｄＨ２Ｏꎬ试剂均由上海生工生物工程技术服务有限
公司合成或提供ꎮ ＰＣＲ 扩增程序为 ９４℃预变性 ３
ｍｉｎꎻ ９４℃变性 ３０ ｓꎬ５４℃退火 １ ｍｉｎꎬ７２℃延伸 １
ｍｉｎ ３０ ｓꎬ共 ３５ 个循环ꎻ最后 ７２℃延伸 １０ ｍｉｎꎬ于
４℃保存ꎮ ＰＣＲ扩增产物由 ＵＮＩＱ￣１０ 柱式 ＤＮＡ胶
回收试剂盒回收、纯化后ꎬ分别用 Ａｌｕ Ⅰ、Ｃｆｏ Ⅰ、
Ｄｄｅ Ⅰ、Ｈｉｎｄ Ⅲ、Ｈｐａ Ⅱ和 Ｐｓｔ Ⅰ６ 种限制性内切
酶进行酶切ꎮ 将纯化的 ＰＣＲ 产物连接到 ＰＵＣｍ￣Ｔ
载体并转入大肠杆菌(Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ)ＤＨ５α感受
态细胞ꎬ经蓝白斑筛选获得 ＤＮＡ 克隆ꎬ送上海生
工生物工程技术服务有限公司测序ꎮ 获得的序列
利用 Ｃｈｒｏｍａｓ编辑校正ꎬ用 Ｃｌｕｓｔａｌ Ｘ 程序进行序
列联配比较ꎬ用 ＤＮＡｓｔａｒ 和 Ｍｅｇａ ４ 分子生物学分
析软件进行系统分析ꎮ
２　 结果与分析
根据短体属线虫虫体短粗ꎻ热杀死后虫体略
弯ꎻ口针发达ꎬ短粗ꎬ基部球呈圆形ꎻ背食道腺开口
距口针基部球短ꎻ食道腺从腹侧面覆盖肠ꎻ雌虫单
生殖腺ꎬ后阴子宫囊明显ꎻ雄虫交合刺纤细ꎬ交合伞
包到尾端等特征ꎬ确定本研究中采集的 ４ 个线虫群
体为短体线虫ꎮ 依据形态和形态测量值及分子特
征等ꎬ将 ４ 种群分别鉴定为 ４ 个不同的种ꎮ
２. １　 ４ 种短体线虫形态学描述
２. １. １ 　 咖啡短体线虫 (Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｃｏｆｆｅａｅ Ｆｉ￣
ｌｉｐｊｅｖ ＆ Ｓｃｈｕｕｒｍａｎｓ Ｓｔｅｋｈｏｎｖｅｎꎬ １９４１) 　 雌虫虫
体短粗ꎬ热杀死后虫体略弯ꎬ体环纹清晰ꎬ侧线 ４
条ꎻ头部低平ꎬ中度骨化ꎻ口针发达ꎬ粗短ꎬ基部球呈
圆形ꎻ背食道腺开口距口针基部球(２. １ ± ０. ２)
μｍꎻ尾近圆柱形ꎬ末端光滑ꎬ尾端具 １ 个明显刻痕ꎮ
雄虫口针基部球在宽度上明显退化ꎻ交合刺纤细ꎬ
成对ꎬ交合伞包到尾端ꎻ其他特征类似于雌虫
(图 １￣Ａ１ ~ Ａ４)ꎮ
２. １. ２　 斯克里布纳短体线虫(Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｓｃｒｉｂ￣
ｎｅｒｉ Ｓｔｅｉｎｅｒꎬ １９４３) 　 雌虫短粗圆筒状ꎬ热杀死后虫
体直伸ꎬ侧线 ４ 条ꎻ唇区缢缩ꎬ具 ２ 个唇环ꎻ口针基
部球宽圆形ꎻ后阴子宫囊短且分化不明显ꎻ尾部宽
圆且无环ꎮ 未见雄虫(图 １￣Ｂ１、Ｂ２)ꎮ
２. １. ３　 伤残短体线虫(Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｖｕｌｎｕｓ Ａｌｌｅｎ ＆
Ｊｅｎｓｅｎꎬ １９５１) 　 雌虫虫体细长ꎬ热杀死后虫体直
伸ꎬ侧线 ４ 条ꎻ头区高ꎬ唇区不缢缩ꎬ具 ３ 个唇环ꎻ口
针发达ꎬ基部球宽圆形ꎻ排泄孔位于食道与肠交界
处相对的位置ꎻ后阴子宫囊分化明显ꎻ尾端光滑ꎬ窄
５４４
　
植物病理学报 ４３ 卷
Ｆｉｇ. １　 Ｐｈｏｔｏｍｉｃｒｏｇｒａｐｈｓ ｏｆ ｆｏｕｒ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｓｐｅｃｉｅｓ
Ｓｐｅｃｉｅｓ: １ꎬ Ｐ. ｃｏｆｆｅａｅ (Ａ１: Ａｎｔｅｒｉｏｒ ｐａｒｔ ｏｆ ｆｅｍａｌｅꎬ Ａ２: Ｔａｉｌ ｏｆ ｆｅｍａｌｅꎬ Ａ３: Ａｎｔｅｒｉｏｒ ｐａｒｔ ｏｆ ｍａｌｅꎬ Ａ４: Ｔａｉｌ ｏｆ ｍａｌｅ)ꎻ
２ꎬ Ｐ. ｓｃｒｉｂｎｅｒｉ (Ｂ１: Ａｎｔｅｒｉｏｒ ｐａｒｔ ｏｆ ｆｅｍａｌｅꎬ Ｂ２: Ｔａｉｌ ｏｆ ｆｅｍａｌｅ)ꎻ ３ꎬ Ｐ. ｖｕｌｎｕｓ (Ｃ１: Ａｎｔｅｒｉｏｒ ｐａｒｔ ｏｆ ｆｅｍａｌｅꎬ
Ｃ２: Ｔａｉｌ ｏｆ ｆｅｍａｌｅꎬ Ｃ３: Ａｎｔｅｒｉｏｒ ｐａｒｔ ｏｆ ｍａｌｅꎬ Ｃ４: Ｔａｉｌ ｏｆ ｍａｌｅ)ꎻ ４ꎬ Ｐ. ｚｅａｅ (Ｄ１: Ａｎｔｅｒｉｏｒ ｐａｒｔ ｏｆ ｆｅｍａｌｅꎬ
Ｄ２: Ｔａｉｌ ｏｆ ｆｅｍａｌｅꎬ Ｄ３: Ｖｕｌｖａ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｆｅｍａｌｅ) . Ｂａｒ ＝ ２０ μｍ.
圆到钝尖ꎮ 雄虫常见ꎬ头部和食道构造与雌虫类
似ꎻ交合刺弯曲ꎬ交合伞延伸到尾尖 (图 １￣Ｃ１ ~
Ｃ４)ꎮ
２. １. ４　 玉米短体线虫(Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｚｅａｅ Ｇｒａｈａｍꎬ
１９５１) 　 雌虫虫体短粗ꎬ热杀死后虫体近直伸ꎬ侧
线 ４ 条ꎻ头部骨化明显ꎬ唇区稍缢缩ꎬ具 ３ 个唇
环ꎻ口针基部球呈圆形ꎻ排泄孔位于食道与肠连
接处前端ꎻ尾部呈锥形ꎬ尾端光滑ꎮ 未见雄虫(图
１￣Ｄ１ ~ Ｄ３)ꎮ
２. ２　 ４ 种短体线虫 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ区的扩增及分析
对来自 ４ 个不同地理种群的短体线虫 ｒＤＮＡ￣
ＩＴＳ区进行了 ＰＣＲ 扩增及序列分析测定ꎬ所得片
段长度分别为 １ ２４８、１ １２７、９１５ 和 ９０４ ｂｐꎮ 序列分
析结果显示浙江建德(咖啡短体线虫)和 ＧｅｎＢａｎｋ￣
ＦＪ７９９１１９、浙江杭州(斯克里布纳短体线虫)、浙江
杭州(伤残短体线虫)和 ＧｅｎＢａｎｋ￣ＦＲ６９２３２２、海南
儋州(玉米短体线虫)和 ＧｅｎＢａｎｋ￣ＪＮ０２０９３５ 分别
聚集在 ４ 个独立的进化分支上ꎮ 这一结论与 ４ 个
短体线虫种群依据形态学特征鉴别所得结论相一
致(图 ２)ꎮ
选用 ６ 种限制性内切酶ꎬ对 ４ 个不同地理种群
短体线虫 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ区的 ＰＣＲ 扩增产物酶切分析
(图 ３)显示:酶切后会产生 １ ~ ５ 条不同的酶切片
段ꎮ ４ 种短体线虫的酶切图谱存在较大差异ꎮ ６ 种
限制性内切酶组合的鉴定图谱能有效地鉴别这 ４
种短体线虫ꎮ
６４４
　
　 ４ 期 　 　 李戌清ꎬ等:４ 种短体线虫形态及 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ的 ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ鉴定
３　 讨论
本研究鉴定出的咖啡短体线虫、斯克里布纳短
体线虫、伤残短体线虫等三种为浙江省首次报道ꎮ
４ 个短体线虫种的主要形态特征和测量值与
国内外的有关报道[５]基本一致ꎬ但部分测量值略
Ｆｉｇ. ２　 Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒｅｅ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｌｉｓｉｏｎ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｏｆ
ｔｈｅ ＩＴＳ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ １２ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｓｐｅｃｉｅｓ
Ｂｏｏｔｓｔｒａｐ ｖａｌｕｅｓ ａｒｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ １ ０００ ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ.
Ｆｉｇ. ３　 ＲＦＬＰ ｏｆ ＩＴＳ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｆｏｕｒ Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｓｐｅｃｉｅｓ
Ｌａｎｅ Ｍ１: １ ｋｂ ｍａｒｋｅｒꎻ Ｌａｎｅ Ｍ２: １００ ｂｐ ｍａｒｋｅｒꎻ Ｌａｎｅ Ｕ: Ｕｎｄｉｇｅｓｔｅｄ ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔꎻ Ｌａｎｅ １￣６: ＡｌｕⅠꎬ ＣｆｏⅠꎬ ＤｄｅⅠꎬ
ＨｉｎｄⅢꎬ ＨｐａⅡ ａｎｄ ＰｓｔⅠꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎻ Ａ￣Ｄ: Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｃｏｆｆｅａｅꎬ Ｐ. ｓｃｒｉｂｎｅｒｉꎬ Ｐ. ｖｕｌｎｕｓ ａｎｄ Ｐ. ｚｅａｅꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.
７４４
　
植物病理学报 ４３ 卷
有出入ꎮ 如 Ｐ. ｃｏｆｆｅａｅ建德群体的雌虫 ＤＧＯ较选
模标本稍小(２. １ μｍ ｖｓ ３￣４ μｍ)ꎬ雌、雄虫 ｂ 值均
略小于选模标本(４. ３ ｖｓ ５￣７ꎻ ４. ８ ｖｓ ６￣７)ꎻＰ. ｚｅａｅ
儋州群体的 ｂ 值略小于选模标本 (４. １ ｖｓ ５. ０￣
９􀆰 ６)ꎮ 此类差异可能是不同地理环境条件所致ꎬ
属于种内变异ꎮ
植物寄生线虫 ｒＤＮＡ 中一些特异性编码区的
ＰＣＲ￣ＲＦＬＰ技术在分子诊断中作用重大[４]ꎬ本研究
表明ꎬ基于序列和限制性内切酶的分析ꎬ使短体线
虫的种群鉴定变得简单、快捷ꎬ且有较强的准确性
和可操作性ꎮ 由于长期单纯的利用形态学特征进
行的分类及鉴定使得该属部分种的有效性尚待确
认ꎬ建议增补该属种群的分子特征ꎬ建立酶切图谱
库ꎬ以帮助和加快农业生产与检验检疫工作中的准
确鉴定ꎮ
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责任编辑:于金枝
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