全 文 ：植物病理学报
ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ ４４(３): ３２３￣３２６(２０１４)
收稿日期: ２０１３￣０４￣０６ꎻ 修回日期: ２０１４￣０２￣１０
基金项目: 海南省重大科技专项课题(ＺＤＺＸ２０１３０２３￣１￣２３)ꎻ中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金课题( ＩＴＢＢ１１０３０３)ꎻ国家现
代农业产业技术体系建设专项资金(ｎｙｃｙｔｘ￣２４)
通讯作者: 刘志昕ꎬ博士生导师ꎬ研究方向为植物分子病毒学ꎻＥ￣ｍａｉｌ:ｌｉｕｚｈｉｘｉｎ＠ｉｔｂｂ.ｏｒｇ.ｃｎꎮ
研究简报
海南甘蔗病毒病的调查及其病原分子鉴定
王洪星１ ꎬ２ꎬ 张雨良１ꎬ 余乃通１ꎬ 罗志文３ꎬ 王建华１ꎬ 杨文君１ꎬ 刘志昕１∗
( １中国热带农业科学院热带生物技术研究所ꎬ海口 ５７１１０１ꎻ ２海南大学应用科技学院(儋州校区)ꎬ儋州 ５７１７３７ꎻ
３海南省农业科学院热带果树研究所ꎬ海口 ５７１１０１)
Ｓｕｒｖｅｙ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｖｉｒｕｓ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｉｎ Ｈａｉｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ
ＷＡＮＧ Ｈｏｎｇ￣ｘｉｎｇ１ꎬ２ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｙｕ￣ｌｉａｎｇ１ꎬ ＹＵ Ｎａｉ￣ｔｏｎｇ１ꎬ ＬＵＯ Ｚｈｉ￣ｗｅｎ３ꎬ ＷＡＮＧ Ｊｉａｎ￣ｈｕａ１ꎬ ＹＡＮＧ Ｗｅｎ￣ｊｕｎ１
ＬＩＵ Ｚｈｉ￣ｘｉｎ (１ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ ＣＡＴＡＳꎬ Ｈａｉｋｏｕ ５７１１０１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ Ｈａｉｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｄａｎｚｈｏｕ ５７１７３７ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｆｒｕｉｔꎬ Ｈａｉｎａｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ
Ｈａｉｋｏｕ ５７１１０１ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｅ ｖｉｒｕｓｅｓ ｔｈａｔ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｉｎ Ｈａｉｎａｎꎬ ｆｏｕｒｔｅｅｎ ｐａｉｒｓ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｏ
ＳＣＭＶꎬ ＳｒＭＶꎬ ＭＤＭＶꎬ ＪＧＭＶꎬ ＳＣＢＶꎬ ＳＳＶꎬ ＳＣＳＶꎬ ＳＤＶꎬ ＳＦＤＶꎬ ＳｃＹＬＶ ａｎｄ ＳｃＳＭＶ ｗｅｒｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ａｎｄ
ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ １０８ ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｈｉｃｈ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｖｉｒｕｓ ｄｉｓｅａｓｅｓ(ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ２０ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｖａｒｉｅ￣
ｔｉｅｓ)ꎬ Ｔｅｎ ｈｅａｌｔｈ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ ８ ｍａｉｎ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｉｎ Ｈａｉｎａｎ ｉｓｌａｎｄ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌｓ. ＲＴ￣ＰＣＲ
ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ４２ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ＳｒＭＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ３８.８ ％ꎬ ２４ ｓａｍｐｌｅｓ ｏｆ ＳｃＹＬＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ２２.２％ ａｎｄ ＳｒＭＶ ａｎｄ ＳｃＹＬＶ ｃｏ￣ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ６.４％. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈａｔ ＳｒＭＶ
ｉｓ ｔｈｅ ｍａｊｏｒ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｏｆ ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｍｏｓａｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｈａｉｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ. Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ
ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｖｉｒｕｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｖｉｒｕｓ￣ｆｒｅｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｓｏｒｇｈｕｍ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓꎻ Ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｙｅｌｌｏｗ ｌｅａｆ ｖｉｒｕｓꎻ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎻ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
文章编号: ０４１２￣０９１４(２０１４)０３￣０３２３￣０４
海南是我国重要的甘蔗生产省份之一ꎬ但其甘
蔗主要种植区感染病毒的种类和数量尚不十分清
楚ꎬ且海南甘蔗花叶病病原病毒缺乏分子水平的系
统鉴定ꎮ 为明确海南甘蔗病毒病的种类、数量、分
布及危害情况ꎬ本研究拟建立较为完整的甘蔗病毒
病检测技术体系ꎬ对海南甘蔗病毒病展开调查ꎬ为
甘蔗抗病毒基因工程及健康种苗发展提供参考ꎮ
１ 材料与方法
１.１ 甘蔗病毒病调查
对甘蔗病毒病展开了 ４ 次调查和采样ꎮ 第一
次是 ２０１０年 ２月甘蔗的收获期ꎻ第二次是 ２０１０ 年
５月甘蔗幼苗期ꎻ第三次是 ２０１０ 年 ８ 月甘蔗生长
期ꎻ第四次是 ２０１１ 年 １２ 月ꎬ主要针对甘蔗主栽品
种病毒感染情况ꎮ 调查的甘蔗品种为海南蔗区主
栽品种 ＲＯＣ２２ 和粤糖 ９３￣１５９ ꎬ以及少量的
ＲＯＣ１０、ＲＯＣ１６和粤糖 ００￣２３６ 等品种ꎮ 采集样品
共计 １０８ 份ꎬ分别采自海南岛的 ８ 个县市 ２８ 个乡
镇ꎬ主要包括定安、龙河、琼中、白沙、邦溪、昌江、王
五、两院科技园、东威ꎮ 采样方式避开田边ꎬ以对角
线或 Ｓ型路线为准则ꎬ选择生长基本正常、基本无虫
害、具典型花叶或黄叶特征的甘蔗植株ꎬ同时对病样
植物病理学报 ４４卷
采集地点表现为无症状的植株也进行叶片样品采
集ꎬ每份样品采集(２０~２００) ｇꎬ去除表面尘土和生物
污染ꎬ放入保鲜袋运回实验室ꎬ－８０℃冰箱保存ꎮ
１.２ 引物的设计
根据相关文献和 ＧｅｎＢａｎｋ 中病毒的基因组序
列ꎬ以 ＣＰ、ＭＰ、ＮＩｂ、ＯＲＦＩ、ＯＲＦＩＩ 核苷酸序列作为
靶标设计了鉴定病毒的多对特异引物ꎬ包括 ８ 种
ＲＮＡ病毒ꎬ３ 种 ＤＮＡ 病毒以及马铃薯 Ｙ 病毒科
(Ｐｏｔｙｖｉｒｉｄａｅ)通用引物[１~３]ꎮ 具体引物见表 １ꎮ
１.３ 显症病样总 ＤＮＡ和总 ＲＮＡ提取
ＤＮＡ、ＲＮＡ 提取参照 ｗａｎｇ 等[５]方法ꎮ 根据
引物说明ꎬ设置不同退火温度和 ＰＣＲ 反应程序ꎬ对
疑似甘蔗病毒样品进行 ＰＣＲ / ＲＴ￣ＰＣＲ检测ꎮ
１.４ 海南 ＳｒＭＶ与 ＳｃＹＬＶ ＣＰ基因克隆
以病株 ｃＤＮＡ 为模板ꎬ利用所设计 ＳｒＭＶ 与
ＳｃＹＬＶ ＣＰ基因引物(表 ２)进行 ＰＣＲ检测、测序和
序列分析ꎮ
Ｔａｂｌｅ １ Ｐｒｉｍｅｒｓ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｓｕｇａｒｃａｎｅ
Ｖｉｒｕｓ Ｔｙｐｅ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ(５′－３′) Ｐｏｓｉｔｉｏｎ(ｎｔ) Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ / Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ
Ｐｏｔｙｖｉｒｉｄａｅ ＲＮＡ
Ｆ:ＧＧＸＡＡＹＡＡＹＡＧＹＧＧＸＣＡＺＣＣ
－ [１]
Ｒ:ＧＴＴＴＴＣＣＣＡＧＴＣＡＣＧＡＣ
ＳｒＭＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＧＣＡＧＧＡＧＧＣＧＧＴＡＣＡＧＴＡＧＡＴＧＣＡＧ
７７８１￣８４４５
ＮＣ＿００４０３５.１ꎬ ＤＱ５３０４３４.１ꎬ
Ｕ５７３５８.２Ｒ:ＧＴＧＡＴＧＣＴＧＣＴＧＣＡＣＴＣＣＡＡＧＡＡＧＧ
ＳＣＭＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＴＣＣＧＧＡＡＣＴＧＴＧＧＡＴＧＣＡＧＧＡＧＣＣＣ
８６７６￣９４５０ ＪＮ０２１９３３.１ꎬ ＧＵ４７４６３５.１
Ｒ:ＧＴＧＧＴＧＣＴＧＣＴＧＣＡＣＴＣＣＣＡＡＣＡＧＡ
ＳｃＳＭＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＧＣＣＡＡＧＧＣＡＡＡＧＣＡＧＡＴＧＡＴＧＡＧ
８８８２￣９２３２ ＧＱ２４６１８７.１ꎬ ＮＣ￣０１４０３７
Ｒ:ＣＣＧＣＴＡＣＧＡＡＣＣＧＡＧＡＡＣＴＧＡＡＣ
ＳｃＹＬＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＡＴＧＡＡＴＡＣＧＧＧＣＧＣＴＡＡＣＣＧＣＴＣＡＣ
２１３０￣２７２０ ＤＱ７６８７４８ꎬＡＹ２３６９７１
Ｒ:ＣＴＡＴＴＴＧＧＧＡＴＴＣＴＧＧＡＡＡＡＧＧＣＡＴ
ＳＦＤＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＣＣＧＡＧＴＴＡＣＧＧＴＣＡＧＡＣＴＧＴＴＣＴＴ
－ [２]
Ｒ:ＣＡＡＧＴＧＧＴＧＡＣＧＡＡＡＴＧＡＴＧＧＣＡＧ
ＳＤＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＣＧＡＡＴＴＧＣＴＧＣＡＡＡＧＴＧＣＴＣＴＴＧ
１３２０５￣１３９９２ ＡＭ１１０７５８
Ｒ:ＴＧＧＡＴＣＡＡＣＣＡＧＴＴＧＴＴＡＴＧＧＧＡＧＧ
ＳＣＳＶ ＤＮＡ
Ｆ:ＴＴＴＡＴＧＴＧＣＴＧＧＡＧＧＣＣＧＣＡＡＧ
６０３９￣７０５７ ＮＣ＿００１ ６３４ꎬＵ１３９８８
Ｒ:ＧＧＧＡＡＣＡＣＴＴＴＧＴＴＣＧＣＣＡＣＡＣ
ＳＳＶ ＤＮＡ
Ｆ:ＧＴＣＣＡＣＣＣＴＴＧＣＡＧＡＡＴＡＧＣＣＡ
－ [３]
Ｒ:ＧＡＡＣＡＴＣＣＧＡＣＣＣＡＡＴＣＣＧＡＣ
ＳＣＢＶ ＤＮＡ
Ｆ:ＧＣＴＴＧＴＡＡＴＧＣＣＡＴＴＣＧＧＡＣＴＧ
５４７１￣６０６８ ＡＪ２７７０９１ꎬＭ８９９２３
Ｒ:ＣＣＡＴＣＣＴＴＣＣＡＴＡＣＡＴＣＣＧＴＣＡ
ＭＤＭＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＴＣＣＣＴＣＡＡＴＡＣＣＧＴＣＴＴＧＡＲＧＣ
８１０６￣９２１２ [４]
Ｒ:ＣＡＧＣＴＧＴＧＴＧＮＣＫＹＴＣＴＧＴＡＴＴ
ＪＧＭＶ ＲＮＡ
Ｆ:ＴＣＲＧＧＣＡＡＴＧＡＲＧＡＹＧＣＴＧＧ
８３９６￣９２６０ [４]
Ｒ:ＣＡＧＣＴＧＴＧＴＧＮＣＫＹＴＣＴＧＴＡＴＴ
Ｘ＝Ａ＼Ｇ ＼Ｃ ＼Ｔꎻ Ｙ＝Ｔ ＼Ｃꎻ Ｚ＝Ａ＼Ｇꎻ Ｖ＝Ａ＼Ｃ ＼Ｇꎻ Ｈ＝Ａ＼Ｃ ＼Ｔꎻ Ｒ＝Ａ＼Ｇꎻ Ｎ＝Ａ＼Ｃ ＼Ｇ ＼Ｔꎻ Ｋ＝Ｇ＼Ｔ.
Ｔａｂｌｅ ２ Ｐｒｉｍｅｒｓ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｓｕｇａｒｃａｎｅ
Ｐｒｉｍｅｒ Ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅ Ｐｏｓｉｔｉｏｎ Ｓｑｕｅｎｃｅ(５′－３′) Ｐｒｏｄｕｃｔ ｓｉｚｅ / ｂｐ
ＳｃＹＬＶ￣ＣＰ￣Ｐ１ ＣＰ
ＳｃＹＬＶ￣ＣＰ￣Ｐ２ ＣＰ
ＳｒＭＶ￣ＣＰ￣Ｆ ＣＰ
ＳｒＭＶ￣ＣＰ￣Ｒ ＣＰ
３６４９￣３６７３
８４２４￣９３８９
ＡＴＧＡＡＴＡＣＧＧＧＣＧＣＴＡＡＣＣＧＣＴＣＡＣ
ＣＴＡＴＴＴＧＧＧＡＴＴＣＴＧＧＡＡＡＡＧＧＣＡＴ
ＧＡＡＧＡＡＴＴＣＧＣＡＧＧＧＧＧＣＧＧＴＡＣＧＧＴ
ＧＣＣＡＡＧＣＴＴＴＣＡＧＴＧＧＴＧＣＴＧＴＴＧＣ
５９１
９８７
４２３
３期 王洪星ꎬ等:海南甘蔗病毒病的调查及其病原分子鉴定
２ 结果与分析
２.１ 采集样品的症状
２０１０年 ２ 月至 ２０１１ 年 １２ 月从海南甘蔗主要
种植区采集样本 １０８份ꎬ均为糖蔗ꎮ 花叶症状植株
叶片出现黄绿相间不规则的嵌纹和条斑ꎬ长短大小
不同ꎬ布满整个叶片ꎻ甘蔗黄叶病罹病植株的症状
是叶片中脉呈鲜黄色ꎬ部分染病叶片中脉两侧呈现
红褐色ꎮ 甘蔗病毒病受甘蔗品种、病毒株系类型和
环境条件等多种因素影响ꎬ症状表现差异较大ꎬ从
发病程度上可分成严重、一般、轻微和隐症ꎮ
２.２ 病毒种类分子鉴定
ＤＮＡ 病毒ꎬ以提取的 ＤＮＡ 为模板ꎬ分别采用
３对 ＤＮＡ 病毒引物进行 ＰＣＲ 扩增ꎬ结果显示ꎬ均
没有扩增条带ꎮ ＲＮＡ病毒ꎬ以设计的 ＲＮＡ病毒引
物进行 ＲＴ￣ＰＣＲ 扩增ꎬ３ 次试验结果表明ꎬ样品中
扩增到 ＳｃＹＬＶ 和 ＳｒＭＶ 病毒的特异片段(图 １)ꎮ
ＳｒＭＶ引物扩增的条带大小约为 １ ｋｂꎬＳｃＹＬＶ引物
扩增的条带约为 ４００ ｂｐꎬ大小正确ꎮ ３ 次试验结果
表明ꎬ用马铃薯 Ｙ病毒科病毒(Ｐｏｔｙｖｉｒｉｄａｅ)通用引
物扩增出约为 １ ８００ ｂｐ的条带ꎬ测序结果表明也为
海南 ＳｃＹＬＶ和 ＳｒＭＶ病毒序列ꎮ
２.３ ＣＰ基因克隆及同源性比较
２.３.１ ＳｒＭＶ 高粱花叶病毒海南分离物(暂命名
ＳｒＭＶ￣ＨＮ)ＣＰ 基因全长 ９８７ ｂｐꎬ推测编码 ３２９ 个
氨基酸ꎬ其基因登录号为 ＫＣ５７６８０３ꎮ 将其经ＮＣＢＩ
(ｈｔｔｐ: / / ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ / ) 中的 ＢＬＡＳＴ 序
列分析ꎬ比较已报道的ＳｒＭＶ分离物ꎬ结果表明该
段序 列 与 中 国 南 方 甘 蔗 的 高 粱 花 叶 病 毒
(Ｓｏｒｇｈｕｍ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓꎬＳｒＭＶ)分离物(ＥＦ４１９１７９)
同源性最高ꎬ达到 ９５％ꎻ与中国云南、中国杭州高
粱花叶病毒(Ｓｏｒｇｈｕｍ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓꎬＳｒＭＶ)分离物
同源性次之ꎮ 海南各地样品测序结果表明ꎬ不同病
株的产物序列基本相同ꎬ同源性达到 ９９％以上ꎬ说
明海南各地 ＳｒＭＶ 感染甘蔗均为海南分离物
(ＳｒＭＶ￣ＨＮ)ꎮ
２.３.２ ＳｃＹＬＶ ＣＰ 编码区核苷酸序列(基因登录
号为 ＫＣ５７６８０４)与 １８ 个中国其他地区已报道的
ＳｃＹＬＶ ＣＰ 核苷酸序列 ( ＪＱ２６６２２９、 ＪＱ２６６２２８、
ＪＱ２６６２２７、 ＪＱ２６６２２６、 ＨＱ２４５３３７、 ＨＱ２４５３３４、
ＨＱ２４５３３１、 ＨＱ２４５３３０、 ＨＱ２４５３２３、 ＨＱ２４５３１９、
ＨＭ６４０２６７、 ＧＵ１９０１６５、 ＧＵ１９０１６２、 ＧＵ１９０１５９、
ＡＹ２３６９７１、 ＡＦ３６９９２３、 ＡＦ１５７０２９、 ＤＱ３０２７５７ )
分别进行了亲缘关系分析ꎮ 结果显示ꎬＣＰ 段核苷
酸序列的同源性较高ꎬ同源性达到 ９９％ꎮ
３ 讨论
本研究针对海南岛甘蔗病毒病首次进行了系
统的调查、检测ꎬ在海南 ２８个乡镇所取疑似病毒样
品的病毒检测结果表明ꎬ８０％以上的样点都被病毒
侵染ꎬ甘蔗花叶病在生长中期大面积发生ꎬ部分田
块的症状特别明显ꎬ在海南甘蔗产区的收获期和幼
苗期均观察到黄叶病状ꎬ大部分田块病株零星分
布ꎬ病株率 １％ ~ １０％ꎬ少数田块的病株率超过
５０％ꎮ 甘蔗收获期感染黄叶病占 ７５％ꎬ幼苗期 １０％
左右ꎮ 与 ２００７年吴伟怀调查结果相比ꎬ甘蔗黄叶
病在海南有明显加重迹象ꎬ其对海南甘蔗产业的发
展已经构成威胁ꎮ
Ｆｉｇ.１ Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ｏｆ ＲＴ￣ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｒｏｍ ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｓａｍｐｌｅｓ
５２３
植物病理学报 ４４卷
本研究设计或引用了 ＳＣＭＶ、ＳｒＭＶ、ＭＤＭＶ、
ＪＧＭＶ、 ＳＣＢＶ、ＳＳＶ、ＳＣＳＶ、ＳＤＶ、ＳＦＤＶ、ＳｃＹＬＶ、
ＳｃＳＭＶ等 １１种病毒引物和马铃薯 Ｙ 病毒科的通
用简并引物进行分子水平系统验证ꎮ 对海南 ２８ 个
乡镇甘蔗 (糖蔗)病毒疑似病样进行了 ＰＣＲ 和
ＲＴ￣ＰＣＲ毒源检测和鉴定ꎬ根据检测和序列分析结
果ꎬ初步确定侵染并危害海南甘蔗(糖蔗)的病毒
主要为甘蔗黄叶病毒、高粱花叶病毒ꎬ与吴伟怀等
(２００７)调查结果相同ꎬ首次在分子水平确立海南
岛甘蔗花叶病的病原主要是高粱花叶病毒ꎬ没有发
现 ＳＣＭＶ、ＭＤＭＶ、ＪＧＭＶ、ＳｃＳＭＶ等病毒ꎮ 在 １０８
个甘蔗样品中 ＳｒＭＶ 检出率为 ３８.８％ (４２ / １０８)ꎬ
ＳｃＹＬＶ的检出率为 ２２. ２％ ( ２４ / １０８)ꎬ ＳｃＹＬＶ 和
ＳｒＭＶ的复合侵染率为 ６.４％(７ / １０８)ꎬ且同一植株
所带不同病毒的量存在差异ꎮ
本次调查和检测糖蔗中未检测到 ＳＣＭＶ、
ＭＤＭＶ、ＪＧＭＶ、 ＳＣＢＶ、ＳＳＶ、ＳＣＳＶ、ＳＤＶ、ＳＦＤＶ、
ＳｃＳＭＶ的侵染ꎮ 因此加强海南地区甘蔗的病毒防
御工作任重道远ꎬ由于采样方法或采集区域的局
限ꎬ海南甘蔗病原病毒种类应该不限于本研究所鉴
定出的 ２种ꎮ 本研究为建立一套较为完整的海南
甘蔗病毒病检测技术体系奠定了基础ꎬ同时对甘蔗
病毒病的防治、无毒健康种苗推广、种质资源的流
动、甘蔗抗病育种等具有重要意义
参考文献
[１] Ｃｈｅｎ ＪꎬＣｈｅｎ Ｊ Ｐꎬ Ａｄａｍｓ Ｍ Ｊ. Ａｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＰＣＲ ｐｒｉｍｅｒ
ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｍｅｍｂｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｏｔｙｖｉｒｉｄａｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｕｓｅ ｔｏ
ｅｘａｍｉｎｅ ｔｈｅ ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｓｔａｔｕｓ ｏｆ ｓｅｖｅｒａｌ ｍｅｍｂｅｒｓ ｏｆ
ｔｈｅ ｆａｍｉｌｙ[ Ｊ] . Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙꎬ２００１ꎬ１４６ ( ４):
７５７－７６６.
[２] ＭｃＱｕａｌｔｅｒ Ｒ Ｂꎬ Ｂｕｍｓ Ｐꎬ Ｓｍｉｔｈ Ｇ Ｒꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｆｉｊｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ｇｅｎｏｍｅ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ５ꎬ６ꎬ
８ａｎｄ１０[Ｊ] . Ａｒｃｈ Ｖｉｒｏｌꎬ２００４(１４９): ７１３－７２１.
[３] Ｓｈａｍｌｏｕｌ Ａ Ｍꎬ Ａｂｄａｌｌａｈ Ｎ Ａꎬ Ｍａｄｋｏｕｒ Ｍ Ａꎬ ｅｔ ａｌ.
Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｇｙｐｔｉａｎ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ ｓｕｇａｒｃａｎｅ
ｓｔｒｅａｋ ｖｉｒｕｓ ｂｙ ＰＣＲ￣ｐｒｏｂｅ ｃａｐｔｕｒｅ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ(ＰＣＲ￣
ＥＬＩＳＡ)ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ[Ｊ] . Ｊｏｕｒ￣
ｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓꎬ２００１(９２): ４５－５４.
[４] Ｊｉａｎｇ Ｊ ＸꎬＸｉｅ ＹꎬＱｕｅ Ｈ Ｙ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｏｆ ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｍｏｓａｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｊｉａｎｇｘｉ
ｐｒｏｖｉｎｃｅ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)[ Ｊ] .Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉ￣
ｃａ(植物病理学报)ꎬ ２００９ꎬ３９(２):２０３－２０６.
[５] Ｗａｎｇ Ｈ ＸꎬＺｈａｎｇ Ｙ ＬꎬＧｏｎｇ Ｄꎬｅｔ ａｌ. Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
ＳｃＹＬＶ ａｎｄ ＳｒＭＶ ｂｙ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＲＴ￣ＰＣＲ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[Ｊ] . Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ (广东农业科
学)ꎬ ２０１１ꎬ３８(１０):１２８－１３１.
责任编辑:于金枝
６２３