全 文 ：植物病理学报
ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ ４３(４): ４２６￣４２９(２０１３)
收稿日期: ２０１２￣０８￣１７ꎻ 修回日期: ２０１３￣０４￣０７
基金项目: 广东省花卉产业技术体系建设专项(２０６０３０２)
通讯作者: 向梅梅ꎬ教授ꎬ主要从事真菌与植物真菌病害研究ꎻ Ｅ￣ｍａｉｌ:ｍｍ＿ｘｉａｎｇ＠１６３. ｃｏｍꎮ
研究简报
乳茄 ３ 种新病害病原菌鉴定
张云霞ꎬ 施祖荣ꎬ 黄江华ꎬ 向梅梅
(仲恺农业工程学院农学院ꎬ 广州 ５１０２２５)
Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｎｅｗ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｎ Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ
ＺＨＡＮＧ Ｙｕｎ￣ｘｉａꎬ ＳＨＩ Ｚｕ￣ｒｏｎｇꎬ ＨＵＡＮＧ Ｊｉａｎｇ￣ｈｕａꎬ ＸＩＡＮＧ Ｍｅｉ￣ｍｅｉ (Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｇｒｏｎｏｍｙꎬ Ｚｈｏｎｇｋａｉ Ｕｎｉｖｅｒ￣
ｓｉｔｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇꎬ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０２２５ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｒｅｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｎ Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｒＤＮＡ ｉｎｔｅｒ￣
ｎａｌ ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ ｓｐａｃｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ. Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｂｌａｃｋ ｒｏｔ ｗａｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ
Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａꎬ ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ ｗａｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ ａｎｄ Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｒｏｔ ｄｉｓｅａｓｅ ｗａｓ
ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ. Ｔｈｉｓ ｉｓ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｎｅｗ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｎ Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍꎻ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａꎻ Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓꎻ Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ
文章编号: ０４１２￣０９１４(２０１３)０４￣０４２６￣０４
乳茄(Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ)ꎬ又叫多头乳茄、
五指茄、五代同堂、黄金果ꎬ为茄科茄属常绿小灌
木ꎮ 乳茄是一种珍贵的观果植物ꎬ原产美洲ꎬ近年
引入我国广东、广西及云南种植ꎬ因其果色鲜艳ꎬ且
观果期长ꎬ果形奇特ꎬ有“五子拜寿”和“五子登科”
的寓意ꎬ在切花和盆栽花卉上广泛应用ꎮ
２０１０ 年ꎬ花卉病害调查发现乳茄 ３ 种病害ꎬ一
种为害茎、叶、果ꎬ导致茎和枝条褐腐、叶片和果实
腐烂ꎻ另外 ２ 种为害果实ꎬ导致果实腐烂ꎮ 本文对
３ 种病害的病原菌进行鉴定ꎬ可为生产上病害的有
效防治提供理论依据ꎮ
１ 材料与方法
１. １ 病原菌分离
采用常规组织分离法进行病原菌分离纯化ꎮ
１. ２ 病原菌形态鉴定
观察病原菌形态特征ꎬ测量大小ꎬ于微分干涉
显微镜下拍照ꎬ并结合培养性状及相关真菌分类资
料进行鉴定ꎮ
１. ３ 病原菌分子鉴定
参照 Ｃｈｉ[１]的方法提取基因组 ＤＮＡꎮ
ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ序列扩增引物为 ＩＴＳ４(５′￣ＴＣＣＴＣ￣
ＣＧＣＴＴＡＴＴＧＡＴＡＴＧＣ￣３′) 和 ＩＴＳ５ ( ５′￣ＧＧＡＡＧ￣
ＴＡＡＡＡＧＴＣＧＴＡＡＣＡＡＧＧ￣３′)ꎬ扩增产物送上海
英骏生物技术有限公司测序ꎬ测序结果在 ＧｅｎＢａｎｋ
(ｈｔｔｐ: / / ｗｗｗ. ｎｃｂｉ. ｎｌｍ. ｎｉｈ. ｇｏｖ)中进行 ＢＬＡＳＴ
比对分析ꎮ
１. ４ 致病性测定
取健康果实ꎬ７０％酒精表面消毒、无菌水冲洗
并晾干后ꎬ将培养 ５ ~ ７ ｄ 的菌落边缘菌块分别接
种到果实表面ꎬ用无菌湿棉花保湿ꎮ 每种病原菌设
针刺和不针刺 ２ 种处理ꎬ以接种 ＰＤＡ 培养基块为
对照ꎮ 每处理接种 ３ 个果实ꎬ每个果实接种 １ ~ ３
个部位ꎮ 于 ２５℃人工气候室培养ꎬ２ ｄ 后观察并记
４ 期 张云霞ꎬ等:乳茄 ３ 种新病害病原菌鉴定
录发病情况ꎮ
２ 结果与分析
２. １ 黑腐病
果实受害后常从基部的乳头状突起或果实顶部
突起开始发病ꎬ初期受害部位变褐色ꎬ后期产生大量
黑色霉层ꎮ 严重时ꎬ整个果实变褐腐烂(图 １￣Ａ)ꎮ
致病性测定结果表明ꎬ针刺接种 ３ ｄ 后果实出
现褐色小病斑ꎬ随后病斑逐渐扩大成圆形ꎬ症状与
自然发病症状基本一致ꎻ未经针刺接种的果实和对
照则不发病(图 １￣Ｂ)ꎮ
病原菌在 ＰＣＡ 培养基上光 /暗交替培养 ６ ｄꎬ
菌落直径 ７ ｍｍꎮ 菌落圆形ꎬ短绒状ꎬ灰褐色ꎬ边缘
整齐ꎮ 分生孢子单生或短链生ꎬ倒棍棒形ꎬ卵形ꎬ倒
梨形或椭圆形ꎬ淡褐色至暗褐色ꎬ表面光滑或具微
刺ꎬ具 １ ~ ５ 个横膈膜和 １ ~ ５ 个纵、斜隔膜ꎬ孢身
(１０ ~ ２６. ５)μｍ × (８ ~ １５)μｍꎮ 喙有或无ꎬ柱状ꎬ
真喙或假喙ꎬ(２. ５ ~ １４)μｍ × (３. ５ ~ ５. ０)μｍꎮ 其
形态特征与相关资料描述的链格孢 Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌ￣
ｔｅｒｎａｔａ (Ｆｒ. ) Ｋｅｉｓｓｌｅｒ基本一致ꎮ
对分离菌株的 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ 进行 ＰＣＲ 扩增、测
序ꎬ得到长度 ６０１ ｂｐ的片段ꎬ所得序列与 ＧｅｎＢａｎｋ
中 Ａ. ａｌｔｅｒｎａｔａ(ＧＱ１２１３２２ 和 ＧＵ７９７１４４)的同源
性为 ９９％ ꎮ 结合形态特征和 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ 序列比对
分析ꎬ确定该病原菌为 Ａ. ａｌｔｅｒｎａｔａꎮ
２. ２ 炭疽病
果实受害后常从基部的乳头状突起或果实顶
部突起开始发病ꎬ初期受害部位变褐色ꎬ后期病部
产生暗褐色点状物(病原菌分生孢子盘)和砖红色
粘液(分生孢子堆)ꎮ 受害严重时ꎬ整个果实变褐
腐烂(图 ２￣Ａ)ꎮ
Ｆｉｇ. １ Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｆｒｕｉｔ ｒｏｔ ｏｎ Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ
Ａ: Ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｆｒｕｉｔꎻ Ｂ: Ｌｅｆｔꎬ Ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｆｒｕｉｔ (１４ ｄａｙｓ)ꎻ
Ｒｉｇｈｔꎬ Ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ ｆｒｕｉｔ (１４ ｄａｙｓ) .
Ｆｉｇ. ２ Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｏｆ Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｆｒｕｉｔ ｒｏｔ ｏｎ Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ
Ａ: Ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｆｒｕｉｔꎻ Ｂ: Ｌｅｆｔꎬ ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｆｒｕｉｔ (１０ ｄａｙｓ)ꎻ
Ｒｉｇｈｔꎬ ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ ｆｒｕｉｔ (１０ ｄａｙｓ) .
７２４
植物病理学报 ４３ 卷
致病性测定结果表明ꎬ针刺接种 ３ ｄ 后果实开
始出现褐色小病斑ꎬ随后病斑逐渐扩大成圆形ꎬ７ ｄ
后接种部位附近开始产生暗褐色点状物(病原菌
分生孢子盘)ꎬ后期产生砖红色粘液 (分生孢子
堆)ꎬ症状与自然发病症状基本一致ꎻ未经针刺接
种的果实和对照则不发病(图 ２￣Ｂ)ꎮ
病原菌在 ＰＤＡ 培养基上光 /暗交替培养 ６ ｄꎬ
菌落直径 ８０ ｍｍꎮ 菌落圆形ꎬ灰色ꎬ绒状ꎬ浓密ꎬ背
面具灰黑相间的轮纹ꎮ 分生孢子单胞ꎬ无色ꎬ多数
直ꎬ少数略弯ꎬ两端钝圆(或一端钝圆ꎬ一端具脐
点)ꎬ少数孢子在中间或中下部略缢缩ꎬ(１１. ５ ~
１６)μｍ × (４. ０ ~ ５. ０)μｍꎻ附着胞暗褐色ꎬ椭圆形ꎬ
边缘光滑ꎬ偶有缺刻ꎬ(７ ~ １３) μｍ × (６ ~ ９) μｍꎮ
其形态特征与相关资料描述的胶孢炭疽菌 Ｃｏｌｌｅｔｏ￣
ｔｒｉｃｈｕｍ ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ Ｐｅｎｚ基本一致ꎮ
对分离菌株的 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ 进行 ＰＣＲ 扩增、测
序ꎬ得到长度为 ６０３ ｂｐ 的片段ꎬ所得序列与
ＧｅｎＢａｎｋ 中 Ｃ. ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ ( ＡＹ２６６３８５ 和
ＨＭ５７５２５８)的同源性为 ９９％ ꎮ 结合形态特征和
ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ 序列比对分析ꎬ确定该病原菌为 Ｃ.
ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓꎮ
２. ３ 菌核病
茎杆、枝条、叶片和果实均可受害ꎬ受害部位变
褐腐烂ꎬ并布有稀疏的白色菌丝ꎬ后期菌丝纠结形
成黑褐色不规则形的菌核(图 ３￣Ａ、Ｂ)ꎮ
致病性测定结果表明ꎬ针刺接种 １ ｄ 后果实出
现浅褐色水渍状小病斑ꎬ随后病斑迅速扩大ꎬ病健
交界处不明显ꎬ３ ｄ 后果面产生白色菌丝ꎬ并逐渐
形成菌丝团和菌核ꎬ最终整个果实变褐腐烂ꎬ症状
与自然发病症状基本一致ꎻ未经针刺接种的果实和
对照没有发病(图 ３￣Ｃ)ꎮ
病原菌在 ＰＤＡ 培养基上ꎬ菌落平铺ꎬ初期白
色ꎬ后期变灰褐色ꎮ 培养 ７ ｄ 后ꎬ菌落边缘形成菌
核ꎬ菌核初期白色ꎬ成熟后变成黑色ꎬ球形或不规则
形ꎬ(１. ５ ~ ５. ５)ｍｍ × (１ ~ ２. ５)ｍｍꎮ 其形态特征
与相关资料描述的核盘菌 Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ
(Ｌｉｂ. ) ｄｅ Ｂａｒｙ基本一致ꎮ
对分离菌株的 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ进行 ＰＣＲ扩增、测序ꎬ
得到长度为 ５６９ ｂｐ的片段ꎬ所得序列与 ＧｅｎＢａｎｋ中
Ｓ. ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ(ＪＮ０１３１８４和 ＥＦ０９１８０９)的同源性为
９９％ ꎮ 结合形态特征和 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ 序列比对分析ꎬ
确定该病原菌为核盘菌 Ｓ. ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍꎮ
３ 讨论
目前国内外对乳茄病害报道较多的是病毒病ꎬ
该病主要引起植株矮化、叶片畸形和花叶等症状ꎮ
美国农业部记载的乳茄真菌病害有 ３ 种[２]ꎬ即白粉
病 (Ｏｉｄｉｕｍ ｓｐ. )、番茄壳针孢叶斑病 ( Ｓｅｐｔｏｒｉａ
ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ)和黄萎病(Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ)ꎬ而国内
仅有关于乳茄褐腐病(Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ)的描
述[３]ꎮ 此外ꎬ据 Ｅｂｉｈａｒａ 等[４] 报道ꎬ大丽轮枝菌
(Ｖ. ｄａｈｌｉａｅ)引起的乳茄黄萎病在日本为害严重ꎮ
本研究通过形态特征观察和 ｒＤＮＡ￣ＩＴＳ 序列分析ꎬ
明确了乳茄上的３种新病害ꎬ即链格孢Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ
Ｆｉｇ. ３ Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｏｆ Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｒｏｔ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｎ Ｓｏｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ
Ａꎬ Ｂ: Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｆｒｕｉｔｓꎻ Ｃ: Ｌｅｆｔꎬ ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｆｒｕｉｔ (８ ｄａｙｓ)ꎻ
Ｒｉｇｈｔꎬ ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｆ ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ ｆｒｕｉｔ (８ ｄａｙｓ) .
８２４
４ 期 张云霞ꎬ等:乳茄 ３ 种新病害病原菌鉴定
ａｌｔｅｒｎａｔａ引起的黑腐病、胶孢炭疽菌 Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ
ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ引起的炭疽病和核盘菌 Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ
ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ引起的菌核病ꎮ
链格孢、胶孢炭疽菌和核盘菌寄主广泛ꎬ都是
花卉上的重要病原菌ꎬ常在生产上造成严重为害ꎮ
链格孢和胶孢炭疽菌主要为害叶片ꎬ引起各种叶斑
病ꎬ降低花卉的观赏价值ꎮ 核盘菌则主要为害植株
的根茎部ꎬ引起幼苗猝倒和各种形式的软腐ꎬ草本
花卉ꎬ 如矮牵牛 ( Ｐｅｔｕｎｉａ ｘ ｈｙｂｒｉｄａ )、 万寿菊
(Ｔａｇｅｔｅｓ ｐａｔｕｌａ)、大丽花(Ｄａｈｌｉａ ｐｉｎｎａｔａ)等[５]常
因该病菌侵染ꎬ导致整个植株腐烂死亡ꎮ 本研究鉴
定的乳茄菌核病ꎬ可为害茎、叶、果ꎬ导致茎杆、枝
条、叶片和果实变褐腐烂ꎬ发病率可达 ３０％ ꎬ给乳
茄生产造成很大威胁ꎮ 适宜条件下该病发展快、蔓
延迅速、为害严重ꎬ须高度重视ꎮ
本研究所报道的乳茄菌核病和有关资料[５]描
述的致病疫霉引起的褐腐病在症状上二者比较相
似ꎬ都可为害茎、叶和果实ꎬ病部呈水渍状软腐ꎬ后
期产生白色霉层ꎮ 但是ꎬ菌核病的病原菌属子囊
菌ꎬ褐腐病属卵菌ꎬ由于病原菌不同二者在防治上
的用药完全不同ꎮ 因此ꎬ生产中应注意这 ２ 种病害
的正确识别ꎬ菌核病在后期病组织上会形成白色至
黑褐色不规则形或鼠粪状的菌核ꎬ而褐腐病病部则
不会产生菌核ꎮ
参考文献
[１] Ｃｈｉ Ｍ Ｈ. Ａ ｑｕｉｃｋ ａｎｄ ｓａｆｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｆｕｎｇａｌ ＤＮＡ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ [Ｊ] . Ｔｈｅ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ Ｊｏｕｒｎａｌꎬ ２００９ꎬ ２５
(１): １０８ －１１１.
[２] Ｆａｒｒ Ｄ Ｆꎬ Ｒｏｓｓｍａｎ Ａ Ｙ. Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｍｙｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ
ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｕｎｇａｌ ｄａｔａｂａｓｅｓ [ ｏｎ￣ｌｉｎｅ] .
２０１１ꎬ Ａｖａｉｌａｂｌｅ: < ｈｔｔｐ: / / ｎｔ. ａｒｓ￣ｇｒｉｎ. ｇｏｖ / ｆｕｎｇａｌｄａ￣
ｔａｂａｓｅｓ / > .
[３] Ｌｉｕ Ｋ Ｙ. Ｃｏｌｏｒｅｄ ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ ｐｅｓｔｓ
ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｈｅｒｂａｃｅｏｕｓ ｆｌｏｗｅｒｓ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｍ] .
Ｈｅｆｅｉ: Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｈｏｕｓｅ (合
肥:安徽科技出版社)ꎬ ２００３. ７３ －７５.
[４] Ｅｂｉｈａｒａ Ｙꎬ Ｕｅｍａｔｓｕ Ｓꎬ Ｓｈｉｍｉｚｕ Ｔ. Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ
ｏｆ ｐａｒｓｌｅｙ (Ｐｅｔｒｏｓｅｌｉｎｕｍ ｃｒｉｓｐｕｍ) ａｎｄ ｎｉｐｐｌｅｆｒｕｉｔ (Ｓｏ￣
ｌａｎｕｍ ｍａｍｍｏｓｕｍ ) ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ
Ｋｌｅｂａｈｎ [Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊａｐａｎ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２０００ꎬ
６６(２): ９５.
[５] Ｄａｉ Ｆ Ｌ. Ｓｙｌｌｏｇｅ ｆｕｎｇｏｒｕｍ ｓｉｎｉｃｏｒｕｍ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[Ｍ] . Ｂｅｉｊｉｎｇ: Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｒｅｓｓ (北京:科学出版社)ꎬ
１９７９. ３０８ －３１３.
责任编辑:于金枝
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