全 文 ：植物病理学报
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA　 42(1): 1-9(2012)
收稿日期: 2011-03-10; 修回日期: 2011-09-26
基金项目: 广东省科技计划项目(2010B020401002); 广州市科技计划项目(4200-F10028)
通讯作者: 刘琼光,博士,副教授,主要从事植物病原细菌学研究; Tel: 020-85281803, E-mail: qgliu@scau. edu. cn
第一作者: 卢梦玲(1988 - ),女,湖北当阳人,硕士研究生,主要从事植物保护研究; E-mail: menglinglu88@gmail. com。
红掌细菌性疫病病原菌的 PCR特异性检测
卢梦玲1, 周晓云2, 曾伟达2, 陈一新2, 刘琼光1*
( 1 华南农业大学资源环境学院, 广州 510642; 2 广州花卉研究中心, 广州 510360)
摘要: 红掌细菌性疫病(Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae,简称 Xad)是红掌等天南星科花卉毁灭性病害,该病通
过带菌种苗调运不断在我国扩散蔓延,国内尚未有检测方法。 通过筛选和重新设计引物,建立了 Xad的 PCR检测方法,结
果表明,利用引物 Xad-F / Xad-R 进行 PCR,能扩增出检测 Xad的特异性 DNA片断,其灵敏度可达 1 ×102CFU / mL,DNA的
最低检出限为 0. 44 ng / μL,可用于红掌苗的带菌检测和红掌细菌病害的鉴定。
关键词: 红掌; Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae; PCR; 检测
Specific PCR detection of Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae 　 LU
Meng-ling1, ZHOU Xiao-yun2, ZENG Wei-da2, CHEN Yi-xin2, LIU Qiong-guang1 　 ( 1College of Natural Re-
source & Environment South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China; 2Guangzhou Flowering Plant Research
Centre,Guangzhou 510360, China)
Abstract: Bacterial blight of Anthurium caused by Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae (Xad) is a
destructive disease. The disease is spreaded with plant seedlings and no method for the pathogenic bacteria de-
tection in our country. In this study, a PCR system for Xad detection with the specific primers Xad-F / XadR
was developed. The results showed that Xad could be detected specifically by the system and the thresholds of
PCR were 1 ×102 CFU / mL for Xad suspension and 0. 44 ng / μL for its DNA. The method developed in this
study is effective to detect and identify the pathogen in Anthurium plants.
Key words: Anthurium andraeanum; Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae; PCR; detection
中图分类号: S432. 42　 　 　 　 　 文献标识码: A　 　 　 　 　 文章编号: 0412-0914(2012)01-0001-09
　 　 红掌(Anthurium andraeanum),天南星科花烛
属,全年开花,色彩鲜艳,观叶观花俱佳,是世界著
名的高档切花和盆花,深受世界各国人们的喜爱,
我国现已形成了一个非常可观的红掌产业。 由
Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae,(以下
简称 Xad)引起的细菌性疫病( anthurium bacterial
blight,以下简称 ABB)是红掌上毁灭性病害,Xad
为害叶片造成叶片枯死,也可为害维管束系统性侵
染造成整株死亡[1],1972 年在美国夏威夷报道[2]。
20 世纪 80 年代,此病害几乎摧毁整个夏威夷地区
的红掌花卉产业[3]。 来自红掌的 Xad 能够侵染其
他天南星科植物[4,5],如广东万年青属(Aglaonema
commutatum, Ag. crispum); 花烛属 ( Anthurium
andraeanum, An. crystallinum, An. scherzeria-
num);五彩芋属(Caladium hortulanum);花叶万年
青 属 ( Dieffenbachia maculata ); 麒 麟 叶 属
(Epipremnum pinnatum,麒麟叶); 喜林芋属(Phi-
lodendron scandens subsp. oxycardium, P.
selloum ); Syngonium podophyllum; Xanthosoma
caracu和 X. sagittifolium等植物[4,6]。 而来自合果
芋上的 Xad 寄主范围较窄,曾有人建议另列为致
病变种[4,7],但尚未被广泛接受。
　
植物病理学报 42 卷
由于缺乏有效的化学防治,ABB 防治策略主
要是预防、卫生清洁和使用无病繁殖材料,诊断由
X. axonopodis pv. dieffenbachiae 感染,目前主要
根据病菌的分离、生理生化特性、致病性测定或者
血清学试验[5,6],然而这些试验需要一至几星期才
能最后确定结果。 酶联免疫吸附(ELISA)其灵敏
度只能用于检测发病的植株 (大约 106 CFU /
mL) [8],在进行 ELISA之前,使用半选择性培养基
进行目的细菌的富集培养能够提高检测的灵敏度,
但该方法耗时较长(5 d),并且其灵敏度也受到样
品中其他细菌的影响[9]。 近年来,有一种新的选
择性培养基 NCTM4(Neomycin-Cephalexin-Trime-
thoprime-piv Mecillinam 4)能提高 Xad的分离准确
率,也能用于病菌的生物学和流行学研究[10],但细
菌分离培养的灵敏度有限。 因此,研究人员需要一
个快速、灵敏的方法来检测苗圃中未显症状的植物
材料。
X. axonopodis pv. dieffenbachiae 在欧洲和地
中海的植物保护组织(EPPO)、加勒比海植物保护
委员会(CPPC)及有些国家均将其列为检疫性有
害生物[11],并且在红掌主产国家仍然未发现该病
原细菌。 但近年来,国内外不断有关于 ABB 新病
区的报道[12 ~ 15],在我国广东、云南、海南、台湾等地
均有该病发生报道[12,16 ~ 18]。 我国花卉产业进出口
频繁,红掌种苗及成品苗数量较多,面积较大,加上
我国目前尚未将 Xad 列入检疫性有害生物,也没
有快速、灵敏的检测 Xad 方法,导致该病害在全国
范围扩散,且发病面积逐年增大,为此,开发特异和
灵敏的 PCR诊断技术尤为重要。
以 PCR为基础的技术已经有效地应用于黄单
胞杆菌属 Xanthomonas细菌的检测和鉴定,如来自
植物材料中的 X. axonopodis pv. citri [19]和 X. fra-
gariae[20],而在检测 Xad 方面,国外采用随机引物
扩增,经过 RAPD 分析获得 Xad 特异性的 SCAR
( sequence-characterized amplified region) 分子标
记,设计引物 PXadU / PXadL和 NXadU / NXadL 对
Xad 进行巢式 PCR 检测,但该方法只能检测严重
发病的植株,对于早期侵染和潜伏侵染的植株其检
测的灵敏度不够[21],特异性还有待于提高,而且巢
式 PCR要进行两轮 PCR,增加操作程序。 本研究
通过引物筛选和比较,拟建立一套更加快速、灵敏
和特异的 PCR 检测方法,旨在为红掌繁殖材料的
带菌检测和鉴定提供指导。
1　 材料与方法
1. 1　 供试材料和试剂
供试的 Xad菌株和其他植物病原细菌菌株来
自广东省,由华南农业大学资源环境学院细菌室保
存提供,见表 1。 发病和健康的红掌苗采自广州芳
村和珠海。 DNA 提取、回收和纯化试剂盒购自天
根生化科技(北京)有限公司。
1. 2　 PCR引物
参照国外报道的巢式-PCR检测红掌疫病细菌
Xad的引物[21]以及 Xad 的 ABC 蛋白序列重新设
计引物,见表 2。
1. 3　 PCR反应
将在普通培养基斜面生长 48 h 的细菌用无菌
水配成菌悬液,其 DNA 作为模板进行扩增。 采用
25 μL 的 PCR反应体系:10 × PCR buffer 2. 5 μL,
dNTPs 2 μL,正向引物 1 μL,反向引物 1 μL,模板
1 μL,Taq酶 0. 4 μL,ddH2O 17. 1 μL。 反应条件:
94℃ 5 min;94℃ 30 s, 53℃ (或 70℃) 30 s,72℃
1 min,35 个循环;72℃延伸 10 min,4℃保存。 PCR
产物在 1. 0%琼脂糖凝胶上电泳检测。
1. 4　 目的片段回收、克隆和测序
按试剂盒方法回收 DNA,克隆到 T载体上,送
至上海英骏基因公司测序。
1. 5　 引物重新设计
将引物 PXadU 和 PXadL 扩增的目的片段克
隆测序后,序列在 NCBI网站 BLAST比对,重新设
计引物对 Xad-F / Xad-R,用于 Xad特异性检测。
1. 6　 特异引物检测
供试菌株见表 1,用引物 Xad-F / XadR,参照方
法 1. 3。
1. 7　 灵敏度检测
Xad菌体浓度检测:将 Xad1 菌株接种在普通
细菌培养基上生长 48 h后,用无菌水配成菌悬液,
调整浓度为 1 × 1010CFU / mL,依次进行 10 倍梯度
稀释,以各稀释度的细菌菌悬液为模板,进行PCR
2
　
　 1 期 　 卢梦玲,等:红掌细菌性疫病病原菌的 PCR特异性检测
Table 1　 Tested Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae strains in the study
Strain No. Strain name Host
Xad1、 Xad2、 Xad3、 Xad4、 Xad5、
Xad6、 Xad7、 Xad8、 Xad9、 Xad10、
Xad11、 Xad12、 Xad13、 Xad14、
Xad16、Xad17、Xad19-1、Xad20
Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae Anthurium andraeanum
Xoo X. oryzae pv. oryzae Oryza sativa
Xoc X. oryzae pv. oryzicola O. sativa
Xcc X. campestris pv. campestris Brassica oleracea var. capitata
Xcm X. campestris pv. mangiferaeindicae Mangifera indica
Xac X. axonopodis pv. citri Citrus reticulata
Xam X. axonopodis pv. manihotis Manihot esculenta
Ech Erwinia chrysanthemi pv. zeae(Dickeya zeae) O. sativa
Ec E. (pectobacterium) carotovora Phalaenopsis amabilis
Cmm Clavibater michiganensis subsp. michiganensis Solanum lycopersicum
Cms Cl. michiganense subsp. sepedonicum S. tuberosum
Rs Ralstonia solanacearum S. lycopersicum
Aac Acidovorax avenae subsp. citrulli Citrullus lanatus
At Agrobacterium tumefaciens Vitis vinifera
Pse Pseudomonas sp. An. andraeanum
Erw Erwinia sp. An. andraeanum
Bac Bacillus sp. An. andraeanum
Pan Pantoea sp. An. andraeanum
Table 2　 Primers used in the study
Primer Sequence(5′→3′) Reference
PXadU AGGGCTCCCCATGCCGGAAT [21]
PXadL ACGCAATGCGCAGGGGAAAT [21]
NXadU AGCGCGGTACATTGTTGTTCGT [21]
NXadL GCGGATCCTGACTGAGCAAAG [21]
Xad-F ACACGGTCAAACGGAATGC This study
Xad-R TCTGCGATTTGGCTGGACA This study
扩增。 细菌浓度测定采用平板菌落计数法。
Xad细菌 DNA浓度检测:按试剂盒方法提取
Xad1 的 DNA,用 OD260和 OD280计算 DNA 浓度
(ng / μL) = OD260 ×50 ×稀释倍数。 以各稀释度的
细菌 DNA为模板,进行 PCR扩增。
参照方法 1. 3 进行 PCR扩增。
1. 8　 PCR检测验证
从喷雾接种 Xad1(浓度 1 ×108 CFU / mL)40 d
后的红掌苗圃中采集待测植株不同部位:叶片表现
症状的部位、叶片未显症状的部位、未显症状的茎
维管束、未接种的健康植株,按试剂盒方法提取植
物 DNA,进行 PCR检测。 此外,从广州、珠海等地
3
　
植物病理学报 42 卷
花场各采集 2 个发病植株样本,提取植物 DNA,采
用引物 Xad-F / Xad-R 进行 PCR 检测,参照 1. 3 方
法进行。
2　 结果与分析
2. 1　 PCR引物比较
利用 ABC 蛋白引物 PXadU / PXadL PCR 扩
增,得到 1 条大小约为 1 570 bp 的片段[21]。 将该
片段切胶回收、纯化、测序,重新设计引物为 Xad-
F / Xad-R。
利用引物 Xad-F / Xad-R、NXadU / NXadL、PX-
adU / PXadL以及巢式 PCR 技术,电泳后比较,结
果表明,新设计的引物 Xad-F / Xad-R 及引物 PX-
adU / PXadL所扩增的条带较亮(图 1),但是引物
PXadU / PXadL片段大(约 1 570 bp),有时候会出
现非特异性条带(图片未显示)。 用新设计的引物
Xad-F / Xad-R PCR 扩增后得到 1 条大小约为 653
bp的特异性条带,且利用该引物对菌株 Xad1、
Xad2、Xad3、Xad4、Xad5、Xad6、Xad7、Xad8、Xad9、
Xad10、 Xad11、 Xad12、 Xad13、 Xad14、 Xad16、
Xad17、Xad19-1、Xad20 的 DNA 进行扩增,均得到
单一的 653 bp片段(图 2)。
2. 2　 特异性比较
利用本研究设计的引物 Xad-F / Xad-R 对
Xad5、Xad9 和其他 13 种不同的植物病原细菌进行
PCR扩增,结果表明,只有 Xad5 和 Xad9 能扩增出
653 bp目的片段(图 3)。 此外,用该引物 PCR 扩
增 Xad1、Xad3、Xad6 以及从红掌上分离的 4 种非
病原细菌,结果表明,只有 Xad1、Xad3 和 Xad6 能
扩增出 653 bp目的片段(图 4),说明引物 Xad-F /
Xad-R对病原细菌 Xad的 PCR扩增具有特异性。
2. 3　 灵敏度检测
2. 3. 1　 菌体稀释　 以 Xad1 细菌菌体经一系列 10
倍梯度稀释作为模板,用 Xad-F / Xad-R 引物进行
PCR 扩增,结果表明,菌体稀释浓度为 1 × 102
CFU / mL 仍可扩增出 653 bp 目的片段(图 5),由
此说明 PCR 检测菌体的最低检出限可达 1 × 102
CFU / mL。
Fig. 1　 PCR amplification results of Xad strains with different primers
M:DL-2000 marker; Lane 1 and 2:Xad1 and Xad17 with primers Xad-F / Xad-R; Lane 4 and 5:Xad1 and Xad17 with
primers NXadU / NXadL; Lane 7 and 8:Xad1 and Xad17 with primers PXadU / PXadL; Lane 10 and 11:Xad1 and Xad17
with primers PXadU / PXadL and NXadU / NXadL by nest PCR; Lane 3,6,9 and 12:Water with different primers, respectively.
Fig. 2　 PCR amplification results of different Xad strains primers Xad-F / Xad-R
M:DL-2000 marker; Lane 1-18:Xad1,Xad2,Xad3,Xad4,Xad5,Xad6,Xad7,Xad8,Xad9,Xad10,Xad11,Xad12,Xad13,
Xad14,Xad16,Xad17,Xad19-1,Xad20, respectively; Lane19: ddH2O.
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　 1 期 　 卢梦玲,等:红掌细菌性疫病病原菌的 PCR特异性检测
Fig. 3　 PCR amplification results of Xad and some plant pathogenic
bacterial strains with primers Xad-F / Xad-R
M:DL-2000 marker; 1:Xad5; 2:Xad9; 3:Xanthomonas oryzae pv. oryzae; 4:Agrobacterium tumefaciens; 5:X. campestris pv.
mangiferaeindicae; 6:Acidovorax avenae subsp. citrulli; 7:Ralstonia solanacearum; 8:Clavibater michiganense subsp.
sepedonicum; 9:Cl. michiganensis subsp. michiganensis; 10:Erwinia chrysanthemi pv. zeae; 11:E. carotovora;
12:X. axonopodis pv. manihotis; 13:X. axonopodis pv. citri; 14:X. oryzae pv. oryzicola;
15:X. campestris pv. campestris; 16: ddH2O.
Fig. 4　 PCR amplification results of Xad and non-pathogenic
bacterial strains with primers Xad-F / Xad-R
M:DL-2000 marker; 1:Xad1; 2:Xad3; 3:Xad6; 4:Pseudomonas sp. ; 5:Erwinia sp. ; 6:Bacillus sp. ; 7:Pantoea sp. ; 8: ddH2O.
Fig. 5　 Sensitivity of PCR detection of Xad1 bacterial cells with primers Xad-F / Xad-R
M:DL-2000 marker; 1:1 ×1010 CFU / mL; 2:1 ×109 CFU / mL; 3:1 ×108 CFU / mL; 4:1 ×107 CFU / mL; 5:1 ×106 CFU / mL;
6:1 ×105 CFU / mL; 7:1 ×104 CFU / mL; 8:1 ×103 CFU / mL; 9:1 ×102 CFU / mL; 10:1 ×101 CFU / mL; 11: ddH2O.
5
　
植物病理学报 42 卷
2. 3. 2　 菌体 DNA稀释　 提取 Xad1 菌体 DNA,测
定其浓度为 44 ng / μL,经 10 倍梯度稀释作为模
板,用 Xad-F / Xad-R 引物进行 PCR 扩增,结果表
明,稀释 100 倍以后,仍然可扩增出 653 bp 目的片
段,但稀释 1 000 倍以后,未能扩增目的片段(图
6)。 由此认为,菌体 DNA 的最低检出限为 0. 44
ng / μL。
2. 4　 发病植物组织 PCR检测
取人工接种感染 Xad 的红掌植株,提取不同
部位 DNA,用 Xad-F / Xad-R引物进行 PCR检测和
验证,结果表明,表现症状部位以及未表现症状的
红掌叶片和茎的维管束组织中均能扩增出 653 bp
的目的片段,而健康植株中不能扩增任何片段
(图 7)。 从来自广州、珠海花场采集的 4 个 ABB
样本中,PCR结果全部为阳性(图 7),表明 Xad-F /
Xad-R 引物可用于红掌 ABB 病害诊断和病原
检测。
3　 讨论
ABB在国外不少国家列为检疫对象,因为种
苗带菌是该病害远距离扩散的重要途径[11],因此,
有关该病原细菌的快速、灵敏和准确的检测方法受
到国内外普遍关注。 本研究中我们建立了一套可
靠和灵敏的方法,用来检测来自红掌上的 Xad。
根据 Xad 编码的假定 ABC 2 型转运蛋白
(putative ABC type 2 transporter protein)基因序
列[21],PCR扩增该蛋白的 1 570 bp基因序列,通过
克隆、测序,再根据其保守区域重新设计引物 Xad-
F / Xad-R,PCR 扩增 Xad 的片段长度为 653 bp,将
该序列与 NCBI 网站基因数据库进行 BLAST,结
果表明, 与 X. axonopodis pv. dieffenbachiae 假
定的 ABC转运蛋白基因亲水区组份(putative ABC
Fig. 6　 Sensitivity of PCR detection of Xad1 DNA with primers Xad-F / Xad-R
M:DL-2000 Marker; 1:44 ng / μL ; 2:4. 4 ng / μL; 3:0. 44 ng / μL; 4:4. 4 × 10 -2 ng / μL; 5:4. 4 × 10 -3 ng / μL;
6:4. 4 × 10 -4 ng / μL; 7:4. 4 × 10 -5 ng / μL; 8:4. 4 × 10 -6 ng / μL;9:4. 4 × 10 -7 ng / μL; 10: ddH2O.
Fig. 7　 PCR detection of Xad from Anthurium andraeanum plants and ABB
symptomatic plants with primers Xad-F / Xad-R
M:DL-2000 Marker; 1:Positive control; Lane2-Lane4: Xad inoculated Anthurium plants with symptomatic plant leaf,
asymptomatic leaf and asymptomatic vascular,respectively; Lane 5 and 6:Healthy plant; Lane 7 and 8:ABB diseased
plants from Guangzhou; Lane 9 and 10:A. andraeanum diseased plants from Zhuhai; 11:Positive control; 12: ddH2O.
6
　
　 1 期 　 卢梦玲,等:红掌细菌性疫病病原菌的 PCR特异性检测
transporter hydrophilic component gene, 编 号:
DQ096647. 1)具有 100%相似性;另外,与紫色球
海胆(Strongylocentrotus purpuratus)基因组中具有
32 个碱基 91%的同源性(32 / 35 = 91% ),而紫色
球海胆属于无脊椎动物棘皮动物门海胆纲的动物,
不是植物病原物。 此外,基因数据库 blast 结果没
有其他较高相似性序列,表明该 653 bp DNA 片段
对于 Xad具有高度的特异性。 进一步的 blastn 结
果表明, Xad-F / Xad-R引物 PCR扩增的 653 bp 编
码的氨基酸序列与 X. oryzae pv. oryzicola 假定的
ABC转运蛋白( putative ABC transporter protein)
具有 61%同源性(131 / 216 = 61% ),与来源于 X.
oryzae pv. oryzae 假定的 ATP 结合蛋白( putative
ATP binding protein)只有 30%同源性(47 / 155 =
30% )。 近年来,Pagani 和 Ritchie[22]克隆和测序了
来自 X. arboricola pv. pruni 编码 ABC 转运蛋白
中一个基因片段,该片段能够特异检测 X. arbori-
cola pv. pruni,且认为该基因簇可用于黄单胞菌
(Xanthomonas)的分子检测。 然而本研究中 Xad-
F / XadR引物扩增产生的 653 bp 编码的氨基酸序
列 blastn结果与 X. arboricola pv. pruni 没有同源
性。 此外,本研究中 Xad-F / Xad-R 引物不能扩增
X. oryzae pv. oryzicola 和 X. oryzae pv. oryzae,也
不能 PCR 扩增其他的黄单胞菌变种,包括 X.
campestris pv. campestris 和 pv. mangiferaeindicae
及 X. axonopodis pv. citri 和 pv. mahihotis。 对于
其他的植物病原细菌,如 Agrobacterium tumefa-
ciens、 Acidovorax avenae subsp. citrulli、 Ralstonia
solanacearum、Clavibater michiganense subsp. sepe-
donicum、Cl. michiganensis subsp. michiganensis、Er-
winia chrysanthemi pv. zeae (Dickeya zeae)和 E.
carotovora等,用引物 Xad-F / Xad-R 不能扩增得到
653 bp目的片段。 同时,从红掌植株中分离得到
的 4 个非植物病原细菌属,用该引物不能扩增目的
片段,相反,本研究供试的 18 个红掌 Xad 菌株,
PCR都能获得 653 bp单一目的片段。
来自红掌上的 Xad 能够侵染较多的天南星科
植物,而来自天南星科不同寄主植物上大部分的
Xad菌株具有相似的 AFLP图谱 ,其中来自合果芋
属( syngonium)的 Xad 用 PxadU / PxadL 和 Nx-
adU / NxadL引物进行巢式 PCR 也能够扩增该菌
株[21],但侵染合果芋属的 Xad,对红掌没有致病
力[4,7,21]。 本研究中,供试的 Xad 菌株全部来自不
同的红掌品种上,没有其他天南星科植物上的菌
株,此外,黄单胞菌致病变种较多,而本研究中供试
的菌株有限,关于 Xad-F / Xad-R 引物用来检测来
自不同天南星科植物上的菌株,以及对更多黄单胞
菌致病变种的特异性,有待于进一步试验。 尽管如
此,综合上述,我们认为 Xad-F / Xad-R 引物对于检
测来自红掌上的 X. axonopodis pv. dieffenbachiae
是可行的。
用引物 PXadU / PXadL 第一轮 PCR 只能检测
出大约 107 CFU / mL Xad 细菌,而且只能检测出严
重发病的植物,对于早期侵染和潜伏侵染的病原细
菌则检测不出来,而用 NXadL / NXadU引物进行第
二轮 PCR,其检出最低限大约为 103 CFU / mL[21]。
但本研究中用这两套引物进行巢式 PCR,并没有
提高检测的灵敏度,效果并不理想(图 1),分别用
其中的 1 对引物直接 PCR 时,有时会出现非特异
性条带(结果未发表),而且用 PXadU / PXadL 引物
PCR扩增片段偏大(1 570 bp),NXadU / NXadL 引
物 PCR扩增(785 bp)灵敏度不够高。 而用 Xad-F /
Xad-R引物,PCR 检测 Xad 菌体的最低检出限可
达 1 ×102 CFU / mL,检测菌体 DNA 的最低检出限
为 0. 44 ng / μL,其灵敏度高于以往的研究。
以往报道表明,Xad 可潜伏在红掌中 1 年以
上,使得具有潜伏侵染的红掌繁殖材料在国内和国
际之间传播[1]。 一些被认为具有抗性的系统性感
染的红掌品种,能在体内累积相当数量的细菌,并
在几个月内不表现症状[23]。 此外,红掌上还有其
他细菌和真菌性病害[24 ~ 27 ],如由假单胞菌[24,27]、
欧文氏菌[25]和真菌等引起的病害在症状上与 Xad
引起的病害症状相似,肉眼不容易鉴别,这对生产
上的病害鉴别、诊断带来不便,对进出口红掌种苗
的细菌性疫病检测也造成不便。 本研究建立的
PCR方法,除了能检测发病的红掌植株外,还可检
测出未表现症状的红掌叶片和茎的维管束组织中
的 Xad,而健康植株中不能扩增出任何片段(图
7)。 因此,本研究认为,PCR 方法可以作为一种有
效的 ABB诊断工具,特别对于苗圃中红掌无性繁
7
　
植物病理学报 42 卷
殖材料的健康诊断,以及 Xad 在红掌体内运转的
检测、发生的流行规律和检疫防治,具有重要实际
意义。
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曾晓葳
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