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作 者 ：范妙华  李纪元  范正琪  田敏  倪穗

期 刊 ：西北植物学报 2008年 1期

关键词：千年桐；硬脂酰脱饱和酶；丝状真菌；表达载体；

Keywords:Vernicia montana, stearoyl-ACP desaturase(SAD), filamentous fungi, expression vector,

摘 要 ：以发育中的千年桐种子总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增得到硬脂酰脱饱和酶基因SAD的cDNA序列。该序列长度为1 191 bp,编码396个氨基酸。推测的分子量为45 541.01 u,等电点pI为6.05。BLAST分析表明,该cDNA序列与其它已登录的SAD基因cDNA序列一致性最高可达93.1%;编码的氨基酸蛋白序列性一致最高为89%。同时,构建了由构巢曲霉3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的gpdA启动子驱动的丝状真菌表达载体,通过冻融法转入农杆菌中,PCR鉴定表明,pBAR-SAD已转入农杆菌EHA105中,成功构建了农杆菌工程菌株。

Abstract:The total RNA was extracted from the developing seeds of Vernicia montana,and the sequence of SAD was obtained by RT-PCR reaction,which was 1 191 bp long and encoded a protein of 396 amino acides with Mr=45 541.01 u and pI=6.05.The deduced nucleotides had

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