全 文 ：林业科学研究摇 圆园员源袁圆苑渊远冤院苑缘圆 苑缘苑
云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员源冤园远鄄园苑缘圆鄄园远
三年桐尧千年桐感染枯萎病病原菌后的生理反应
杨素素袁 高摇 暝袁 朱慧萍袁 刘英冠袁 汪阳东袁 陈益存鄢
渊中国林业科学研究院亚热带林业研究所袁浙江 富阳摇 猿员员源园园冤
收稿日期院 圆园员源鄄园源鄄圆缘
基金项目院 国家自然科学基金青年科学基金项目渊猿员圆园园源愿缘冤
作者简介院 杨素素渊员怨怨员要冤袁女袁浙江衢州人袁在读硕士研究生袁主要研究方向院油料植物抗病分子机制援
鄢 通讯作者院 女袁副研究员袁博士袁主要研究方向院油料植物分子育种援 耘鄄皂葬蚤造院赠蚤糟怎灶赃糟澡藻灶岳 员远猿郾 糟燥皂
摘要院枯萎病是油桐毁灭性病害遥 中国广泛种植的油桐有三年桐和千年桐袁三年桐易感枯萎病袁千年桐抗枯萎病遥
为探讨三年桐与千年桐在枯萎病应答过程中的差异袁在对油桐枯萎病灾区调研的基础上袁进行枯萎病病原菌的分
离尧鉴定袁并进一步探讨三年桐尧千年桐接种枯萎病病原菌后超氧化物歧化酶渊杂韵阅冤尧过氧化物酶渊孕韵阅冤尧过氧化氢
酶渊悦粤栽冤活性和丙二醛渊酝阅粤冤含量的变化遥 结果表明院油桐枯萎病病原菌为尖孢镰刀菌袁接种试验显示千年桐在
接种尖孢镰刀菌后 杂韵阅尧孕韵阅尧悦粤栽较三年桐均呈现较高活性袁在接种后 杂韵阅尧孕韵阅活性先升高后降低袁悦粤栽 活性升
高并维持高活性袁酝阅粤含量变化不明显曰三年桐 杂韵阅 活性和 酝阅粤 含量均先升高后降低袁孕韵阅 活性先降低再升高袁
悦粤栽活性先降低后升高又降低遥 千年桐作为抗病种袁其抗病性可能与其本身具有较高的 杂韵阅尧孕韵阅尧悦粤栽 活性有关袁
并且和病原菌感染后酶活上升有关曰三年桐为易感病种袁接种后 杂韵阅尧孕韵阅尧悦粤栽 活性有变化袁但仍不能抵御病原菌
的危害遥
关键词院油桐枯萎病曰尖孢镰刀菌曰三年桐曰千年桐
中图分类号院杂苑远猿援 员 文献标识码院粤
孕澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 砸藻泽责燥灶泽藻 燥枣 灾藻则灶蚤糟蚤葬 枣燥则凿蚤 葬灶凿 灾援 皂燥灶贼葬灶葬 怎责燥灶
陨灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂
再粤晕郧 杂怎鄄泽怎袁 郧粤韵 酝蚤灶早袁 在匀哉 匀怎蚤鄄责蚤灶早袁 蕴陨哉 再蚤灶早鄄早怎葬灶袁 宰粤晕郧 再葬灶早鄄凿燥灶早袁 悦匀耘晕 再蚤鄄糟怎灶
渊砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 杂怎遭贼则燥责蚤糟葬造 云燥则藻泽贼则赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 云怎赠葬灶早摇 猿员员源园园袁 在澡藻躁蚤葬灶早袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽怎灶早 憎蚤造贼 蚤泽 葬 凿藻增葬泽贼葬贼蚤灶早 凿蚤泽藻葬泽藻 枣燥则 贼怎灶早 贼则藻藻袁 憎澡蚤糟澡 蚤泽 则藻早葬则凿藻凿 葬泽 贼澡藻 贼怎灶早 责造葬早怎藻援 灾藻则灶蚤糟蚤葬 枣燥则凿蚤蚤 葬灶凿
灾援 皂燥灶贼葬灶葬 葬则藻 贼憎燥 悦澡蚤灶藻泽藻 灶葬贼蚤增藻 贼怎灶早 泽责藻糟蚤藻泽援 灾援 枣燥则凿蚤蚤 蚤泽 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 贼燥 贼怎灶早 憎蚤造贼 凿蚤泽藻葬泽藻 憎澡蚤造藻 灾援 皂燥灶贼葬灶葬 蚤泽
则藻泽蚤泽贼葬灶贼援 栽燥 藻曾责造燥则藻 贼澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 泽责藻糟蚤藻泽 则藻泽责燥灶凿蚤灶早 贼燥 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶袁 贼澡藻 则藻泽藻葬则糟澡 枣燥糟怎泽藻凿 燥灶 贼澡藻 蚤泽燥造葬鄄
贼蚤燥灶 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶袁 葬灶凿 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 凿蚤泽皂怎贼葬泽藻 渊杂韵阅冤袁 责藻则燥曾蚤凿葬泽藻 渊孕韵阅冤 葬灶凿
糟葬贼葬造葬泽藻 渊悦粤栽冤 葬灶凿 皂葬造燥灶凿蚤葬造凿藻澡赠凿藻 渊酝阅粤冤 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 泽责藻糟蚤藻泽 葬枣贼藻则 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 憎藻则藻
皂藻葬泽怎则藻凿援 陨贼 贼怎则灶藻凿 燥怎贼 贼澡葬贼 贼澡藻 贼怎灶早 憎蚤造贼 责葬贼澡燥早藻灶 憎葬泽 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂援 栽澡藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼 则藻增藻葬造藻凿 贼澡葬贼
贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 杂韵阅袁 孕韵阅 葬灶凿 悦粤栽 蚤灶 灾援 皂燥灶贼葬灶葬 憎藻则藻 澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 灾援 枣燥则凿蚤蚤 葬枣贼藻则 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 云援 燥曾赠泽鄄
责燥则怎皂援 蚤灶 灾援 皂燥灶贼葬灶葬袁 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 杂韵阅 葬灶凿 孕韵阅 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 葬贼 枣蚤则泽贼 葬灶凿 贼澡藻灶 凿藻糟则藻葬泽藻凿袁 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 悦粤栽 蚤灶鄄
糟则藻葬泽藻凿 葬贼 枣蚤则泽贼 葬灶凿 皂葬蚤灶贼葬蚤灶藻凿 葬贼 葬 澡蚤早澡 造藻增藻造袁 贼澡藻 酝阅粤 糟燥灶贼藻灶贼 澡葬凿 灶燥 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 糟澡葬灶早藻援 陨灶 灾援 枣燥则凿蚤蚤袁 遭燥贼澡 杂韵阅
葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬灶凿 酝阅粤 糟燥灶贼藻灶贼 憎藻灶贼 怎责 葬贼 贼澡藻 遭藻早蚤灶灶蚤灶早 葬灶凿 贼澡藻灶 凿燥憎灶袁 贼澡藻 孕韵阅 葬糟贼蚤增蚤贼赠 则藻凿怎糟藻凿 葬贼 枣蚤则泽贼 葬灶凿 贼澡藻灶 蚤灶鄄
糟则藻葬泽藻凿袁 贼澡藻 悦粤栽 葬糟贼蚤增蚤贼赠 凿藻糟则藻葬泽藻凿 葬贼 枣蚤则泽贼 葬灶凿 贼澡藻灶 则燥泽藻 葬灶凿 凿藻糟则藻葬泽藻凿 葬贼 造葬泽贼援 陨灶 糟燥灶糟造怎泽蚤燥灶袁 贼澡藻 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 灾援
皂燥灶贼葬灶葬 燥憎灶藻凿 澡蚤早澡藻则 造藻增藻造 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 杂韵阅袁 孕韵阅袁 悦粤栽袁 葬灶凿 泽澡燥憎藻凿 皂燥则藻 蚤灶糟则藻葬泽蚤灶早 怎责燥灶 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 贼澡藻
责葬贼澡燥早藻灶 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 灾援 枣燥则凿蚤蚤援
运藻赠 憎燥则凿泽院栽怎灶早 憎蚤造贼曰 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂曰 灾藻则灶蚤糟蚤葬 枣燥则凿蚤曰 灾藻则灶蚤糟蚤葬 皂燥灶贼葬灶葬援
第 远 期 杨素素等院三年桐尧千年桐感染枯萎病病原菌后的生理反应
通常所说的油桐袁即狭义的油桐袁为三年桐
渊灾藻则灶蚤糟蚤葬 枣燥则凿蚤蚤渊匀藻皂泽造援 冤 粤蚤则赠 杂澡葬憎冤袁广义的油桐是
大戟科渊耘怎责澡燥则遭蚤葬糟藻葬藻冤油桐属渊灾藻则灶蚤糟蚤葬 蕴燥怎则援 冤植物
的统称袁包括三年桐尧千年桐渊灾援 皂燥灶贼葬灶葬渊蕴燥怎则援 冤冤
和日本油桐渊灾援 糟燥则凿葬贼葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 粤蚤则赠 杂澡葬憎冤遥 油
桐是我国四大木本油料植物之一袁其种子可提炼桐
油袁桐油是一种优良的干性植物油袁在工业上有广泛
的用途咱员暂 袁可用于制漆尧塑料尧人造橡胶尧油墨等袁同
时还是重要的生物柴油原料咱圆 原 猿暂 袁具有可再生尧安
全尧无污染的特点袁其发展前景十分广阔咱源暂 遥
油桐枯萎病有野桐瘟冶之称袁员怨猿怨 年在广西壮族
自治区首次被发现袁并确定其病原菌为尖孢镰刀菌
渊云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 杂糟澡造藻糟澡贼冤 咱缘暂 袁此后 圆园 多年中油
桐枯萎病给油桐产业造成了毁灭性的灾害遥 油桐枯
萎病机理及防治难题也一直未能得到有效解决袁
员怨怨员要圆园员员 年间油桐枯萎病相关文献鲜少遥 圆园园怨
年广西壮族自治区田林县发生大面积油桐渊三年
桐冤枯萎并死亡袁同时表现出多发病症遥 作者研究发
现袁当地枯萎病尧叶枯病均有发生咱远暂 袁给油桐产业带
来了极大的危害遥 油桐枯萎病是一种维管束病害袁
病原菌由根部入侵袁沿木质部导管向上蔓延袁造成油
桐半株或全株枯萎袁主要危害 猿尧源 年生以上的三年
桐袁最高危害率高达 怨园豫 遥 油桐感染枯萎病之后的
主要病症为根部腐烂尧枝干黑褐色尧叶片黄化咱苑暂 遥 由
于油桐枯萎病致病机理尚不明确袁以不感病的千年
桐为砧木袁三年桐为接穗进行嫁接袁是目前最有效的
防治方法咱苑暂 遥
为进一步确认油桐枯萎病再度泛滥的病原菌袁
本文从广西田林县油桐枯萎病灾区连续两年采集样
本袁进行病原菌分离尧纯化尧鉴定袁测定了三年桐尧千
年桐在病原菌侵染后的生理指标袁包括超氧化物歧
化酶 渊 杂韵阅冤尧过氧化物酶 渊 孕韵阅冤尧过氧化氢酶
渊悦粤栽冤尧丙二醛渊酝阅粤冤含量的变化袁为进一步研究
油桐抗感枯萎病机理及病害防治提供思路遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 样品采集
供试材料取自广西壮族自治区田林县油桐主产
区袁在 圆园园怨 和 圆园员园 年 愿 月分别采集发病植株茎干
部部位遥 样品现场采集后存放于封口袋中袁置于低
温保鲜盒袁带回实验室进行病原物分离尧鉴定遥
员郾 圆摇 病原物分离尧纯化
用自来水将感病叶片表面的颗粒污染物清洗干
净袁在 苑缘豫乙醇渊灾 辕 灾冤中浸泡约 源园 泽袁随后在 员豫 次
氯酸钠溶液中表面消毒 源 皂蚤灶袁在 苑缘豫乙醇中漂洗
猿园 泽渊去除残余的次氯酸钠冤袁最后用无菌蒸馏水清
洗多次渊猿 次以上冤并用无菌滤纸吸干水分遥 用无菌
手术刀片在茎杆病健交界处切取约 园郾 缘 糟皂圆的组织
块袁移植于麦芽粉琼脂培养基 渊 皂葬造贼 藻曾贼则葬糟贼 葬早葬则袁
酝耘粤冤平板上袁圆远益黑暗条件下培养遥 培养基中预先
加入硫酸链霉素渊缘园 皂早窑蕴 原员 冤和盐酸四环素渊圆园
皂早窑蕴 原员冤以防止细菌的污染遥 培养 源 凿 后袁将从组
织块边缘长出的菌丝转接至新鲜马铃薯葡萄糖琼脂
培养基渊责燥贼葬贼燥 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则袁孕阅粤冤中进行纯化咱苑暂 遥
员郾 猿摇 病原物形态学与分子鉴定
将病原物分别接种在 孕阅粤 中观察培养性状和
特征遥 病原物总基因组提取采用 酝怎造贼蚤泽燥怎则糟藻 郧藻鄄
灶燥皂蚤糟 阅晕粤 酝蚤灶蚤责则藻责 试剂盒渊粤曾赠早藻灶公司冤遥 利用核
糖体 阅晕粤内转录间隔区渊蚤灶贼藻则灶葬造 贼则葬灶泽糟则蚤遭藻凿 泽责葬糟藻则袁
陨栽杂员 原 缘郾 愿杂 原 陨栽杂圆冤和翻译延长因子 琢渊贼则葬灶泽造葬贼蚤燥灶 藻鄄
造燥灶早葬贼蚤燥灶 枣葬糟贼燥则 葬造责澡葬袁耘云 原员琢冤两个保守基因对病原
菌进行分子鉴定遥 陨栽杂 基因扩增引物渊缘忆 原 栽悦悦郧鄄
栽粤郧郧栽郧粤粤悦悦栽郧悦郧郧 原 猿忆冤 和 陨栽杂源 渊 缘忆 原 栽悦悦栽悦鄄
悦郧悦栽栽粤栽栽郧粤栽粤栽郧悦 原 猿忆冤 咱愿暂 袁 孕悦砸 扩增反应条件
为院怨源益预变性 源 皂蚤灶 后袁怨源益变性 源园 泽袁缘缘益退火
缘园 泽袁苑圆益延伸 远园 泽袁共 猿缘 个循环袁最后在 苑圆益终延
伸 员园 皂蚤灶遥 耘云 原员琢基因扩增用引物 耘云 原员琢 原 云渊缘忆
原 粤栽郧郧郧栽粤粤郧郧粤粤郧粤悦粤粤郧粤悦 原 猿忆冤和 耘云 原 员琢 原
砸渊缘忆 – 郧郧粤粤郧栽粤悦悦粤郧栽郧粤栽悦粤栽郧栽栽 原 猿忆冤袁孕悦砸
扩增反应条件为院怨源益预变性 源 皂蚤灶后袁怨源益变性 源缘
泽袁远园益退火 源缘 泽袁苑圆益延伸 怨园 泽袁共 猿缘 个循环袁最后
在 苑圆益终延伸 员园 皂蚤灶遥 利用 员豫的琼脂糖电泳后袁
经 阅晕粤 郧藻造 耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 试剂盒渊粤曾赠早藻灶 公司冤纯化后
送上海生工生物工程技术服务有限公司测序遥
病原物 陨栽杂 和 耘云 原 员琢 基因序列分别进行
月蕴粤杂栽比对后获得多个匹配的序列记录袁用 悦蕴哉杂栽鄄
粤蕴 载软件包进行多序列比对袁用 郧耘晕耘阅韵悦 软件进
行适当修正并去除序列两端不准确部分遥 用
酝耘郧粤远郾 园远 软件分析系统发育关系袁以 运蚤皂怎则葬 圆 参
数计算遗传距离袁采用邻接法渊灶藻蚤早澡遭燥则 躁燥蚤灶蚤灶早 葬灶葬造鄄
赠泽蚤泽袁晕允冤构建进化树袁重复次数为 员 园园园 次遥
员郾 源摇 病原物接种方法
健康植物材料源自栽培于温室中的油桐实生
苗袁三年桐和千年桐各 源缘 株袁每组 员缘 株袁分为 猿 组
重复遥 取长满平皿的培养物菌块渊直径 员 糟皂冤袁置
于 孕阅月 液体培养基中袁员远园 则责皂袁缘 凿袁在荧光显微镜
猿缘苑
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
下用细胞计数板计数袁当孢子达到 远 伊 员园远个窑
皂蕴 原员后袁备用遥 取健康油桐材料袁挖开根部土壤袁
用自来水冲洗干净后袁根部于 苑缘豫乙醇中浸泡 员
皂蚤灶袁园郾 缘 豫次氯酸钠浸泡 猿 皂蚤灶袁怨园豫乙醇中浸泡
猿园 泽袁无菌水冲洗 猿 次以上袁在根部用无菌刀轻轻
切伤袁淋上述孢子液 员园园 皂蕴咱怨暂 袁后植入土壤中遥 感
染后的油桐植株在人工气候箱渊砸栽韵孕 原 缘园园阅袁托
普仪器公司冤中 圆远益恒温培养渊愿 澡 光照 辕 员远 澡 黑
暗冤袁保持 怨缘豫相对湿度袁定期观察植株发病情况
并记录病症遥 根据病症情况袁分别采集侵染前以及
侵染后不同时期袁即侵染前 渊园 凿冤尧侵染前期 渊圆
凿冤尧侵染中期渊缘 凿冤和侵染后期渊愿 凿冤的油桐根部
进行生理指标的测定遥
员郾 缘摇 植株生理指标的测定
取上述不同时期的油桐植株根部袁剪碎袁各称取
园郾 缘 早袁用锡箔纸包裹袁迅速置于液氮中冷冻袁并放于
原苑园益冰箱中保存遥 待进行生理指标测定时将其取
出袁提前将植物组织研磨机渊允载云杂栽孕砸孕袁上海净信实
业发展有限公司冤用液氮预冷袁迅速将上述样品在冷
冻研磨机中进行研磨 猿园 泽袁连续进行两次袁在研磨完
的样品中加入提前预冷的 责匀 值为 苑郾 愿 的磷酸缓冲
液袁上下颠倒混匀袁置于冰上袁作生理指标的测定遥
用氮蓝四唑渊晕月栽冤光化还原法测定超氧化物歧
化酶渊杂韵阅冤的活性咱员园暂 袁用愈伤木酚显色法测定过氧
化物酶渊孕韵阅冤的活性咱员员暂 袁用过氧化氢渊匀圆韵圆 冤分解
法测定过氧化氢酶渊悦粤栽冤的活性咱员员暂 袁采用硫代巴比
妥酸渊栽月粤冤比色法测定丙二醛渊酝阅粤冤含量咱员园暂 遥
员郾 远摇 数据处理与分析
获得油桐植株不同侵染时期根部的 猿 次以上酶
活性测定数据袁取其平均值作为 员 个生物学重复的
结果袁共进行 猿 次生物学重复袁并用 杂孕杂杂员怨郾 园 软件
计算标准偏差遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 病原物的分离培养
茎部病症组织在 孕阅粤平板上培养 猿 凿后即可见
菌丝在边缘切口处长出遥 经 孕阅粤 培养基纯化后获
得若干纯培养物渊图 员 原 耘冤袁根据培养性状渊包括生
长速度和菌落特征等冤将菌株初步划分为若干分类
单元遥
粤院油桐枯萎病株曰月院油桐枯萎病株枝干曰悦院油桐枯萎病株树皮曰阅院孕阅粤平板上分离病原菌曰
耘院孕阅粤平板上纯化菌株曰云院大分生孢子及小分生孢子渊标尺 越 缘 滋皂冤
图 员摇 油桐渊三年桐冤枯萎病病原菌分离尧纯化尧形态学鉴定
圆郾 圆摇 病原物致病性测定
利用上述分类单元中的代表性菌株进行致病性
测定渊回接试验冤袁其中某一菌株能引起茎部病斑进
而呈现褐色袁叶片萎黄袁在 圆远益 渊愿 澡 光照 辕 员远 澡 黑
暗冤和 怨缘豫相对湿度条件下孵育 缘 凿后袁茎部病斑长
度即可达到 圆园 猿园 皂皂袁宽度 员园 圆园 皂皂遥 茎部经
再分离试验袁所获分离物与菌株完全一致袁符合柯赫
法则遥
圆郾 猿摇 病原物的培养性状
病原菌在 孕阅粤培养基上生长迅速袁圆愿益生长源 凿
后袁菌落直径可达 猿 缘 糟皂袁菌丝茂密袁棉絮状袁气生
菌丝白色袁菌落基座大多带有不同程度的紫色渊图 员
原 阅冤袁纯化培养菌株见图 员 原 耘袁孢子形态见图 员
原 云遥
源缘苑
第 远 期 杨素素等院三年桐尧千年桐感染枯萎病病原菌后的生理反应
圆郾 源摇 病原物的系统发育分析
孕悦砸产物琼脂糖电泳结果显示袁耘云 原 员琢 和 陨栽杂
基因片段的大小均在 缘园园 遭责 左右遥 序列经 月蕴粤杂栽
比对后发现这两个基因序列与 郧藻灶月葬灶噪 数据库中多
个 云援 韵曾赠泽责燥则怎皂渊尖孢镰刀菌冤菌株的相似性均达到
员园园豫 遥 系统发育分析也表明病原菌株与已报道的
云援 燥曾赠泽责燥则怎皂渊尖孢镰刀菌冤均在一个分支内渊自展支
持率分别达 远源豫 和 员园园豫 冤袁与镰孢属 渊 云怎泽葬则蚤怎皂
蕴蚤灶噪 藻曾 云则援 冤其它种类遗传关系相对较远渊图 圆冤袁结
合形态学鉴定结果袁确定该菌株为 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂渊尖
孢镰刀菌冤遥
图 圆摇 基于核糖体 则阅晕粤基因转录间隔区渊陨栽杂冤和翻译延长因子 琢渊耘云 原 员琢冤序列构建的 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂及该属其它真菌的系统发育树渊自展
支持值渊月燥燥贼泽贼则葬责冤 跃 缘园豫的显示在各个进化分支节点上遥 酝藻贼葬则澡蚤扎蚤怎皂 葬灶蚤泽燥责造蚤葬藻渊云允缘愿怨远缘园郾 员冤 和 酝藻贼葬则澡蚤扎蚤怎皂 则燥遭藻则蚤泽蚤蚤渊运悦源远员园猿圆郾 员冤分别作
为外群冤
圆郾 缘摇 感染尖孢镰刀菌后三年桐尧千年桐生理指标的
变化
圆郾 缘郾 员摇 对 杂韵阅 活性的影响 摇 超氧化物歧化酶
渊杂韵阅冤作为氧清除剂能有效地清除体内破坏力极强
的活性氧 韵圆 原等物质遥 正常情况下袁植物体内的活
性氧物质的产生和清除处于平衡的状态遥 但是在逆
境胁迫下袁植物呼吸作用迅速增强袁细胞渗透势大幅
降低袁体内的活性氧会大量产生袁打破这个平衡遥
杂韵阅活性测定结果表明渊图 猿冤袁感染尖孢镰刀菌后
千年桐和三年桐活性均先升高后降低袁并且都在侵
染前期达到峰值遥 抗病的千年桐在侵染前尧侵染前
期尧侵染中期 杂韵阅 活性均高于三年桐袁而在侵染后
期低于三年桐遥
圆郾 缘郾 圆摇 对 孕韵阅活性的影响摇 过氧化物酶渊孕韵阅冤是
以铁卟啉为辅基袁可催化 匀圆韵圆 氧化酚类和胺类化合
物袁具有消除 匀圆韵圆 和酚类尧胺类毒性的双重作用遥
从图 猿 中可以看出千年桐 孕韵阅 维持较高活性袁其活
性先上升后降低袁在侵染中期达到活性最高值遥 而
三年桐在接种后 孕韵阅活性先降低再升高袁在侵染中
期达到活性最低值遥 孕韵阅 活性测定结果表明袁在整
个侵染过程中袁千年桐 孕韵阅活性均高于三年桐遥
圆郾 缘郾 猿摇 对 悦粤栽 活性的影响摇 过氧化氢酶渊悦粤栽冤是
催化 匀圆韵圆 分解成氧和水的酶遥 通过图 猿 可以看出
千年桐的 悦粤栽 始终维持较高活性袁在接种后袁酶活
性迅速上升袁并在侵染前期尧侵染中期和侵染后期均
保持较高活性遥 三年桐在接种前与千年桐酶活性相
近袁而在接种后 悦粤栽 活性先降低后升高又降低袁在
侵染前期达到活性最低值袁侵染中期达到活性最高
值遥 悦粤栽活性测定结果表明袁在接种后袁千年桐 悦粤栽
活性均高于三年桐遥
圆郾 缘郾 源摇 对 酝阅粤含量的影响摇 植物器官衰老或在逆
境下遭受伤害袁往往发生膜脂过氧化作用袁丙二醛
渊酝阅粤冤是膜脂过氧化的最终分解产物袁其含量可以
反映植物遭受逆境伤害的程度遥 通过图 猿 可以看出
千年桐的起始 酝阅粤含量比三年桐的高袁千年桐接种
后的 酝阅粤含量呈现缓慢上升过程袁变化并不明显袁
并且都低于三年桐 酝阅粤 含量遥 而三年桐在受到侵
染之后 酝阅粤含量极速上升袁在侵染后期下降袁在侵
染中期尧侵染后期 酝阅粤 含量均较高遥 酝阅粤 含量测
定结果表明袁在接种后袁三年桐体内累积的 酝阅粤 含
量高于千年桐遥
猿摇 讨论
三年桐和千年桐是我国油桐的主要栽培种袁两
者在形态学尧解剖结构尧染色体数目渊圆灶 越 圆圆冤上非
常相似遥 三年桐结实早尧单位面积产量和子仁含油
率高尧油质较好咱员圆暂 袁但在病灾区的三年桐盛果期袁枯
萎病病原菌尖孢镰刀菌往往造成毁灭性的病害袁且
缘缘苑
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
图 猿摇 三年桐尧千年桐感染尖孢镰刀菌后 杂韵阅尧孕韵阅尧
悦粤栽活性及 酝阅粤含量的变化
该病在全国大面积分布袁长期以来毁灭了大批的油
桐种苗咱员圆暂 遥 而尖孢镰刀菌对千年桐基本不致病袁但
千年桐结果年限长尧结实期晚尧油质差咱员圆暂 遥 以千年
桐为砧木袁三年桐为接穗进行嫁接后的油桐树抗病
性强袁但仍发现尖孢镰刀菌沿着树干蔓延至嫁接口
产生危害咱员猿暂 遥 因此袁研究千年桐尧三年桐抗感病机
理并有效减缓枯萎病病害成为一个亟待解决的
难题遥
超氧化物歧化酶渊杂韵阅冤尧过氧化物酶渊孕韵阅冤尧过
氧化氢酶渊悦粤栽冤被认为是植物的三大保护酶袁其活
性不仅反映寄主对病原菌的抗性反应袁而且可以大
致判断病原菌的侵害程度遥 在正常生长条件下袁
杂韵阅尧孕韵阅 及 悦粤栽 等和非保护酶系统如抗坏血酸和
谷胱甘肽等可以有效清除植物体内产生的活性氧自
由基袁从而不会伤害植物咱员源暂 遥 但当受到环境胁迫
时袁上述酶的活性会发生变化遥
在侵染尖孢镰刀菌之后的表型特征上看袁三年
桐出现明显病症袁千年桐无明显病症袁因此千年桐不
仅自然抗病袁并且在接种病原菌之后仍不易感病遥
三年桐不仅自然条件下感病率高袁人工接种后也易
感病遥
三年桐尧千年桐感染尖孢镰刀菌后生理变化完
全不同遥 总体来看袁抗病的千年桐在接种后三大保
护酶活性均较三年桐高袁可能像一些常见的抗性植
物一样袁在受到外界胁迫之后迅速产生防卫反应袁利
用急剧上升的 杂韵阅尧孕韵阅尧悦粤栽活性来清除体内的氧
自由基尧匀圆韵圆 等有毒物质曰酝阅粤 含量变化不明显袁
表明在感染尖孢镰刀菌之后袁膜脂过氧化作用不明
显袁对植物细胞膜危害不大遥 因此袁千年桐本身较高
的保护酶活性一定程度上影响了病原菌的致病力袁
同时影响了寄主 原寄生物的共存袁研究结果表明袁千
年桐在尖孢镰刀菌的刺激下产生了自卫机制并有效
抵抗病原菌的危害遥
相对而言袁在接种后三年桐的三大保护酶活性
均较低遥 在感染尖孢镰刀菌的前期袁三年桐 杂韵阅 活
性迅速上升袁但在侵染中期尧侵染后期活性下降袁表
明随着胁迫时间的延长袁三年桐体内产生的自由基
未能被有效清除袁生成 匀圆韵圆袁对植株伤害加剧曰而此
时 悦粤栽尧孕韵阅 活性也相继升高袁清除过剩的 匀圆韵圆曰酝阅粤含量在侵染前期尧侵染中期上升而侵染后期下
降袁其较高的 酝阅粤 含量对细胞膜产生大量的伤害遥
因此三年桐虽然在病原菌侵染之后体内也产生了自
卫机制袁但在病原菌的长时间胁迫下袁最终处于不平
衡的状态袁受到了严重危害遥
植物通过一系列复杂机制来保护自身而免受病
原菌的危害袁这种机制可能是自身存在的袁或者是受
病原菌刺激而引发的机制咱员缘 原 员远暂 遥 根据文献报道袁植
物和其它有机体一样袁有区分自身渊杂藻造枣冤和非自身
渊晕燥灶鄄泽藻造枣冤的能力袁植物细胞表面的模式识别受体
渊孕砸砸泽冤可以特异性识别不同的病原菌分子结构袁导
致转录重排渊贼则葬灶泽糟则蚤责贼燥皂藻 则藻责则燥早则葬皂皂蚤灶早冤袁引发了复
杂的信号传导途径袁使植物可以产生多种防卫反应
来阻止病原菌的侵入咱员远 原 员愿暂 遥 已有研究证实激发植
物产生防卫机制的信号传导途径涉及多种酶和激
素袁包括裂原激活蛋白激酶渊皂蚤贼燥早藻灶鄄葬糟贼蚤增葬贼藻凿 责则燥贼藻蚤灶
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莉酸渊 躁葬泽皂燥灶蚤糟 葬糟蚤凿冤 咱员缘袁 员怨 原 圆员暂等袁这些信号途径相关
的突变体植株表现出更明显的致病病症咱员缘暂 袁而施加
特定的外源激素则可以诱导植株抗病基因的表达袁
因此植株表现出更强的抗病性咱圆圆暂 遥
综上所述袁千年桐可能也是通过复杂的自卫机
制保护自身免受病原菌危害袁已有文献报道千年桐
根部具有较三年桐更厚的表皮细胞和木栓层袁较高
的单宁尧钾含量咱员猿暂 袁以及较高的多元酚氧化酶活
远缘苑
第 远 期 杨素素等院三年桐尧千年桐感染枯萎病病原菌后的生理反应
性咱员猿暂 袁这可能和千年桐抗病性有关遥 本文的研究结
果表明千年桐具有较高的 杂韵阅尧孕韵阅尧悦粤栽 活性袁千
年桐受病原菌刺激引发的机制也存在袁但这种自卫
机制是如何刺激引发的有待今后研究遥
三年桐与千年桐抗感病机理比较复杂袁可能涉
及物理防御尧化学防御尧抗病基因等综合结果袁因此
从不同研究水平探讨三年桐和千年桐对尖孢镰刀菌
的应答反应袁包括研究比较尖孢镰刀菌侵染后植株
根尧茎的解剖结构袁分析抗毒素渊主要为酚类及萜
类冤的产生与否袁检测植物激素变化袁分离抗病基因
等袁对揭示油桐抗感枯萎病机理及病害防治具有重
要意义遥
参考文献院
咱员暂 方嘉兴袁何摇 方援 中国油桐咱酝暂援 北京院 中国林业出版社袁 员怨怨愿院
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