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作 者 ：赵昶灵 郭维明 杨清 陈俊愉

期 刊 ：西北植物学报 2005年 12期

关键词：梅花；南京红须；类黄酬3羟化酶基因；全长；基因组DNA；TAIL-PCR；克隆；

Keywords:Prunus mume, Nanjinghongxu, flavonoid 3‘-hydroxylase gene, genomic DNA, TAIL-PCR, cloning,

摘 要 ：根据从基因组DNA扩增到的梅花‘南京红须’类黄酮3’-羟化酶基因片段（469bp）设计3条嵌套的特异性引物．与6条短的随机简并引物组成的引物库分别用热不对称交错PCR法从‘南京红须’基因组DNA扩增该片段的5’和3’旁侧序列。获得的5’和3’旁侧序列分别长1443bp和1200bp。将两个旁侧序列在469bp片段的基础上拼接得到‘南京红须’全长为2lrl4bp的类黄酮3’-羟化酶基因，被命名为pmhxF3’H。序列分析表明：该基因与11条正式发表的、已递交到GenBank的类黄酮3’-羟化酶基因的eDNA序列在总体上有52．21％的一致性．具有3个内含子。其启动子含有1个“AGGA盒”、1个“GC盒”和3个“TATA盒”。这是首次用热不对称交错PCR法从木本植物的基因组DNA克隆到类黄酮3’-羟化酶基因。本研究将为梅花花色的分子生物学机理探索、花色的基因工程改良提供参考。

Abstract:Three interbedded specific primers were designed according to the band (469 bp) of flavonoid 3‘-hydroxylase gene amplified from genomic DNA of Nanjinghongxu (Prunus mume) ,and they were combined with a primer bank consisting of six short random degenerate

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