全 文 ：书犇犗犐：１０．１１６８６／犮狔狓犫２０１５０５７ 犺狋狋狆：／／犮狔狓犫．犾狕狌．犲犱狌．犮狀
王玉灵，胡冠芳，刘敏艳，余海涛，牛树君，李玉奇．唐古特莨菪中生物碱的分离、鉴定与生物活性研究．草业学报，２０１５，２４（１２）：１８８１９５．
ＷＡＮＧＹｕＬｉｎｇ，ＨＵＧｕａｎＦａｎｇ，ＬＩＵＭｉｎＹａｎ，ＹＵＨａｉＴａｏ，ＮＩＵＳｈｕＪｕｎ，ＬＩＹｕＱｉ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆａｌｋａ
ｌｏｉｄｓｆｒｏｍ犃狀犻狊狅犱狌狊狋犪狀犵狌狋犻犮狌狊．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１５，２４（１２）：１８８１９５．
唐古特莨菪中生物碱的分离、鉴定与生物活性研究
王玉灵１，胡冠芳２，刘敏艳２，余海涛２，牛树君２，李玉奇２
（１．甘肃农业大学草业学院农药学系，甘肃 兰州７３００７０；２．甘肃省农业科学院植物保护研究所，甘肃 兰州７３００７０）
摘要：研究唐古特莨菪中生物碱对农业害虫（螨）的生物活性，可为利用该植物研制新型植物源杀虫（螨）剂提供理
论依据。本文采用柱色谱分离法从唐古特莨菪地上部分分离得到２个生物碱类化合物，通过 ＭＳ、ＮＭＲ确定了其
化学结构，分别为莨菪碱、东莨菪碱。采用微量点滴法和玻片浸渍法测定了莨菪碱、东莨菪碱对甘蓝蚜、桃蚜等９
种蚜虫和朱砂叶螨、二斑叶螨等４种叶螨的触杀活性。结果表明，莨菪碱对禾谷缢管蚜、桃粉蚜、豆蚜和绣线菊蚜
具有较强的触杀作用，ＬＣ５０值分别为２５７．８６３，２７５．４５９，３４４．６４５和３４４．７１７ｍｇ／Ｌ。东莨菪碱对豆蚜和禾谷缢管蚜
具有较强的触杀作用，ＬＣ５０值分别为３１１．５８５和３９２．３０９ｍｇ／Ｌ。对照药剂鱼藤酮对甘蓝蚜和棉蚜具有较强的触杀
作用，ＬＣ５０值分别为３９９．５４２和４３６．１２４ｍｇ／Ｌ。对甘蓝蚜等９种蚜虫的触杀作用，莨菪碱强于或与东莨菪碱相当；
对豆蚜、禾谷缢管蚜的触杀作用，莨菪碱和东莨菪碱均强于鱼藤酮；对甘蓝蚜、桃蚜和棉蚜的触杀作用，莨菪碱和东
莨菪碱均弱于鱼藤酮。莨菪碱和东莨菪碱对截形叶螨、山楂叶螨、二斑叶螨和朱砂叶螨具有较强的触杀作用。２种
生物碱对４种叶螨的毒力相当，对二斑叶螨和朱砂叶螨的毒力（２０１．０２７～２２４．１７２ｍｇ／Ｌ）均高于截形叶螨和山楂
叶螨（２５７．０１４～３３２．６９８ｍｇ／Ｌ）。对照药剂鱼藤酮对截形叶螨、山楂叶螨的ＬＣ５０值分别为１９６．８４７和２２４．５９２
ｍｇ／Ｌ，其毒力高于莨菪碱和东莨菪碱。
关键词：唐古特莨菪；生物碱；分离；鉴定；生物活性　　
犐狊狅犾犪狋犻狅狀，犻犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犪犮狋犻狏犻狋犻犲狊狅犳犪犾犽犪犾狅犻犱狊犳狉狅犿犃狀犻狊狅犱狌狊狋犪狀犵狌狋犻犮狌狊
ＷＡＮＧＹｕＬｉｎｇ１，ＨＵＧｕａｎＦａｎｇ２，ＬＩＵＭｉｎＹａｎ２，ＹＵＨａｉＴａｏ２，ＮＩＵＳｈｕＪｕｎ２，ＬＩＹｕＱｉ２
１．犇犲狆犪狉狋犿犲狀狋狅犳犘犲狊狋犻犮犻犱犲犛犮犻犲狀犮犲，犘狉犪狋犪犮狌犾狋狌狉犪犾犆狅犾犾犲犵犲，犌犪狀狊狌犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犔犪狀狕犺狅狌７３００７０，犆犺犻狀犪；２．犐狀狊狋犻狋狌狋犲
狅犳犘犾犪狀狋犘狉狅狋犲犮狋犻狅狀，犌犪狀狊狌犃犮犪犱犲犿狔狅犳犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊，犔犪狀狕犺狅狌７３００７０，犆犺犻狀犪
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｗｏａｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍｔｈｅａｅｒｉａｌｐａｒｔｓｏｆ犃狀犻狊狅犱狌狊狋犪狀犵狌狋犻犮狌狊ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｂｙｅｌｕｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｓｅｒｉｅｓｏｆ
ｇｅｌｃｏｌｕｍｎｓ．ＴｈｅａｌｋａｌｏｉｄｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＭＳａｎｄＮＭＲａｎｄｔｈｅａｌｋａｌｏｉｄｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉ
ｆｉｅｄａｓｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅａｎｄｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ．Ｃｏｎｔａｃｔｔｏｘｉｃｉｔｉｅｓｏｆｔｈｅｔｗｏａｌｋａｌｏｉｄｓｏｎｎｉｎｅｓｐｅｃｉｅｓｏｆａｐｈｉｄｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇ
犅狉犲狏犻犮狅狉狔狀犲犫狉犪狊狊犻犮犪犲ａｎｄ犕狔狕狌狊狆犲狉狊犻犮犪犲，ａｎｄｆｏｕｒｓｐｅｃｉｅｓｏｆｍｉｔｅｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇ犜犲狋狉犪狀狔犮犺狌狊犮犻狀狀犪犫犪狉犻狀狌狊ａｎｄ
犜．狌狉狋犻犮犪犲ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｔｏｐｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄｓｌｉｄｅｄｉｐｍｅｔｈｏｄｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ
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犮犻狏狅狉犪ａｎｄ犃．犮犻狋狉犻犮狅犾犪ｗｉｔｈＬＣ５０ｖａｌｕｅｓｏｆ２５７．８６３，２７５．４５９，３４４．６４５ａｎｄ３４４．７１７ｍｇ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅｗａｓｍｏｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｉｎｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇ犃．犮狉犪犮犮犻狏狅狉犪ａｎｄ犚．狆犪犱犻ｗｉｔｈＬＣ５０ ｖａｌｕｅｓｏｆ
第２４卷　第１２期
Ｖｏｌ．２４，Ｎｏ．１２
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
２０１５年１２月
Ｄｅｃ，２０１５
收稿日期：２０１５０１２７；改回日期：２０１５０４０９
基金项目：粮食公益性行业科研专项储粮虫霉监测与生态控制技术研究之子任务用于储粮害虫防治的植物源药剂筛选及剂型研究（２０１３３００２３
５）资助。
作者简介：王玉灵（１９８８），女，甘肃天水人，在读硕士。Ｅｍａｉｌ：ｗｙｌ１９８８０９２２＠１２６．ｃｏｍ
通信作者Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．Ｅｍａｉｌ：ｈｕｇｕａｎｆａｎｇ＠１２６．ｃｏｍ
３１１．５８５ａｎｄ３９２．３０９ｍｇ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｏｔｅｎｏｎｅｗａｓｍｏｓｔｔｏｘｉｃｔｏ犅．犫狉犪狊狊犻犮犪犲ａｎｄ
犃狆犺犻狊犵狅狊狊狔狆犻犻ｗｉｔｈＬＣ５０ｖａｌｕｅｓｏｆ３９９．５４２ａｎｄ４３６．１２４ｍｇ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｔａｃｔｔｏｘｉｃｉｔｉｅｓｏｆｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ
ｏｎｔｈｅｎｉｎｅｓｐｅｃｉｅｓｏｆａｐｈｉｄｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇ犅．犫狉犪狊狊犻犮犪犲ｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｏｒｓｉｍｉｌａｒｔｏｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏ
ｒｏｔｅｎｏｎｅ，ｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅａｎｄｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅｗｅｒｅｍｏｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅａｇａｉｎｓｔ犃．犮狉犪犮犮犻狏狅狉犪ａｎｄ犚．狆犪犱犻．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｒｏ
ｔｅｎｏｎｅｗａｓｍｏｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅａｇａｉｎｓｔ犅．犫狉犪狊狊犻犮犪犲，犕．狆犲狉狊犻犮犪犲ａｎｄ犃．犵狅狊狊狔狆犻犻．Ｆｏｒｔｈｅｆｏｕｒｓｐｅｃｉｅｓｏｆｍｉｔｅｓ
ｔｅｓｔｅｄ（犜．狋狉狌狀犮犪狋犲狊，犜．狏犻犲狀狀犲狀狊犻狊，犜．狌狉狋犻犮犪犲ａｎｄ犜．犮犻狀狀犪犫犪狉犻狀狌狊），ｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅａｎｄｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅｈａｄｓｉｍｉ
ｌａｒｅｆｆｅｃｔｓ，ｗｈｉｃｈｉｎｃｌｕｄｅｄｈｉｇｈｅｒｃｏｎｔａｃｔｔｏｘｉｃｉｔｉｅｓｏｎ犜．狌狉狋犻犮犪犲ａｎｄ犜．犮犻狀狀犪犫犪狉犻狀狌狊（ＬＣ５０：２０１．０２７－
２２４．１７２ｍｇ／Ｌ）ｔｈａｎｏｎ犜．狋狉狌狀犮犪狋犲狊ａｎｄ犜．狏犻犲狀狀犲狀狊犻狊（ＬＣ５０：２５７．０１４－３３２．６９８ｍｇ／Ｌ）．Ｒｏｔｅｎｏｎｅｗａｓｍｏｒｅ
ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｔｈａｎｔｈｅｔｗｏａｌｋａｌｏｉｄｓａｇａｉｎｓｔ犜．狋狉狌狀犮犪狋犲狊ａｎｄ犜．狏犻犲狀狀犲狀狊犻狊ｗｉｔｈＬＣ５０ｖａｌｕｅｓｏｆ１９６．８４７ａｎｄ２２４．５９２
ｍｇ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犃狀犻狊狅犱狌狊狋犪狀犵狌狋犻犮狌狊；ａｌｋａｌｏｉｄｓ；ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙ；ｃｏｎｔａｃｔｔｏｘｉｃｉｔｙ
植物中含有丰富的次生代谢产物———生物碱，其在植物次生代谢产物中含量最大，具有高效、低毒、无污染、
对人畜安全、作用方式独特、选择性强、对天敌和有益生物安全及有害生物不易产生抗药性等优点［１］，符合人们对
理想农药的要求。生物碱对昆虫的作用方式具有多样性，诸如毒杀、忌避、拒食、抑制生长发育等，同时对多种植
物病菌也具有很强的抑菌活性［２３］。莨菪烷类生物碱分布于茄科植物如曼陀罗属植物曼陀罗（犇犪狋狌狉犪狊狋狉犪犿狅狀犻
狌犿）、白花曼陀罗（洋金花，犇．犿犲狋犲犾）、紫花曼陀罗（犇．狋犪狋狌犾犪）、毛曼陀罗（犇．犻狀狀狅狓犻犪）、重瓣曼陀罗（犇．犳犪狊狋狌狅狊犪）
以及莨菪（犎狔狅狊犮狔犪犿狌狊狀犻犵犲狉）、颠茄（犃狋狉狅狆犪犫犲犾犾犪犱狅狀狀犪）、唐古特莨菪（犃狀犻狊狅犱狌狊狋犪狀犵狌狋犻犮狌狊）、黄花山莨菪（犃．
狋犪狀犵狌狋犻犮狌狊ｖａｒ．狏犻狉犻犱狌犾狌狊）、三分三（犃．犪犮狌狋犪狀犵狌犾狌狊）、赛莨菪（犛犮狅狆狅犾犻犪犮犪狉狀犻狅犾犻犮狅犻犱犲狊）、铃铛子（犃．犾狌狉犻犱狌狊）等
中，包括莨菪碱（ｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ）、东莨菪碱（ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ）、山莨菪碱（ａｎｉｓｏｄａｍｉｎｅ）、去甲基莨菪碱（ｎｏｒｈｙｏｓｃｙａ
ｍｉｎｅ）、阿托品（ａｔｒｏｐｉｎｅ，消旋莨菪碱ｄｌｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ）、樟柳碱（ａｎｉｓｏｄｉｎｅ）等［４］，唐古特莨菪是提取莨菪烷类生物
碱的主要植物资源，王质彬和吴先琪［５］从其地上部分分离获得山莨菪碱和莨菪碱，并明确了含量与物候的关系；
张晓峰和王环［６］采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）技术从其地上和地下部分均分离得到东莨菪碱、山莨菪碱、阿托品
（消旋莨菪碱）和樟柳碱，并研究了４种生物碱含量随物候的变化情况。
唐古特莨菪属茄科（Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ）山莨菪属（犃狀犻狊狅犱狌狊）多年宿根草本植物，为我国所特有，主要分布于甘肃、西
藏、云南、青海等地，生于海拔２８００～４２００ｍ的山坡、草坡阳处，目前尚未由人工引种栽培［７］。唐古特莨菪性温，
味辛、甘，有毒，其有效成分主要是莨菪烷类生物碱，作为副交感神经抑制剂，具有麻醉、活血化瘀、解痉镇痛、解磷
中毒、止血生肌、止咳平喘等多种功效而被广泛应用于临床［８］。唐古特莨菪既是一种藏药和中草药，也是一种牛
羊不食的天然草场毒草，其地下部分根系发达，地上部分生长茂盛，耐瘠抗旱适应性强，严重影响牧草生长，与另
一种毒草瑞香狼毒（犛狋犲犾犾犲狉犪犮犺犪犿犪犲犼犪狊犿犲）均是草原退化的指标。在唐古特莨菪的杀虫活性研究方面，张兴
等［９］、张国洲等［１０］分别研究了丙酮、甲醇粗提物对赤拟谷盗（犜狉犻犫狅犾犻狌犿犮犪狊狋犪狀犲狌犿）种群形成的抑制作用，以及对
５龄菜青虫（菜粉蝶犘犻犲狉犻狊狉犪狆犪犲幼虫）的拒食活性，其２４和４８ｈ的拒食率分别为２０．９％和２３．４％。胡冠芳
等［１１］研究了甘青赛莨菪（唐古特莨菪）不同部位（茎、叶、根皮、根木质部和青果）不同极性溶剂粗提物的杀虫活
性，结果表明，叶甲醇粗提物对粘虫（犕狔狋犺犻犿狀犪狊犲狆犪狉犪狋犲）５龄幼虫和４龄菜青虫的触杀活性最强，其次为茎和根
皮甲醇粗提物；叶、茎和根皮甲醇粗提物对４龄菜青虫的拒食活性均很弱，对麦长管蚜（犛犻狋狅犫犻狅狀犪狏犲狀犪犲）具有一
定的触杀活性，对棉蚜（犃狆犺犻狊犵狅狊狊狔狆犻犻）和桃蚜（犕狔狕狌狊狆犲狉狊犻犮犪犲）无触杀活性。关于莨菪烷类生物碱对农业害虫
（螨）的生物活性研究，国内外迄今未见文献报道［１２］。鉴此，本试验对唐古特莨菪地上部分所含生物碱进行分离
提纯，并对分离得到的２种生物碱即莨菪碱和东莨菪碱开展杀蚜［甘蓝蚜（犅狉犲狏犻犮狅狉狔狀犲犫狉犪狊狊犻犮犪犲）、桃蚜、麦长管
蚜等９种蚜虫］、杀螨［朱砂叶螨（犜犲狋狉犪狀狔犮犺狌狊犮犻狀狀犪犫犪狉犻狀狌狊）、二斑叶螨（犜．狌狉狋犻犮犪犲）等４种叶螨］活性测定，旨在
为利用唐古特莨菪研制新型植物源杀虫（螨）剂提供依据。
９８１第１２期 王玉灵　等：唐古特莨菪中生物碱的分离、鉴定与生物活性研究
１　材料与方法
１．１　提取分离实验
１．１．１　植物样品及前处理　　唐古特莨菪地上部（盛花期茎、叶），２０１３年７月２０日采自甘肃省甘南藏族自治
州临潭县海拔３４２０ｍ的天然草地，洗净后切段阴干，粉碎过３８０μｍ筛，在室温下保存备用。
１．１．２　试剂　　莨菪碱、东莨菪碱、鱼藤酮标准品购于百灵威科技有限公司；氢氧化钠、甲醇、盐酸、氯仿、乙腈、
丙酮、石油醚、三乙胺、氨水等为分析纯；柱层析硅胶（４８～７５μｍ）、薄层层析硅胶（ＧＦ２５４）、反相硅胶均购于青岛
海洋有限公司。
１．１．３　实验仪器　　Ｂｒｕｋｅｒ４００超导核磁共振仪（Ｂｒｕｋｅｒ公司）；热电 ＴＳＱＱｕａｎｔｕｍＬＣ／ＭＳ液质联用仪；
２６９５２９９６型分析 ＨＰＬＣ（美国 Ｗａｔｅｒｓ公司）；Ｄｅｌｔａ６００２４８７型制备 ＨＰＬＣ（美国 Ｗａｔｅｒｓ公司）；ＳｕｎｆｉｒｅＰｒｅｐ
Ｃ１８（１０μｍ，１９ｍｍ×２５０ｍｍ）制备型色谱柱；粉碎机ＦＥ２２０（河北省黄骅市中兴仪器有限公司）；旋转蒸发仪
ＲＥ５２（上海亚荣生化仪器厂）；低温冷却循环泵ＤＬＳＢ（郑州长城科工贸有限公司）；循环式多用真空泵ＳＨＤＩＩＩ
（上海比朗仪器有限公司）。
１．１．４　提取分离方法　　将２．２ｋｇ唐古特莨菪茎叶粉碎，用工业甲醇提取，回流提取２次，每次２ｈ，抽滤，减压
浓缩至浸膏，回收甲醇，再将浸膏悬浮于蒸馏水中，用４ｍｏｌ／ＬＨＣｌ调悬浮水溶液ｐＨ＝１～２，静置过夜；抽滤；再
用４ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ溶液调ｐＨ＝９～１０，用氯仿等体积萃取，减压浓缩，回收氯仿，得唐古特莨菪总生物碱粗提物
１５０ｇ［１３］。
将１５０ｇ总生物碱用硅胶柱分离，分别用甲醇－乙腈－水梯度洗脱（１６∶４∶８０，２６∶４∶７０，３６∶４∶６０，
４６∶４∶５０），薄层检测收集合并相同组分，得到Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４个组分。用标准品作为对照，发现活性生物碱部分存
在Ｂ、Ｃ２个组分里。将Ｂ组分用氯仿－甲醇（含１‰三乙胺）梯度（４０∶１，３０∶１，２０∶１，１０∶１）洗脱，合并氯
仿－甲醇（３０∶１）流分，再通过石油醚－丙酮（含２％氨水）梯度（８∶１，４∶１，２∶１，１∶１）洗脱，最后通过反向硅
胶（甲醇：水）纯化，活性炭脱色，得到莨菪碱纯品（化合物１，１．２３ｇ，通过 ＭＳ、ＮＭＲ确定其化学结构）；Ｃ组分用
氯仿－甲醇（含１％三乙胺）梯度洗脱（３０∶１，２０∶１，１０∶１），合并氯仿－甲醇（２０∶１）流分，经过反复硅胶柱层
析，随后依次用反向硅胶纯化，活性炭脱色，最后得到东莨菪碱纯品（化合物２，３．８７ｇ，通过 ＭＳ、ＮＭＲ确定其化
学结构）［１４］。
１．２　生物活性测定
１．２．１　供试蚜虫及叶螨　　甘蓝蚜、桃粉蚜（犎狔犪犾狅狆狋犲狉狌狊犪狉狌狀犱犻犿犻狊）、麦长管蚜、豆蚜（犃狆犺犻狊犮狉犪犮犮犻狏狅狉犪）、禾
谷缢管蚜（犚犺狅狆犪犾狅狊犻狆犺狌犿狆犪犱犻）、绣线菊蚜（犃狆犺犻狊犮犻狋狉犻犮狅犾犪）、萝卜蚜（犔犻狆犪狆犺犻狊犲狉狔狊犻犿犻）、桃蚜和棉蚜，２０１４年
５－９月采自甘肃省农业科学院不施药的甘蓝（犅狉犪狊狊犻犮犪狅犾犲狉犪犮犲犪）菜地、桃（犃犿狔犵犱犪犾狌狊狆犲狉狊犻犮犪）树、小麦（犜狉犻狋犻犮
狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿）田、蚕豆（犞犻犮犻犪犳犪犫犪）田、玉米（犣犲犪犿犪狔狊）田、苹果（犕犪犾狌狊狆狌犿犻犾犪）树、油菜（犅狉犪狊狊犻犮犪狀犪狆狌狊）田和
棉花（犌狅狊狊狔狆犻狌犿犺犻狉狊狌狋狌犿）田，朱砂叶螨、二斑叶螨和截形叶螨（犜．狋狉狌狀犮犪狋狌狊），２０１４年９－１１月采自温室内种
植的菜豆（犘犺犪狊犲狅犾狌狊狏狌犾犵犪狉犻狊）叶片，山楂叶螨（犜．狏犻犲狀狀犲狀狊犻狊），２０１４年８月采自苹果树叶片。
１．２．２　供试样品配制　　称取生物碱和鱼藤酮样品，加定量丙酮水（体积比为９∶１）溶解，用蒸馏水稀释成２０００
ｍｇ／Ｌ作为母液，在冰箱中２℃条件下保存备用。生物测定前加入１％的表面活性剂ＪＦＣ（Ｃ７～Ｃ９烷醇聚氧乙烯
醚），参考预实验将母液稀释成５个不同梯度的浓度待测。
１．２．３　对蚜虫触杀活性的测定　　采用微量点滴法［１５］。参照已报道的权威经典测试方法———点滴法，挑选大
小相当的无翅成蚜，用０．０４６μＬ的微量点滴器将已稀释的不同浓度的药液点滴在蚜虫的前胸背板上，置于已放
入新鲜寄主植物叶片并铺有保湿滤纸的直径１２ｃｍ的培养皿中，每皿放３０头蚜虫，每个浓度重复３次。以等量
的丙酮水＋ＪＦＣ用蒸馏水稀释成同样浓度作为溶剂对照。以同上方法配制的不同浓度梯度的鱼藤酮作为药剂对
照。在温度（２５±１）℃、湿度６０％～８０％、光照（Ｌ）∶黑暗（Ｄ）＝１４ｈ∶１０ｈ条件下饲养，及时加水保湿。调查２４
ｈ后的死亡数，计算死亡率与校正死亡率。计算公式如下：
死亡率（％）＝（死亡虫数／处理虫数）×１００
０９１ 草　业　学　报 第２４卷
校正死亡率（％）＝［（处理死亡率－对照死亡率）／（１００－对照死亡率）］×１００
采用ＳＰＳＳ统计软件（版本１７．０）进行分析，得出毒力回归方程（犢＝犃＋犅犡）、致死中浓度ＬＣ５０值及其９５％
置信限。
１．２．４　对叶螨触杀活性的测定　　采用玻片浸渍法［１６１７］。参照ＦＡＯ（联合国粮农组织）推荐的测定害螨的标准
方法———玻片浸渍法并加以改进，将双面胶带剪成２～３ｃｍ长，贴在显微镜载玻片的一端，用镊子揭去胶带上的
纸片，用零号毛笔挑选大小一致、体色鲜艳、行动活泼的雌成螨，将其背部粘在双面胶带上（注意：不要粘住螨足、
螨须和口器），每片粘３行，每行粘１０头。在温度（２５±１）℃，相对湿度８５％左右的生化培养箱中放置４ｈ后，用
双目镜观察，剔除死亡或不活泼个体。生物碱和鱼藤酮在预试的基础上用蒸馏水稀释成５个浓度，将带螨玻片的
一端浸入药液中，轻轻摇动５ｓ后取出，迅速用吸水纸吸干螨体及其周围多余的药液，每个浓度重复３次。处理
后将试螨置于生化培养箱中，条件同１．２．３。以等量的丙酮水＋ＪＦＣ用蒸馏水稀释成同样浓度作为溶剂对照。
２４ｈ后用双目镜调查死亡数，计算死亡率与校正死亡率，计算公式及分析方法同１．２．３。
２　结果与分析
２．１　２种化合物的结构鉴定
化合物１：白色针状结晶，ＥＳＩＭＳ（犿／狕）：２９０．２１［Ｍ＋Ｈ］＋，１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１．６９－２．３１
（４Ｈ，ｍ，Ｈ２，４，６，７），２．７４（３Ｈ，ｓ，ＨＮＣＨ３），３．８１（２Ｈ，ｍ，Ｈ９′），５．０５（１Ｈ，ｍ，Ｈ３），７．２７－７．３２
（５Ｈ，ｍ，Ｈ２′，３′，４′，５′，６′）；１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：２４．７（Ｃ６），３０．７（Ｃ７），３５．７（Ｃ２，４），
４８．４（ＣＮＣＨ３），５５．９（Ｃ７′），６３．７（２Ｃ，Ｃｌ，５），６４．５（Ｃ９′），６５．９（Ｃ３），１２８．９（Ｃ４′），１２９．３（２Ｃ，Ｃ２′，
６′），１３０．０（Ｃ３′，５′），１３７．２（Ｃ１′），１７２．９（Ｃ８′）。化合物１的波谱数据与莨菪碱的波谱数据一致，故鉴定化
合物１为莨菪碱（ｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ）［１８１９］（图１）。
化合物２：无色油状液体，ＥＳＩＭＳ（犿／狕）：３０６．２４［Ｍ＋Ｈ］＋，１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１．４５（１Ｈ，
ｄ，犑＝１６．０Ｈｚ，Ｈ２α），１．６６（１Ｈ，ｄ，犑＝１６．０Ｈｚ，Ｈ２β），２．１６（１Ｈ，ｄｔ，犑＝５．２，１６．０Ｈｚ，Ｈ４），２．４７
（３Ｈ，ｓ，ＨＮＣＨ３），２．９９（１Ｈ，ｄ，犑＝３．２Ｈｚ，Ｈ７），３．１１（１Ｈ，ｍ，Ｈ１），３．２１（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），３．５２（１Ｈ，
ｄ，犑＝３．２Ｈｚ，Ｈ６），３．７５（２Ｈ，ｍ，Ｈ９′），４．９５（２Ｈ，ｍ，Ｈ３），７．２４－７．３７（５Ｈ，ｍ，Ｈ２′，３′，４′，５′，
６′）；１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：２９．７（Ｃ２），２９．８（Ｃ４），３９．４（ＣＮＣＨ３），５６．０（Ｃ７′），５６．３（Ｃ５），
５６．６（２Ｃ，Ｃ１，Ｃ７），５８．７（Ｃ６），６４．５（Ｃ９′），６７．３（Ｃ３），１２８．８（Ｃ４′），１２９．２（２Ｃ，Ｃ２′，６′），１２９．９（２Ｃ，
Ｃ３′，５′），１３７．５（Ｃ１′），１７２．８（Ｃ８′）。化合物２的波谱数据与东莨菪碱波谱数据一致，故鉴定化合物２为东
莨菪碱（ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ）［２０２１］（图２）。
图１　化合物１：莨菪碱
犉犻犵．１　犆狅犿狆狅狌狀犱１：犺狔狅狊犮狔犪犿犻狀犲
　
图２　化合物２：东莨菪碱
犉犻犵．２　犆狅犿狆狅狌狀犱２：狊犮狅狆狅犾犪犿犻狀犲
　
２．２　莨菪碱和东莨菪碱对甘蓝蚜、豆蚜等９种蚜虫的毒力
表１表明，莨菪碱对禾谷缢管蚜、桃粉蚜、豆蚜和绣线菊蚜具有较强的触杀作用，ＬＣ５０值分别为２５７．８６３，
２７５．４５９，３４４．６４５和３４４．７１７ｍｇ／Ｌ，其次为对萝卜蚜和甘蓝蚜，ＬＣ５０值分别为４５１．３０１和５３８．５２５ｍｇ／Ｌ，而对
棉蚜、桃蚜和麦长管蚜的触杀作用较弱，ＬＣ５０值分别为７０６．６３９，８７５．２４６和１０３７．３０６ｍｇ／Ｌ。东莨菪碱对豆蚜和
禾谷缢管蚜具有较强的触杀作用，ＬＣ５０值分别为３１１．５８５和３９２．３０９ｍｇ／Ｌ，其次为对萝卜蚜和棉蚜，ＬＣ５０值分别
１９１第１２期 王玉灵　等：唐古特莨菪中生物碱的分离、鉴定与生物活性研究
为５５２．６２６和６２７．３１９ｍｇ／Ｌ，而对甘蓝蚜、桃蚜、麦长管蚜和绣线菊蚜的触杀作用较弱，ＬＣ５０值分别为８３５．６０２，
９６４．４５６，１２１４．１２５和１３２０．０６５ｍｇ／Ｌ。对照药剂鱼藤酮对甘蓝蚜和棉蚜具有较强的触杀作用，ＬＣ５０值分别为
３９９．５４２和４３６．１２４ｍｇ／Ｌ，其次为对桃蚜和豆蚜，ＬＣ５０值分别为５６５．８６６和６１６．６３９ｍｇ／Ｌ，而对禾谷缢管蚜的
触杀作用较弱，ＬＣ５０值为１１７５．２０１ｍｇ／Ｌ。从相对毒力来看，对甘蓝蚜的触杀作用，莨菪碱强于东莨菪碱，二者均
不及鱼藤酮，分别为鱼藤酮毒力的０．７４（０．７４～０．７２）倍和０．４８（０．４８～０．４２）倍；对豆蚜的触杀作用，莨菪碱和东
莨菪碱相当，二者均强于鱼藤酮，分别为鱼藤酮毒力的１．７９（１．８３～１．６９）倍和１．９８（２．０１～１．９１）倍；对禾谷缢管
蚜的触杀作用，莨菪碱强于东莨菪碱，二者均强于鱼藤酮，分别为鱼藤酮毒力的４．５６（４．１４～５．８３）倍和３．００
（２．７８～３．７２）倍；对桃蚜、棉蚜的触杀作用，莨菪碱和东莨菪碱相当，二者均弱于鱼藤酮，分别为鱼藤酮毒力的
０．６５（０．６３～０．６９）倍和０．５９（０．７１～０．５５）倍、０．６２（０．６３～０．７４）倍和０．７０（０．６４～０．８０）倍。
表１　莨菪碱和东莨菪碱对９种蚜虫的毒力
犜犪犫犾犲１　犜狅狓犻犮犻狋犻犲狊狅犳犺狔狅狊犮狔犪犿犻狀犲犪狀犱狊犮狅狆狅犾犪犿犻狀犲犪犵犪犻狀狊狋狀犻狀犲犪狆犺犻犱狊狆犲犮犻犲狊
样品名称
Ｓａｍｐｌｅｎａｍｅ
蚜虫种类
Ａｐｈｉｄｓｐｅｃｉｅｓ
ＬＣ５０（９５％置信限
９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｌｉｍｉｔ，ｍｇ／Ｌ）
相对毒力
Ｒｅｌａｔｉｖｅｔｏｘｉｃｉｔｙ
莨菪碱 Ｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ 甘蓝蚜犅．犫狉犪狊狊犻犮犪犲 ５３８．５２５（４６６．４０５～６２３．５７８） ０．７４（０．７４～０．７２）
豆蚜犃．犮狉犪犮犮犻狏狅狉犪 ３４４．６４５（３１０．１８６～３９６．０７１） １．７９（１．８３～１．６９）
禾谷缢管蚜犚．狆犪犱犻 ２５７．８６３（２３４．８０８～２８２．５４８） ４．５６（４．１４～５．８３）
桃蚜犕．狆犲狉狊犻犮犪犲 ８７５．２４６（６９５．１１７～１０２６．３９９） ０．６５（０．６３～０．６９）
棉蚜犃．犵狅狊狊狔狆犻犻 ７０６．６３９（５４７．３２１～７６９．６１４） ０．６２（０．６３～０．７４）
萝卜蚜犔．犲狉狔狊犻犿犻 ４５１．３０１（４１１．０４９～５０５．５４３） －
麦长管蚜犛．犪狏犲狀犪犲 １０３７．３０６（９３６．６６９～１１４５．４２５） －
桃粉蚜犎．犪狉狌狀犱犻犿犻狊 ２７５．４５９（２３１．５５４～３３２．８５６） －
绣线菊蚜犃．犮犻狋狉犻犮狅犾犪 ３４４．７１７（３１６．４４８～３８３．２２８） －
东莨菪碱Ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ 甘蓝蚜犅．犫狉犪狊狊犻犮犪犲 ８３５．６０２（７２０．８２９～１０６０．５８９） ０．４８（０．４８～０．４２）
豆蚜犃．犮狉犪犮犮犻狏狅狉犪 ３１１．５８５（２８２．５３０～３５０．４１６） １．９８（２．０１～１．９１）
禾谷缢管蚜犚．狆犪犱犻 ３９２．３０９（３４９．２７７～４４２．７３０） ３．００（２．７８～３．７２）
桃蚜犕．狆犲狉狊犻犮犪犲 ９６４．４５６（６１７．５８５～１２８７．３６４） ０．５９（０．７１～０．５５）
棉蚜犃．犵狅狊狊狔狆犻犻 ６２７．３１９（５３５．６３１～７０９．４０２） ０．７０（０．６４～０．８０）
萝卜蚜犔．犲狉狔狊犻犿犻 ５５２．６２６（５１１．７４１～５９９．２９２） －
麦长管蚜犛．犪狏犲狀犪犲 １２１４．１２５（１０８５．０４１～１３８８．２８６） －
桃粉蚜犎．犪狉狌狀犱犻犿犻狊 ３４８．９９８（３１０．３００～４１０．４２７） －
绣线菊蚜犃．犮犻狋狉犻犮狅犾犪 １３２０．０６５（１１８０．６７６～１５２６．７７２） －
鱼藤酮Ｒｏｔｅｎｏｎｅ 甘蓝蚜犅．犫狉犪狊狊犻犮犪犲 ３９９．５４２（３４３．３２５～４４６．１８５） １．００
豆蚜犃．犮狉犪犮犮犻狏狅狉犪 ６１６．６３９（５６７．４１１～６６９．０６４） １．００
禾谷缢管蚜犚．狆犪犱犻 １１７５．２０１（９７１．５９８～１６４６．７３０） １．００
桃蚜犕．狆犲狉狊犻犮犪犲 ５６５．８６６（４４０．８０２～７０９．３４８） １．００
棉蚜犃．犵狅狊狊狔狆犻犻 ４３６．１２４（３４３．７７６～５６８．５００） １．００
　注：相对毒力＝鱼藤酮的ＬＣ５０值／莨菪碱、东莨菪碱的ＬＣ５０值。下同。
　Ｎｏｔｅ：Ｒｅｌａｔｉｖｅｔｏｘｉｃｉｔｙ＝ＬＣ５０ｖａｌｕｅｏｆｒｏｔｅｎｏｎｅ／ＬＣ５０ｖａｌｕｅｏｆｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ，ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
２．３　莨菪碱和东莨菪碱对朱砂叶螨、二斑叶螨等４种叶螨的毒力
表２表明，莨菪碱和东莨菪碱对截形叶螨、山楂叶螨、二斑叶螨和朱砂叶螨具有较强的触杀作用。２种生物
碱对４种叶螨的毒力相当，对二斑叶螨和朱砂叶螨的毒力均高于截形叶螨和山楂叶螨，莨菪碱对二斑叶螨、朱砂
２９１ 草　业　学　报 第２４卷
叶螨的ＬＣ５０值分别为２２２．９５０和２１９．３３６ｍｇ／Ｌ，东莨菪碱对二斑叶螨、朱砂叶螨的ＬＣ５０值分别为２０１．０２７和
２２４．１７２ｍｇ／Ｌ。对照药剂鱼藤酮对截形叶螨、山楂叶螨的ＬＣ５０值分别为１９６．８４７和２２４．５９２ｍｇ／Ｌ。从相对毒
力来看，莨菪碱和东莨菪碱对截形叶螨、山楂叶螨的触杀作用相当，二者均不及鱼藤酮，分别为鱼藤酮毒力的０．５９
（０．５８～０．５９）倍和０．６２（０．６２～０．６０）倍、０．７５（０．６５～０．７９）倍和０．８７（０．８３～０．８７）倍。
表２　莨菪碱和东莨菪碱对４种叶螨的毒力
犜犪犫犾犲２　犜狅狓犻犮犻狋犻犲狊狅犳犺狔狅狊犮狔犪犿犻狀犲犪狀犱狊犮狅狆狅犾犪犿犻狀犲犪犵犪犻狀狊狋犳狅狌狉犿犻狋犲狊狆犲犮犻犲狊
样品名称
Ｓａｍｐｌｅｎａｍｅ
叶螨种类
Ｍｉｔｅｓｐｅｃｉｅｓ
ＬＣ５０（９５％置信限
９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｌｉｍｉｔ，ｍｇ／Ｌ）
相对毒力
Ｒｅｌａｔｉｖｅｔｏｘｉｃｉｔｙ
莨菪碱 Ｈｙｏｓｃｙａｍｉｎｅ 截形叶螨犜．狋狉狌狀犮犪狋狌狊 ３３２．６９８（３０５．９４５～３６２．４９９） ０．５９（０．５８～０．５９）
山楂叶螨犜．狏犻犲狀狀犲狀狊犻狊 ２９８．９５３（２６２．６１２～３４１．９３５） ０．７５（０．６５～０．７９）
二斑叶螨犜．狌狉狋犻犮犪犲 ２２２．９５０（１９７．９５６～２４５．７５５） －
朱砂叶螨犜．犮犻狀狀犪犫犪狉犻狀狌狊 ２１９．３３６（１９３．８１５～２４２．２３０） －
东莨菪碱Ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ 截形叶螨犜．狋狉狌狀犮犪狋狌狊 ３１８．７３０（２８８．０３４～３５５．２４０） ０．６２（０．６２～０．６０）
山楂叶螨犜．狏犻犲狀狀犲狀狊犻狊 ２５７．０１４（２０４．９２３～３１１．５４１） ０．８７（０．８３～０．８７）
二斑叶螨犜．狌狉狋犻犮犪犲 ２０１．０２７（１７０．４８７～２２５．９３９） －
朱砂叶螨犜．犮犻狀狀犪犫犪狉犻狀狌狊 ２２４．１７２（２０３．３４９～２４３．６８９） －
鱼藤酮Ｒｏｔｅｎｏｎｅ 截形叶螨犜．狋狉狌狀犮犪狋狌狊 １９６．８４７（１７８．１５７～２１２．９８６） １．００
山楂叶螨犜．狏犻犲狀狀犲狀狊犻狊 ２２４．５９２（１６９．６９６～２７１．０１４） １．００
３　结论与讨论
采用柱色谱分离法从唐古特莨菪地上部分分离得到２个生物碱类化合物，通过 ＭＳ、ＮＭＲ确定了其化学结
构，分别为莨菪碱、东莨菪碱。生物活性测定结果表明，莨菪碱对禾谷缢管蚜、桃粉蚜、豆蚜和绣线菊蚜具有较强
的触杀作用，东莨菪碱对豆蚜和禾谷缢管蚜具有较强的触杀作用，对照药剂鱼藤酮对甘蓝蚜和棉蚜具有较强的触
杀作用。对甘蓝蚜的触杀作用，莨菪碱强于东莨菪碱，二者均不及鱼藤酮；对豆蚜的触杀作用，莨菪碱和东莨菪碱
相当，二者均强于鱼藤酮；对禾谷缢管蚜的触杀作用，莨菪碱强于东莨菪碱，二者均强于鱼藤酮；对桃蚜、棉蚜的触
杀作用，莨菪碱和东莨菪碱相当，二者均弱于鱼藤酮。２种生物碱对４种叶螨具有较强的触杀作用，对二斑叶螨
和朱砂叶螨的毒力均高于截形叶螨和山楂叶螨，对照药剂鱼藤酮对截形叶螨和山楂叶螨毒力高于莨菪碱和东莨
菪碱。
唐古特莨菪是特产于我国青藏高原的中草药，其形成东莨菪碱的能力较强，是提取山莨菪碱和东莨菪碱的主
要资源植物，为重要的藏药和中药药用植物。由于多年来一直处于过度采挖状态，不仅破坏了野生植物生存的自
然生态环境，而且导致了植物资源的潜在灭绝［２２］。李小伟等［２３］在其综述论文中从对家畜的毒性角度认为，唐古
特莨菪全株有毒，根毒较大，但从对昆虫的毒性研究结果来看，地上部分茎叶对粘虫和菜青虫的触杀活性高于其
根部［１１］，这可能是茎叶的杀虫生物碱含量高于根部所致，张晓峰和王环［６］研究得出的地上部分生物碱含量高于
地下部分的结论证实了这一推断。本研究结果表明，莨菪碱和东莨菪碱对豆蚜和禾谷缢管蚜的触杀活性优于著
名植物源杀虫剂鱼藤酮，对甘蓝蚜、桃蚜和棉蚜的触杀活性与鱼藤酮相当，对朱砂叶螨、二斑叶螨等４种叶螨的触
杀活性与鱼藤酮相当，表明莨菪烷类生物碱在研制新型植物源杀虫（螨）剂方面具有广阔的应用前景。从利用唐
古特莨菪研制植物源杀虫（螨）剂而言，可直接采收其地上部茎叶，而无需挖根，这有利于保护野生资源，避免挖根
对生态环境造成的严重破坏。张晓峰和王环［６］研究结果表明，唐古特莨菪植物地上部分在生长发育的盛花期，其
体内４种莨菪烷类生物碱含量总和明显高于其他物候期，同时也高于地下部分不同物候期的总生物碱含量。因
此，应根据物候期合理利用唐古特莨菪的地上部分提取生物碱，避免挖根对植物的掠夺性采掘，以利于该植物的
生物可持续利用。
３９１第１２期 王玉灵　等：唐古特莨菪中生物碱的分离、鉴定与生物活性研究
王威等［２４］研究证实，甘青赛莨菪（唐古特莨菪）乙醇粗提物在１０００ｍｇ／ｋｇ浓度下对水稻白叶枯病菌（犡犪狀
狋犺狅犿狅狀犪狊狅狉狔狕犪犲ｐｖ．狅狉狔狕犪犲）具有一定的抑制作用。因此，今后有必要研究莨菪碱、东莨菪碱等莨菪烷类生物碱
对主要农作物病原菌的抑菌作用，以探明其在植物源杀菌剂开发利用方面的前景。同时还应研究探明此类生物
碱对蚜虫和叶螨的作用机理，为新型植物源杀虫（螨）剂的研制提供依据。
作者采用柱色谱分离法从唐古特莨菪盛花期地上部分分离得到４个莨菪烷类生物碱，即莨菪碱、东莨菪碱、
山莨菪碱和樟柳碱，通过 ＨＰＬＣＤＡＤ检测了其在生物碱总碱样品中的含量，分别为３．４６％，１２．４０％，１３．０９％和
１０．３４％（论文待发表），本文是莨菪碱和东莨菪碱对蚜虫和叶螨触杀活性测定结果的报道。
犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊：
［１］　ＸｕｅＧＨ，ＦａｎＨＹ，ＬｉＨ，犲狋犪犾．Ａｄｖａｎｃｅｓｉｎａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｒｅｓｅａｒｃｈｏｎａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎｔｈｅｂｏｔａｎｉｃａｌｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ．ＮｏｒｔｈｅｒｎＨｏｒｔｉｃｕｌ
ｔｕｒｅ，２００９，（６）：１３１１３４．
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４９１ 草　业　学　报 第２４卷
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