全 文 ：书柱花草磷转运蛋白犛犵犘犜１的克隆和表达分析
孙丽莉１，２，陈志坚２，刘攀道１，２，廖红２，刘国道１，田江２
（１．海南大学农学院 中国热带农业科学院品种资源研究所，海南 儋州５７１７３７；２．华南农业大学亚热带
农业生物资源保护与利用国家重点实验室根系生物学研究中心，广东 广州５１０６４２）
摘要：磷是植物生长所必需的大量元素。高亲和磷转运子是控制植物对磷吸收和转运的主要蛋白。本研究以磷高
效的柱花草基因型ＴＰＲＣ２００１１为对象，首先建立低磷胁迫下ＴＰＲＣ２００１１根系全长ｃＤＮＡ文库。通过同源克隆
的方法，首次克隆到编码柱花草高亲和磷转运蛋白的基因，犛犵犘犜１。该基因全长ｃＤＮＡ为１９９４ｂｐ，编码５３８个氨
基酸残基，蛋白分子量为５９ｋＤ。ＳｇＰＴ１蛋白具有高亲和磷转运子的结构特点，即含有“６＋６”跨膜结构。而且，定
量ＰＣＲ分析结果表明低磷胁迫显著促进犛犵犘犜１在根部的表达，表明该基因可能参与低磷胁迫下磷的吸收和转运
的过程。总之，以上结果表明犛犵犘犜１的加强表达可能是ＴＰＲＣ２００１１适应低磷胁迫的分子机制之一，为进一步研
究柱花草适应低磷的分子机制提供候选基因。
关键词：柱花草；磷；磷转运子；同源克隆；犛犵犘犜１
中图分类号：Ｑ９４３．２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１３）０４０１８７１０
犇犗犐：１０．１１６８６／ｃｙｘｂ２０１３０４２３　　
　　磷是植物生长发育过程中必需的大量元素，参与植物光合作用、能量代谢和信号传导等过程［１３］。但是，土壤
中磷有效性较低，难以满足植物生长的需要［４，５］。在长期进化过程中，植物形成了一系列适应低磷胁迫的机
制［６，７］，包括改变根的形态构型及诱导高亲和磷转运子的表达，强化根系吸收根际有效磷［８］；促进根系有机酸和
质子的分泌，活化并释放土壤中的难溶性磷［９］；提高内源和外源酸性磷酸酶的活性，实现植物内部磷的再利用和
土壤中有机磷的活化等［１０，１１］。其中，调控磷转运子的表达是植物控制根际有效磷的吸收和转运的关键步骤，也
是植物适应低磷胁迫的主要分子机制之一［１２１４］。
植物的磷转运子主要分为３个家族，其中对高亲和力磷转运子ＰＴ１（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）家族的研究在许
多植物中都有报道，如水稻（犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪）［１５１７］、玉米（犣犲犪犿犪狔狊）［１８］、拟南芥（犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪）［１９］、苜蓿
（犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪）［２０］、番茄（犔狔犮狅狆犲狉狊犻犮狅狀犲狊犮狌犾犲狀狋狌犿）［２１］、大豆（犌犾狔犮犻狀犲犿犪狓）［２２］和短柄草（犅狉犪犮犺狔狆狅犱犻狌犿
犱犻狊狋犪犮犺狔狅狀）［２３］等。ＰＴ１家族成员在结构上具有较高的保守性，如编码的蛋白分子量相似，约为５８ｋＤ，包含
５２０～５５０个氨基酸残基；由１２个亲脂的跨膜域（ＴＭ）组成，ＴＭ６和ＴＭ７之间有一个分布在细胞质中的亲水性
大环，形成“６亲水６”结构［２４２７］。
通过比较ＰＴ１家族中的不同成员的表达模式，发现大部分植物ＰＴ１家族的磷转运子在根中的表达量受低
磷胁迫的显著上调。例如，在水稻１３个犘犜１基因家族成员中至少有１０个在根部表达，其中犗狊犘犜２，犗狊犘犜６，
犗狊犘犜８等受低磷胁迫增强表达；拟南芥９个犘犜１基因中至少有８个在根部受低磷增强或诱导表达［１５，１６，２８，２９］。酵
母功能互补实验证明，大部分ＰＴ１家族成员介导酵母细胞膜的磷酸盐转运，为高亲和磷转运蛋白，并且超量或抑
制部分犘犜１基因家族成员的表达，能够影响磷的吸收与转运［１７，２７，３０］。在水稻中，犗狊犘犜６通过酵母功能互补实验
证明为高亲和磷转运子，在主侧根的表皮细胞、皮层和维管组织均有表达，且干涉犗狊犘犜６的表达会降低根部及根
部向地上部磷的运输，暗示犗狊犘犜６可能参与从外界环境吸收磷并从根部向地上部的长距离运输［１６］。在拟南芥
中，超量或抑制表达高亲和磷转运子犃狋犘犺狋１；５，导致地上部磷含量减少或增加，表明犃狋犘犺狋１；５可能参与从地上
第２２卷　第４期
Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．４
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
１８７－１９６
２０１３年８月
收稿日期：２０１２０９０５；改回日期：２０１２１０１５
基金项目：国家自然科学基金（３１０２５０２２），国家重点基础研究９７３项目（２００７ＣＢ１０８９０３）和中国农业产业体系专项基金（ＣＡＲＳ３５）资助。
作者简介：孙丽莉（１９８４），女，福建宁德人，博士。Ｅｍａｉｌ：ｌｉｌｉｏｎｓｕｎ＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｊｔｉａｎ＠ｓｃａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
部向根部运输磷的过程［３１］。在大豆中，犌犿犘犜５的启动子ＧＵＳ分析表明，犌犿犘犜５在新形成的根瘤中，在根瘤与
根交界处表达较强，而在成熟根瘤中，主要在根瘤的维管束中表达较强，表明犌犿犘犜５可能参与了磷从植株根部
向根瘤的转运［３２］。苜蓿犕狋犘犜４功能的丧失会抑制ＡＭ 菌根的形成和对磷的吸收，表明犕狋犘犜４对共生体系的
形成和菌根菌对磷的吸收起重要作用［３３］。
柱花草（犛狋狔犾狅狊犪狀狋犺犲狊犵狌犻犪狀犲狀狊犻狊）是重要的热带牧草，喜高温，耐瘦瘠土壤，主要种植于热带和亚热带酸性土
壤区，柱花草对酸性低磷土壤具有良好的适应性［３４，３５］。但是，柱花草响应低磷酸性土壤的分子机制尚不清楚。
前期的研究结果表明柱花草基因型ＴＰＲＣ２００１１具有较高的磷吸收和利用效率［３６］。本研究以ＴＰＲＣ２００１１为
供试材料，首先建立低磷胁迫下ＴＰＲＣ２００１１根部全长ｃＤＮＡ文库，同源克隆出柱花草第一个磷转运子犛犵犘犜１，
并对其进行生物信息学和表达模式分析，为进一步研究柱花草响应低磷的分子机制提供候选基因。
１　材料与方法
１．１　材料
１．１．１　植物　柱花草ＴＰＲＣ２００１１，由中国热带农业科学院品种资源研究所牧草中心提供。
１．１．２　试剂材料　ｃＤＮＡ文库试剂盒购自Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ公司，Ｔｒｉｚｏｌ购自Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司，Ｔａｑ酶、克隆载体
ｐＭＤ１８Ｔ、ＳＹＢＲＧｒｅｅｎ定量试剂盒购自Ｔａｋａｒａ公司，ｃＤＮＡ反转录试剂盒购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司，ＤＮＡｍａｒｋｅｒ购
自美津生物技术有限公司。
１．２　方法
１．２．１　植物材料处理　供试材料于２００８年９月在华南农业大学根系中心温室培养。柱花草ＴＰＲＣ２００１１种子
去种壳后经１０％ ＮａＣｌＯ消毒，播入石英砂中，在２５℃暗室催芽，长出第一对真叶后移栽至１４Ｌ塑料盆中于温室
进行营养液栽培。培养温度为２８℃／２５℃（昼／夜），湿度７５％，营养液为１／２Ｈｏａｇｌａｎｄ溶液［３７］。待幼苗正常生
长１个月后，进行高磷（２５０μｍｏｌ／Ｌ）和低磷（５μｍｏｌ／Ｌ）处理，２个月后收获样品。收获地上部和根部样品用于测
磷，部分根部样品用于提取ＲＮＡ，建立全长ｃＤＮＡ文库和分析表达模式。每个处理设４个重复。
１．２．２　磷浓度测定　地上部和根部样品于１０５℃杀青３０ｍｉｎ后，７５℃烘干至恒重，６００℃灰化１０ｈ后采用钼锑
抗显色法测定磷含量［３８］。
１．２．３　ｃＤＮＡ文库建立　柱花草ＴＰＲＣ２００１１低磷处理后的根部提取ＲＮＡ，参照ｃＤＮＡ文库试剂盒构建全长
ｃＤＮＡ文库［３９］。５μｇＰｏｌｙ（Ａ＋）ＲＮＡ反转成ｃＤＮＡ，补平末端后，连接上犈犮狅犚Ｉ接头。犡犺狅Ｉ酶切后，利用
ＳｐｈａｒｏｓｅＣＬ２Ｂ柱依大小分离回收ＤＮＡ，并将接有犈犮狅犚Ｉ和犡犺狅Ｉ双接头的ｃＤＮＡ包装入ＵｎｉＺＡＰＸＲ噬菌体
颗粒中。
１．２．４　犛犵犘犜１全长克隆和序列分析　根据磷转运子
保守结构域设计引物犛犵犘犜１ＥＳＴＦ与犛犵犘犜１ＥＳＴ
Ｒ（表１），通过扩增获得ＥＳＴ序列。根据ＥＳＴ序列设
计特异引物犛犵犘犜１Ｔ７Ｆ与犛犵犘犜１Ｔ３Ｒ（表１），分
别与 通 用 引 物 Ｔ７ 和 Ｔ３ 配 对，以 低 磷 胁 迫 下
ＴＰＲＣ２００１１根部全长ｃＤＮＡ文库为模板，扩增犛犵
犘犜１的３′端和５′端序列，测序并分析序列后，用
ＭＥＧＡ４．１软件拼接序列全长，其序列已经递交到
ＮＣＢＩ（登录号：ＪＸ５６０９６５）。根据５′和３′端ＵＴＲ序列
设计基因全长引物犛犵犘犜１ｆｕｌＦ 和犛犵犘犜１ｆｕｌＲ
（表１），ＰＣＲ扩增后测序获得犛犵犘犜１全长序列。蛋
白序列分析采用ＤＮＡｓｔａｒ７．１．０软件，亚细胞定位预
测采用 ＷｏＬＦＰＳＯＲＴ软件，进化树分析采用 ＭＥＧＡ
４．１软件ＮｅｉｇｈｂｏｒＪｏｉｎｉｎｇ法，跨膜结构域分析采用
表１　用于克隆犛犵犘犜１和实时荧光定量分析的引物序列
犜犪犫犾犲１　犘狉犻犿犲狉狊犳狅狉犛犵犘犜１犮犾狅狀犻狀犵犪狀犱狇犚犜犘犆犚犪狀犪犾狔狊犻狊
引物名称Ｐｒｉｍｅｒｎａｍｅ 引物序列 （５′３′）Ｓｅｑｕｅｎｃｅ（５′３′）
犛犵犘犜１ＥＳＴＦ ＣＡＣＧＧＣＴＴＧＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧ
犛犵犘犜１ＥＳＴＲ ＣＴＴＴＡＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＴＧＡＧＡＴ
Ｔ３ ＡＴＴＡＡＣＣＣＴＣＡＣＴＡＡＡＧＧＧＡ
犛犵犘犜１Ｔ３Ｒ ＡＴＡＧＧＧＣＡＡＴＧＡＧＴＧＴＴＴＧＴ
Ｔ７ ＴＡＡＴＡＣＧＡＣＴＣＡＣＴＡＴＡＧＧＧ
犛犵犘犜１Ｔ７Ｆ ＧＡＴＣＡＣＡＴＧＧＧＡＣＧＴＴＴＣ
犛犵犘犜１ｆｕｌＦ ＡＴＣＡＧＡＡＴＴＡＧＡＧＡＴＧＴＣＡＧＧＡＣＡＡＣＡ
犛犵犘犜１ｆｕｌＲ ＣＣＡＡＴＡＴＡＴＴＣＡＧＴＴＡＣＡＧＴＣＴＴＡＣＡＧ
犛犵犘犜１ＱＦ ＡＧＣＡＣＡＡＡＣＡＣＴＣＡＴＴＧＣＣＣＴＡＴ
犛犵犘犜１ＱＲ ＡＣＣＡＣＡＡＡＣＣＣＡＡＴＴＣＴＧＴＴＣＴＣ
犛犵犈犉１ＱＦ ＣＡＣＴＴＣＡＧＧＡＣＧＴＧＴＡＣＡＡＧＡＴＣ
犛犵犈犉１ＱＲ ＣＴＴＧＧＡＧＡＧＣＴＴＣＡＴＧＧＴＧＣＡ
８８１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．４
ＴＭｐｒｅｄ在线软件，氨基酸序列比对用ＧｅｎｅＤｏｃ２．０软件，磷酸化位点分析采用ＮｅｔＰｈｏｓ２．０Ｓｅｒｖｅｒ在线软件。
１．２．５　实时荧光定量ＰＣＲ分析犛犵犘犜１表达量　根部样品用Ｔｒｉｚｏｌ法（参考Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司试剂盒说明书）提
取ＲＮＡ，并用ｃＤＮＡ反转录试剂盒反转录成ｃＤＮＡ。实时荧光定量ＰＣＲ参照ＳＹＢＲＧｒｅｅｎ定量试剂盒说明书
方法进行，用ＲｏｔｏｒＧｅｎｅ３０００ｑＲＴＰＣＲ系统（ＣｏｒｂｅｔｔＲｅｓｅａｒｃｈ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）运行及ＲｅａｌＴｉｍｅＡｎａｌｙｓｉｓＳｏｆｔ
ｗａｒｅ６．０计算分析每个样品的表达量。相对表达量为目的基因的表达量与看家基因表达量的比值。犛犵犘犜１定
量引物为犛犵犘犜１ＱＦ和犛犵犘犜１ＱＲ（表１），看家基因引物为犛犵犈犉１ＱＦ和犛犵犈犉１ＱＲ（表１）。
１．３　数据统计分析
所有数据均用 ＭｉｃｒｏｓｏｆｔＯｆｆｉｃｅＥｘｃｅｌ２００３进行处理，采用ＳＰＳＳ分析系统（１１．５ｖ）进行狋测验统计分析。
２　结果与分析
２．１　不同磷水平对柱花草磷浓度的影响
图１　高低磷处理对柱花草犜犘犚犆２００１１
地上部和根部磷浓度的影响
犉犻犵．１　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犘狋狉犲犪狋犿犲狀狋狊狅狀犘犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊
犻狀狋犺犲狊犺狅狅狋狊犪狀犱狉狅狅狋狊狅犳狊狋狔犾狅犜犘犚犆２００１１
　　　：表示处理间差异显著（０．００１＜犘＜０．０１），下同。ｉｎｄｉｃａｔｅ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｎ狋ｔｅｓｔｓ（０．００１＜犘＜
０．０１）．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
图２　犛犵犘犜１全长犮犇犖犃的克隆
犉犻犵．２　犉狌犾犾犲狀犵狋犺犮犾狅狀犲狅犳犛犵犘犜１
　　　Ｍ为ＤＭ２０００ｍａｒｋｅｒ，ａ为３端扩增结果，ｂ为５端扩增结果，ｃ为全
长ｃＤＮＡ扩增结果。ＭｉｎｄｉｃａｔｅｓＤＭ２０００ｍａｒｋｅｒ；ｌａｎｅａ，ｂ，ｃｉｓＰＣＲ
ｐｒｏｄｕｃｔｏｆ３′ｔｅｒｍｉｎａｌ，５′ｔｅｒｍｉｎａｌａｎｄｆｕｌｌｅｎｇｔｈｏｆ犛犵犘犜１，ｒｅｓｐｅｃ
ｔｉｖｅｌｙ．
柱花草ＴＰＲＣ２００１１正常生长１个月后进行高
磷（２５０μｍｏｌ／Ｌ）和低磷（５μｍｏｌ／Ｌ）处理，结果表明
（图１），高低磷处理显著影响柱花草ＴＰＲＣ２００１１地
上部 和 根 部 的 磷 浓 度。低 磷 处 理 显 著 降 低 了
ＴＰＲＣ２００１１地上部和根部的磷浓度，分别只为高磷
条件下的２６％和３２％。
２．２　柱花草磷转运子犛犵犘犜１的同源克隆
为了克隆柱花草的编码高亲和磷转运子的基因，
根据已报道的高亲和磷转运子保守结构域设计引物，
同源克隆获得柱花草犛犵犘犜１基因的４７１ｂｐＥＳＴ序
列。根据获得的ＥＳＴ序列设计正向和反向特异引物，
分别与通用引物Ｔ３和Ｔ７配对，以低磷胁迫下柱花草
ＴＰＲＣ２００１１根部的全长ｃＤＮＡ文库为模板，扩增出
犛犵犘犜１的３′端序列和５′端序列（图２）。犛犵犘犜１基因
全长ｃＤＮＡ为１９９４ｂｐ，其中５′端和３′端ＵＴＲ序列
分别为１１８ｂｐ和２５９ｂｐ，其开放阅读框为１６１７ｂｐ。
经预测，犛犵犘犜１编码５３８个氨基酸残基，蛋白的分子
量为５９ｋＤ，等电点为８．９３。运用 ＷｏＬＦＰＳＯＲＴ预
测ＳｇＰＴ１的亚细胞定位，分析结果表明，ＳｇＰＴ１可能
与大多数磷转运蛋白一样定位在细胞质膜上。
２．３　进化树分析
采用 ＭＥＧＡ４．１软件，将ＳｇＰＴ１与其他植物已
知功能的ＰＴ１磷转运蛋白构建系统进化树，分析表
明，ＰＴ１家族可以分为４个亚家族（图３）。柱花草Ｓｇ
ＰＴ１属于亚族Ⅰ，与豆科植物百脉根ＬｊＰＴ１高亲和磷
转运蛋白同源性最高，氨基酸序列相似性为８６．８％
（图３）。
２．４　保守结构域分析
采用ＴＭｐｒｅｄ软件分析ＳｇＰＴ１的跨膜结构域，分
析表明ＳｇＰＴ１具备磷转运子的特征，含有１２个跨膜
结构域，并且可能是高亲和磷转运子，即在第６个和第
９８１第２２卷第４期 草业学报２０１３年
图３　犛犵犘犜１与其他植物犘犜转运蛋白的系统进化树分析
犉犻犵．３　犘犺狔犾狅犵犲狀犲狋犻犮狋狉犲犲狅犳犛犵犘犜１狑犻狋犺狊狅犿犲狊犲犾犲犮狋犲犱犘犜狆狉狅狋犲犻狀狊犻狀狆犾犪狀狋狊
　Ａｔ为拟南芥，Ｇｍ为大豆，Ｌａ为白羽扇豆，Ｌｅ为番茄，Ｌｊ为百脉根，Ｍｔ为苜蓿，Ｏｓ为水稻，Ｓｔ为马铃薯，Ｔａ为小麦。ＧｅｎｅＢａｎｋ注册号：ＡｔＰｈｔ１；
１，ＮＰ＿１９９１４９；ＡｔＰｈｔ１；２，ＮＰ＿１９９１５１；ＡｔＰｈｔ１；３，ＮＰ＿１９９１５０；ＡｔＰｈｔ１；４，ＮＰ＿１８１４２８；ＡｔＰｈｔ１；５，ＮＰ＿１８０８４２；ＡｔＰｈｔ１；６，ＮＰ＿１９９１４８；ＡｔＰｈｔ１；７，ＮＰ＿
１９１０３０；ＡｔＰｈｔ１；８，ＮＰ＿１７３５１０；ＡｔＰｈｔ１；９，ＮＰ＿１７７７６９；ＧｍＰＴ１，ＡＣＰ１９３４３；ＧｍＰＴ２，ＡＣＰ１９３４２；ＧｍＰＴ３，ＡＣＰ１９３４７；ＧｍＰＴ４，ＡＦＬ０２６２０；ＧｍＰＴ５，
ＡＣＰ１９３４０；ＧｍＰＴ６，ＡＣＰ１９３３９；ＧｍＰＴ７，ＡＣＰ１９３４１；ＧｍＰＴ８，ＡＣＰ１９３４６；ＧｍＰＴ９，ＡＣＰ１９３４４；ＧｍＰＴ１０，ＡＣＰ１９３４５；ＧｍＰＴ１１，ＡＦＬ０２６２１；
ＧｍＰＴ１２，ＡＣＰ１９３３８；ＧｍＰＴ１３，ＡＣＮ８０１４７；ＧｍＰＴ１４，ＡＦＬ０２６２２；ＬａＰＴ１，ＡＡＫ３８１９６；ＬｅＰＴ１，ＡＡＢ８２１４６；ＬｅＰＴ２，ＡＡＢ８２１４７；ＬｅＰＴ４，ＡＡＸ８５１９２；
ＬｊＰＴ１，ＢＡＥ９３３５１；ＬｊＰＴ２，ＢＡＥ９３３５２；ＬｊＰＴ３，ＢＡＥ９３３５３；ＭｔＰＴ１，ＡＡＢ８１３４６；ＭｔＰＴ２，ＡＡＢ８１３４７；ＭｔＰＴ４，ＡＡＭ７６７４３；ＯｓＰＴ１，Ｑ８Ｈ６Ｈ４；ＯｓＰＴ２，
ＮＰ＿００１０４８９７９；ＯｓＰＴ３，Ｑ７ＸＤＺ７；ＯｓＰＴ４，Ｑ０１ＭＷ８；ＯｓＰＴ５，ＮＰ＿００１０５２１９３；ＯｓＰＴ６，ＮＰ＿００１０６２５２７；ＯｓＰＴ７，ＮＰ＿００１０４８８９３；ＯｓＰＴ８，ＮＰ＿
００１０６４７０８；ＯｓＰＴ９，Ｑ８Ｈ６Ｇ７；ＯｓＰＴ１０，ＮＰ＿００１１７４７６１；ＯｓＰＴ１１，ＮＰ＿００１０４３７５９；ＯｓＰＴ１２，ＮＰ＿００１０４８９７６；ＯｓＰＴ１３，ＮＰ＿００１０５２１９５；ＳｔＰＴ１，
ＣＡＡ６７３９５；ＳｔＰＴ２，ＣＡＡ６７３９６；ＳｔＰＴ３，ＣＡＣ８７０４３；ＴａＰＴ２，ＣＡＣ６９８５５。
　Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓｆｏｒｐｌａｎｔｓｐｅｃｉｅｓ：Ａｔ，犃．狋犺犪犾犻犪狀犪；Ｇｍ，犌．犿犪狓；Ｌａ，犔狌狆犻狀狌狊犪犾犫狌狊；Ｌｅ，犔．犲狊犮狌犾犲狀狋狌犿；Ｌｊ，犔狅狋狌狊犼犪狆狅狀犻犮犪狊；Ｍｔ，犕犲犱犻犮犪犵狅
狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪；Ｏｓ，犗．狊犪狋犻狏犪；Ｓｔ，犛狅犾犪狀狌犿狋狌犫犲狉狅狊狌犿；Ｔａ，犜狉犻狋犻犮狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿．ＡｃｃｅｓｓｉｏｎｎｕｍｂｅｒｓｉｎＧｅｎＢａｎｋ：ＡｔＰｈｔ１；１，ＮＰ＿１９９１４９；ＡｔＰｈｔ１；２，
ＮＰ＿１９９１５１；ＡｔＰｈｔ１；３，ＮＰ＿１９９１５０；ＡｔＰｈｔ１；４，ＮＰ＿１８１４２８；ＡｔＰｈｔ１；５，ＮＰ＿１８０８４２；ＡｔＰｈｔ１；６，ＮＰ＿１９９１４８；ＡｔＰｈｔ１；７，ＮＰ＿１９１０３０；ＡｔＰｈｔ１；８，
ＮＰ＿１７３５１０；ＡｔＰｈｔ１；９，ＮＰ＿１７７７６９；ＧｍＰＴ１，ＡＣＰ１９３４３；ＧｍＰＴ２，ＡＣＰ１９３４２；ＧｍＰＴ３，ＡＣＰ１９３４７；ＧｍＰＴ４，ＡＦＬ０２６２０；ＧｍＰＴ５，ＡＣＰ１９３４０；
ＧｍＰＴ６，ＡＣＰ１９３３９；ＧｍＰＴ７，ＡＣＰ１９３４１；ＧｍＰＴ８，ＡＣＰ１９３４６；ＧｍＰＴ９，ＡＣＰ１９３４４；ＧｍＰＴ１０，ＡＣＰ１９３４５；ＧｍＰＴ１１，ＡＦＬ０２６２１；ＧｍＰＴ１２，
ＡＣＰ１９３３８；ＧｍＰＴ１３，ＡＣＮ８０１４７；ＧｍＰＴ１４，ＡＦＬ０２６２２；ＬａＰＴ１，ＡＡＫ３８１９６；ＬｅＰＴ１，ＡＡＢ８２１４６；ＬｅＰＴ２，ＡＡＢ８２１４７；ＬｅＰＴ４，ＡＡＸ８５１９２；
ＬｊＰＴ１，ＢＡＥ９３３５１；ＬｊＰＴ２，ＢＡＥ９３３５２；ＬｊＰＴ３，ＢＡＥ９３３５３；ＭｔＰＴ１，ＡＡＢ８１３４６；ＭｔＰＴ２，ＡＡＢ８１３４７；ＭｔＰＴ４，ＡＡＭ７６７４３；ＯｓＰＴ１，Ｑ８Ｈ６Ｈ４；
ＯｓＰＴ２，ＮＰ＿００１０４８９７９；ＯｓＰＴ３，Ｑ７ＸＤＺ７；ＯｓＰＴ４，Ｑ０１ＭＷ８；ＯｓＰＴ５，ＮＰ＿００１０５２１９３；ＯｓＰＴ６，ＮＰ＿００１０６２５２７；ＯｓＰＴ７，ＮＰ＿００１０４８８９３；Ｏｓ
ＰＴ８，ＮＰ＿００１０６４７０８；ＯｓＰＴ９，Ｑ８Ｈ６Ｇ７；ＯｓＰＴ１０，ＮＰ＿００１１７４７６１；ＯｓＰＴ１１，ＮＰ＿００１０４３７５９；ＯｓＰＴ１２，ＮＰ＿００１０４８９７６；ＯｓＰＴ１３，ＮＰ＿
００１０５２１９５；ＳｔＰＴ１，ＣＡＡ６７３９５；ＳｔＰＴ２，ＣＡＡ６７３９６；ＳｔＰＴ３，ＣＡＣ８７０４３；ＴａＰＴ２，ＣＡＣ６９８５５．
０９１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．４
７个跨膜区之间（ＴＭ６～ＴＭ７）具有亲水环结构（图４）。
图４　犛犵犘犜１的跨膜结构域分析
犉犻犵．４　犘狉犲犱犻犮狋犻狅狀狅犳狋狉犪狀狊犿犲犿犫狉犪狀犲狉犲犵犻狅狀狊
采用ＧｅｎｅＤｏｃ软件进行多序列比对的结果表明，不同
物种间的ＰＴ１磷转运子相似性很高，均具有１２个跨
膜 结 构 域 和 １ 个 特 征 保 守 序 列 ＧＧＤＹＰＬＳＡ
ＴＩＭＳＥ［２４，４０］（图５）。
２．５　磷酸化位点分析
磷酸化是蛋白质最重要的翻译后修饰之一，调控
着信号传导，蛋白互作、降解、定位等过程，对磷转运蛋
白活性也有调节作用。采用ＮｅｔＰｈｏｓ对ＳｇＰＴ１蛋白
质序列进行磷酸化位点分析，表明，ＳｇＰＴ１有２０个位
点可能的磷酸化位点（＞０．５），其中包括１０个丝氨酸
磷酸化位点，６个苏氨酸磷酸化位点，４个酪氨酸磷酸
化位点（图６）。
２．６　低磷胁迫对柱花草犛犵犘犜１表达的影响
高低磷处理２个月后，柱花草ＴＰＲＣ２００１１植株的磷浓度出现显著差异（图１），本研究进一步对高低磷处理
后的ＴＰＲＣ２００１１根部ｃＤＮＡ进行表达分析，结果表明，犛犵犘犜１基因在高低磷处理的根部中均有表达，低磷处理
显著增强犛犵犘犜１在根部的表达量，为高磷条件下的２倍（图７），犛犵犘犜１在高低磷条件下的不同表达量，表明
犛犵犘犜１在不同外源磷条件下可能具有不同的功能。
３　讨论
缺磷是酸性土壤中限制作物生长的主要因素，植物在进化过程中形成了一系列适应低磷的机制［６，７］。近年
来，对磷转运蛋白的研究较为广泛。ＰＴ１家族磷转运蛋白主要是膜蛋白，在植物吸收和转运磷的过程中起着重
要的作用［１３，２８，４１］。研究发现，在不同的物种中犘犜１基因家族成员数目差异较大，在拟南芥中有９个犘犜１基因家
族成员［４２，４３］，大豆有１４个犘犜１基因［２２］，水稻有１３个犘犜１基因［４４］。植物ＰＴ１磷转运蛋白同源性很高，蛋白结
构相似，且大部分都属于高亲和磷转运子［１２，４５，４６］。本研究利用同源克隆的方法，首次克隆到柱花草中编码高亲和
磷转运子的基因犛犵犘犜１。ＳｇＰＴ１的蛋白特性和结构性质均具备高亲和磷转运子的特点，含有１２个跨膜结构域
和１个特征保守序列（图４，５），并且亚细胞定位预测其可能与其他物种ＰＴ１高亲和磷转运子相似，定位于细胞质
膜上。同时，在系统进化树中，ＳｇＰＴ１所在的亚家族Ⅰ磷转运蛋白大部分已通过酵母突变体互补实验，证明为高
亲和力磷转运蛋白，如ＡｔＰｈｔ１：４，ＧｍＰＴ５，ＭｔＰＴ１和ＳｔＰＴ１等［２９，３２，４７，４８］。因此，预测ＳｇＰＴ１可能为高亲和磷转
运子。
已有报道表明，低磷胁迫能够增强植物ＰＴ１基因家族成员在根部的表达量，这在磷的吸收和转运中具有重
要作用［１６，２９，４９］。在系统进化树中，ＳｇＰＴ１所在的亚家族Ⅰ主要是在根部受低磷诱导表达，如犃狋犘犺狋１；４，犕狋犘犜１，
犕狋犘犜２和犛狋犘犜２等［２９，４８，５０］。而与犛犵犘犜１相近且已有研究报道的犔犼犘犜１、犕狋犘犜１和犕狋犘犜２主要在根部表达，
并且菌根菌侵染能够抑制这些基因的表达［５０，５１］，暗示ＳｇＰＴ１可能具有相似的功能。亚家族Ⅱ主要为单子叶植
物，在这个亚族中，水稻的４个基因功能都具有不同的特点，犗狊犘犜２和犗狊犘犜６在根部受低磷诱导表达，但ＯｓＰＴ６
为高亲和磷转运蛋白，主要负责磷的吸收；ＯｓＰＴ２为低亲和磷转运蛋白，主要参与磷从根部向地上部长距离运
输［１６，５２］。犗狊犘犜１和犗狊犘犜８的表达不受磷的调控，但对植株体内磷的平衡起到十分重要的作用［５３，５４］。在亚家族
Ⅲ中，犕狋犘犜４，犔犲犘犜４，犗狊犘犜１１，犗狊犘犜１３则在根部受菌根菌的侵染增强表达［４４，５５，５６］。亚家族ＩＶ中的犃狋犘犺狋１；８，
犃狋犘犺狋１；９在拟南芥根部受到低磷胁迫增强表达，而水稻中的犗狊犘犜９和犗狊犘犜１０与水稻的其他家族成员相比，由
于缺少基序６，因此预测其可能具有不同的功能［１５，４２，５７］。由此可见，基因家族成员不同的表达模式很大程度上决
定了该蛋白可能具有的生物功能。对犛犵犘犜１进行表达模式分析发现，在高低磷处理下犛犵犘犜１均有表达，且低
磷处理显著增强犛犵犘犜１在根部的表达量（图７），与进化树中亚家族Ⅰ的犃狋犘犺狋１；１，犃狋犘犺狋１；４相似。犃狋犘犺狋１；１
和犃狋犘犺狋１；４在低磷条件下能促进植物从外界吸收更多磷，在高磷条件下双突变这２个基因会导致吸收磷的能
１９１第２２卷第４期 草业学报２０１３年
图５　犛犵犘犜１与其他植物的犘犜１磷转运子多序列比对
犉犻犵．５　犃犾犻犵狀犿犲狀狋狅犳犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊犲狇狌犲狀犮犲狅犳犛犵犘犜１狑犻狋犺狊狅犿犲狊犲犾犲犮狋犲犱犘犜１狆狉狅狋犲犻狀狊犻狀狆犾犪狀狋狊
　Ｌｅ为番茄，Ｌｊ为百脉根，Ｍｔ为苜蓿，Ｓｔ为马铃薯。横线标注为１２个保守跨膜结构域，框标注为磷转运子蛋白特征保守序列ＧＧＤＹＰＬＳＡＴＩＭＳＥ。
Ｌｅ，犔．犲狊犮狌犾犲狀狋狌犿；Ｌｊ，犔狅狋狌狊犼犪狆狅狀犻犮犪狊；Ｍｔ，犕．狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪；Ｓｔ，犛狅犾犪狀狌犿狋狌犫犲狉狅狊狌犿．１２ｍｅｍｂｒａｎｅｓｐａｎｎｉｎｇｄｏｍａｉｎｓｏｆＰＴｓａｒｅｈｉｇｈｌｉｇｈｔｅｄｂｙｕｎ
ｄｅｒｌｉｎｅｓ．Ｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓｗｉｔｈｂｏｘａｒｅｓｉｇｎａｔｕｒｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓ（ＧＧＤＹＰＬＳＡＴＩＭＳＥ）ｏｆＰＴ１ｆａｍｉｌｙ．
２９１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．４
图６　犛犵犘犜１氨基酸序列的磷酸化位点分析
犉犻犵．６　犘狅狊狆犺狅狉狔犾犪狋犻狅狀狊犻狋犲犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳犛犵犘犜１犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊犲狇狌犲狀犮犲
力降低。柱花草ＴＰＲＣ２００１１是磷高效基因型，具有
图７　犛犵犘犜１在犜犘犚犆２００１１根部的表达分析
犉犻犵．７　犈狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳犛犵犘犜１犻狀犜犘犚犆２００１１狉狅狅狋
较高的磷利用效率［３６］，在高磷条件下犛犵犘犜１的表达
可能是ＴＰＲＣ２００１１具有较高磷吸收效率的分子机制
之一，在低磷条件下犛犵犘犜１的增强表达，可能可以提
高ＴＰＲＣ２００１１适应低磷胁迫的能力。Ｊｉａ等［５４］研究
发现，在水稻中超量表达犗狊犘犜８，能够促进地上部和
根部磷的吸收；同时，Ｍｉｔｓｕｋａｗａ等［１２］在烟草中超量
表达拟南芥的犘犎犜１，能显著提高低磷条件下烟草对
磷的吸收和转运能力，并提高生物量。但是，柱花草
犛犵犘犜１基因如何提高植株对磷吸收和利用的功能仍
需作进一步的研究。
ＰＴ１磷转运蛋白在转录水平的调控，主要表现在基因的启动子与转录因子的互作［５８，５９］。研究表明，大麦
犎狏犘犺狋１；１启动子区域的Ｐ１ＢＳ元件去除后，犎狏犘犺狋１；１对缺磷胁迫不敏感［６０］；水稻中含有 ＭＹＢ结构域的犗狊
犘犎犚１基因超量表达后，在磷充足的条件下，一些犗狊犘犜基因也能够上调表达，并造成地上部磷累积过量［５４］。此
外，ＰＴ１家族磷转运蛋白的活性也受到蛋白质修饰的调节，特别是磷酸化。ＳｇＰＴ１有１７个磷酸化位点，表明Ｓｇ
ＰＴ１转运蛋白的活性可能还受磷酸化调控，但柱花草如何通过磷酸化调节ＳｇＰＴ１表达也还需要进一步实验论
证。
参考文献：
［１］　方子森，高凌花，张恩和，等．人工施用氮肥、磷肥对宽叶羌活产量和质量的影响［Ｊ］．草业学报，２０１０，１９（４）：５４６０．
［２］　杨治平，张强，周怀平，等．不同施磷水平对饲用柠条营养和产量的影响［Ｊ］．草业学报，２０１０，１９（２）：１０３１０８．
［３］　任立飞，张文浩，李衍素．低磷胁迫对黄花苜蓿生理特性的影响［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（３）：２４２２４９．
［４］　ＲｉｃｈａｒｄｓｏｎＡＥ，ＨｏｃｋｉｎｇＰＪ，ＳｉｍｐｓｏｎＲＪ，犲狋犪犾．Ｐｌａｎｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｔｏｏｐｔｉｍｉｓｅａｃｃｅｓｓｔｏｓｏｉｌｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ［Ｊ］．ＣｒｏｐａｎｄＰａｓ
ｔｕｒｅＳｃｉｅｎｃｅ，２００７，６０（２）：１２４１４３．
［５］　ＲａｇｈｏｔｈａｍａＫＧ．Ｐｈｏｓｐｈａｔｅａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗｏｆＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＰｌａｎｔＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，１９９９，５０：６６５
６９３．
［６］　ＴｉａｎＪ，ＷａｎｇＸＲ，ＴｏｎｇＹＰ，犲狋犪犾．Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔｆｏｒｅｆｆｉｃｉｅｎｔｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｃｒｏｐｓａｎｄｐａｓｔｕｒｅｓ［Ｊ］．
ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，２３：１６．
［７］　ＷａｎｇＸＲ，ＳｈｅｎＪＢ，ＬｉａｏＨ．Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｏｒｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈｉｓｍｏｒｅｃｒｉｔｉｃａｌｆｏｒｅｎｈａｎｃｉｎｇｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｉｎｍｏｄｅｒｎ
ｃｒｏｐｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，２０１０，１７９（４）：３０２３０６．
３９１第２２卷第４期 草业学报２０１３年
［８］　ＬｙｎｃｈＪＰ．Ｒｏｏｔｐｈｅｎｅｓｆｏｒｅｎｈａｎｃｅｄｓｏｉｌｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎａｎｄｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ：ｔｏｏｌｓｆｏｒｆｕｔｕｒｅｃｒｏｐｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，
２０１１，１５６（３）：１０４１１０４９．
［９］　ＱｉｎＬ，ＪｉａｎｇＨ，ＴｉａｎＪ，犲狋犪犾．Ｒｈｉｚｏｂｉａｅｎｈａｎｃｅａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｏｆｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｏｕｒｃｅｓｂｙｓｏｙｂｅａｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ
ａｎｄＳｏｉｌ，２０１１，３４９：２５３６．
［１０］　ＷａｎｇＸＲ，ＷａｎｇＹＸ，ＴｉａｎＪ，犲狋犪犾．ＯｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＡｔＰＡＰ１５ｅｎｈａｎｃｅｓｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｉｎｓｏｙｂｅａｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉ
ｏｌｏｇｙ，２００９，１５１（１）：２３３２４０．
［１１］　ＬｉａｎｇＣＹ，ＴｉａｎＪ，ＬａｍＨＭ，犲狋犪犾．ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＰｖＰＡＰ３，ａｎｏｖｅｌｐｕｒｐｌｅａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ
ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｃｏｍｍｏｎｂｅａｎｅｎｈａｎｃｉｎｇｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒＡＴＰｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１０，１５２（２）：８５４８６５．
［１２］　ＭｉｔｓｕｋａｗａＮ，ＯｋｕｍｕｒａＳ，ＳｈｉｒａｎｏＹ，犲狋犪犾．Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｎ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪ｈｉｇｈａｆｆｉｎｉｔｙｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ
ｇｅｎｅｉｎｔｏｂａｃｃｏｃｕｌｔｕｒｅｄｃｅｌｓｅｎｈａｎｃｅｓｃｅｌｇｒｏｗｔｈｕｎｄｅｒｐｈｏｓｐｈａｔｅｌｉｍｉｔｅｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅ
ｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＵＳＡ，１９９７，９４（１３）：７０９８７１０２．
［１３］　ＲａｕｓｃｈＣ，ＢｕｃｈｅｒＭ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ，２００２，２１６（１）：２３３７．
［１４］　ＳｍｉｔｈＦＷ，ＲａｅＡＬ，ＨａｗｋｅｓｆｏｒｄＭＪ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅａｎｄｓｕｌｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ
ｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａＡｃｔａ，２０００，１４６５（１２）：２３６２４５．
［１５］　ＬｉｕＦ，ＣｈａｎｇＸＪ，ＹｅＹ，犲狋犪犾．Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄｗｈｏｌｅｌｉｆｅｃｙｃｌｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｐｈｏｓｐｈａｔｅ
ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｉｎｒｉｃｅ［Ｊ］．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔ，２０１１，４（６）：１１０５１１２２．
［１６］　ＡｉＰ，ＳｕｎＳ，ＺｈａｏＪ，犲狋犪犾．Ｔｗｏｒｉｃｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ，ＯｓＰｈｔ１；２ａｎｄＯｓＰｈｔ１；６，ｈａｖｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｕｎｃｔｉｏｎｓａｎｄｋｉｎｅｔｉｃ
ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｉｎｕｐｔａｋｅａｎｄｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＴｈｅＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２００９，５７（５）：７９８８０９．
［１７］　高佳，刘雄伦，刘玲，等．水稻磷酸盐转运蛋白Ｐｈｔ１家族研究进展［Ｊ］．中国农学通报，２００９，２５（１５）：３１３４．
［１８］　ＮａｇｙＲ，ＶａｓｃｏｎｃｅｌｏｓＭＪ，ＺｈａｏＳ，犲狋犪犾．ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｆｉｖｅＰｈｔ１ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｆｒｏｍｍａｉｚｅ（犣犲犪犿犪狔狊
Ｌ．）［Ｊ］．ＰｌａｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，２００６，８（２）：１８６１９７．
［１９］　ＭｕｄｇｅＳＲ，ＲａｅＡＬ，ＤｉａｔｌｏｆｆＥ，犲狋犪犾．ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｓｕｇｇｅｓｔｓｎｏｖｅｌｒｏｌｅｓｆｏｒｍｅｍｂｅｒｓｏｆｔｈｅＰｈｔ１ｆａｍｉｌｙｏｆｐｈｏｓ
ｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｉｎ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊［Ｊ］．ＴｈｅＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２００２，３１（３）：３４１３５３．
［２０］　ＬｉｕＪ，ＶｅｒｓａｗＷ Ｋ，ＰｕｍｐｌｉｎＮ，犲狋犪犾．Ｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｍｅｍｂｅｒｓｏｆｔｈｅ犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪ＰＨＴ１ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ
ｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｅｎｃｏｄｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｗｉｔｈｄｉｓｔｉｎｃｔｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，
２８３（３６）：２４６７３２４６８１．
［２１］　ＬｉｕＣ，ＭｕｃｈｈａｌＵＳ，ＵｔｈａｐｐａＭ，犲狋犪犾．Ｔｏｍａｔｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｓａｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｙｒｅｇｕｌａｔｅｄｉｎｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｓｂｙ
ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９９８，１１６（１）：９１９９．
［２２］　ＴａｍｕｒａＹ，ＫｏｂａｅＹ，ＭｉｚｕｎｏＴ，犲狋犪犾．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｉｎｄｕｃｉｂｌｅｐｈｏｓｐｈａｔｅ
ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｓｏｆｓｏｙｂｅａｎ［Ｊ］．ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１２，７６（２）：３０９３１３．
［２３］　马彩艳，刘冬成，阳文龙，等．短柄草磷转运蛋白家族基因的克隆及表达分析［Ｊ］．分子植物育种，２０１１，９（４）：４８２４９０．
［２４］　ＫａｒａｎｄａｓｈｏｖＶ，ＢｕｃｈｅｒＭ．Ｓｙｍｂｉｏｔｉｃｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｓ［Ｊ］．ＴｒｅｎｄｓｉｎＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，２００５，
１０（１）：２２２９．
［２５］　ＤａｒａｍＰ，ＢｒｕｎｎｅｒＳ，ＰｅｒｓｓｏｎＢＬ，犲狋犪犾．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｃｅｌｓｐｅｃｉｆｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｆｒｏｍｔｏ
ｍａｔｏ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ，１９９８，２０６（２）：２２５２３３．
［２６］　ＳａｉｅｒＭＨ．Ｆａｍｉｌｉｅｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｆｏｒｍｉｎｇｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅｃｈａｎｎｅｌｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｍｂｒａｎｅＢｉｏｌｏｇｙ，２０００，１７５（３）：１６５１８０．
［２７］　杨存义，刘灵，沈宏，等．植物Ｐｈｔ１家族磷转运子的分子生物学研究进展［Ｊ］．分子植物育种，２００６，４（２）：１５３１５９．
［２８］　ＭｕｃｈｈａｌＵＳ，ＰａｒｄｏＪＭ，ＲａｇｈｏｔｈａｍａＫＧ．Ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｆｒｏｍｔｈｅｈｉｇｈｅｒｐｌａｎｔ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪［Ｊ］．Ｐｒｏ
ｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＵＳＡ，１９９６，９３（１９）：１０５１９１０５２３．
［２９］　ＭｉｓｓｏｎＪ，ＴｈｉｂａｕｄＭＣ，ＢｅｃｈｔｏｌｄＮ，犲狋犪犾．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊Ｐｈｔ１；４，ａ
ｈｉｇｈａｆｆｉｎｉｔｙｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｎｇｇｒｅａｔｌｙｔｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｕｐｔａｋｅｉｎｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｐｒｉｖｅｄｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，
２００４，５５（５）：７２７７４１．
［３０］　段海燕，徐芳森，王运华．植物体内磷转运子的研究进展［Ｊ］．华中农业大学学报，２００１，２０（５）：５０６５１０．
［３１］　ＮａｇａｒａｊａｎＶＫ，ＪａｉｎＡ，ＰｏｌｉｎｇＭＤ，犲狋犪犾．犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊Ｐｈｔ１；５ｍｏｂｉｌｉｚｅｓｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｅｔｗｅｅｎｓｏｕｒｃｅａｎｄｓｉｎｋｏｒｇａｎｓａｎｄｉｎ
ｆｌｕｅｎｃｅｓｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｐｈｏｓｐｈａｔｅｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓａｎｄｅｔｈｙｌｅｎｅｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１１，１５６（３）：１１４９
４９１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．４
１１６３．
［３２］　ＱｉｎＬ，ＺｈａｏＪ，ＴｉａｎＪ，犲狋犪犾．ＴｈｅｈｉｇｈａｆｆｉｎｉｔｙｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒＧｍＰＴ５ｒｅｇｕｌａｔｅｓｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｔｏｎｏｄｕｌｅｓａｎｄ
ｎｏｄｕｌａｔｉｏｎｉｎｓｏｙｂｅａｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１２，１５９（４）：１６３４１６４３．
［３３］　ＪａｖｏｔＨ，ＰｅｎｍｅｔｓａＲＶ，ＴｅｒｚａｇｈｉＮ，犲狋犪犾．Ａ犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｉｎｄｉｓｐｅｎｓａｂｌｅｆｏｒｔｈｅａｒｂｕｓｃｕｌａｒ
ｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｓｙｍｂｉｏｓｉｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＵＳＡ，２００７，１０４（５）：１７２０１７２５．
［３４］　ＬｉｕＧＤ，ＰｈａｉｋａｅｗＣ，ＳｔüｒＷ Ｗ．Ｓｔａｔｕｓｏｆ犛狋狔犾狅狊犪狀狋犺犲狊ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｉｎｏｔｈｅｒｃｏｕｎｔｒｉｅｓ．ＩＩ．犛狋狔犾狅狊犪狀狋犺犲狊ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄ
ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｉｎＣｈｉｎａａｎｄｓｏｕｔｈｅａｓｔＡｓｉａ［Ｊ］．ＴｒｏｐｉｃａｌＧｒａｓｓｌａｎｄｓ，１９９７，３１：４６０４６６．
［３５］　ＮｏｂｌｅＡＤ，ＯｒｒＤＭ，ＭｉｄｄｌｅｔｏｎＣＨ，犲狋犪犾．Ｌｅｇｕｍｅｓｉｎｎａｔｉｖｅｐａｓｔｕｒｅａｓｓｅｔｏｒｌｉａｂｉｌｉｔｙ？Ａｃａｓｅｈｉｓｔｏｒｙｗｉｔｈｓｔｙｌｏ［Ｊ］．
ＴｒｏｐｉｃａｌＧｒａｓｓｌａｎｄｓ，２０００，３４：１９９２０６．
［３６］　ＤｕＹＭ，ＴｉａｎＪ，ＬｉａｏＨ，犲狋犪犾．Ａｌｕｍｉｎｉｕｍｔｏｌｅｒａｎｃｅａｎｄｈｉｇｈｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｈｅｌｐｓ犛狋狔犾狅狊犪狀狋犺犲狊ｂｅｔｔｅｒａｄａｐｔｔｏｌｏｗ
Ｐａｃｉｄｓｏｉｌｓ［Ｊ］．ＡｎｎａｌｓｏｆＢｏｔａｎｙ，２００９，１０３（８）：１２３９１２４７．
［３７］　陈志坚，严炜，孙丽莉，等．锰毒对柱花草苗期生长及铁镁吸收的影响［Ｊ］．热带作物学报，２０１１，３２（１）：１４２１４６．
［３８］　ＭｕｒｐｈｙＪ，ＲｉｌｅｙＪＲ．Ａｍｏｄｉｆｉｅｄｓｉｎｇｌｅｓｏｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｎｎａｔｕｒａｌｗａｔｅｒｓ［Ｊ］．Ａｎａｌｙｔｉｃａ
ＣｈｉｍｉｃａＡｃｔａ，１９６２，２７（１）：３１３６．
［３９］　ＴｉａｎＪ，ＶｅｎｋａｔａｃｈａｌａｍＰ，ＬｉａｏＨ，犲狋犪犾．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｓｔａｒｖａｔｉｏｎｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｇｅｎｅｓｉｎ
ｃｏｍｍｏｎｂｅａｎ（犘犺犪狊犲狅犾狌狊狏狌犾犵犪狉犻狊Ｌ．）［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ，２００７，２２７（１）：１５１１６５．
［４０］　李立芹．农作物Ｐｈｔ１家族磷转运体蛋白的生物信息学分析［Ｊ］．作物杂志，２０１１，（３）：２０２４．
［４１］　ＹａｎｇＣＹ，ＬｉｕＬ，ＳｈｅｎＨ，犲狋犪犾．ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙｏｆＰｈｔ１ｆａｍｉｌｙｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｍｏ
ｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔＢｒｅｅｄｉｎｇ，２００６，４（２）：１５３１５９．
［４２］　ＳｈｉｎＨ，ＳｈｉｎＨＳ，ＤｅｗｂｒｅＧＲ，犲狋犪犾．Ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊：Ｐｈｔ１；１ａｎｄＰｈｔ１；４ｐｌａｙａｍａｊｏｒｒｏｌｅｉｎｐｈｏｓ
ｐｈａｔｅａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｆｒｏｍｂｏｔｈｌｏｗａｎｄｈｉｇｈｐｈｏｓｐｈａｔｅｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ［Ｊ］．ＴｈｅＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２００４，３９（４）：６２９６４２．
［４３］　ＳｍｉｔｈＦＷ，ＭｕｄｇｅＳＲ，ＲａｅＡＬ，犲狋犪犾．Ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔａｎｄＳｏｉｌ，２００３，２４８：７１８３．
［４４］　ＰａｓｚｋｏｗｓｋｉＵ，ＫｒｏｋｅｎＳ，ＲｏｕｘＣ，犲狋犪犾．Ｒｉｃｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｉｎｃｌｕｄｅａｎｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｉｌｙｄｉｖｅｒｇｅｎｔｇｅｎｅｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｙａｃ
ｔｉｖａｔｅｄｉｎａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｓｙｍｂｉｏｓｉｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＵＳＡ，２００２，９９（２０）：
１３３２４１３３２９．
［４５］　ＭｉｎｇＦ，ＬｕＱ，ＷａｎｇＷ，犲狋犪犾．Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｅｎｃｏｄｅｄｇｅｎｅｉｎ犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪
Ｌ［Ｊ］．ＳｃｉｅｎｃｅｉｎＣｈｉｎａＳｅｒｉｅｓＣＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００６，４９（５）：４０９４１３．
［４６］　ＫａｒｔｈｉｋｅｙａｎＡＳ，ＶａｒａｄａｒａｊａｎＤＫ，ＭｕｋａｔｉｒａＵＴ，犲狋犪犾．Ｒｅｇｕｌａｔｅｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ［Ｊ］．
ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００２，１３０（１）：２２１２３３．
［４７］　ＣｈｉｏｕＴＪ，ＬｉｕＨ，ＨａｒｒｉｓｏｎＭＪ．Ｔｈｅｓｐａｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｏｆａｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ（ＭｔＰＴ１）ｆｒｏｍ犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀
犮犪狋狌犾犪ｉｎｄｉｃａｔｅａｒｏｌｅｉｎｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔａｔｔｈｅｒｏｏｔ／ｓｏｉｌｉｎｔｅｒｆａｃｅ［Ｊ］．ＴｈｅＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２００１，２５（３）：２８１２９３．
［４８］　ＬｅｇｇｅｗｉｅＧ，ＷｉｌｍｉｔｚｅｒＬ，ＲｉｅｓｍｅｉｅｒＪＷ．ＴｗｏｃＤＮＡｓｆｒｏｍｐｏｔａｔｏａｒｅａｂｌｅｔｏｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｐｈｏｓｐｈａｔｅｕｐｔａｋｅｄｅｆｉｃｉｅｎｔ
ｙｅａｓｔｍｕｔａｎｔ：ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｆｒｏｍｈｉｇｈｅｒｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＴｈｅＰｌａｎｔＣｅｌ，１９９７，９（３）：３８１３９２．
［４９］　ＲｅｍｙＥ，ＣａｂｒｉｔｏＴＲ，ＢａｔｉｓｔａＲＡ，犲狋犪犾．ＴｈｅＰｈｔ１；９ａｎｄＰｈｔ１；８ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｍｅｄｉａｔｅｉｎｏｒｇａｎｉｃｐｈｏｓｐｈａｔｅａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｂｙ
ｔｈｅ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪ｒｏｏｔｄｕｒｉｎｇｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｓｔａｒｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＮｅｗＰｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ，２０１２，１９５（２）：３５６３７１．
［５０］　ＬｉｕＨ，ＴｒｉｅｕＡＴ，ＢｌａｙｌｏｃｋＬＡ，犲狋犪犾．Ｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｗｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｆｒｏｍ犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀犮犪狋狌
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ＭｉｃｒｏｂｅＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，１９９８，１１（１）：１４２２．
［５１］　ＭａｅｄａＤ，ＡｓｈｉｄａＫ，ＩｇｕｃｈｉＫ，犲狋犪犾．Ｋｎｏｃｋｄｏｗｎｏｆａｎａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｉｎｄｕｃｉｂｌｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｏｆ犔狅狋狌狊
犼犪狆狅狀犻犮狌狊ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｍｕｔｕａｌｉｓｔｉｃｓｙｍｂｉｏｓｉｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔａｎｄＣｅｌＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００６，４７（７）：８０７８１７．
［５２］　郭强，孙淑斌，ＬｉｎｇＹ，等．水稻中的磷转运蛋白基因在异源表达系统中的功能分析［Ｊ］．中国水稻科学，２００８，２２（３）：
２２７２３３．
［５３］　ＳｕｎＳＢ，ＧｕＭ，ＣａｏＹ，犲狋犪犾．Ａｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ，ＯｓＰｈｔ１；１，ｍｏｄｕｌａｔｅｓｐｈｏｓｐｈａｔｅｕｐｔａｋｅａｎｄ
ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｉｎＰｈｏｓｐｈａｔｅｒｅｐｌｅｔｅｒｉｃｅ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１２，１５９（４）：１５７１１５８１．
［５４］　ＪｉａＨＦ，ＲｅｎＨＹ，ＧｕＭ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅ犗狊犘犺狋１；８ｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐｈｏｓｐｈａｔｅｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｉｎｒｉｃｅ［Ｊ］．
５９１第２２卷第４期 草业学报２０１３年
ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１２，１５６（３）：１１６４１１７５．
［５５］　ＪａｖｏｔＨ，ＰｅｎｍｅｔｓａＲＶ，ＢｒｅｕｉｌｉｎＦ，犲狋犪犾．犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪犿狋狆狋４ｍｕｔａｎｔｓｒｅｖｅａｌａｒｏｌｅｆｏｒｎｉｔｒｏｇｅｎｉｎｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆ
ａｒｂｕｓｃｕｌｅｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｉｎａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｓｙｍｂｉｏｓｉｓ［Ｊ］．ＴｈｅＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２０１１，６８（６）：９５４９６５．
［５６］　ＸｕＧＨ，ＣｈａｇｕｅＶ，ＭｅｌａｍｅｄＢｅｓｓｕｄｏＣ，犲狋犪犾．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆ犔犲犘犜４：ａｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｉｎｔｏｍａｔｏ
ｗｉｔｈｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｅｎｈａｎｃｅｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢｏｔａｎｙ，２００７，５８（１０）：２４９１２５０１．
［５７］　ＲｅｍｙＥ，ＣａｂｒｉｔｏＴＲ，ＢａｔｉｓｔａＲＡ，犲狋犪犾．ＴｈｅＰｈｔ１；９ａｎｄＰｈｔ１；８ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｍｅｄｉａｔｅｉｎｏｒｇａｎｉｃｐｈｏｓｐｈａｔｅａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｂｙ
ｔｈｅ犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪ｒｏｏｔｄｕｒｉｎｇｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｓｔａｒｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＮｅｗＰｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ，２０１２，１９５（２）：３５６３７１．
［５８］　ＣｈｅｎＡＱ，ＧｕＭ，ＳｕｎＳＢ，犲狋犪犾．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｗｏｃｏｎｓｅｒｖｅｄｃｉｓａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓ，ＭＹＣＳａｎｄＰ１ＢＳ，ｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｒｅｇ
ｕｌａｔｉｏｎｏｆｍｙｃｏｒｒｈｉｚａａｃｔｉｖａｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｉｎｅｕｄｉｃｏｔｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．ＮｅｗＰｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ，２０１１，１８９（４）：１１５７１１６９．
［５９］　ＢａｒｉＲ，ＤａｔｔＰａｎｔＢ，ＳｔｉｔｔＭ，犲狋犪犾．ＰＨＯ２，ｍｉｃｒｏＲＮＡ３９９，ａｎｄＰＨＲ１ｄｅｆｉｎｅａｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．
ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００６，１４１（３）：９８８９９９．
［６０］　ＳｃｈｕｎｍａｎｎＰＨ，ＲｉｃｈａｒｄｓｏｎＡＥ，ＶｉｃｋｅｒｓＣＥ，犲狋犪犾．Ｐｒｏｍｏｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｂａｒｌｅｙ犘犺狋１；１ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｉ
ｄｅｎｔｉｆｉｅｓｒｅｇｉｏｎｓｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇｒｏｏｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓｔｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００４，
１３６（４）：４２０５４２１４．
犆犾狅狀犻狀犵犪狀犱犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狋犺犲狆犺狅狊狆犺犪狋犲狋狉犪狀狊狆狅狉狋犲狉狆狉狅狋犲犻狀犛犵犘犜１犳狉狅犿犛狋狔犾狅狊犪狀狋犺犲狊
ＳＵＮＬｉｌｉ１，２，ＣＨＥＮＺｈｉｊｉａｎ２，ＬＩＵＰａｎｄａｏ１，２，ＬＩＡＯＨｏｎｇ２，ＬＩＵＧｕｏｄａｏ１，ＴＩＡＮＪｉａｎｇ２
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＨａｉｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＣｒｏｐＧｅｎｅｔｉｃＲｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｃｈｉｎｅｓｅ
ＡｃａｄｅｍｙｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｄａｎｚｈｏｕ５７１７３７，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｆｏｒＣｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＳｕｂｔｒｏｐｉｃａｌＡｇｒｏｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，ＲｏｏｔＢｉｏｌｏｇｙ
Ｃｅｎｔｅｒ，ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６４２，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ（Ｐ）ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｍａｃｒｏｎｕｔｒｉｅｎｔｓａｎｄａｈｉｇｈａｆｆｉｎｉｔｙｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ
（ＰＴ）ｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎＰａｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｐｏｒｔ．犛犵犘犜１ｅｎｃｏｄｅｓａｈｉｇｈａｆｆｉｎｉｔｙｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓ
ｐｏｒｔｅｒｆｒｏｍｔｈｅｒｏｏｔｓｏｆＴＰＲＣ２００１１ｗｈｉｃｈｉｓａＰｅｆｆｉｃｉｅｎｔｇｅｎｏｔｙｐｅ．Ｉｔｗａｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｌｙｃｌｏｎｅｄａｎｄａｆｕｌ
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１９９４ｂｐ，ａｎｄｉｔｅｎｃｏｄｅｓ５３８ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ．ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｏｆＳｇＰＴ１ｉｓ５９ｋＤ．Ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓｅｃ
ｏｎｄａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｓａ６＋６ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈｉｓｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｗｉｔｈｍｏｓｔｈｉｇｈａｆｆｉｎｉｔｙＰＴ．Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ
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ｄａｔｅｇｅｎｅｓｆｏｒｃｌａｒｉｆｙｉｎｇｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犛狋狔犾狅狊犪狀狋犺犲狊；ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ；ｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ；ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｃｌｏｎｅ；犛犵犘犜１
６９１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．４