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Bioactivity of Cichorium intybus leaf extracts against Mythimna separata

菊苣叶提取物对粘虫的生物活性研究



全 文 :书菊苣叶提取物对粘虫的生物活性研究
孙娈姿,王?珍,呼天明,杜金鸿
(西北农林科技大学动物科技学院,陕西 杨凌712100)
摘要:为研究菊苣叶提取物的杀虫活性,采用冷浸法和超声波混合提取法得到菊苣叶提取物,对3及4龄粘虫分别
用饲喂称重法和叶碟添加法进行毒力测定。结果表明,各有机溶剂提取物处理的幼虫体重均显著低于对照组(犘<
0.05);乙醇和乙酸乙酯提取物处理组的幼虫期比对照组延长了4.3d;各有机溶剂提取物处理组中,乙酸乙酯提取
物死亡率最高,为57.78%,其化蛹率最低,仅为46.67%;各处理组蛹重均显著大于对照组(犘<0.05);乙醇和乙酸
乙酯提取物处理组粘虫的拒食率高达80%以上。
关键词:菊苣叶;提取物;粘虫;生物活性
中图分类号:S482.3  文献标识码:A  文章编号:10045759(2011)02006007
  粘虫(犕狔狋犺犻犿狀犪狊犲狆犪狉犪狋犪)是危害我国粮食作物的一种重要的迁飞性害虫,其幼虫食性广、食量大,猖獗暴发
时往往造成惨重损失[1]。2002年8月中旬,晋冀鲁豫津近100万hm2 秋熟作物三代粘虫大暴发,对农作物生产
造成严重危害[2,3]。长期以来,人们在治虫防虫过程中主要依赖化学农药,但由于化学农药本身固有的缺点和人
们长期不合理的滥用,导致了农药残留、害虫抗药性和环境污染等一系列问题。随着人类对生态环境及绿色食品
的重视,促使人们开展多方面研究以开发新型农药。植物源农药因其新型高效、无残留、无公害等特点又被称为"
绿色农药",它的开发也已提上议程[4,5]。
植物源杀虫剂由于具有效成分多、对非靶标生物安全[68]、不易产生抗药性的特点受到人们高度重视,并具有
作为传统农药替代品的潜力。目前,已对3000多种植物的杀虫活性进行了研究[9,10],主要包括楝科(Meliace
ae),菊科(Compositae),豆科(Leguminosae),杜鹃花科(Ericaceae),卫矛科(Celastraceae),唇形科(Labiatae),
瑞香科(Thymelaeaceae)等植物[11]。其中菊科植物化学成分的复杂性和多样性均居植物界首位,几乎包括了所
有天然化合物类型[12,13]。研究表明植物体内的萜类化合物在植物防御作用中具有重要生态作用,三萜化合物及
其衍生物作为杀虫剂已有报道[1416]。
菊苣(犆犻犮犺狅狉犻狌犿犻狀狋狔犫狌狊)为菊科菊苣属多年生草本植物,原产于欧洲、西亚、中亚和北美洲,我国西北、华北
及东北等地区也有分布。菊苣主要含三萜、倍半萜、香豆素、糖类等成分[17],并有高产[18]、再生能力强[19]、营养价
值高、抗病虫害的优点。目前对菊苣的研究多集中在保存[20]、栽培[2123]和加工利用[24]等方面,有研究表明,菊苣
提取物本身也具有许多生理活性,如增强免疫能力、抗炎、抑菌[25,26]、降低胆固醇和血糖等[2729]。本试验首次对
菊苣叶三种提取物进行了杀虫活性的研究,以期为开发菊苣绿色杀虫剂提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 植物样品?集与前处理
菊苣的新鲜叶片于2009年5月采自陕西杨凌会展中心北侧试验田,室内阴干,然后置于电热恒温鼓风干燥
箱中,控温在(40±1)℃烘干至发脆。用微型植物试样粉碎机粉碎,过0.45mm筛,得到植物干粉,密封于塑料袋
中备用。
1.2 供试昆虫
供试昆虫为粘虫,由西北农林科技大学无公害农药研究中心提供。粘虫幼虫在温度(27±1)℃,相对湿度(80
60-66
2011年4月
   草 业 学 报   
   ACTAPRATACULTURAESINICA   
第20卷 第2期
Vol.20,No.2
 收稿日期:20100401;改回日期:20100621
基金项目:科技部国际合作项目(普那菊苣天然产物提纯鉴定的合作研究,2008DFA31650)和陕西省国际合作项目(普那菊苣天然产物提纯鉴
定合作研究,2008KW29)资助。
作者简介:孙娈姿 (1984),女,辽宁大连人,在读硕士。Email:sunluanzi@163.com
通讯作者。Email:hutianming@126.com
±5)%,L∥D=14h∥10h的ZPW400智能植物培养箱(哈尔滨东拓科技开发有限公司)内用人工饲料喂养。
选取同一世代、3及4日龄期的健康粘虫幼虫作为供试虫。
1.3 试验方法
1.3.1 提取物的制备 采用冷浸法和超声波混合提取法进行提取,称取50g干粉放入1000mL棕色瓶中,加
入10倍量有机溶剂(乙醇、乙酸乙酯、石油醚),每次浸泡24h,超声波提取20min,将浸提液滤出,再将滤渣重复
提取1次,合并滤液,用旋转蒸发仪浓缩至膏状,称重计算提取率,并用丙酮定容到每1mL丙酮中含有1g干物
质,放入4℃冰箱备用。
提取率=
提取干物质重量
样品重量 ×100%
1.3.2 对粘虫的生物活性测定 参照饲喂称重法测定[30,31]。在100g人工饲料中分别加入丙酮溶解的各提取
物溶液2.5mL(相当于2.5g提取物),均匀混合。取适量加入培养皿中,每皿接入4龄试虫1头,每处理设3个
重复,每重复30头试虫,对照组饲料只加入等量丙酮。各处理和对照连续饲喂5d后均换用正常饲料继续饲养
至化蛹。在接虫前、接虫饲养后每隔48h对试虫进行称重,连续称9d,并详细观察试虫的取食、生长发育及生死
反应,统计蛹期、化蛹率和死亡率等指标。
死亡率=
死亡虫数
供试总虫数×100%
校正死亡率=
处理死亡率-对照死亡率
1-对照死亡率 ×100%
[32]
发育抑制率=
对照虫体重增加量-处理虫体重增加量
对照虫体重增加量 ×100%
[33]
1.3.3 非选择性拒食作用测定方法 叶碟法:在直径为9cm的培养皿底部铺一层滤纸,并加水保湿,挑取大小
一致、健壮、饥饿4h的3龄粘虫,每个培养皿中放3龄试虫1头。将新鲜的玉米叶片剪成1cm×2cm的叶碟,
放入供试样品(200mg/mL)内浸2~3s,自然晾干后在每个培养皿内加1片叶碟,待试虫吃完后再加1片叶碟,
记录试虫取食叶碟的数量,设3个重复,每个重复10头试虫,对照用丙酮作同样处理。每隔24h用方格纸测定
剩余叶面积,并更换新鲜浸毒叶片,连续记录48h,计算拒食率。
拒食率=
对照组平均取食叶面积-处理组平均取食叶面积
对照组平均取食叶面积 ×100%
[34]
1.4 数据处理
用Excel2000对数据进行转换,用SPSS16.0软件中的OneWayANOVA程序分别对不同处理的粘虫发
育指标的数据进行统计分析。采用Bivariatecorrelations分析粘虫死亡率与生长发育指标的相关性。
2 结果与分析
2.1 不同溶剂的提取率
各溶剂对菊苣叶片的提取率差异明显,石油醚、乙
酸乙酯和乙醇的提取率依次增加,乙醇提取率最高,达
到7.23%,石油醚提取率最低(表1)。由于以上溶剂
极性也是依次递减的,根据相似相溶的原理,可以推
断,菊苣叶片中化学物质亲水性者较多,而亲脂性者较
少。
2.2 不同溶剂菊苣叶片提取物对粘虫生长发育的影响
在粘虫幼虫同一培养期内,各菊苣叶片提取物处
理的试虫体重均低于对照(表2)。在第1天,各提取
表1 3种溶剂对菊苣叶的提取率
犜犪犫犾犲1 犜犺狉犲犲犽犻狀犱狊狅犳狊狅犾狏犲狀狋狅狀狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀
狉犪狋犲狅犳犾犲犪狏犲狊狅犳犆.犻狀狋狔犫狌狊
溶剂Solvent 提取率Extractionpercentage(%)
乙醇Ethanol 7.23a
乙酸乙酯Ethylacetate 4.36b
石油醚Petroleumether 1.08c
 不同字母者表示在方差分析中差异显著(犘<0.05),下同。
 Differentlettersindicatethesignificantdifference(犘<0.05),the
sameasbelow.
物处理组粘虫体重与对照组粘虫体重均差异显著,但处理之间不显著;在第3天至第5天,乙醇和乙酸乙酯处理
组的粘虫体重无显著差异,但这2个处理组与对照组及石油醚处理组差异显著;在第7天,石油醚和对照组差异
16第20卷第2期 草业学报2011年
不显著,可能由于更换正常饲料后,石油醚处理组恢复较快;在第9天,石油醚处理组的粘虫体重又显著低于对照
组的粘虫体重,这是因为在第7天到第9天,对照组粘虫体重增长迅速,尽管石油醚处理组正在恢复,但体重增长
速度不及对照组。在第1至9天,乙醇处理组的粘虫体重和乙酸乙酯处理组的粘虫体重始终无显著差异,但乙酸
乙酯处理组的粘虫体重始终小于乙醇处理组的粘虫体重。所以对试虫体重影响大小的基本顺序是:乙酸乙酯>
乙醇>石油醚。由于各处理对试虫体重均有一定程度的影响,从而影响到试虫的生长发育,故试虫的平均历期比
对照有所延长,乙醇、乙酸乙酯、分别比对照均延长了4.3d,而石油醚处理组的试虫比对照组缩短0.9d。
表2 菊苣叶提取物对粘虫幼虫生长发育抑制的影响
犜犪犫犾犲2 犌狉狅狑狋犺狉犲狊狋狉犪犻狀犻狀犵犲犳犳犲犮狋狊狅犳犲狓狋狉犪犮狋狊犳狉狅犿狋犺犲犾犲犪狏犲狊狅犳犆.犻狀狋狔犫狌狊犪犵犪犻狀狊狋4狋犺犻狀狊狋犪狉犾犪狉狏犪狅犳犕.狊犲狆犪狉犪狋犪
提取溶剂
Extraction
solvent
幼虫体重Bodyweightofthelarvae(mg/头 Head)
第1天
Thefirstday
第3天
Thethirdday
第5天
Thefifthday
第7天
Theseventhday
第9天
Theninthday
幼虫历期
Developmentperiod
ofthelarvae(d)
对照Control 19.86a 52.12a 80.38a 126.06a 194.82a 19.7
乙醇Ethanol 14.66b 17.35b 17.24b 38.16b 39.51b 24.0
乙酸乙酯Ethylacetate 13.91b 17.24b 15.11b 33.74b 36.26b 24.0
石油醚Petroleumether 16.29b 31.02c 42.93c 107.06a 155.52c 18.8
  石油醚提取物处理组的发育抑制率一直显著低于
图1 不同菊苣叶提取物对粘虫的发育抑制率
犉犻犵.1 犜犺犲犵狉狅狑狋犺犻狀犺犻犫犻狋犻狅狀狉犪狋犲狅犳犕.狊犲狆犪狉犪狋犪狋狉犲犪狋犲犱犫狔
犱犻犳犳犲狉犲狀狋犲狓狋狉犪犮狋狊犾犲犪狏犲狊狅犳犆.犻狀狋狔犫狌狊
其余2种有机溶剂提取物组,石油醚提取物抑制率最
高只有46.6%,而乙醇和乙酸乙酯溶剂提取物的最高
抑制率都在80%左右(图1)。各有机溶剂在第1天的
抑制率差异不显著,都在30%以下;从第3天至第5
天,石油醚提取物处理组粘虫体重显著低于乙醇和乙
酸乙酯提取物处理组,高低顺序和对体重量影响的大
小顺序相同,都是乙酸乙酯>乙醇>石油醚。各溶剂
提取物抑制率随时间变化趋势基本相同,第5天最高,
这可能是由于前5天都是由处理饲料喂养,抑制作用
较强,且第5天是正常粘虫体重增加量较大的时期,故
抑制率最高;值得注意的是,到第9天,3个处理组抑
制率有点上升,但还是低于第5天的抑制率,说明菊苣
叶提取物对粘虫幼虫发育的抑制作用有一定的持续性。
2.3 各处理对粘虫蛹及存活率的影响
试虫取食处理饲料后,石油醚处理与对照的蛹重差异不大,其中乙醇、乙酸乙酯提取物处理与对照差异显著
(表3)。大部分试虫的化蛹率受到一定程度的影响,其中乙酸乙酯提取物处理的效果较为明显,其化蛹率仅为
46.67%;但不同提取物对试虫的蛹期影响不显著,对照组的试虫蛹期时间最长,近11d。各处理对试虫的存活也
有不同程度的影响,乙酸乙酯影响最大,校正死亡率为57.78%,这可能都是提取物延迟试虫生长发育的持续影
响。
据观察,虫体在5d内可摄取足量的菊苣叶提取物而致中毒,表现出阵发性抽搐,虫体扭曲。但处理试虫的
死亡并不只发生在提取物处理的5d内,在幼虫发育过程中不断有死亡现象,试虫身体极度邹缩,体表大量脱水,
虫体缩短,虫体发黑,有的触之可微动,但不能爬动;有的触之不动而已死;有的腐烂而死。
在化蛹中,菊苣叶提取物处理的粘虫会出现处于成蛹状态,但羽化不成功而死亡;或蛹羽化不正常(短翅、卷
翅)。
26 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.2
2.4 不同提取物对粘虫生长发育指标的相关分析
由于粘虫的死亡率的高低直接反映了菊苣叶提取物的杀虫能力,因此,作者将粘虫蛹重、蛹期、成蛹率、第1,
3,5,7,9天粘虫的体重分别与粘虫的死亡率进行了相关分析(表4)。结果显示,粘虫死亡率与蛹重存在显著(犘
<0.05)正相关,与成蛹率及第1天到第9天的体重呈显著(犘<0.01)负相关。说明这些指标都可以成为菊苣叶
提取物杀虫能力的可靠指标。
表3 各溶剂菊苣叶提取物处理对粘虫蛹及存活的影响
犜犪犫犾犲3 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犲狓狋狉犪犮狋狊犳狉狅犿狋犺犲犾犲犪狏犲狊狅犳犆.犻狀狋狔犫狌狊犪犵犪犻狀狊狋狆狌狆犪犲犪狀犱狊狌狉狏犻狏犪犾狅犳犕.狊犲狆犪狉犪狋犪
处理Treatment 蛹重Pupaweight(mg/头 Head)成蛹率Pupationrate(%) 蛹期Pupalperiod(d)校正死亡率Correctedmortality(%)
对照Contract 285.15a 90.00 10.9 -
乙醇Ethanol 335.99b 50.00 10.4 48.26
乙酸乙酯Ethylacetate 342.85b 46.67 10.3 57.78
石油醚Petroleumether 313.04a 75.57 10.1 16.03
表4 粘虫死亡率与粘虫生长发育指标的相关分析
犜犪犫犾犲4 犆狅狉狉犲犾犪狋犻狅狀犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳犿狅狉狋犪犾犻狋狔犪狀犱犻狀犱犻犮犪狋狅狉狊狅犳犵狉狅狑狋犺犪狀犱犱犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋狅犳犕.狊犲狆犪狉犪狋犪
项目
Item
死亡率
Mortality
蛹重
Pupa
weight
蛹期
Pupal
period
成蛹率
Pupation
rate
幼虫历期
Development
periodof
thelarvae
幼虫体重bodyweightofthelarvae
第1天
The1st
day
第3天
The3rd
day
第5天
The5th
day
第7天
The7th
day
蛹重Pupaweight 0.535
蛹期Pupalperiod -0.315 -0.561
成蛹率Pupationrate -0.963 -0.506 0.311
幼虫历期Developmentperiodofthelarvae 0.242 0.089 -0.293 -0.307
幼虫体重 第1天Thefirstday -0.628 -0.782 0.510 0.638 -0.362
Bodyweight 第3天Thethirdday -0.825 -0.784 0.582 0.802 -0.362 0.894
ofthelarvae 第5天Thefifthday -0.867 -0.768 0.528 0.831 -0.352 0.874 0.988
第7天Theseventhday -0.847 -0.729 0.271 0.795 -0.224 0.836 0.891 0.913
第9天Theninthday -0.924 -0.693 0.301 0.883 -0.241 0.793 0.914 0.939 0.975
 注:表示0.01水平差异显著;表示0.05水平差异显著。
 Note:indicatessignificantdifferenceatthelevelof0.01;indicatessignificantdifferenceatthelevelof0.05.
表5 菊苣叶提取物对粘虫3龄幼虫的拒食作用
犜犪犫犾犲5 犃狀狋犻犳犲犲犱犻狀犵犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋狊犳狉狅犿狋犺犲犾犲犪狏犲狊狅犳犆.犻狀狋狔犫狌狊
犪犵犪犻狀狊狋3狉犱犻狀狊狋犪狉犾犪狉狏犪狅犳犕.狊犲狆犪狉犪狋犪
提取物Extracts 24h
平均取食叶面积
Chewedleafarea
perinsect(cm2)
平均拒食率
Antifeeding
rate(%)
48h
平均取食叶面积
Chewedleafarea
perinsect(cm2)
平均拒食率
Antifeeding
rate(%)
72h
平均取食叶面积
Chewedleafarea
perinsect(cm2)
平均拒食率
Antifeeding
rate(%)
乙醇Ethanol 2.41c 83.96 4.40c 82.40 4.98b 83.40
乙酸乙酯Ethylacetate 2.32c 84.56 3.90c 84.40 4.67b 84.43
石油醚Petroleumether 6.90b 54.09 11.93b 52.28 29.50a 16.67
对照Contract 15.03a - 25.00a - 30.00a -
36第20卷第2期 草业学报2011年
2.5 菊苣叶溶剂提取物对粘虫的拒食作用
菊苣叶3种溶剂提取物对粘虫3龄幼虫均有较强的拒食作用。在200mg/mL浓度下处理24h,乙酸乙酯提
取物拒食率最高,达到84.56%,其次为乙醇,3个处理组取食面积均与对照差异显著。乙醇和乙酸乙酯提取物
48和72h内的拒食率与24h内的拒食率相比变化不明显。但在石油醚处理组中,拒食率随着时间的延长而变
小,到72h后,拒食率只有16.67%(表5)。
3 讨论
本试验对菊苣叶杀虫活性的研究侧重于其对试虫生长发育的影响。经不同菊苣叶提取物处理后,粘虫表现
出不同的拒食、胃毒和生长发育抑制等现象。在3种菊苣叶提取物中,乙酸乙酯提取物对粘虫的生长发育影响最
显著,乙醇提取物次之,石油醚提取物最低。在乙酸乙酯提取物处理组中,处理的第3~5天虫体重抑制率高达
90%以上,并且幼虫期延长。昆虫生长发育受到抑制的原因可能是提取物使昆虫产生拒食现象,引起昆虫取食不
足,没有足够营养;也可能是昆虫在取食有毒化合物后,中肠结构受到破坏,影响物质的正常吸收[35];还可能是有
毒化合物破坏了昆虫体内激素平衡,致使昆虫产生畸型虫态[36]。在测定生长发育试验过程中,粘虫对添加提取
物的人工饲料取食很少,并且拒食试验也表明提取物对粘虫的拒食效果很显著,所以推测粘虫生长受到抑制的原
因主要是拒食效果,但具体原因还有待进一步试验。对于幼虫期的延长,有人认为前胸腺受到影响后,血淋巴中
蜕皮激素的滴度降低会延长幼虫期[37,38]。
食料条件、农药、温度等对试虫影响的一个重要表现就是蛹重的变化,一般的蛹重与羽化率呈显著正相关,即
在一定范围内,蛹的重量越大,羽化率越高[39,40]。但在本试验中,蛹重与死亡率形成了显著的正相关,这可能是
由于粘虫在处理的前5d,粘虫生长发育由于拒食而受到抑制,因为更换正常饲料后,粘虫取食量增加,并且在延
长的幼虫期内体重迅速增加,蛹重也有了相应的增加。
在本试验中,乙醇和乙酸乙酯提取物具有很好的拒食作用,达80%以上。此前对农药的研究表明,农药可破
坏害虫味觉使害虫拒食,通过毒力作用使害虫的取食行为受到抑制或通过气味使害虫产生趋避[41,42]。推测,菊
苣叶乙醇和乙酸乙酯提取物可能通过类似农药的机理抑制粘虫的取食。
在试验过程中经菊苣叶提取物处理后观察到,粘虫先身体变黑,最后腐烂而死。这种现象很像胃毒致死后的
现象,胃毒作用机理很多,或与消化系统受到破坏[43]有关,或是阻断神经传导[35]而导致害虫麻痹、昏迷和死亡,或
是影响昆虫体内消化酶的活性[44]而使消化系统损坏。另外,在处理粘虫的发育过程中,粘虫会因为毒性而有羽
化不正常现象。植物源杀虫剂对昆虫生长发育的影响,目前普遍认为是干扰了昆虫正常的内分泌系统,导致生长
发育出现异常[45]。对于影响昆虫生长发育或是拒食的现象,单一的机理很难解释,往往是多种因素共同作用的
结果。菊苣叶提取物中具体哪一类活性成分对试虫种群产生此影响,以及其作用机理尚需进一步探讨。
在3种有机溶剂提取物中,乙酸乙酯效果最为显著,由于乙酸乙酯极性程度在石油醚与乙醇之间,为中等极
性的溶剂,根据相似相溶的原理,推测活性成分属于中等极性的化合物。菊苣内含有丰富的三萜类和倍半萜内酯
类,且此类化合物有杀虫抑菌等作用[46],萜类化合物是目前最受欢迎的一类植物源杀虫剂,近年来,我国研究较
多的苦皮藤及同属几种植物的有效成分主要为倍半萜酯类化合物。至于菊苣叶片中活性物质是否属于倍半萜类
化合物,以及结构与活性的关系等问题,尚需进一步分离和生物活性跟踪测定。
4 结论
本研究初步证明,菊苣叶的乙酸乙酯提取物对粘虫的生长发育影响显著,可用来开发菊苣叶提取物绿色杀虫
剂或驱虫剂。深入研究菊苣叶提取物对农业害虫的毒杀、拒食等作用机制,有望开发植物源农业害虫行为调节
剂,调节害虫的生长和生育时间并且干扰其正常的为害行为,从而有效地控制害虫生长和繁殖,达到既控制害虫
又有效保护生态环境的目的。
参考文献:
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犅犻狅犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犆犻犮犺狅狉犻狌犿犻狀狋狔犫狌狊犾犲犪犳犲狓狋狉犪犮狋狊犪犵犪犻狀狊狋犕狔狋犺犻犿狀犪狊犲狆犪狉犪狋犪
SUNLuanzi,WANGQuanzhen,HUTianming,DUJinhong
(ColegeofAnimalScience&Technology,NorthwestA&FUniversity,Yangling712100,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Insecticidalactivityofextractsfromleavesof犆犻犮犺狅狉犻狌犿犻狀狋狔犫狌狊,wereassessedbycoldsoakedex
tractionandbymicrowaveassistedextraction.Theinsecticidalactivitiesofthe犆.犻狀狋狔犫狌狊leafextractsagainst
thelarvaeof犕狔狋犺犻犿狀犪狊犲狆犪狉犪狋犪weretestedbyafeeding,weighingandleafdiskmethod.Thebodyweightsof
larvaefedbytheextractswithorganicsolventsweresignificantlylowerthanthoseofthecontrolsinthefirst
sevendays,andthedevelopmentperiodoflarvaetreatedwithethanolorethylacetateextractswere4.3days
longerthanthatofthecontrols.Thecorrectedmortalityof犕.狊犲狆犪狉犪狋犪treatedbytheethylacetateextracts
wasthehighest(57.78%),andthecorrespondingpupatingratewasthelowest(46.67%).Moreover,thepu
palweightinthedifferenttreatmentswasgreaterthanthatofthecontrols.Inantifeedingexperiments,the
antifeedingratesofethanolextractsandethylacetateextractsagainst犕.狊犲狆犪狉犪狋犪weremorethan80%.
犓犲狔狑狅狉犱狊:leavesof犆犻犮犺狅狉犻狌犿犻狀狋狔犫狌狊;extracts;犕狔狋犺犻犿狀犪狊犲狆犪狉犪狋犪;bioactivity
66 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.2