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Physiological and biochemical analysis of the leaves of Elymus under dry farming conditions

旱作条件下披碱草属植物叶的生理生化特征分析



全 文 :书旱作条件下披碱草属植物叶的
生理生化特征分析
祁娟1,2,徐柱2,王海清2,马玉宝2,李临杭2
(1.甘肃农业大学草业学院 草业生态系统教育部重点实验室,甘肃 兰州730070;2.中国农业科学院草原研究所,内蒙古 呼和浩特010010)
摘要:在无控制的野外旱作条件下,比较了披碱草属6种野生植物在内蒙古干旱与半干旱区生理生化特性,并对同
一地区引种的不同种及分布于不同地区的同一种植物进行了对比分析。结果表明,材料XJE1和XJP5能够保持
较好的水分状况,具有较高的相对含水量,而GSD4保水能力不及其他几种材料;BJT3和XJP5叶绿素含量较高,
而GSD4叶绿素含量较低。渗透调节物质Pro以BJT3、XJP5和GSS2显著高于其他材料,而MDA含量以BJT3相
对较高,比XJE1高近3倍;保护酶SOD活性以材料GSD4较高,其次为BJT3,GSS2较低,POD活性以XJP5较高,
其次为BJT3,NMN6较低。经隶属函数综合分析发现,披碱草属6种植物中,除GSD4和NMN6之间隶属函数值
差异不显著外,其他材料之间都比较显著,其隶属度值由大到小的顺序为XJP5>BJT3>XJE1>GSD4>NMN6>
GSS2。并且来自同一地区的披碱草属2种不同植物的生理特征表现一定的趋同,而来自不同地区的同一种植物表
现出一定适应性分化。这些结果都表明,植物为了适应不同的生态环境,各种生理生化指标都会进行相应的调节,
共同起作用来保护植物免受伤害。
关键词:披碱草属;生理生化;渗透调节;保护酶系统;干旱与半干旱区
中图分类号:Q948.1  文献标识码:A  文章编号:10045759(2009)01003907
  披碱草属(犈犾狔犿狌狊)是禾本科(Poaceae)小麦族(Triticeae)内分布最广的多年生属,在我国约有12种,多数种
具有抗寒、抗旱、耐盐碱等特点[1],该属植物不但是麦类作物遗传改良的重要优异基因来源,而且是我国北方地区
重要的优良牧草,其野生种具有分蘖性强,竞争力强等特点,是草地很好的补播材料[2]。长期以来,国内外学者对
披碱草属植物的引种、育种[3,4]、种质资源的收集、鉴定、分类[5]、评价[6,7]及系统学意义[8~10]等方面已有了很多研
究报道,但对其生理生化特性及其对环境的适应性方面研究报道较少。本研究选取采自不同省区的披碱草属6
种野生种质材料,在同一生长条件下对苗期叶片渗透调解物质、水分关系、保护酶系统等进行了比较研究,并结
合生境进行对比分析,旨在了解不同来源披碱草属材料在干旱与半干旱区环境中生理生化适应方式差异,为有效
利用和优质高产牧草的选育提供基础科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验地概况
本试验小区设在内蒙古自治区锡林郭勒盟太仆寺旗贡宝拉格苏木,位于北纬41°36′、东经115°04′,内蒙古中
部,锡林郭勒盟南部,地处阴山北麓,浑善达克沙地南缘,属典型干旱、半干旱草原区,海拔1400m,年平均气温
0.7~2.4℃,最热月(7月)平均气温17.8℃,极端最高气温33.3℃,最冷月(1月)平均气温-17.6℃,极端最低气
温-35.7℃;年均降水量397mm,最多降水量625mm,最少降水量240mm,≥10℃年积温1800~2300℃,无霜
期90~126d;土壤为淡栗钙土,pH值一般为7.0~8.5,土层较厚,周边草地植被以克氏针茅(犛狋犻狆犪犽狉狔犾狅狏犻犻)、
羊草(犔犲狔犿狌狊犮犺犻狀犲狀狊犻狊)、隐子草属(犆犾犲犻狊狋狅犵犲狀犲狊)及蒿属(犃狉狋犲犿犻狊犻犪)植物为建群种和优势种。
1.2 供试材料
试验材料种子采自新疆、内蒙古、河北、甘肃4省区,由中国农业科学院草原研究所提供(表1)。
第18卷 第1期
Vol.18,No.1
草 业 学 报
ACTAPRATACULTURAESINICA   
39-45
2009年2月
 收稿日期:20080523;改回日期:20080923
基金项目:“973”计划项目子课题(2007CB106806)资助。
作者简介:祁娟(1972),女,甘肃镇原人,在读博士。Email:qijuan0622@163.com
通讯作者。Email:yxuzhu@yahoo.com
表1 材料名称及来源
犜犪犫犾犲1 犕犪狋犲狉犻犪犾狊犪狀犱狊狅狌狉犮犲狊
编号Code 种名Species 来源Sources 生境 Habitats
XJE1 肥披碱草犈.犲狓犮犲犾狊狌狊 新疆谢家沟 Xiejiagou,Xinjiang 山坡 Mountainslope
GSS2 老芒麦犈.狊犻犫犻狉犻犮狌狊 甘肃古浪县黄羊川 Gulangcountry,Gansu 农田路边Roadsidealongfield
BJT3 麦宾草犈.狋犪狀犵狌狋狅狉狌犿 北京百望山Baiwangmountain,Beijing 路旁山坡 Mountainslope,roadside
GSD4 披碱草犈.犱犪犺狌狉犻犮狌狊 甘肃古浪县黄羊川 Gulangcountry,Gansu 农田路边Roadsidealongfield
XJP5 紫芒披碱草犈.狆狌狉狆狌狉犪狉犻狊狋犪狋狌狊 新疆昭苏县军马场Zhaosucountry,Xinjiang 公路边Besidehighway
NMN6 垂穗披碱草犈.狀狌狋犪狀狊 内蒙古昭盟巴林右旗Zhaomeng,InnerMongolia 山坡道旁 Mountainslope,roadside
NMS7 老芒麦犈.狊犻犫犻狉犻犮狌狊 内蒙古太仆寺旗Taipusi,InnerMongolia 草甸割草场 Meadowmowingland
NMD8 披碱草犈.犱犪犺狌狉犻犮狌狊 内蒙古太仆寺旗Taipusi,InnerMongolia 草甸割草场 Meadowmowingland
 注:材料以地名及种名第一个大写字母命名。
 Note:Materialswerenamedbythefirstcapitalletterofsourcesandspecies.
1.3 试验设计
于2007年6月21日人工条播,撒播均匀,覆土0.5~1.0cm,行距40cm,小区间间隔80cm,试验小区面积
2m×5m,采用随机区组设计,重复3次。试验期间不灌溉,不施肥,出苗后清除杂草2次。在同一时期(2007年
8月22日),在土壤含水量为9.112%(0~10cm),18.515% (10~20cm)和20.924%(20~30cm)的情况下,所
选材料生长正常。分别选取发育良好、健康植株叶片约10g,用液氮罐保存带回实验室放入-80℃冰箱备用。取
样时间为早晨8:00-9:00。
1.4 指标测定
土壤含水量和叶片相对含水量采用烘干法[11];脯氨酸含量(proline,Pro)采用酸性茚三酮法[11],单位为μg/
g;过氧化物酶(peroxidase,POD)活性采用愈创木酚显色法[11],单位ΔOD470/(min·g)(OD470表示波长470nm
处的吸光度值);超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性采用氮蓝四唑(nitrobluetetrazolium,NBT)
法[11],单位为U/g;丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量采用硫代巴比妥酸(thiobarbituricacid,TBA)法[11],单
位为nmol/g;叶绿素含量测定采用比色法[11],单位为mg/g。
用Excel和SAS统计软件进行分析。应用Fuzzy数学中隶属度函数的方法对多种生理生化指标进行综合
评判。对与耐旱性呈正相关参数的脯氨酸、叶绿素、相对含水量、SOD和POD活性采用公式犉犻犼=(犡犻犼-犡犼min)/
(犡犻-犡犼min);对与耐旱性呈负相关参数的 MDA采用公式犉犻犼=1-(犡犻犼-犡犼min)/(犡犻max-犡犼min)。式中,犉犻犼为犻品
种的犼性状测定的具体隶属值;犡犻犼为犻品种犼性状测定值;犡犼min为犻品种犼性状中测定的最小值;犡犼max为犻品种犼
性状中测定的最大值;然后将每一供试材料所有性状的具体隶属值进行累加,求平均值得到该材料的隶属度。
2 结果与分析
2.1 试验期间大气因子变化情况
在材料苗期,7月份降水量较大,日照时数较少,相对湿度较小,平均气温和地表平均地温较高(表2);8月份
降水量少,相对湿度较高,日照时数长,但早晚温差较大,平均气温和地表平均地温较低。
表2 试验期间气象因子变化趋势
犜犪犫犾犲2 犆犺犪狀犵犲狋狉犲狀犱狅犳犿犲狋犲狅狉狅犾狅犵犻犮犪犾犳犪犮狋狅狉狊犻狀犲狓狆犲狉犻犿犲狀狋犪犾狆犲狉犻狅犱
月份
Month
降水量
Precipitation(mm)
日照时数
Sunshinehours(h)
平均气温
Meantemperature(℃)
平均地温
Theearth’ssurfacetemperature(℃)
平均相对湿度
 Meanrelativehumidity(%)
6月June 41.62 220.260 18.120 31.779 36.368
7月July 96.74 166.945 20.826 37.804 27.438
8月August 20.28 247.305 19.732 17.593 62.756
04 ACTAPRATACULTURAESINICA(2009) Vol.18,No.1
2.2 披碱草属6种植物(XJE1、GSS2、BJT3、GS4、XJP5和NMN6)生理生化特征比较
2.2.1 披碱草属6种植物叶片相对含水量和叶绿素含量比较 同一生长条件下,不同来源的材料叶片相对含水
量差异较大(犘<0.05)(图1)。其中XJE1相对含水量(98.1%)显著高于其他植物,XJP5次之,而 NMN6和
GSD4相对较低,分别为78.0%和66.8%。这说明了在当地自然条件下,XJE1保水能力强,细胞受环境的影响
较小,而GSD4保水能力相对较差。XJE1、GSS2和NMN6之间叶绿素含量差异不显著,BJT3和XJP5之间差异
不显著,叶绿素含量以BJT3和XJP5为高,分别为3.901和4.105mg/g,GSD4含量最低。相关分析表明,叶片
相对含水量与叶绿素含量呈显著正相关(狉=0.8622,犘<0.05)。
2.2.2 披碱草属6种植物叶片的渗透调节物质Pro和膜质过氧化物 MDA含量比较 不同种材料的脯氨酸含
量存在显著差异(图2),其中BJT3、XJP5和GSS2叶片游离脯氨酸含量比其他几种显著偏高(犘<0.05),分别为
327.50,330.11和301.3μg/g,XJE1和GSD4相对较低,但它们总体水平趋于一致。BJT3的 MDA含量显著高
于其他植物,比XJE1的 MDA含量高近3倍,而同一环境条件下其他植物的 MDA含量均趋于一致的水平。
2.2.3 披碱草属6种植物叶片的保护酶SOD和POD含量比较 披碱草属6种植物叶片SOD含量具有显著差异
(犘<0.05)(图3),其中材料GSD4的SOD活性较高,达397.3U/g,其次为BJT3,GSS2最低,仅85.9U/g;
图1 披碱草属植物叶片相对含水量(犃)及叶绿素含量(犅)
犉犻犵.1 犜犺犲犮狅狀狋犲狀狋狅犳狉犲犾犪狋犻狏犲狑犪狋犲狉犮狅狀狋犲狀狋(犃)犪狀犱犮犺犾狅狉狅狆犺狔犾(犅)狅犳犈犾狔犿狌狊
 XJE1:肥披碱草犈.犲狓犮犲犾狊狌狊;GSS2:老芒麦犈.狊犻犫犻狉犻犮狌狊;BJT3:麦宾草犈.狋犪狀犵狌狋狅狉狌犿;GSD4:披碱草犈.犱犪犺狌狉犻犮狌狊;XJP5:紫芒披碱草犈.狆狌狉狆狌
狉犪狉犻狊狋犪狋狌狊;NMN6:垂穗披碱草犈.狀狌狋犪狀狊;NMS7:老芒麦犈.狊犻犫犻狉犻犮狌狊;NMD8:披碱草犈.犱犪犺狌狉犻犮狌狊.不同小写字母表示材料间差异显著(犘<0.05)
Differentlowercasesindicatesignificantdifferencebetweenspecies(犘<0.05).下同 Thesamebelow
图2 披碱草属植物叶片游离脯氨酸(犃)及丙二醛(犅)含量
犉犻犵.2 犜犺犲犮狅狀狋犲狀狋狅犳犘狉狅(犃)犪狀犱犕犇犃(犅)狅犳犈犾狔犿狌狊
14第18卷第1期 草业学报2009年
图3 披碱草属植物叶片保护酶犛犗犇(犃)和犘犗犇(犅)含量
犉犻犵.3 犜犺犲犮狅狀狋犲狀狋狅犳犛犗犇(犃)犪狀犱犘犗犇(犅)狅犳犈犾狔犿狌狊
POD活性以XJP5较高,其次为BJT3和GSD4,NMN6较低。经相关分析,POD与SOD呈极显著正相关(狉=
0.779,犘<0.05)。
2.2.4 披碱草属6种植物叶片生理生化指标综合比较分析 本研究应用Fuzzy数学中隶属度函数的方法[12]对
披碱草属植物的多种生理生化指标进行综合分析(表3),结果表明,适应干旱与半干旱环境能力由强到弱为
XJP5>BJT3>XJE1>GSD4>NMN6>GSS2。
表3 披碱草属6种植物生理生化指标的隶属度分析
犜犪犫犾犲3 犃狀犪犾狔狊犻狊狅犳犿狌犾狋犻狏犪狉犻犪狋犲犿犲犿犫犲狉狊犺犻狆犳狌狀犮狋犻狅狀狅狀狆犺狔狊犻狅犾狅犵犻犮犪犾犻狀犱犲狓狅犳6狊狆犲犮犻犲狊狅犳犈犾狔犿狌狊
材料
Species
相对含水量
Relativewatercontent
叶绿素
Chlorophyl
脯氨酸
Proline
丙二醛
MDA
超氧化物歧化酶活性
SODactivity
过氧化物酶活性
PODactivity
均值
Mean
XJE1 1.000 0.421 0.241 1.000 0.321 0.148 0.522c
GSS2 0.422 0.368 0.779 0.456 0 0.250 0.379e
BJT3 0.562 0.895 0.980 0 0.975 0.494 0.651b
GSD4 0 0 0 0.439 1.000 1.000 0.407d
XJP5 0.690 1.000 1.000 0.762 0.730 0.538 0.787a
NMN6 0.355 0.316 0.425 0.894 0.451 0 0.406d
2.3 同种异地及不同种同一来源的披碱草(GSD4和NMD8)与老芒麦(GSS2和NMS7)生理生化特征比较
2.3.1 同种异地及不同种同一来源该种植物叶片相对含水量和叶绿素含量比较 无论是同一来源不同材料还
是同一材料不同来源之间相对含水量和叶绿素差异都较显著(犘<0.05)(图1)。NMS7和 NMD8相对含水量
高,而GSS2和GSD4相对含水量较低。同一材料不同来源相对含水量相比,老芒麦比披碱草高;叶绿素含量也
是来自当地的NMS7和NMD8含量较高,而来自甘肃古浪的材料GSS2和GSD4相对较低,并且来自同一地方
的材料,老芒麦叶绿素含量比披碱草高。
2.3.2 同种异地及不同种同一来源该种植物叶片渗透调节物质和膜质过氧化物含量比较 同一来源不同材料
之间Pro含量差异显著(犘<0.05)(图2),同一种不同来源材料之间差异不显著。并且老芒麦Pro含量较披碱草
高;而 MDA含量是当地种含量低,同一材料之间差异较大。总体是引种材料Pro和 MDA含量相对较高,说明
在同一环境下,本地种适应当地环境,对环境的变化不敏感,引入种为了适应新的环境会发生相应的生理调节。
2.3.3 同种异地及不同种同一来源该种植物叶片保护酶活性比较 引种材料POD活性比当地材料高,同种材
料之间差异不大(图3),而SOD活性是引种材料较低,而当地材料较高。
24 ACTAPRATACULTURAESINICA(2009) Vol.18,No.1
2.3.4 同种异地及不同种同一来源该种植物生理生化指标综合比较分析 当地材料隶属函数值由大到小的顺
序为NMS7>NMD8>GSS2>GSD4,当地材料比引种材料隶属度值高(表4)。
表4 同种异地及不同种同一来源该种生理生化指标的隶属度分析
犜犪犫犾犲4 犃狀犪犾狔狊犻狊狅犳犿狌犾狋犻狏犪狉犻犪狋犲犿犲犿犫犲狉狊犺犻狆犳狌狀犮狋犻狅狀狅狀狆犺狔狊犻狅犾狅犵犻犮犪犾犪狀犱犫犻狅犮犺犲犿犻犮犪犾犻狀犱犲狓狅犳狊犪犿犲狊狆犲犮犻犲狊犳狉狅犿
犱犻犳犳犲狉犲狀狋狉犲犵犻狅狀狊犪狀犱犱犻犳犳犲狉犲狀狋狊狆犲犮犻犲狊犳狉狅犿狊犪犿犲狉犲犵犻狅狀狊
材料
Species
相对含水量
Relativewatercontent
叶绿素
Chlorophyl
脯氨酸
Proline
丙二醛
MDA
超氧化物歧化酶活性
SODactivity
过氧化物酶活性
PODactivity
均值
Mean
GSS2 0.504 0.636 1.000 0.042 0 0.849 0.505c
NMS7 1.000 1.000 0.946 1.000 0.017 0.094 0.676a
GSD4 0 0 0.093 0 0.971 1.000 0.344d
NMD8 0.773 0.636 0 0.762 1.000 0 0.529b
3 结论与讨论
3.1 植物在生长发育过程中会受到许多生态因子的影响,主要表现出各种生理代谢的相应变化。而植物又以这
种内在的物质和能量变化来塑造环境,从而表现出积极的适应环境的潜势[13]。本研究选取的6种披碱草属种子
采自不同的地方和不同的生境,生长在同一环境下,个体发育过程中所受环境影响基本一致,但种间由于长期适
应原生境,对环境的生理生态反应具有明显差异。本试验进行的6-8月份,太仆寺旗试验点早晚温差较大,降水
量较少,披碱草属植物在当地自然环境下能适时地启动调节和保护机制,降低渗透势提高保护酶来应对不良环
境。
3.2 在干旱环境中生长的植物可通过生理上的变化来抵御或减轻干旱的损伤。植物组织相对含水量是生理状
态的一个重要指标,叶片能够维持较高含水量是其适应性的一种重要的生理表现;渗透调节物质是植物耐旱的最
基本特征之一[14,15];植物在遭受环境胁迫时,活性氧会大大增加[16],SOD、POD是保护系统的主要酶,植物的抗
性及其对环境的适应与其保护酶含量密切相关[17~19]。植物由于长期对环境的适应,自身可能具有一些特有的小
分子物质,从而对植物起到保护作用[20]。本试验发现材料XJE1具有较高的相对含水量,但其Pro、SOD、POD和
MDA含量相对较低;材料XJP5脯氨酸、叶绿素和POD含量较高,但SOD和MDA含量较低;材料GSD4相对含
水量、脯氨酸和叶绿素含量较低,但SOD、POD和 MDA含量较高。这说明植物是否能够适应新的环境不但决定
植物本身,而且是与环境存在互作效应,各种生理生化指标共同起作用来保护植物细胞不受伤害。并且发现2种
保护酶形成明显的互补,说明2种酶在清除植物体内自由基时可相互补充和协调,保护植物免受环境伤害。杨明
博等[21]在锦鸡儿属(犆犪狉犪犵犪狀犪)植物研究中发现保护酶POD与CAT也形成明显的互补。生物体内保持着各种
酶的平衡,通过调动各种酶和整个防御系统来抵抗伤害,降低膜伤害程度[22,23]。
3.3 植物对环境的生理适应特征是多方面的,因此不能用单一的指标对其适应性进行判断,本研究引用隶属函
数法通过综合分析得出披碱草属6种植物适应环境的能力依次为 XJP5>BJT3>XJE1>GSD4>NMN6>
GSS2。
3.4 由于在当地只收集到披碱草属的2个种,因此本研究选取来自甘肃古浪的这2种材料与来自本试验地周边
天然草原的这2种进行对比分析,结果表明来自当地的2种材料隶属函数值高,并且生长在同一环境中的2种植
物隶属函数值差异显著(犘<0.05)。内蒙古太仆寺旗是典型干旱、半干旱草原性气候,甘肃古浪是寒冷高原性气
候,其环境条件相差甚远,环境差异造成这2种植物适应性差异,NMS7和NMD8由于长期生长在此,已经适应
了当地环境。长期生长在不同生境中的同一植物,由于环境的影响渗透物质的含量、丙二醛含量和保护酶活性等
都会发生变化,因而表现出一定适应性分化。而生长在同一环境中的不同植物,为了适应环境,其生理指标表现
出一定的趋同,说明环境差异造成体内生理调节发生变异。披碱草属植物多数抗逆性较强,都能采取积极的对策
来适应环境。进一步研究和对照几种披碱草属植物在分子水平上与生境的联系,探究其在分子水平上能否由于
34第18卷第1期 草业学报2009年
环境的不同而有趋同或分化情况,也许能从更深的层次上理解其生理适应性与物种遗传结构的关系。
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44 ACTAPRATACULTURAESINICA(2009) Vol.18,No.1
犘犺狔狊犻狅犾狅犵犻犮犪犾犪狀犱犫犻狅犮犺犲犿犻犮犪犾犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狋犺犲犾犲犪狏犲狊狅犳犈犾狔犿狌狊
狌狀犱犲狉犱狉狔犳犪狉犿犻狀犵犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊
QIJuan1,2,XUZhu2,WANGHaiqing2,MAYubao2,LILinhang2
(1.PrataculturalColege,GansuAgriculturalUniversity,KeyLaboratoryofGrasslandEcology
System,MinistryofEduation,Lanzhou730070,China;2.GrasslandResearch
Institute,CAAS,Huhhot010010,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Physiologicalandbiochemicalcharacteristicsoftheleavesofsix犈犾狔犿狌狊speciesweredeterminedun
derthenaturaldryfarmingconditionsofthearidandsemiaridregionsofInnerMongolia,differentspecies
fromsameregionswerecomparedaswelasthesamespeciesfromdifferentregions.Thereweresignificant
differencesinthephysiologicalandbiochemicalcharacteristicsofdifferent犈犾狔犿狌狊.ThespeciesofXJE1and
XJP5maintainedagoodwaterstatusandhadahighrelativewatercontent(RWC),whereastheRWCofGSD4
wasthelowest.BJT3andXJP5hadahighchlorophylcontent,whilethatofGSD4waslow.Theosmoticcon
tentofProofBJT3,XJP5andGSS2wassignificantly(犘<0.05)higherthanthatoftheotherspecies.The
MDAofBJT3wasnearlythreetimeshigherthanthatofXJE1.GSD4hadthemostSODantioxidativeenzyme
activity,folowedbyBJT3andthenGSS2.PODactivityofXJP5washigh,folowedbyBJT3,whileNMN6
waslower.MultivariatemembershipfunctionanalysisindicatedthatexceptforGSD4andNMN6,therewere
somesignificantdifferencesinadaptationtoaridandsemiaridenvironmensofthe犈犾狔犿狌狊species.Theorderof
subordinatefunctionvaluesfromstrongtoweakwasXJP5>BJT3>XJE1>GSD4>NMN6>GSS2.Wealso
foundthatthereweresomehomologiesbetweendifferentspeciesfromthesameregion.Thesamespeciesin
differentregionsappearedtobedifferentiatedintheiradaptability.Theseresultsindicatethatthephysiological
andbiochemicalindexeswerealadaptedtodifferentecologicalenvironments.
犓犲狔狑狅狉犱狊:犈犾狔犿狌狊;physiologicalandbiochemical;osmoticadjustment;antioxidativeenzymes;aridandsemi
aridregion
54第18卷第1期 草业学报2009年