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Effects of exogenous metallothionein on energy production and incretion of China Holstein cows

外源性金属硫蛋白对中国荷斯坦奶牛产能性能和内分泌的影响



全 文 :书外源性金属硫蛋白对中国荷斯坦奶牛
产能性能和内分泌的影响
吴力专1,2,陈海燕1,张彬1,李丽立3,陈宇光1,肖定福1,罗佳捷1,吴宗明1
(1.湖南农业大学动物科学技术学院,湖南 长沙410128;2.长江大学动物科学学院,湖北 荆州434025;
3.中国科学院亚热带农业生态研究所,湖南 长沙410125)
摘要:选取24头泌乳奶牛,随机分成A、B、C和D,4组,分别按剂量0.0(对照),6.0,12.0和16.0mg/头静脉注射
金属硫蛋白(MT),以探讨外源性 MT对奶牛产能性能和内分泌的影响。结果表明,B组1~30d、C组1~45d的
标准产奶量显著高于A组,C组乳脂率在31~45d较 A组有显著改善;B组INS含量30d显著高于 A组;C组
IGFⅠ和T3 含量45d最高,显著高于A组,而D组受到抑制;C组FSH和E2 含量变化幅度最小;B组P含量30d
时显著高于其他各组,PRL含量15d时显著高于A组;血清和乳中 MT含量C和D组30~45d显著或极显著大
于A组。说明外源性 MT以12.0mg/头剂量效果最佳,间隔时间30~45d为宜。
关键词:金属硫蛋白;中国荷斯坦奶牛;产能性能;内分泌
中图分类号:S823.9+.1  文献标识码:A  文章编号:10045759(2011)01018306
   金属硫蛋白(metalothionein,简称MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量、富含Cys、能被金属结合的
活性天然蛋白,它对动物具有重要生理功能,参与微量元素储存、运转和代谢(如 MT在动物体内是Zn等元素的
代谢缓冲池[1]),抗电离辐射,清除羟基自由基,解重金属毒,增强机体免疫力,提高动物抗应激和抗氧化力以及影
响动物机体生长发育、生殖衰老、肿瘤发生、免疫、应激等各个方面,其研究和开发涉及农业、医药保健、生物工程、
环境保护等各个领域。MT是“看家”基因编码的蛋白,具有组织和细胞特异表达功能,并受控于激素及免疫调节
素的控制。给动物注射糖皮质激素、干扰素、白细胞介素Ⅰ均能使肝脏中 MT合成增加。各种炎症因子及机体
的应激状态(如寒冷、过度疲劳、饥饿等)都能增加 MTmRNA的转录[2,3],同时伴有血浆中Zn浓度的下降。在
胚胎发育过程中,有几种组织的 MT基因表达增加[4,5](MT可提供参与胚胎、生长发育及分化反应的酶所需的
Cu或Zn)。研究发现应激在诱导 MT合成的同时,血液中激素水平均上升[6],由此考虑激素可诱导产生 MT。
一般认为,机体氧化及应激的始作俑者是羟基自由基,羟基自由基通过攻击生物膜多不饱和脂肪酸、DNA、
蛋白质和其他生物大分子,引发细胞和组织氧化损伤,导致细胞组织的裂解、酶和氧化强化剂的释放,使机体产生
应激,生产力下降,出现病变、甚至死亡。MT清除羟自由基和抗氧化作用日益受到关注。MT对猪体内机理研
究也取得重要进展[79],并建立定量检测 MT的酶联免疫法[10]。同时,对奶牛抗应激及其调控机理研究也取得一
定成果,如张彬等[11]对 MT在奶牛体内的存留规律、抗热应激力[12]和泌乳性能及其抗氧化性能[13,14]的研究。
应激尤其是热应激一直是困扰我国南方各省奶牛饲养业的一大难题,一般来说,动物应激是多种直接影响机
体健康和正常生产的多种激素反应因素综合,主要体现在对神经内分泌的影响[15]。存在5个方面的激活:下丘
脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)、胰腺和生长激素轴、促乳激素轴、促性腺激素轴和促甲状腺激素轴[16]。众所周
知,夏季持续高温对奶牛生理机理造成影响,从而导致奶牛产奶量下降,且不易恢复[17,18]。动物在长期或轻度应
激状态下,HPA轴激素变化不大[16],而本次试验所采用中国荷斯坦泌乳牛是处于长期热应激后恢复期,故而只
探讨外源性 MT对HPA轴之外其他应激激素轴的调控,旨在为 MT的理论研究及南方奶牛生产提供科学依据。
第20卷 第1期
Vol.20,No.1
草 业 学 报
ACTAPRATACULTURAESINICA   
183-188
2011年2月
 收稿日期:20100118;改回日期:20100308
基金项目:国家自然科学基金项目(31072053;30671516;30571351)和湖南省研究生科研创新项目(CX2010B284)资助。
作者简介:吴力专(1973),女,湖南醴陵人,讲师,在读博士。Email:lizhuanw1111@sina.com
通讯作者。Email:zhb8236@126.com,lili@isa.ac.cn
1 材料与方法
1.1 金属硫蛋白(Zn-MT)
参照李丽立[19]建立的硫酸锌诱导法,从中国荷斯坦奶牛公犊肝脏诱导、提取、纯化的Zn-MT。
1.2 试验动物的选择、饲养与试验设计
从湖南省奶牛原种场选取5岁左右、体重500kg、第3胎、产犊28~153d、健康的中国荷斯坦泌乳牛24头,
供试牛在同一幢双列式牛舍,1头/牛床。每日挤奶2次,喂料2次,刷拭体表1次,清扫牛舍2次。自由舔食盐
砖及饮水,舍外运动场自由活动。各组日粮相同,其组成及营养水平[NationalResearchCouncil,NRC(2001)标
准](kg/头·d),玉米:3.136、麦麸:0.728、豆粕:0.504、棉粕:0.448、菜粕:0.28、酵母粉:0.28、磷酸氢钙:0.056、
石粉:0.056、碳酸氢钠:0.056、稻草:10、象草:20;日粮营养水平(/头·d),产奶净能(NEL):86.60MJ、奶牛能量
单位(NND):27.60个、粗蛋白(CP):1585.60g、钙(Ca):57.44g、磷(P):32.80g。试验时间:9-11月;气温:9
月18~33℃、10月15~31℃、11月8~27℃。采用随机区组设计,根据不同产奶量和生理时期均分为4组,A为
对照组,B、C、D为试验组,依次静脉注射20mL生理盐水溶解的Zn-MT0.0,6.0,12.0和16.0mg/头。预试
期7d,正试期45d。
1.3 采样与测定项目
1.3.1 采样 试验期第1(注射MT前)、15、30和45天分别从供试牛颈静脉采血。采血10mL/(头·次),常温
静置20min,后4℃离心(4000r/min×10min),取血清分装,-20℃保存待测。奶样各阶段分别抽取5mL/头,
4℃防腐保存待测。
1.3.2 产奶性能 计量标准产奶量/(头·d),乳脂率测定采用红外线分析扫描仪。
1.3.3 应激激素轴生理指标 胰岛素(insulin,INS)、胰岛素样生长因子(insulinlikegrowthfactorⅠ,IGF
Ⅰ)、促乳素(prolactin,PRL)、促卵泡素(foliclestimulatinghormone,FSH)、孕酮(progesterone,P)、雌二醇
(estradiol,E2)、三碘甲腺原氨酸(triodothyronine,T3)均采用放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)试剂盒
(天津九鼎医学生物公司生产)测定。
1.3.4 MT含量 参照张彬等[20]建立的酶联免疫吸附法(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)测定,
酶联免疫分析仪为TECANA5082型。标准方程为:犢=19.704狓2+0.0946狓-0.1267,犚2=0.9991,式中,狓
表示各样品所测OD值,犢 表示各样品对应 MT含量(μg/mL),犚表示相关系数。
1.3.5 数据处理与统计分析 采用SAS6.12统计软件(GLM过程)进行方差分析,用Duncan检验进行多重比
较。
2 结果与分析
2.1 外源性 MT对奶牛产奶性能的影响
注射 MT后,各试验组奶牛较A组平均标准产乳量均增高(表1),其中C组均显著高于A组(犘<0.05);B
组1~30d时显著高于A组(犘<0.05),D组则16d后才显著高于A组(犘<0.05),即低剂量组(6.0mg/mL)发
挥作用的时间段是注射 MT后1~30d,中剂量组(12.0mg/mL)发挥作用的时间段是注射 MT后1~45d,而高
剂量组(16.0mg/mL)作用时间段为注射 MT后16~45d。乳脂率31~45d的C组最高,显著高于A组(犘<
0.05)。说明 MT为12.0mg/头时对产奶量作用实效快,作用时间最长,同时可提高牛乳口感。
2.2 外源性 MT对奶牛内分泌激素轴的影响
注射 MT后,各试验组牛的激素大多有不同程度的提高(表2)。INS变化最小,只有30d时B组显著性高
于A组(犘<0.05);C组的IGFⅠ含量15和45d时显著高于A组(犘<0.05);各试验组T3 的含量均比对照组
高,其中,45d时C组T3 浓度值为最高,显著高于 A组(犘<0.05);可见,MT的注射剂量为6mg/头时,促进
INS和T3 的作用,作用时效为30d,故能加强奶牛体内的同化作用和体内血糖的调控能力,减少产热量,从而提
高抗热应激能力;而 MT注射剂量为12mg/头时,则促进IGFⅠ和T3 的分泌,作用实效为15~45d,可有效提
481 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.1
高动物的同化作用,以提高产品的转化效率。C组FSH 含量变动幅度为0.06mIU/mL,而 A组的为0.24
mIU/mL,是前者的4倍,B和D组却只在30d后才保持稳定;B组P含量30d时最高,显著高于其他各组,45d
时,与C、D组P含量差异不显著(犘>0.05),但仍显著高于A组(犘<0.05);D组E2 含量30d时显著高于其他
各组(犘<0.05),B组和C组15d时显著高于A组(犘<0.05),D组E2 含量变化幅度最大(0.81pg/mL),C组最
小(0.17pg/mL)。MT对奶牛PRL分泌,只在15d时,试验各组动物血清中PRL量显著高于A组(犘<0.05);
而在16~45d时,各试验组奶牛血清中含PRL的量虽比 A组要高,但差异不显著(犘>0.05),导致这一结果的
出现可能是在试验后期(10-11月)的气温转凉造成的,由此推测 MT可作为奶牛抗热应激剂,且时效快,但奶牛
在非应激状态下,可能提高生产性能的效果并不明显。因此,动物在应激状态下,MT的使用量不宜过大,以6~
12.0mg/头为宜,注射间隔时间30~45d。
表1 各组奶牛的产奶性能
犜犪犫犾犲1 犕犻犾犽狆狉狅犱狌犮犻狀犵犪犫犻犾犻狋狔狅犳狋犺犲犮狅狑狊犻狀犱犻犳犳犲狉犲狀狋犵狉狅狌狆狊
项目Item 时间Time A组GroupA B组GroupB C组GroupC D组GroupD
平均标准乳产量 预饲期Adap.period 12.59±2.39aA 12.59±2.32abA 12.57±2.11abA 12.66±2.87abA
Correctedmilkyields 1~15d 12.41±2.00abB 13.13±2.56aA 13.24±2.12aA 12.91±2.31aB
(kg/头Capita) 16~30d 11.00±1.85cB 12.35±2.31bcA 11.97±1.58bA 12.11±2.92bA
31~45d 11.24±1.95bcB 11.76±1.87cAB 12.23±2.44bA 12.51±2.42abA
平均乳脂率 预饲期Adap.period 3.68±0.26aA 3.57±0.45bA 3.67±0.48bA 3.88±0.24bA
Butterfatpercentage 1~15d 3.92±1.00aA 3.72±0.35abA 3.94±0.47bA 4.30±0.64aA
(%) 16~30d 3.89±0.25aA 3.88±0.31abA 3.94±0.23bA 4.25±0.58aA
31~45d 3.99±0.45aB 4.01±0.45aAB 4.65±0.64aA 4.22±0.30aAB
 注:同列相同小写字母表示差异不显著(犘>0.05),相邻字母如a、b或b、c表示差异显著 (犘<0.05),不相邻字母如a、c表示差异极显著 (犘<
0.01)。同行相同大写字母表示差异不显著(犘>0.05),相邻字母如A、B或B、C表示差异显著 (犘<0.05),不相邻字母如A、C表示差异极显著 (犘
<0.01)。下同。
 Note:Therearesignificantdifferencesamongfiguresinthesamecolumnwithdifferentletterssuchasa,borb,c(犘<0.05)anda,c(犘<0.01)
respectively.TherearesignificantdifferencesamongfiguresinthesamerowwithdifferentletterssuchasA,BorB,C(犘<0.05)andA,C(犘<
0.01)respectively.Thesamebelow.
2.3 外源性 MT对奶牛血清和奶中 MT含量变化的影响
外源性 MT对血清和乳中 MT含量有影响(表3)。注射 MT后,各试验组血清中 MT含量均高于对照组,
其中,30~45d时,C组和D组较A组对应阶段的 MT含量显著增加(犘<0.05),但与B组无显著性差异(犘>
0.05)。同样,牛乳中 MT含量以C组16~30d时最高,极显著高于对照组(犘<0.01),显著高于B、D组(犘<
0.05),D组较A组牛乳中 MT含量也显著提高(犘<0.05)。另外,血清中 MT含量与乳中 MT的量有一定的相
关性,如C、D、B和A组动物血清在15~30d时依次为2.240,2.115,2.005和1.685μg/mL(各值分别对应为15
和30d的均值),对应16~30d乳中 MT含量分别依次为4.81,3.23,2.67和2.13μg/mL,呈相同的递减趋势。
3 讨论
奶牛具有耐寒怕热的生物学特性,当环境温度超过15.6℃时就会影响奶牛的呼吸频率,超过21.1℃时,奶牛
的直肠温度也将受到影响[21],本试验环境温度均在8~33℃,时间是9-11月,刚经过高温季节,可以确定奶牛处
于高热应激与非热应激的过渡状态,其体内产能性能和内分泌均有不同程度的变动。
激素是动物体内的第一信使,具有级联放大作用,其微量变化都可引起机体代谢发生较大调整,如C组动物
血清中PRL只在15d时显著高于A组,就引起该组注射MT后的各阶段平均产乳量都显著高于A组,因此MT
通过调控动物体内激素含量来发挥功能无疑能起到事半功倍的效果。
581第20卷第1期 草业学报2011年
表2 各组奶牛血清中内分泌激素的含量
犜犪犫犾犲2 犜犺犲犮狅狀狋犲狀狋狅犳犲狀犱狅犮狉犻狀犲犺狅狉犿狅狀犲犻狀狊犲狉狌犿狅犳犱犪犻狉狔犮犪狋狋犾犲犻狀犱犻犳犳犲狉犲狀狋犵狉狅狌狆狊
项目Item 激素 Hormone 时间 Time(d) A组GroupA B组GroupB C组GroupC D组GroupD
胰腺、生长激素轴
Pancreasandgrowth
hormoneaxis
INS(mIU/L) 1 16.91±5.70aA 16.73±3.79aA 16.62±5.02aA 16.90±3.30aA
15 16.48±3.20aA 18.31±3.65aA 18.07±4.37aA 17.14±1.80aA
30 14.64±2.10aB 17.48±4.41aA 13.32±1.82bB 15.82±2.98aAB
45 13.32±1.80aA 15.97±3.33aA 15.97±4.81aA 16.30±1.52aA
IGFⅠ (ng/mL) 1 228.96±6.97aA 229.54±7.49aA 230.93±8.27bA 230.51±10.76abA
15 226.02±13.21aB 230.34±10.97aB 237.73±12.41abA 226.12±7.64bB
30 230.53±3.26aAB 231.14±8.84aAB 236.26±8.75abA 222.59±8.60bB
45 224.89±20.88aB 235.01±22.49aAB 244.78±3.66aA 237.45±6.26aAB
促甲状腺激素轴
Stimulatingthyroid
hormoneaxis
T3(ng/mL) 1 1.38±0.36aA 1.37±0.27aA 1.38±0.41aA 1.39±0.22aA
15 1.38±0.45aA 1.48±0.17aA 1.47±0.28aA 1.41±0.16aA
30 1.26±0.37aB 1.57±0.27aA 1.48±0.22aAB 1.54±0.31aAB
45 1.36±0.40aB 1.59±0.19aAB 1.90±0.51bA 1.59±0.27aAB
促性腺激素轴
Stimulatingsexgland
hormonesaxis
FSH (mIU/mL) 1 4.86±0.59aA 4.86±0.28aA 4.84±0.27aA 4.87±0.38aA
15 4.66±0.25aB 5.15±0.19aA 4.56±0.48aB 4.62±0.40abB
30 4.62±0.24aB 5.00±0.38aA 4.50±0.35aB 4.41±0.45bB
45 4.78±0.87aA 4.91±0.60aA 4.55±0.32aA 4.43±0.32bA
P(ng/mL) 1 1.13±0.79aA 1.14±0.79bA 1.17±1.01aA 1.04±0.92bA
15 1.24±0.82aA 1.17±0.80bA 1.14±0.92aA 1.10±0.76bA
30 1.27±0.85aB 1.84±0.87aA 1.19±0.83aB 1.32±0.93abB
45 0.95±0.78aB 1.73±0.82aA 1.44±1.19aAB 1.53±0.93aAB
E2(pg/mL) 1 2.88±0.62aA 2.82±0.48aA 2.96±0.45aA 2.94±0.45bA
15 2.69±0.63aB 3.10±0.58aA 3.06±0.41aA 2.98±0.58bAB
30 2.94±0.77aB 3.01±0.64aB 3.11±0.48aB 3.79±0.56aA
45 2.86±0.69aB 2.81±0.45aB 3.23±0.64aAB 3.76±0.44aA
促乳激素轴
Stimulatingmammary
glandhormonesaxis
PRL(ng/mL) 1 3.88±0.44aA 3.84±0.46aA 3.79±0.53aA 3.88±0.46aA
15 3.54±0.27aB 3.81±0.33aA 4.04±0.43aA 3.85±0.31aA
30 3.58±0.47aA 3.63±0.31aA 3.78±0.31aA 3.86±0.42aA
45 3.67±0.69aA 3.86±0.49aA 3.78±0.19aA 3.83±0.44aA
表3 各组奶牛血清和奶中 犕犜的含量
犜犪犫犾犲3 犕犜犮狅狀狋犲狀狋狊犻狀狊犲狉狌犿犪狀犱犿犻犾犽狅犳犱犪犻狉狔犮犪狋狋犾犲犻狀犱犻犳犳犲狉犲狀狋犵狉狅狌狆狊 μg/mL
样品Samples 时间Time(d) A组 GroupA B组 GroupB C组 GroupC D组GroupD
血清Serum 1 1.94±0.37aA 1.94±0.68aA 1.94±0.41bA 1.93±0.55aA
15 1.86±0.62aA 2.12±0.40aA 2.20±0.28abA 2.14±0.64aA
30 1.51±0.25aB 1.89±0.72aAB 2.28±0.33aA 2.35±0.23aA
45 1.53±0.10aB 1.89±0.43aAB 2.03±0.22abA 2.11±0.27aA
牛奶 Milk 1~15 2.11±0.68aA 2.20±0.20bA 2.34±0.84bA 2.23±0.55bA
16~30 2.13±0.82aC 2.67±0.56aCB 4.81±0.94aA 3.23±0.85aB
31~45 2.12±0.62aA 2.09±0.08bA 2.25±0.80bA 2.63±0.76abA
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  胰腺、生长激素轴和促甲状腺激素轴均与动物能量代谢水平有关[16],INS促进肌肉、肝脏和脂肪组织的合成
代谢,抑制血糖的浓度、肝糖原异生和分解,同时刺激各组织对葡萄糖的摄取[22],INS分泌增加则有利于动物减
少产热;IGFⅠ含量依赖于GH的水平,其主要功能是促进Ca、P、Na、K及S等元素进入软骨组织外,还能促进
氨基酸进入软骨细胞,增强DNA复制、RNA转录和蛋白质合成,因此IGFⅠ的含量增加可提高动物对产品的合
成与转化量[23];T3 可使组织中Na+-K+-ATP酶活性明显升高,有利于奶牛调节体温,同时T3 可促进脑和骨
的发育;乳牛甲状腺机能不足时,产乳量和乳脂率均下降,若喂以甲状腺制剂或激素可恢复产乳量和乳脂含
量[31],尤其是对胚胎的生长发育有重要功能。这些均与动物产能性能密切相关。INS、IGFⅠ、TSH(促甲状腺
素)均属于蛋白类激素,MT能提供其合成酶所需的金属Zn2+。FSH可保证卵泡成熟,维持卵巢的大小,并刺激
雌激素的生成;P和E2 促进乳腺泡发育;低水平且含量稳定的FSH、P和E2 对PRL的分泌有促进作用,PRL促
进乳腺发育、发动和维持泌乳,随着动物的泌乳时间延长,PRL的分泌会逐渐减少,泌乳量也会逐渐降低,若在泌
乳后期适当的提高PRL的分泌,则奶牛泌乳量会增加且生产期延长[24];P和E2 属于固醇类激素,它们发挥作用
是通过结合受体(是结合在DNA上的某些蛋白质),MT可调控Zn2+浓度而调节这些受体蛋白激活与否,从而负
反馈调节血液中P和E2 的变动幅度[22]。试验结果显示(表2),注射MT后,B组(MT为6.0mg/头)在30d时,
INS含量显著升高;C组(MT为12.0mg/头)在45d时,血清中IGFⅠ、T3 均显著提高,证明MT通过控制奶牛
机体产能而调节体温,同时促进奶牛保胎,并有助于产奶性能的提高。与此同时,促性腺、促乳腺轴激素含量保持
稳态,如FSH在A组中变动幅度是C组的4倍;P在B组中变动幅度最大,为0.67ng/mL,C组变动幅度最小,
为0.30ng/mL;E2 以D组变动幅度最大,为0.81pg/mL,C组变动幅度最小,为0.17pg/mL;PRL在15d时显
著提高,但后期虽较A组的对应值高,但无显著性差异,这可能与试验后期牛场气温下降(10-11月)有关。由此
可见,MT在低剂量(B组)的情况下,有利于奶牛的保胎作用,而中剂量(C组)则更利于奶牛的泌乳性能,高剂量
(D组)更有利于奶牛的发情,对保胎和泌乳则反而不利。同时,注射 MT后,对处于热应激状态的奶牛发挥作用
更明显,因此,MT作为生产促进剂时,适合对象是处于妊娠状态的泌乳牛,尤其是处于热应激状态的妊娠初期的
乳牛。调节机体产能性能,缓解与生殖有关激素变动幅度,这也正是 MT能提高泌乳奶牛抗热应激能力的本质。
MT对机体激素的调节引起机体的产热和生产性能指标的变化量,有待进一步深入研究。
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犈犳犳犲犮狋狊狅犳犲狓狅犵犲狀狅狌狊犿犲狋犪犾狅狋犺犻狅狀犲犻狀狅狀犲狀犲狉犵狔狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀犪狀犱犻狀犮狉犲狋犻狅狀狅犳犆犺犻狀犪犎狅犾狊狋犲犻狀犮狅狑狊
WULizhuan1,2,CHENHaiyan1,ZHANGBin1,LILili3,CHENYuguang1,
XIAODingfu1,LUOJiajie1,WUZongming1
(1.ColegeofAnimalScienceandTechnology,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China;
2.ColegeofAnimalScience,YangtzeUniversity,Jingzhou434025,China;3.InstisuteofSubtropical
AgriculturalEcology,ChineseAcademyofSciences,Changsha410125,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Effectsofexogenousmetalothionein(MT)onenergyproductionandincretionofChinaHolstein
cowswerestudiedusing24lactatingcows,randomlyalocatedtogroupsA,B,CandD.MTwassupplemen
tedat0.0,6.0,12.0and16.0mg/capita,respectively,byintravenousinjection.IngroupsB(during1-30
d)andC(during1-45d),correctedmilkyieldswerehigherthanthatingroupA.IngroupCduring31-45
d,milkfatpercentagewassignificantlyimprovedbycomparisonwithgroupA.TheINSserumcontentof
groupAwassignificantlylowerthanthatofgroupBat30d;IGF-ⅠorT3contentofserumingroupCwas
thehighestat45dandthedifferenceswithgroupAweresignificant,whiletheIGFⅠorT3ofproductionin
groupDwasinhibited.TherangesofvariationofFSHorE2contentingroupCwerethesmalestofalthe
groups.ThePcontentofingroupBwassignificantlyhigherthanthatinothergroupsat30d,andthePRL
contentofgroupBwassignificantlyhigherthanthatingroupAat15d.IngroupsBandC,MTcontentsofse
rumormilkweresignificantlyhigherthanthoseingroupAduringthe30-45dlactationperiod.Inconclu
sion,thebestchoicewastosupplementMTat12mg/capitaforlactatingcowsbyintravenousinjectionanda
suitabletimeintervalwasonceevery30-45d.
犓犲狔狑狅狉犱狊:metalothionein;ChinaHolsteincows;energyproduction;incretion
881 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.1