全 文 ：书凤仙花植株乙醇浸提液和固体粉剂对
瘤胃体外发酵代谢参数的影响
王东升１，黄江丽１，张志红１，田晓娟１，黄黄１，印遇龙２，丁建南１
（１．江西省科学院生物资源研究所，江西 南昌３３００２９；２．中国科学院亚热带农业生态研究所，湖南 长沙４１０１２５）
摘要：本研究旨在分析凤仙花整株制备的固体粉剂和乙醇浸提液对瘤胃体外代谢参数和降甲烷效果的影响。采集
装有永久性瘤胃瘘管的牛瘤胃液，以稻草粉、玉米粉和黄豆粉为人工饲料，通过体外瘤胃模拟培养法，研究了固体
粉剂和乙醇浸提液不同添加量（０．５％，１．０％和２．５％）对甲烷和二氧化碳气体产生以及瘤胃发酵代谢参数挥发性
脂肪酸（ＶＦＡ）和微生物蛋白（ＭＣＰ）等影响。结果表明，凤仙花固体粉剂处理在瘤胃发酵中总产气量最高，其次为
乙醇浸提液，莫能菌素处理最低（犘＜０．０５）。凤仙花和莫能菌素处理均能降低甲烷生成，其中固体粉剂处理效果最
明显，仅有微量甲烷。莫能菌素处理中二氧化碳含量最低，凤仙花所有处理显著提高二氧化碳含量。莫能菌素和
凤仙花降低氨态氮（ＮＨ３Ｎ）含量，随着凤仙花添加量增加，ＮＨ３Ｎ降低更明显。莫能菌素处理中 ＭＣＰ含量最低，
凤仙花所有处理都高于莫能菌素和对照，固体粉剂处理的 ＭＣＰ提高效果最明显。莫能菌素处理降低乙酸和总挥
发性脂肪酸含量，提高丙酸含量。凤仙花处理不同程度提高瘤胃中乙酸、丙酸和丁酸含量，总挥发性脂肪酸平均比
对照高１２．９％和２０．２％。莫能菌素和凤仙花处理都降低乙酸／丙酸。在体外培养条件下，凤仙花明显降低甲烷生
成，促进ＮＨ３Ｎ向 ＭＣＰ转化，改变了瘤胃代谢模式。
关键词：凤仙花；体外瘤胃发酵；甲烷；微生物蛋白；挥发性脂肪酸
中图分类号：Ｓ８１６．７９　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１３）０２００８７０７
　　甲烷是主要的温室气体之一，其温室效应是二氧化碳的２０～３０倍。畜牧业对全球温室效应的贡献率为９％
～１８％，而反刍动物排放的甲烷约占其中８０％［１］。反刍动物通过瘤胃中微生物发酵利用纤维素、半纤维素等结
构性碳水化合物，在此过程中产生大量氢气和二氧化碳，而瘤胃中产甲烷菌利用氢气和二氧化碳进行还原反应生
成甲烷，甲烷再以暖气的方式经口排出体外。反刍动物瘤胃内生成的甲烷不仅加剧了温室效应，同时也降低了饲
料利用率，造成２％～１５％饲料总能的损失［２］。因此，减少瘤胃内甲烷的生成对提高饲料能量利用率和改善环境
具有重要意义，研究调控反刍动物瘤胃甲烷排放的措施和方法已成为降低温室效应热点之一。反刍动物瘤胃形
成后通过不同措施进行微生态调控，降低甲烷的产生，如羔羊２８天时前胃功能发育已基本完成，此时可调控瘤胃
发酵，降低甲烷排放［３］。减少甲烷排放的途径主要有改变日粮组成，添加脂类物质、抗生素和植物提取物等。研
究发现，日粮不同精粗组合对反刍动物瘤胃内挥发性脂肪酸、产气量以及甲烷产生有不同影响［４，５］。添加脂类物
质如植物油后，瘤胃ｐＨ明显提高，瘤胃微生物活性发生变化，甲烷菌活性受到抑制，甲烷的排放减少，进而提高
动物的生产性能和饲料利用率［６］。肉牛日粮中添加葵花籽油，甲烷排放减少２２％，总能损失减少２１％［７］。莫能
菌素是离子载体型抗生素，明显抑制甲烷菌活性［８］，在反刍动物上应用降低体内２５％甲烷生成。但是，长期使用
莫能菌素会使瘤胃微生物产生适应性，并且畜产品中残留的抗生素对人体健康存在潜在威胁。因此，开发绿色、
无污染饲料添加剂越来越受到关注，其中植物提取物研究比较多。绞股蓝和丝兰等含皂甙类植物提取物，不仅减
少瘤胃中原虫数量，降低原虫对细菌的吞噬以及甲烷排放，而且调控瘤胃发酵模式，提高饲料能量的利用效率，同
时这类物质还有效提高动物机体抵抗力，预防疾病发生，改善动物产品质量［９，１０］。
第２２卷　第２期
Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．２
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
８７－９３
２０１３年４月
收稿日期：２０１１１１１５；改回日期：２０１２０９０６
基金项目：国家科技支撑计划项目（２０１２ＢＡＤ３９Ｂ０５４），国家自然科学基金项目（３１２６０５５６），江西省自然科学基金项目（２０１１４ＢＡＢ２０４０２１），江西
省科技支撑计划项目（２０１０ＢＮＡ０９１００）和江西省科学院博士基金项目（２０１０ｙｙｂ０１，２０１１ｙｙｂ０５）资助。
作者简介：王东升（１９７６），男，江苏赣榆人，助理研究员，博士。Ｅｍａｉｌ：ｗ＿ｄ＿ｓｈ＠１２６．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｊｉａｎｎａｎｄｉｎｇ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
凤仙花（犐犿狆犪狋犻犲狀狊犫犪犾狊犪犿犻狀犪）是凤仙花科凤仙花属植物，为一年生草本植物，主要分布于热带地区及亚热
带地区，在中国主要产于西南地区［１１］。凤仙花含有丰富的化学成分，主要含有糖类、黄酮类、醌类、甾醇类、香豆
素类等多种活性成分，具有抗过敏、抗真菌、抗炎等多种药理作用［１２］。本研究小组在筛选降甲烷药用植物时发
现，与青蒿（犃狉狋犲犿犻狊犻犪犪狀狀狌犪）、蒲公英（犜犪狉犪狓犪犮狌犿犿狅狀犵狅犾犻犮狌犿）、麻黄（犎犲狉犫犪犲狆犺犲犱狉犪犲）等植物比较，凤仙花具
有明显的降甲烷效果［１３］。试验采用体外厌氧培养技术，比较凤仙花植株固体粉剂和乙醇浸提液对瘤胃产甲烷、
微生物蛋白（ＭＣＰ）、氨态氮（ＮＨ３Ｎ）和挥发性脂肪酸（ＶＦＡ）等发酵参数的影响，通过这些特征指标的分析，探讨
凤仙花作用机理，为以后的开发利用提供参考。
１　材料与方法
１．１　试验材料
１．１．１　添加剂和人工饲料　降甲烷添加剂包括凤仙花和莫能菌素。凤仙花为本所植物遗传育种研究室栽培，开
花后期整株采收，全株风干后粉碎过１ｍｍ筛成为固体粉剂。固体粉剂分别在５０℃、７０％乙醇中浸泡４８ｈ，料液
比为１∶４，浸泡之后用超声波提取，超声波频率为２０ｋＨｚ，提取温度为５０℃。通过抽滤得到粗提液，在６０℃左右
将粗提液浓缩到总体积的１／５，即为凤仙花乙醇浸提液。莫能菌素是４０％预混剂，购自江西省南昌市兽医防疫
站。人工饲料选用黄豆粒、玉米粒和稻草，分别将这３种材料粉碎后过１ｍｍ筛备用。
１．１．２　瘤胃液采集　瘤胃液取自装有永久瘤胃瘘管的黄牛，试验动物每天饲喂２次，饲喂时间点为７：００和
１７：００，自由饮水。２０１１年５－６月份取样试验。晨饲２ｈ后采集瘤胃瘘管中新鲜瘤胃液，迅速装入充有氮气自封
袋中，并用３９℃保温瓶带回实验室。将采集的瘤胃液用４层脱脂纱布在大烧杯中过滤，过滤时在厌氧袋中操作，
减少微生物与空气的接触。量取所需体积瘤胃液迅速加入到准备好的人工唾液中（瘤胃液与人工唾液体积比为
１∶２），制成混合人工瘤胃培养液，人工瘤胃培养液在实验开始前新鲜配制。人工唾液由微量元素溶液、缓冲液、
常量元素溶液和还原剂溶液等组成，具体配制参照 Ｍｅｎｋｅ和Ｓｔｅｉｎｇａｓｓ［１４］的方法。
１．１．３　瘤胃体外培养装置　本研究使用的体外厌氧瘤胃培养装置是在王全军等［１５］所用培养装置基础上改造而
成，装置由两部分组成，培养瓶和５０ｍＬ玻璃注射器（浙江宁波和平注射器厂），两者之间通过带控制阀的软管连
接。培养瓶中放入人工瘤胃培养液和饲料，瓶口用反口胶塞密封。在胶塞上插入软管的尖头部分，软管末端连接
注射器。用密封带和胶布密封并固定软管的尖头部分，注射器用橡皮筋固定在培养瓶外。注射器每次使用之前
用凡士林涂抹注射器，消除注射器内腔和塞之间摩擦。
１．２　试验方法
１．２．１　试验设计　采用二因子设计，因子１为凤仙花固体粉剂和乙醇提取物，因子２为添加剂的添加量，添加量
设３个梯度，凤仙花乙醇浸提液添加量分别是培养液体积的０．５％，１．０％和２．５％（ｍＬ／ｍＬ，Ｅ１、Ｅ２和Ｅ３）；固体
粉剂添加量分别是培养液体积的０．５％，１．０％和２．５％（ｇ／ｍＬ，Ｓ１、Ｓ２和Ｓ３）。试验设正负对照，负对照为无任何
添加剂（ＣＫ）；正对照为莫能菌素，添加量为３０ｍｇ／Ｌ（Ｍ），莫能菌素添加量参考相关文献［１６］。每一处理设７个
平行，每个培养瓶为一平行，试验连续重复４批次。
１．２．２　体外培养　分别称取稻草粉、玉米粉和黄豆粉０．９０ｇ，０．４５ｇ和０．１５ｇ，组成体外厌氧培养所用人工饲
料。将人工饲料送入２５０ｍＬ培养瓶内，按照处理加入不同添加剂。在厌氧操作袋中打开培养瓶，分别向每个瓶
中加入人工瘤胃培养液２００ｍＬ，与人工饲料混合均匀。迅速盖上胶塞，插上软管的尖头部分，打开软管的控制
阀，用针头导入高纯氮气，驱赶瓶中剩余空气，确保培养瓶内为厌氧环境。将培养瓶放入（３９±０．５）℃恒温培养箱
中发酵培养。在１２，１８和２４ｈ记录注射器读数，测定注射器内甲烷（ＣＨ４）和二氧化碳（ＣＯ２）含量。各个处理的
注射器读数与校正对照比较后 （只有培养液没有饲料底物），转变成产气量。公式为：产气量＝Ｖｔ－Ｖｉ，其中，Ｖｔ
为各处理发酵ｔ小时的注射器读数，Ｖｉ为校正对照发酵ｔ小时的注射器读数。发酵至终点后收集各处理发酵
液，测定ｐＨ、氨态氮（ＮＨ３Ｎ）、微生物蛋白（ＭＣＰ）和３种挥发性脂肪酸（ＶＦＡ）。
１．２．３　测定方法　ＣＯ２ 和ＣＨ４ 测定：ＣＯ２ 含量用ＧＡＳＢＯＡＲＤ沼气分析仪（武汉四方光电科技有限公司）测
定；ＣＨ４ 用岛津气相色谱仪器测定，测定条件为：ＨＰＩＮＮＯＷＡＸ（１９０９１Ｎ１３３）毛细管柱，测定条件为柱温８０℃，
气化室温度１００℃，检测室温度１２０℃，载气使用高纯氮气。用１０μＬ微量注射器分别抽取１．０，２．０，３．０，４．０，
８８ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．２
５．０，６．０μＬ甲烷标准气，根据甲烷浓度和其峰面积关系，确定甲烷标准曲线，具体条件参照胡伟莲等
［１７］方法。
发酵液参数测定：发酵液ｐＨ值用梅特勒－托利多酸度计直接测定；ＮＨ３Ｎ含量测定采用水杨酸钠－次氯
酸钠比色法，具体过程参照冯宗慈和高民［１８］的方法；ＭＣＰ含量测定参照 Ｍａｋｋａｒ等［１９］分步离心法进行样品的预
处理，考马斯亮蓝（Ｇ２５０）比色法测定蛋白含量。测定挥发性脂肪酸含量时，取培养液１ｍＬ，加０．２ｍＬ浓度为
２５％的偏磷酸，４℃高速离心（１２０００ｒ／ｍｉｎ）１０ｍｉｎ，测定上清液中３种ＶＦＡ含量。配制６个梯度的乙酸、丙酸和
丁酸的混合标样，用于制作标准曲线。气相色谱测定的柱温为１８０℃，气化室温度为２００℃，检测室温度为
２２０℃，具体条件参照相关文献［１７］。培养液中 ＶＦＡ主要由乙酸、丙酸和丁酸组成，三者之和为总挥发酸（ＴＶ
ＦＡ）。
１．３　统计分析
数据采用Ｅｘｃｅｌ２００３软件进行记录整理，试验结果用平均值±标准误表示，统计分析采用ＳＡＳＶ８软件的
Ｄｕｎｃａｎ氏法进行多重比较，以犘＜０．０５作为差异显著性判断标准。
２　结果与分析
２．１　凤仙花对产气量的影响
比较不同处理体外培养中的产气量（表１），１２ｈ测定结果中，莫能菌素（Ｍ）处理的产气量最低，比对照（ＣＫ）
显著低５６．９％，所有凤仙花处理产气量高于ＣＫ，凤仙花固体粉剂高浓度处理（Ｓ３）比ＣＫ高８６．９％，同时也显著
高于其他凤仙花处理（犘＜０．０５）。１８ｈ产气量中，莫能菌素处理产气量也是最低，固体粉剂３个添加量Ｓ１、Ｓ２和
Ｓ３均显著高于凤仙花乙醇浸提液３个处理（犘＜０．０５）。２４ｈ培养结束时，莫能菌素处理依然保持最低，Ｓ３处理
最高，所有凤仙花处理均显著高于ＣＫ和莫能菌素处理（犘＜０．０５）。比较各处理３次总产气量，凤仙花固体粉剂
最高，３个添加量分别比ＣＫ高４２．４％，５７．０％和７０．９％，乙醇浸提液３个添加量分别比ＣＫ高１６．６％，２５．２％和
３２．２％，莫能菌素处理比ＣＫ显著低２７．８％（犘＜０．０５）。因此，凤仙花与莫能菌素处理对产气量的影响结果相
反。凤仙花２种制剂添加量和产气量之间表现出一定正比关系，添加量低，产气量低，添加量高，产气量也相应提高。
表１　凤仙花乙醇浸提液和固体粉剂对体外发酵产气的影响
犜犪犫犾犲１　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犲狋犺犪狀狅犾犲狓狋狉犪犮狋犪狀犱狆犾犪狀狋狊狅犾犻犱狆狅狑犱犲狉狅犳犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪狅狀犵犪狊狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀犻狀狏犻狋狉狅狉狌犿犲狀犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀
项目
Ｉｔｅｍｓ
时间
Ｔｉｍｅ
ＣＫ Ｍ Ｅ１ Ｅ２ Ｅ３ Ｓ１ Ｓ２ Ｓ３
产气量
Ｇａｓ
（ｍＬ）
１２ｈ １８．５７±２．０３ｃ ８．００±１．６９ｄ１９．８９±２．１０ｂｃ２０．８６±２．７８ｂｃ２０．６９±１．４１ｂｃ２２．４３±２．４７ｂ２７．１７±１．２４ｂ３４．６７±１．１１ａ
１８ｈ １９．００±３．１２ｃ１７．００±３．８７ｃ ２２．８６±１．８９ｂ２６．３６±４．６１ｂ２８．５９±２．２７ｂ ３１．００±３．４７ａ３５．００±２．３５ａ ３５．００±３．５２ａ
２４ｈ ２３．６７±２．５１ｃ１９．２３±２．８９ｃ ２８．６８±３．２９ｂ２９．４８±２．５６ａｂ３１．６９±２．０８ａｂ３３．８０±１．１９ａ３４．００±２．１８ａ ３５．００±２．０４ａ
总量 Ｔｏｔａｌ６１．２４±２．６５ｃ４４．２３±４．５８ｄ７１．４３±１．２７ｂ７６．７０±４．５８ｂ８０．９７±３．０９ａ ８７．２３±４．５８ａ９６．１７±２．４７ａ１０４．６７±５．２１ａ
ＣＨ４
（％）
１２ｈ ６．７８±１．５４ａ ０．７０±０．０２ｃ １．００±０．０８ｂ １．１０±０．０５ｂ ０．３０±０．０５ｃ ０．００±０．００ｄ ０．００±０．００ｄ ０．００±０．００ｄ
１８ｈ １４．６３±１．５８ａ ２．２０±０．２５ｃ ４．０５±１．７４ｂ ２．１０±２．５８ｃ ０．３０±０．０２ｄ ０．３０±２．３５ｄ ０．３０±３．０７ｄ ０．００±０．００ｅ
２４ｈ ２１．００±２．０１ａ ５．４０±１．０６ｃ１４．１０±１．５８ｂ ４．８０±１．４４ｃ ０．４０±０．１２ｄ ０．３０±０．０２ｄ ０．３０±０．０７ｄ ０．００±０．００ｄ
ＣＯ２
（％）
１２ｈ ２６．４５±２．５１ｃｄ２０．７８±１．２２ｄ３７．２４±２．９８ｃ４０．５２±１．４５ｂｃ４８．０９±２．４７ｂ４４．３２±２．１５ｂ５４．８０±２．０９ａ６０．２８±３．１１ａ
１８ｈ ２９．７４±１．０２ｄ２２．８１±２．３６ｄ４１．７７±２．４７ｂ４５．１４±２．９８ｂ５２．９８±４．５６ｂ４８．６３±２．２１ｂ５９．７１±３．２５ａ６５．３２±３．０７ａ
２４ｈ ３７．１６±３．５８ｄ２８．７０±２．５５ｅ４４．０１±２．８９ｃ４９．５６±３．５５ｂ５８．１３±６．２１ｂ５１．２７±３．６８ｂ６２．４９±３．４７ａｂ７０．０４±４．７５ａ
　注：同列数据不同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５）。下同。
　Ｎｏｔｅ：Ｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎ，ｖａｌｕｅｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｅｔｔｅｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（犘＜０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
２．２　凤仙花对ＣＨ４ 和ＣＯ２ 的影响
比较１２ｈＣＨ４ 差异（表１），含量最高是ＣＫ，莫能菌素处理明显较低，比ＣＫ显著低８９．７％ （犘＜０．０５）。凤
仙花固体粉剂３个处理都为０；乙醇浸提液３个处理分别比ＣＫ显著低８５．３％，８３．８％和９５．６％ （犘＜０．０５）。分
９８第２２卷第２期 草业学报２０１３年
析１８和２４ｈ测定结果，ＣＫ中ＣＨ４ 含量在所有处理中保持最高，莫能菌素显著低于ＣＫ（犘＜０．０５），分别比ＣＫ
低８４．９％和７４．３％。凤仙花固体粉剂Ｓ３处理抑制ＣＨ４ 生成，２个较低添加浓度处理中仅有微量ＣＨ４；乙醇浸
提液３个添加量１８ｈ测定结果比ＣＫ分别低７２．３％，８５．６％和９７．９％，２４ｈ测定结果比ＣＫ低３２．８％，７７．１％
和９８．０％（犘＜０．０５）。
ＣＯ２ 变化与ＣＨ４ 相反，与产气量变化趋势相似。不同时间取样测定结果中，莫能菌素处理均为最低，平均比
ＣＫ低２２．６％。在凤仙花２种制剂中，固体粉剂对ＣＯ２ 提高明显，各添加量平均比ＣＫ高１０９．５％，５４．５％和
８９．６％ （犘＜０．０５），乙醇浸提液各添加量分别比ＣＫ高３１．８％，４４．８％和７０．５％。
２．３　凤仙花对ｐＨ的影响
发酵培养结束时，测定瘤胃液中的ｐＨ，比较所有处理，莫能菌素最高（表２），比ＣＫ高０．２％（犘＞０．０５）；凤
仙花处理均比ＣＫ低，并且随着添加量的提高，降低更明显。凤仙花乙醇浸提液３个添加量分别比ＣＫ低１．９％，
２．８％和４．７％，固体粉剂处理分别比ＣＫ低３．５％，５．４％和８．４％（犘＜０．０５）。
表２　凤仙花乙醇浸提液和固体粉剂体外发酵代谢参数的影响
犜犪犫犾犲２　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犲狋犺犪狀狅犾犲狓狋狉犪犮狋犪狀犱狆犾犪狀狋狊狅犾犻犱狆狅狑犱犲狉狅犳犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪狅狀犿犲狋犪犫狅犾犻犮狆犪狉犪犿犲狋犲狉狊犻狀狏犻狋狉狅狉狌犿犲狀犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀
项目Ｉｔｅｍｓ ＣＫ Ｍ Ｅ１ Ｅ２ Ｅ３ Ｓ１ Ｓ２ Ｓ３
ｐＨ ６．７９±２．１１ａ ６．８０±１．５８ａ ６．６６±１．４５ａｂ ６．６０±０．４７ｂ ６．４７±２．１０ｂｃ ６．５５±１．２５ｂ ６．４２±１．８９ｂｃ ６．２２±１．２４ｃ
氨态氮 ＮＨ３Ｎ
（ｍｇ／１００ｍＬ）
８．３６±２．０２ａ ７．００±２．５８ｂ ７．２９±１．２１ｂ ５．８８±１．４４ｃ ４．３３±１．８７ｃ ４．９２±０．８４ｃ ４．００±１．７８ｃｄ ３．７３±０．１５ｄ
微生物蛋白 ＭＣＰ
（ｍｇ／ｍＬ）
６．６８±２．０１ｄ ６．５６±２．５４ｄ１０．６９±１．３６ｃ １１．８５±１．４７ｃ１３．０１±２．５８ｂ １２．３５±３．２２ｂ １６．０１±２．８９ａｂ２０．０２±３．４５ａ
乙酸 Ａｃｅｔａｔｅ
（ｍｍｏｌ／Ｌ）
２４．９６±３．５６ｂ２４．０５±２．８４ｂ２５．９８±５．３６ｂ ３０．１６±５．１０ａ２７．３５±２．８９ａｂ２８．２６±４．７８ａ ３０．５８±３．１５ａ ２９．８７±４．７７ａ
丙酸Ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ
（ｍｍｏｌ／Ｌ）
４．６２±０．２２ｂ ５．１５±１．２０ｂ ５．０３±１．８１ｂ ６．１１±２．６９ａ ５．６８±２．１２ａ ５．７８±１．４５ａ ６．２８±２．２１ａ ６．４７±１．２３ａ
丁酸Ｂｕｔｙｒａｔｅ
（ｍｍｏｌ／Ｌ）
２．２１±１．０１ｂ ２．１６±０．２１ｂ ２．２０±０．８９ｂ ２．６１±０．０９ａ ２．５３±０．０７ａ ２．５１±０．０９ｂ ２．７１±１．０４ａ ２．２２±０．５８ｂ
总挥发性脂肪酸
ＴＶＦＡ（ｍｍｏｌ／Ｌ）
３１．７９±２．５８ｂ３１．３６±５．５５ｂ３３．２１±２．６９ｂ ３８．８８±３．５２ａ３５．５６±４．５７ａｂ３６．５５±４．５９ａｂ　　３９．５６±４．７８ａ ３８．５６±４．７１ａ
乙酸／丙酸
Ａｃｅｔａｔｅ／ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ
５．４０±２．１１ａ ４．６７±１．０５ｂ ５．１６±１．４７ａ ４．９４±０．２４ａ ４．８１±１．３１ａ ４．８９±１．６８ａ ４．８６±１．７３ａ ４．６２±１．５４ｂ
　ＭＣＰ：Ｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ；ＴＶＦＡ：Ｔｏｔａｌｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄ．
２．４　凤仙花对 ＭＣＰ和ＮＨ３Ｎ的影响
ＮＨ３Ｎ和 ＭＣＰ是瘤胃微生物发酵２个重要指标，反映了瘤胃代谢状态。结果显示（表２），ＣＫ中ＮＨ３Ｎ含
量最高，其他处理均显著低于ＣＫ（犘＜０．０５），莫能菌素处理比ＣＫ低１６．３％，乙醇浸提液３个处理比ＣＫ低
１２．８％，２９．７％和４８．２％，固体粉剂３个处理比ＣＫ低４１．１％，５２．２％和５５．４％。添加量相同时，凤仙花固体粉
剂降低效果比乙醇浸提液明显。体外发酵液中 ＭＣＰ结果与ＮＨ３Ｎ不同，莫能菌素处理的 ＭＣＰ最低，比ＣＫ低
１．８％（犘＞０．０５），凤仙花处理的ＭＣＰ均高于ＣＫ，固体粉剂３个添加量分别比ＣＫ高８４．９％，１３９．７％和１９９．７％
（犘＜０．０５），乙醇浸提液分别比ＣＫ高６０．０％，７７．４％和９４．８％。
２．５　凤仙花对ＶＦＡ的影响
比较各处理乙酸含量（表２），莫能菌素处理最低，比ＣＫ低３．６％（犘＞０．０５）；凤仙花处理平均比ＣＫ高
１４．９％，比莫能菌素处理高１９．３％。凤仙花处理之间没有明显区别，但是２种处理方式表现为先升高后降低趋
势，与其他发酵参数变化规律不同。比较丙酸差异，ＣＫ含量最低，莫能菌素处理比ＣＫ高１１．５％（犘＞０．０５）；凤
０９ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．２
仙花固体粉剂平均比ＣＫ高３３．７％（犘＜０．０５），乙醇浸提液平均比ＣＫ高２１．４％。结果中看出，丁酸在３种挥发
性脂肪酸中所占比例最小，莫能菌素处理的丁酸含量最低，比ＣＫ低２．３％（犘＞０．０５）；固体粉剂平均比ＣＫ高
１２．２％，乙醇浸提液平均比ＣＫ高１０．７％。比较３种挥发性脂肪酸总量（ＴＶＦＡ），莫能菌素处理最低，比ＣＫ低
１．４％（犘＞０．０５）；固体粉剂比ＣＫ平均高２０．２％，乙醇浸提液比ＣＫ平均高１２．９％。对于乙酸／丙酸，ＣＫ最高，
莫能菌素处理比ＣＫ低１３．５％（犘＜０．０５），凤仙花固体粉剂比ＣＫ平均低１１．４５％，乙醇浸提液比ＣＫ低８．１％。
本试验中，凤仙花处理不同程度提高瘤胃中乙酸、丙酸和丁酸含量，ＴＶＦＡ也随着３种酸含量的提高而提高，降
低乙酸／丙酸。
３　讨论
莫能菌素（Ｍｏｎｅｎｓｉｎ）是反刍动物应用较广的饲料添加剂，具有减少瘤胃甲烷生成、提高饲料转化效率功效。
莫能菌素在一定用量内对产气总量影响不明显，但是明显提高二氧化碳含量［１６，２０］。本试验中，莫能菌素用量在
３０ｍｇ／Ｌ时，ＣＨ４ 降低，产气量和ＣＯ２ 也下降，分析认为与用量较多有关。凤仙花不同添加量明显降低ＣＨ４ 含
量，剂量越高效果越明显。研究表明，饲料有机物质的消化率与体外培养时的产气量具有高度相关性，产气量越
高，表明饲料在瘤胃内的发酵活动越剧烈［２１］。凤仙花明显提高产气量和ＣＯ２ 含量，表明添加的凤仙花刺激了瘤
胃微生物代谢活动，提高某些微生物活性；另外，当ＣＨ４ 生成受到抑制时，造成ＣＯ２ 和Ｈ２ 等累积［２２］。
ＭＣＰ代谢是瘤胃微生物区系营养代谢的一个重要的组成部分，是反刍动物最主要的氮源供应者［２３］。本试
验中，体外培养２４ｈ后，凤仙花处理 ＭＣＰ测定结果均比ＣＫ高。试验结果表明，凤仙花处理刺激了瘤胃微生物
代谢活动，加快瘤胃微生物蛋白合成，促进ＮＨ３Ｎ向 ＭＣＰ转化。此结果与茶皂素等植物提取物具有减少瘤胃
ＮＨ３Ｎ浓度、促进 ＭＣＰ合成结论一致［２４］。添加莫能菌素降低 ＭＣＰ含量，与莫能菌素抑制革兰氏阳性细菌活
性、引起瘤胃细菌数量下降等有关［８］。瘤胃液ｐＨ值是反映瘤胃内发酵状况的一项综合指标，ｐＨ值过高或过低
对瘤胃微生物生长、发育及发酵均有不利的影响［２５］。本试验中，莫能菌素ｐＨ比ＣＫ高０．２％，差异不显著，添加
凤仙花引起ｐＨ值明显降低，分析原因可能是凤仙花处理影响瘤胃微生物菌群，提高了挥发性脂肪酸（ＶＦＡ）含
量。ｐＨ变化与饲料配比有关［２６］，本研究中饲料配比对凤仙花引起的ｐＨ变化缓冲效果差，在以后研究中需要调
整饲料组成和配比。另外，由于试验采用不连续体外发酵，不能及时排除代谢产物而造成大量有机酸类物质累
积［２７］。有文献报道ＶＦＡ是反刍动物和瘤胃微生物维持和生长的主要能量来源，瘤胃内各ＶＦＡ百分率反映瘤胃
微生物的发酵类型及养分吸收情况［２８］。凤仙花处理提高瘤胃中乙酸、丙酸和丁酸含量，ＴＶＦＡ也随着提高，而乙
酸／丙酸下降，可能是凤仙花不仅促进饲料能量的利用，而且还改变了瘤胃代谢模式，结果与茶皂甙和延胡索酸二
钠效果相同［２９，３０］。
比较凤仙花乙醇浸提液以及固体粉剂体外瘤胃发酵效果，从ＣＨ４、ＣＯ２ 和 ＭＣＰ等数据看，浓度相同时，固体
粉剂的效果最好，乙醇浸提液效果较差。当直接添加固体粉剂时，其中含有的少量对多糖、蛋白质等营养物质也
被微生物利用，促进瘤胃微生物发酵，所以效果更明显。
４　结论
凤仙花乙醇浸提液和固体粉剂均能有效降低ＣＨ４ 产生，促进 ＮＨ３Ｎ向 ＭＣＰ转化，添加量高时（２．５％）效
果更明显，固体粉剂的效果最好，并且用量较大时，没有副作用。综上所述，凤仙花有望成为反刍动物新型瘤胃发
酵调控剂。
参考文献：
［１］　Ｇｉｌ Ｍ，ＳｍｉｔｈＰ，ＷｉｌｋｉｎｓｏｎＪＭ．Ｍｉｔｉｇａｔｉｎｇｃｌｉｍａｔｅｃｈａｎｇｅ：ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｄｏｍｅｓｔｉｃｌｉｖｅｓｔｏｃｋ［Ｊ］．Ａｎｉｍａｌ，２０１０，４（３）：３２３
３３３．
［２］　ＪｏｈｎｓｏｎＫＡ，ＪｏｈｎｓｏｎＤＥ．Ｍｅｔｈａｎｅｅｍｉｓｓｉｏｎｆｒｏｍｃａｔｔｌｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９９５，７３：２４８３２４９２．
［３］　郭江鹏，潘建忠，李发弟，等．０５６日龄舍饲肉用羔羊前胃功能发育研究［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（３）：１２８１３５．
［４］　韩继福，冯仰廉，张晓明，等．阉牛不同日粮的纤维消化、瘤胃内 ＶＦＡ对甲烷产生量的影响［Ｊ］．中国兽医学报，１９９７，
１７（３）：２７８２８０．
１９第２２卷第２期 草业学报２０１３年
［５］　崔占鸿，郝力壮，刘书杰，等．体外产气法评价青海高原燕麦青干草与天然牧草组合效应［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（３）：２５０
２５７．
［６］　ＣｈａｖｅｓＡＶ，ＳｔａｎｆｏｒｄＫ，ＤｕｇａｎＭＥＲ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｉｎｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅ，ｇａｒｌｉｃａｎｄｊｕｎｉｐｅｒｂｅｒｒｙｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓｏｎｒｕｍｅｎｆｅｒ
ｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ｂｌｏｏｄｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ，ｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ａｎｄｃａｒｃａｓｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｇｒｏｗｉｎｇｌａｍｂｓ［Ｊ］．ＬｉｖｅｓｔｏｃｋＳｃｉｅｎｃｅ，
２００８，１１７：２１５２２４．
［７］　ＭｃｇｉｎｎＳＭ，ＢｅａｕｃｈｅｍｉｎＫＡ，ＣｏａｔｅｓＴ，犲狋犪犾．Ｍｅｔｈａｎｅｅｍｉｓｓｉｏｎｆｒｏｍｂｅｅｆｃａｔｔｌｅ：Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｍｏｎｅｎｓｉｎ，ｓｕｎｆｌｏｗｅｒｏｉｌ，ｅｎ
ｚｙｍｅｓ，ｙｅａｓｔ，ａｎｄｆｕｍａｒｉｃａｃｉｄ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２００４，８２：３３４６３３５６．
［８］　ＧｏｏｄｒｉｃｈＲＤ，ＧａｒｒｅｔｔＪＥ，ＧａｓｔＤＲ，犲狋犪犾．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｍｏｎｅｎｓｉｎｏｎｔｈｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｃａｔｔｌｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉ
ｅｎｃｅ，１９８４，５８：１４８４１４９８．
［９］　王新峰，毛胜勇，朱伟云．绞股蓝皂甙对体外瘤胃微生物甲烷产量及发酵特性的影响［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（２）：５２５９．
［１０］　李国祥，王梦芝，李世霞，等．丝兰提取物对山羊瘤胃发酵参数、原虫密度及甲烷产量的影响［Ｊ］．饲料工业，２００８，２９（１８）：
１５１８．
［１１］　胡喜兰，朱慧，刘存瑞，等．凤仙花的化学成分研究［Ｊ］．中成药，２００３，２５（１０）：８３３．
［１２］　ＰａｔｒａＡ．Ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆ犐犿狆犪狋犻犲狀狊犫犪犾狊犪犿犻狀犪Ｌ．［Ｊ］．ＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ，１９８８，１９：３６７３６８．
［１３］　张志红，黄江丽，田晓娟，等．几种植物提取物对瘤胃体外培养物甲烷生成的影响［Ｊ］．江西科学，２０１１，２９（１）：４３４５．
［１４］　ＭｅｎｋｅＫＨ，ＳｔｅｉｎｇａｓｓＨ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｎｅｒｇｅｔｉｃｆｅｅｄｖａｌｕｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｇａｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
ｕｓｉｎｇｒｕｍｅｎｆｌｕｉｄ［Ｊ］．ＡｎｉｍａｌＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１９８８，２８：７５５．
［１５］　王全军，毛胜勇，张红霞，等．半胱胺对山羊瘤胃微生物体外发酵的影响［Ｊ］．华中农业大学学报，２００２，２１（６）：５３５５３９．
［１６］　王中华，林雪彦，李富昌，等．莫能菌素浓度对混合瘤胃微生物体外发酵的影响［Ｊ］．动物营养学报，２００２，１４（４）：５９６２．
［１７］　胡伟莲，王佳，吕建敏．瘤胃体外发酵产物中的甲烷和有机酸含量的快速测定［Ｊ］．浙江大学学报（农业与生命科学版），
２００６，３２（２）：２１７２２１．
［１８］　冯宗慈，高民．通过比色测定瘤胃液氨氮含量方法的改进［Ｊ］．内蒙古畜牧科学，１９９３，４：４０．
［１９］　ＭａｋｋａｒＨＰＳ，ＳｈａｖｍａＯＰ，ＤａｗｒａＲＫ，犲狋犪犾．Ｓｉｍｐｌｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｔｅｉｎｉｎｒｕｍｅｎｌｉｑｕｏｒ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ
ＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，１９８２，６５：２１７０２１７３．
［２０］　叶均安．莫能菌素添加剂对瘤胃培养物发酵的影响［Ｊ］．饲料研究，２００３，６：３９．
［２１］　ＭｅｎｋｅＫＨ，ＲａａｂＬ，ＳａｌｅｗｓｋｉＡ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｅｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｚａｂｌｅｅｎｅｒｇｙｃｏｎｔｅｎｔｏｆｒｕｍｉｎａｎｔ
ｆｅｅｄｓｔｕｆｆｓｆｒｏｍｔｈｅｇａｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｗｈｅｎｔｈｅｙａｒｅｉｎｃｕｂａｔｅｄｗｉｔｈｒｕｍｅｎｌｉｑｕｏｒｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，
１９７９，９３：２１７１２１７２．
［２２］　ＬóｐｅｚＳ，ＶａｌｄéｓＣ，ＮｅｗｂｏｌｄＣＪ，犲狋犪犾．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｓｏｄｉｕｍｆｕｍａｒａｔｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｎｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ｂｒｉｔｉｓｈ
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９９９，８１：５９６４．
［２３］　王聪，刘强，董群，等．日粮补充苹果酸对牛瘤胃发酵和养分消化代谢的影响［Ｊ］．草业学报，２００９，１８（３）：２２４２３１．
［２４］　叶均安．茶皂索对湖羊生产性能的影响［Ｊ］．饲料研究，２００１，６：３３．
［２５］　ＢｒｏｗｎＭＳ，ＰｏｎｃｅＣＨ，ＰｕｌｉｋａｎｔｉＲ，犲狋犪犾．Ａｄａｐｔａｔｉｏｎｏｆｂｅｅｆｃａｔｔｌｅｔｏｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄｉｅｔｓ：ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｒｕｍｉｎａｌｍｅ
ｔａｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２００６，８４：２５３３．
［２６］　李勇，郝正里，李发弟，等．不同组合饲粮对绵羊瘤胃代谢参数的影响［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（３）：１３６１４２．
［２７］　叶均安．茶皂素对瘤胃原虫的抑制效果［Ｊ］．中国饲料，２００１，２：３０３２．
［２８］　ＯｒｓｋｏｖＥＲ，ＭａｃｌｅｏｄＮＡ，ＮａｋａｓｈｉｍａＹ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄｓｍｉｘｔｕｒｅｓｏｎｅｎｅｒｇｙｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｃａｔｔｌｅ［Ｊ］．
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９９１，６９：３３８９３３９７．
［２９］　ＭａｏＨＬ，ＷａｎｇＪＫ，ＺｈｏｕＹＹ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｄｄｉｔｉｏｎｏｆｔｅａｓａｐｏｎｉｎｓａｎｄｓｏｙｂｅａｎｏｉｌｏｎｍｅｔｈａｎｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｆｅｒｍｅｎｔａ
ｔｉｏｎａｎｄｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｒｕｍｅｎｏｆｇｒｏｗｉｎｇｌａｍｂｓ［Ｊ］．ＬｉｖｅｓｔｏｃｋＳｃｉｅｎｃｅ，２０１０，１２９：５６６２．
［３０］　毛胜勇，王新峰，朱伟云．体外法研究延胡索酸二钠对瘤胃微生物发酵活力及甲烷产量的影响［Ｊ］．草业学报，２０１０，
１９（２）：６９７５．
２９ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．２
犈犳犳犲犮狋狊狅犳狆犾犪狀狋狊狅犾犻犱狆狅狑犱犲狉犪狀犱犲狋犺犪狀狅犾犲狓狋狉犪犮狋狅犳犐犿狆犪狋犻犲狀狊犫犪犾狊犪犿犻狀犪狅狀
犿犻犮狉狅犫犻犪犾犿犲狋犪犫狅犾犻犮狆犪狉犪犿犲狋犲狉狊犱狌狉犻狀犵犻狀狏犻狋狉狅狉狌犿犲狀犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀
ＷＡＮＧＤｏｎｇｓｈｅｎｇ１，ＨＵＡＮＧＪｉａｎｇｌｉ１，ＺＨＡＮＧＺｈｉｈｏｎｇ１，ＴＩＡＮＸｉａｏｊｕａｎ１，
ＨＵＡＮＧＨｕａｎｇ１，ＹＩＮＹｕｌｏｎｇ２，ＤＩＮＧＪｉａｎｎａｎ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｏｕｒｃｅｏｆＪｉａｎｇｘｉＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００２９，Ｃｈｉｎａ；２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ
ｏｆｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２５，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆ犐犿狆犪狋犻犲狀狊犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓａｎｄｐｌａｎｔｓｏｌｉｄｐｏｗｄｅｒ
（０．５％，１．０％ａｎｄ２．５％），ｏｎｍｅｔｈａｎｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｃａｔｔｌｅｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ
ｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ犻狀狏犻狋狉狅．Ｆｏｒａｇｅｓｗｉｔｈｓｔｒａｗ０．９０ｇ，ｃｏｒｎ０．４５ｇａｎｄｓｏｙｂｅａｎ０．１５ｇ（１ｍｍｓｃｒｅｅｎ）ｗｅｒｅｔｒａｎｓ
ｐｏｒｔｅｄｉｎ２５０ｍＬｓｅｒｕｍｂｏｔｔｌｅｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ２００ｍＬｌｉｑｕｉｄ（ａｒｔｉｆｉｃｉａｌｓａｌｉｖａａｎｄｒｕｍｉｎａｌｌｉｑｕｏｒｉｎａ２∶１），ａｎｄｉｎ
ｃｕｂａｔｅｄａｔ３９℃．Ｔｏｔａｌｇａｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌｐｌａｎｔｓｏｌｉｄｐｏｗｄｅｒｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ，ｍｏｎｅｎｓｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
ｔｈｅｌｏｗｅｓｔ，ａｎｄｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ．Ａｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｏｆｂｏｔｈ犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪ａｎｄｍｏｎｅｎ
ｓｉｎｒｅｄｕｃｅｄｍｅｔｈａｎｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｉｔｗａｓｌｏｗｅｓｔｉｎｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌｐｌａｎｔｓｏｌｉｄｐｏｗｄｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．Ｍｏｎｅｎｓｉｎｔｒｅａｔ
ｍｅｎｔｓｒｅｄｕｃｅｄｃａｒｂｏｎｄｉｏｘｉｄｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｗｈｉｌｅ犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｔ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｏｆ犐．
犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓａｎｄｍｏｎｅｎｓｉｎｒｅｄｕｃｅｄａｍｍｏｎｉａｎｉｔｒｏｇｅｎ（ＮＨ３Ｎ），ａｎｄａｓ犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎ
ｃｒｅａｓｅｄ，ａｍｍｏｎｉｕｍｎｉｔｒｏｇｅｎｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｄｅｃｒｅａｓｅｄ．ＴｈｅＭＣＰｏｆｍｏｎｅｎｓｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｗａｓｔｈｅｌｅａｓｔ，ｗｈｉｌｅ
ｔｈｏｓｅｏｆｏｒｉｇｉｎａｌｐｌａｎｔｓｏｌｉｄｐｏｗｄｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ（Ｓ１，Ｓ２，Ｓ３）ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ
ａｎｄｍｏｎｅｎｓｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．Ｍｏｎｅｎｓｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｃｅｔａｔｅａｎｄｔｏｔａｌｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄｂｕｔ
ｉｎｃｒｅａｓｅｄｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｏｆ犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔｓ，ａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈ
ｔｈａｔｏｆｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ，ｔｈｅｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓａｎｄｏｒｉｇｉｎａｌｐｌａｎｔｓｏｌｉｄｐｏｗｄｅｒｗｅｒｅｉｎ
ｃｒｅａｓｅｄｂｙ１２．９％ａｎｄ２０．２％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｏｆｍｏｎｅｎｓｉｎａｎｄ犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｒｅｄｕｃｅｄ
ｔｈｅｒａｔｉｏｏｆａｃｅｔａｔｅｔｏｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ．Ｉｎｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｃｏｕｌｄｒｅｄｕｃｅｍｅｔｈａｎｅｅｍｉｓｓｉｏｎｓ，ｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅ
ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｏｆＮＨ３ＮｔｏＭＣＰ，ｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｍｏｄｅｌｏｆ犻狀狏犻狋狉狅ｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｓｏｌｉｄｐｏｗｄｅｒ
ｏｆ犐．犫犪犾狊犪犿犻狀犪ｗａｓｔｈｅｍｏｓｔｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犐犿狆犪狋犻犲狀狊犫犪犾狊犪犿犻狀犪；犻狀狏犻狋狉狅ｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ；ｍｅｔｈａｎｅ；ｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｒｕｄｐｒｏｔｅｉｎ（ＭＣＰ）；ｖｏｌ
ａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄ
３９第２２卷第２期 草业学报２０１３年