全 文 ：书玉米犛犛犚引物和甘蔗犈犛犜－犛犛犚
引物在芒属中的通用性研究
卢玉飞，蒋建雄，易自力
（湖南农业大学生物科学技术学院，湖南 长沙４１０１２８）
摘要：芒属种质资源是芒属能源作物新品种育种的基础。为了给开展芒属的相关遗传分析提供基础，本研究以中
国芒属植物全部７个种类为材料，对３８２对玉米ＳＳＲ引物和１００对甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物的通用性进行研究以筛选
有效的微卫星分子标记。筛选分前期筛选以获得初步有效的引物和后期使用这些初步有效的引物对全部供试材
料进行扩增２个环节进行。结果表明，在全部８４份供试材料中都能实现稳定ＰＣＲ扩增且条带清晰、有多态性、能
准确判读的玉米ＳＳＲ引物和甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物分别为３９对（１０．２１％）和１３对（１３．００％）。这５２对引物在所有
供试材料中扩增总共得到２５０条带。其中在芒属中产生２２０条带，而多态性条带为２０６条（９３．６４％），平均每对引
物获得３．９６条多态性条带。在扩增条带中，出现了不少特异性条带。基于全部２５０条带计算得到的遗传相似度
（ＧＳ）为０．５８８～０．９８８。采用非加权类平均法聚类的结果表明，在ＧＳ＝０．６８水平上，中国芒属植物分为两大类：第
一类由尼泊尔芒、双药芒、红山茅构成，第二类由芒、五节芒同荻、南荻组成；在ＧＳ＝０．８２水平上，芒与五节芒同荻
与南荻分开；在ＧＳ＝０．８８时，芒与五节芒分开。结果初步表明中国芒属植物遗传多样性比较丰富。其中，芒、五节
芒、荻和南荻的相似性较高，相似度为０．７８０～０．９８８，说明它们之间的遗传距离较近，而尼泊尔芒、双药芒、红山茅
同这四者的遗传距离却较远。因此建议在中国芒属植物的遗传改良和新品种选育时，亲本选配可以适当考虑这三
者，以拓宽杂交种的遗传基础。
关键词：ＳＳＲ；ＥＳＴ－ＳＳＲ；引物通用性；中国芒属植物；遗传多样性
中图分类号：Ｑ９４３；Ｓ５４３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１２）０５００８６１０
　　芒属（犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊）（禾本科Ｐｏａｃｅａｅ）是一类Ｃ４ 高大禾草。因其具有适宜作为新一代非粮食能源植物开发利
用的潜力而备受关注［１４］。按Ｃｈｅｎ和Ｒｅｎｖｏｉｚｅ［５］的分类体系，中国的芒属植物包含芒（犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊狊犻狀犲狀狊犻狊）、五
节芒（犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊）、荻（犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊）、南荻（犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊）、尼泊尔芒（犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊）、双药芒（犕．
狀狌犱犻狆犲狊）和红山茅（犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊）等７个种。尽管我国的芒属植物资源丰富，但对其遗传多样性的了解并不
多。
微卫星，或言之简单序列重复（ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｓ，ＳＳＲｓ）以一种由短的碱基基序构成的长阵列形式广
泛分布于真核生物基因组内，长１～６ｂｐ（ｂａｓｅｐａｉｒｓ，ｂｐ）［６，７］。根据开发ＳＳＲ标记所依据的序列的不同性质，
ＳＳＲ标记可分为基因组ＳＳＲ（ｇｅｎｏｍｉｃＳＳＲ，ｇＳＳＲ）和表达序列标签ＳＳＲ（ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅｔａｇｓＳＳＲ，ＥＳＴ－
ＳＳＲ）［８］。ＥＳＴ是通过对ｃＤＮＡ文库中随机挑取的克隆进行大规模测序所获得的ｃＤＮＡ的５′或３′端序列，长度
一般为１５０～５００ｂｐ［８］。ＥＳＴ－ＳＳＲ是指ＥＳＴ序列中包含的ＳＳＲ，因来源于编码ＤＮＡ而与基因表达有关［９］。
作为功能基因的一部分，ＥＳＴ－ＳＳＲ的侧翼区往往受到功能性约束而使得其歧化速率慢，所以该侧翼区序列在物
种间很保守。已有研究表明，这２种ＳＳＲ标记在物种及其近缘种间，甚至在该物种与某些远缘种之间都具有比
较高的通用性［７，１０１２］。
由于通过文库筛选来开发ＳＳＲ引物的成本高昂，并且因为通过公共数据库搜索来获得适用序列来开发芒属
ＳＳＲ引物的机会也小，因此根据ＳＳＲ侧翼区序列保守性的特点，从现有近缘种的ＳＳＲ引物中筛选获取可用于芒
８６－９５
２０１２年１０月
　　　草　业　学　报　　　
　　　ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ　　　
第２１卷　第５期
Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．５
收稿日期：２０１２０３２８；改回日期：２０１２０４２８
基金项目：国家自然科学基金项目（３０９７１８３２）和国家高技术研究发展计划（８６３计划）项目（２０１１ＡＡ１００２０９０３）资助。
作者简介：卢玉飞（１９７６），男，广西贵港人，讲师，在读博士。Ｅｍａｉｌ：ｌｙｆｆ１００２＠１２６．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｙｉｚｉｌｉ８８９＠１６３．ｃｏｍ
属植物扩增的ＳＳＲ引物是一个现实选择［１０］。Ｈｅｒｎáｎｄｅｚ等［１０］考察了７６对玉米（犣犲犪犿犪狔狊）ＳＳＲ引物在２份芒
属杂交种中的扩增情况，并接着使用了１１份材料开展多样性研究，结果表明玉米的微卫星引物在芒属中的通用
性很高。钟智林等［１３］比较了３０对玉米ＳＳＲ引物在１５份芒属材料中的扩增情况，结果表明玉米ＳＳＲ引物适用
于芒属植物遗传多样性分析。Ｈｕｎｇ等［１４］的研究则表明来自芒的９个微卫星位点在五节芒中能实现种间扩增。
马洪峥等［１５］利用尼泊尔芒和双药芒的６份材料，筛选得到１４对能产生稳定扩增的ＳＳＲ引物，并进而评价认为所
获得的这１４个ＳＳＲ位点在双药芒组遗传学研究中的适用性强。Ｚｈｏｕ等［１６］从芒中开发了１４个ＳＳＲ位点，其中
１２个在五节芒、荻、南荻中能实现种间扩增。Ｈｏ等［１７］的研究则表明源自犕．狊犻狀犲狀狊犻狊ｆｏ．犵犾犪犫犲狉的转录区的１２
个多态性微卫星位点能在芒的所有变种及五节芒中实现类群间扩增。
本研究以我国芒属植物的全部７个种为材料，对３８２对玉米ＳＳＲ引物和１００对甘蔗（犛犪犮犮犺犪狉狌犿狅犳犳犻犮犻狀犪
狉狌犿）ＥＳＴ－ＳＳＲ引物的通用性进行研究，寻找适用于芒属相关遗传学研究的ＳＳＲ引物，并在此基础上初步探讨
中国芒属种质资源的遗传多样性，为开展相关研究奠定基础。
１　材料与方法
１．１　植物材料
实验材料采自湖南农业大学芒属种质资源圃。８０份芒属材料以及作为外类群的４份甘蔗属（犛犪犮犮犺犪狉狌犿）材
料的详细信息见表１。类群名称按Ｃｈｅｎ和Ｒｅｎｖｏｉｚｅ［５］的分类体系。
１．２　引物
３８２对玉米ＳＳＲ引物为ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ公司产品（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯＵＳＡ）；１００对甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物序列
由美国Ｉｌｉｎｏｉｓ大学ＥｒｉｋＳａｃｋｓ博士提供，由北京奥科生物技术有限公司合成。
１．３　实验方法
１．３．１　基因组ＤＮＡ提取　每份材料从一个单株里选取生长状况良好的新鲜健康嫩叶，总ＤＮＡ提取方法参照
ＣＴＡＢ法［１８］并稍加改良。所有ＤＮＡ母液于－７０℃保存。
１．３．２　引物筛选　引物筛选分２个环节进行：前期筛选以获得初步认为有效的引物、应用初步有效的引物对上
述８４份材料进行扩增。在前期引物筛选（即初筛）环节，每次扩增电泳同时检测若干对引物，从芒属的每个类群
及每个外类群中各抽取１～３份材料来使用。扩增反应体系为１５μＬ，含２μＬ（约５０ｎｇ）模板 ＤＮＡ、０．０２
ｍｍｏｌ／Ｌ引物、２．５ｍｍｏｌ／ＬＭｇ２＋、０．２ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ、０．５ＵＴａｑＤＮＡｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（广州东盛生物技术有限公
司）、１．５μＬ１０×ＰＣＲｂｕｆｆｅｒ。扩增反应在ＰＣＲ仪 （Ｂｉｏｍｅｔｒａ，Ｇｅｒｍａｎｙ）上完成。扩增程序为：９４℃预变性５
ｍｉｎ；９４℃变性３０ｓ，５６～６０℃退火３０ｓ，７２℃延伸１ｍｉｎ，循环数３５；７２℃保持７ｍｉｎ。根据扩增结果和已有经验，
完全无带或仅有细带或弱带的引物都舍弃，认为该引物无效。其中，２００８年１１－１２月完成玉米ＳＳＲ引物的前期
筛选，这当中使用的部分供试材料不在上述８４份材料之列，筛选时使用的退火温度通常为５８℃，少量引物使用
６０℃；甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物的前期筛选是于２０１０年１－２月使用上述８４份材料中的部分材料来完成的，筛选时
所有引物使用的退火温度均为５６℃。用于每次扩增的材料都同时包含了中国芒属植物的至少大部分种类。
然后，进一步应用初步认为有效的引物对上述８４份材料进行扩增。扩增反应体系和程序同前期筛选所应用
的，但已根据初筛的扩增情况来适当调整了退火温度。扩增产物通过１２％的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，
ＡｇＮＯ３ 染色检测。选择扩增条带清晰且有多态性的引物来使用，舍弃扩增效果不佳或条带过于复杂而无法准确
判读的引物。每一对确定有效的引物在优化好退火温度后，都将保持相同条件再重复一遍扩增和电泳以检验扩
增条带的稳定性。根据在同一电泳迁移位置上稳定、清晰的扩增条带的有／无，记为１／０矩阵。为确保读带的误
差尽可能小，带型过于复杂而无法准确判读的扩增条带都舍弃不读。
１．３．３　数据处理　计算不同引物的多态性条带百分率（ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｂａｎｄｓ，ＰＰＢ）。采用 ＮＴ
ＳＹＳｐｃ－２．１０ｅ［１９］软件计算遗传相似度（ｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ，ＧＳ），并按非加权类平均法（ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄｐａｉｒｇｒｏｕｐ
ｍｅｔｈｏｄｗｉｔｈａｒｉｔｈｍｅｔｉｃａｖｅｒａｇｉｎｇ，ＵＰＧＭＡ）进行聚类。
７８第２１卷第５期 草业学报２０１２年
表１　８４份供试材料
犜犪犫犾犲１　８４犪犮犮犲狊狊犻狅狀狊狅犳狆犾犪狀狋犿犪狋犲狉犻犪犾狊
类群Ｔａｘｏｎ 材料序号ＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ． 采集号Ｓｅｒｉａｌｎｕｍｂｅｒ 采集地Ｓａｍｐｌｉｎｇｌｏｃａｔｉｏｎ
芒犕．狊犻狀犲狀狊犻狊（ｎ＝２８） １ ４１１１ 海南屯昌 Ｈａｉｎａｎ，Ｔｕｎｃｈａｎｇ
２ ２０６８ 广西凭祥 Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｐｉｎｇｘｉａｎｇ
３ ６０３０ 广西梧州 Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｗｕｚｈｏｕ
４ ６０５９ 云南富宁 Ｙｕｎｎａｎ，Ｆｕｎｉｎｇ
５ ６０８７ 云南文山 Ｙｕｎｎａｎ，Ｗｅｎｓｈａｎ
６ ４０９８ 云南勐海 Ｙｕｎｎａｎ，Ｍｅｎｇｈａｉ
７ ３０２３ 福建霞浦Ｆｕｊｉａｎ，Ｘｉａｐｕ
８ ３１２０ 广东梅县 Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｍｅｉｘｉａｎ
９ ２２０９ 贵州玉屏 Ｇｕｉｚｈｏｕ，Ｙｕｐｉｎｇ
１０ ００５７ 四川自贡Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｚｉｇｏｎｇ
１１ ４３６２ 浙江洞头Ｚｈｅｊｉａｎｇ，Ｄｏｎｇｔｏｕ
１２ ４３７２ 浙江舟山Ｚｈｅｊｉａｎｇ，Ｚｈｏｕｓｈａｎ
１３ ４３３３ 江西广昌Ｊｉａｎｇｘｉ，Ｇｕａｎｇｃｈａｎｇ
１４ ００３８ 湖北秭归 Ｈｕｂｅｉ，Ｚｉｇｕｉ
１５ ４０８５ 重庆渝北区Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｙｕｂｅｉｑｕ
１６ ４３０５ 河南洛宁 Ｈｅｎａｎ，Ｌｕｏｎｉｎｇ
１７ ４４４５ 河南林州 Ｈｅｎａｎ，Ｌｉｎｚｈｏｕ
１８ ４０３１ 陕西凤县Ｓｈａａｎｘｉ，Ｆｅｎｇｘｉａｎ
１９ ４０２５ 陕西周至Ｓｈａａｎｘｉ，Ｚｈｏｕｚｈｉ
２０ ４０４０ 陕西城固Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｅｎｇｇｕ
２１ ４１４７ 山东青岛Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｑｉｎｇｄａｏ
２２ ２３８７ 辽宁宽甸Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｋｕａｎｄｉａｎ
２３ ２３５１ 吉林蛟河Ｊｉｌｉｎ，Ｊｉａｏｈｅ
２４ ００３５ 湖北神农架 Ｈｕｂｅｉ，Ｓｈｅｎｎｏｎｇｊｉａ
２５ ４１４２ 山东日照Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｒｉｚｈａｏ
２６ ２４４２ 辽宁丹东Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｄａｎｄｏｎｇ
２７ ２４１５ 辽宁鞍山Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ａｎｓｈａｎ
２８ ２３８２ 吉林吉安Ｊｉｌｉｎ，Ｊｉ’ａｎ
五节芒犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊（ｎ＝１２） ２９ ６０４７ 广西玉林 Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｙｕｌｉｎ
３０ ２００５ 广西龙胜 Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｌｏｎｇｓｈｅｎｇ
３１ ３０２４ 福建霞浦Ｆｕｊｉａｎ，Ｘｉａｐｕ
３２ ２０９１ 广东鼎湖 Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｄｉｎｇｈｕ
３３ ２２０３ 贵州雷山 Ｇｕｉｚｈｏｕ，Ｌｅｉｓｈａｎ
３４ ００２０ 江西梅岭Ｊｉａｎｇｘｉ，Ｍｅｉｌｉｎｇ
３５ ４０２２ 湖南浏阳 Ｈｕｎａｎ，Ｌｉｕｙａｎｇ
３６ ４１５４ 湖南岳阳 Ｈｕｎａｎ，Ｙｕｅｙａｎｇ
３７ ４１６３ 湖北江厦 Ｈｕｂｅｉ，Ｊｉａｎｇｘｉａ
３８ ４１３６ 江苏连云港Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ
３９ ４４０９ 安徽金寨 Ａｎｈｕｉ，Ｊｉｎｚｈａｉ
４０ ４０３６ 陕西勉县Ｓｈａａｎｘｉ，Ｍｉａｎｘｉａｎ
８８ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．５
　续表１　Ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ
类群Ｔａｘｏｎ 材料序号ＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ． 采集号Ｓｅｒｉａｌｎｕｍｂｅｒ 采集地Ｓａｍｐｌｉｎｇｌｏｃａｔｉｏｎ
荻犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊（ｎ＝２１） ４１ ４４６４ 湖北红安 Ｈｕｂｅｉ，ＨｏｎｇＡｎ
４２ ４４４３ 河南林州 Ｈｅｎａｎ，Ｌｉｎｚｈｏｕ
４３ ４０３７ 陕西城固Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｅｎｇｇｕ
４４ ４０３０ 陕西凤县Ｓｈａａｎｘｉ，Ｆｅｎｇｘｉａｎ
４５ ２４８７ 甘肃泾川 Ｇａｎｓｕ，Ｊｉｎｇｃｈｕａｎ
４６ ４０２３ 宁夏永宁 Ｎｉｎｇｘｉａ，Ｙｏｎｇｎｉｎｇ
４７ ４２１８ 山西安泽Ｓｈａｎｘｉ，Ａｎｚｅ
４８ ４２２０ 山西霍州Ｓｈａｎｘｉ，Ｈｕｏｚｈｏｕ
４９ ４２０８ 山西昔阳Ｓｈａｎｘｉ，Ｘｉｙａｎｇ
５０ ４４５１ 河北阜平 Ｈｅｂｅｉ，Ｆｕｐｉｎｇ
５１ ４４５２ 北京密云Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｍｉｙｕｎ
５２ ４１４６ 山东青岛Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｑｉｎｇｄａｏ
５３ ４１３８ 山东日照Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｒｉｚｈａｏ
５４ ４１３９ 山东日照Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｒｉｚｈａｏ
５５ ４４５７ 山东东营Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｄｏｎｇｙｉｎｇ
５６ ２４６３ 辽宁康平Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｋａｎｇｐｉｎｇ
５７ ２４２７ 辽宁盖州Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｇａｉｚｈｏｕ
５８ ２４６５ 辽宁阜新Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｆｕｘｉｎ
５９ ２３５４ 吉林安图Ｊｉｌｉｎ，Ａｎｔｕ
６０ ２２２８ 黑龙江伊春 Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ，Ｙｉｃｈｕｎ
６１ ４０４９ 黑龙江佳木斯 Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ，Ｊｉａｍｕｓｉ
南荻犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊（ｎ＝１６） ６２ ０００１ 湖南长沙 Ｈｕｎａｎ，Ｃｈａｎｇｓｈａ
６３ ０００３ 湖南长沙 Ｈｕｎａｎ，Ｃｈａｎｇｓｈａ
６４ ４０８１ 湖南长沙 Ｈｕｎａｎ，Ｃｈａｎｇｓｈａ
６５ ２１０９ 湖南华容 Ｈｕｎａｎ，Ｈｕａｒｏｎｇ
６６ ４１６９ 湖南岳阳 Ｈｕｎａｎ，Ｙｕｅｙａｎｇ
６７ ００３２ 湖北神农架 Ｈｕｂｅｉ，Ｓｈｅｎｎｏｎｇｊｉａ
６８ ６００９ 重庆北碚Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｂｅｉｂｅｉ
６９ ４１２９ 江苏姜堰Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｊｉａｎｇｙａｎ
７０ ４１２２ 江苏南京Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｎａｎｊｉｎｇ
７１ ５０３３ 安徽黄山 Ａｎｈｕｉ，Ｈｕａｎｇｓｈａｎ
７２ ４３００ 河南淅川 Ｈｅｎａｎ，Ｘｉｃｈｕａｎ
７３ ４４６０ 河南光山 Ｈｅｎａｎ，Ｇｕａｎｇｓｈａｎ
７４ ４１２５ 江苏泰州Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｔａｉｚｈｏｕ
７５ ４３９６ 山东微山Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｗｅｉｓｈａｎ
７６ ５００５ 江西修水Ｊｉａｎｇｘｉ，Ｘｉｕｓｈｕｉ
７７ ４１３３ 江苏大丰Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｄａｆｅｎｇ
尼泊尔芒犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊（ｎ＝１） ７８ ３１７７ 云南昆明 Ｙｕｎｎａｎ，Ｋｕｎｍｉｎｇ
双药芒犕．狀狌犱犻狆犲狊（ｎ＝１） ７９ ３１７８ 云南昆明 Ｙｕｎｎａｎ，Ｋｕｎｍｉｎｇ
红山茅犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊（ｎ＝１） ８０ ３１８１ 云南昭通 Ｙｕｎｎａｎ，Ｚｈａｏｔｏｎｇ
河八王犛犪犮犮犺犪狉狌犿狀犪狉犲狀犵犪（ｎ＝２） ８１ ４１０６ 海南琼海 Ｈａｉｎａｎ，Ｑｉｏｎｇｈａｉ
８２ ４０７６ 湖南桂东 Ｈｕｎａｎ，Ｇｕｉｄｏｎｇ
甜根子草犛．狊狆狅狀狋犪狀犲狌犿 （ｎ＝２） ８３ ６０６４ 云南富宁 Ｙｕｎｎａｎ，Ｆｕｎｉｎｇ
８４ ００４６ 四川峨眉Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｅｍｅｉ
９８第２１卷第５期 草业学报２０１２年
２　结果与分析
２．１　引物筛选
从３８２对玉米ＳＳＲ引物和１００对甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物中，初步筛选获得在供试类群中至少都能产生较清晰
主带的引物分别有９２对（２４．０８％）和２９对（２９．００％），初步认为这些引物是有效引物。利用这些引物对上述８４
份材料统一进行ＰＣＲ扩增，条带较清晰且有多态性的分别为５４对（１４．１４％）、１９对（１９．００％）。其中一些引物
因扩增条带不清晰或者因为其中某些条带过于复杂以致无法在所有供试材料中准确判读等因素而被放弃使用，
剩余３９对（１０．２１％）玉米ＳＳＲ引物和１３对（１３．００％）甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物，条带清晰稳定且能准确无误判读，
而用于进一步的遗传分析。
用筛选获得的这５２对引物对上述８４份材料进行ＰＣＲ扩增，结果共得到２５０条带，平均每对引物获得４．８１
条，每对引物扩增条带数为２～９条。部分引物的扩增图谱如图１和图２所示。其中在芒属中总共得到２２０条
带，绝大多数条带大小在１００～２００ｂｐ，平均每对引物获得４．２３条；这当中多态性条带２０６条（９３．６４％），平均每
对引物３．９６条。其中，在玉米ＳＳＲ引物和甘蔗 ＥＳＴ－ＳＳＲ引物中各有１对引物，即分别为ｐｕｍｃ１１７０和
ＢＱ５３７２５０ａ，它们在芒属材料中表现为单态性。
图１　玉米犛犛犚引物狆犿犿犮０１３２的扩增图谱
犉犻犵．１　犃犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀狆狉狅犱狌犮狋狊犳狉狅犿狋犺犲犾狅犮狌狊狅犳狆犿犿犮０１３２犳狉狅犿犿犪犻狕犲犛犛犚
　该图谱由两块胶的电泳图片合并而成，因为一块胶仅有５２个点样孔，每次电泳８４份材料要分两块胶点样，把两块胶的图片组合到一块以方便比
较各材料的扩增条带。１：芒，２：五节芒，３：荻，４：南荻，５：尼泊尔芒，６：双药芒，７：红山茅，８：河八王，９：甜根子草；Ｍ：Ｍａｒｋｅｒ；打的为芒荻杂交种，
不在８４份供试材料之列，也不参与数据分析。下同。Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｍａｋｅｔｈｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｂａｎｄｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｃｃｅｓｓｉｏｎｓｃｏｍｐａｒａｂｌｅ，ｔｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔ
ｉｃｐａｔｔｅｒｎｗａｓｃｏｍｂｉｎｅｄｂｙｔｗｏｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍｓｏｆｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｓｆｒｏｍｔｈｅｓａｍｅＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｓａｍｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．Ｓｉｎｃｅ
ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｏｎｌｙ５２ｔｅｅｔｈｏｆｏｎｅｃｏｍｂ，ｓｏ８４ａｃｃｅｓｓｉｏｎｓｈａｄｔｏｂｅｓｅｐａｒａｔｅｄｉｎｔｗｏｇｅｌｓｆｏｒｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｅａｃｈｔｉｍｅ．１：犕．狊犻狀犲狀狊犻狊，２：犕．犳犾狅狉犻犱狌
犾狌狊，３：犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊，４：犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊，５：犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊，６：犕．狀狌犱犻狆犲狊，７：犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊，８：犛．狀犪狉犲狀犵犪，９：犛．狊狆狅狀狋犪狀犲狌犿，Ｍ：
Ｍａｒｋｅｒ．Ａｓｔｅｒｉｓｋｄｅｎｏｔｅｄｔｈｅａｃｃｅｓｓｉｏｎｔｈａｔｗａｓｈｙｂｒｉｄｏｆ犕．狊犻狀犲狀狊犻狊ａｎｄ犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊，ｗｈｉｃｈｗａｓｎｏｔｉｎｃｌｕｄｅｄｉｎｔｈｅ８４ａｃｃｅｓｓｉｏｎｓａｎｄｗａｓ
ｅｘｃｌｕｄｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆｉｎａｌｄａｔａａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
图２　甘蔗犈犛犜－犛犛犚引物犅犙４７８９４９犪的扩增图谱
犉犻犵．２　犃犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀狆狉狅犱狌犮狋狊犳狉狅犿狋犺犲犾狅犮狌狊狅犳犅犙４７８９４９犪犳狉狅犿狊狌犵犪狉犮犪狀犲犈犛犜－犛犛犚
２．２　特异性条带
这５２对引物在对上述８０份芒属供试材料进行ＰＣＲ扩增时，扩增条带中出现了一些可能比较有利用价值的
特异性条带（表２）。在中国芒属植物中，它们仅为某一或某些类群所拥有，这些类群在本研究中称为专属类群。
２．３　玉米ＳＳＲ引物与甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物扩增效果对比
这２种引物的扩增效率非常相近，但甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物的多态性稍强于玉米ＳＳＲ引物的（表３）。倘若在
数据分析中去掉在内类群材料芒属中扩增结果无多态性的ｐｕｍｃ１１７０和ＢＱ５３７２５０ａ这２对引物，甘蔗ＥＳＴ－
ＳＳＲ引物的扩增效率和多态性均略优于玉米ＳＳＲ引物的。
２．４　聚类分析
采用ＮＴＳＹＳｐｃ－２．１０ｅ软件计算得到的遗传相似系数（ＧＳ）为０．５８８～０．９８８。聚类结果（图３）表明，在ＧＳ
０９ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．５
＝０．６８水平上，中国芒属植物分为两大类群：第一类由尼泊尔芒、双药芒、红山茅构成，第二类由芒、五节芒同荻、
南荻组成；在ＧＳ＝０．８２上，第二类又分成了由芒与五节芒构成的一支和由荻与南荻构成的另一支；在ＧＳ＝０．８８
上，芒与五节芒分开，各自成为一个分支。这些分支以及由荻和南荻构成的分支又各自形成了很多次级分支。
表２　３９对玉米犛犛犚引物和１３对甘蔗犈犛犜－犛犛犚引物在芒属中的扩增效果
犜犪犫犾犲２　犃犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犲犳犳犲犮狋狊狅犳３９犿犪犻狕犲犛犛犚狆狉犻犿犲狉狆犪犻狉狊犪狀犱１３狊狌犵犪狉犮犪狀犲犈犛犜－犛犛犚狆狉犻犿犲狉狆犪犻狉狊犻狀犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊
引物
Ｐｒｉｍｅｒ
条带大小
Ｐｒｏｄｕｃｔｓｉｚｅ
ｒａｎｇｅ（ｂｐ）
退火温度
Ａｎｎｅａｌｉｎｇ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（℃）
扩增条带数
Ｎｏ．ｏｆ
ｂａｎｄｓ
多态性条带
Ｎｏ．ｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ
多态性条带百分率（ＰＰＢ）
Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ（％）
特异性条带（专属类群）
Ｓｐｅｃｉｆｉｃｂａｎｄ
（Ｅｘｃｌｕｓｉｖｅｔａｘｏｎｏｒｔａｘａ）
ｐｂｎｌｇ１２５ ２８０～３３０ ６０ ５ ５ １００．００ ２８０ｂｐ（３）
ｐｂｎｌｇ１３４７ ９５～１６５ ６０ ７ ７ １００．００ ９５ｂｐ（７），１２０ｂｐ（６）
ｐｂｎｌｇ１６０１ １４５～１９０ ６０ ５ ５ １００．００ １６０ｂｐ（７）
ｐｂｎｌｇ２２４８ １７０～１８０ ６０ ２ １ ５０．００ １８０ｂｐ（８）
ｐｂｎｌｇ２３２３ １３０～１６５ ５４ ５ ５ １００．００
ｐｍｍｃ０１３２ １６０～２２５ ５８ ９ ９ １００．００ １７０ｂｐ（２）
ｐｍｍｃ０４１１ １３０～１６５ ５８ ４ ４ １００．００ １６５ｂｐ（４）
ｐｐｈｉ４３５４１７ １９０～２０５ ５６ ４ ４ １００．００
ｐｕｍｃ１０６９ ８５～１３５ ５８ ７ ７ １００．００
ｐｕｍｃ１０７３ ７５～９５ ６０ ４ ４ １００．００
ｐｕｍｃ１１２６ １１０～１２５ ５２ ２ ２ １００．００
ｐｕｍｃ１１７０ １３０ ５６ １ ０ ０．００ １３０ｂｐ（８）
ｐｕｍｃ１１９６ １４０～１５５ ５８ ４ ４ １００．００
ｐｕｍｃ１２４１ １４０～１５０ ５６ ２ １ ５０．００ １４０ｂｐ（８）
ｐｕｍｃ１２４５ １６０～１７０ ６０ ２ ２ １００．００
ｐｕｍｃ１２６５ １００～１４０ ５６ ３ ２ ６６．６７ １４０ｂｐ（６）
ｐｕｍｃ１２９２ １４０～２４５ ５６ ７ ７ １００．００ １５０ｂｐ（６）
ｐｕｍｃ１３０１ ９０～１３０ ５８ ５ ５ １００．００
ｐｕｍｃ１３２５ １２０～１７０ ５４ ５ ５ １００．００
ｐｕｍｃ１３５８ １００～１７５ ６０ ６ ６ １００．００
ｐｕｍｃ１３６６ １２５～１６５ ５６ ３ ２ ６６．６７ １２５ｂｐ（８）
ｐｕｍｃ１４５０ １３０～１７０ ５６ ７ ７ １００．００
ｐｕｍｃ１４６１ １７０～１７５ ５２ ２ ２ １００．００ １７５ｂｐ（４）
ｐｕｍｃ１４７２ １５０～１７０ ６０ ４ ４ １００．００
ｐｕｍｃ１５００ １２５～１８５ ６０ ６ ６ １００．００ １８５ｂｐ（５）
ｐｕｍｃ１５３７ ９０～１８５ ５６ ７ ６ ８５．７１ ９０ｂｐ（８），１０５ｂｐ（４），１１０ｂｐ（４）
ｐｕｍｃ１５４２ １１０～１４５ ５０ ４ ４ １００．００ １１０ｂｐ（５），１３０ｂｐ（１）
ｐｕｍｃ１５６６ １４０～１５０ ６０ ３ ３ １００．００
ｐｕｍｃ１６７８ １１５～１４５ ５８ ６ ５ ８３．３３ １３０ｂｐ（８）
ｐｕｍｃ１７３８ ８５～１３５ ５４ ５ ５ １００．００ ８５ｂｐ（５），１３５ｂｐ（４）
ｐｕｍｃ１７８０ １４０～１９５ ５０ ３ ２ ６６．６７ １４０ｂｐ（８），１６５ｂｐ（５），１９５ｂｐ（４）
ｐｕｍｃ１９４１ ６０～１００ ５４ ３ ２ ６６．６７ ６０ｂｐ（６），９５ｂｐ（８）
ｐｕｍｃ１９６２ １４０～１４８ ５６ ２ １ ５０．００ １４０ｂｐ（８），１４８ｂｐ（５）
ｐｕｍｃ２０３６ １４０～１６５ ５６ ５ ５ １００．００ １５０ｂｐ（３），１６０ｂｐ（７），１６５ｂｐ（６）
１９第２１卷第５期 草业学报２０１２年
　续表２　Ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ
引物
Ｐｒｉｍｅｒ
条带大小
Ｐｒｏｄｕｃｔｓｉｚｅ
ｒａｎｇｅ（ｂｐ）
退火温度
Ａｎｎｅａｌｉｎｇ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（℃）
扩增条带数
Ｎｏ．ｏｆ
ｂａｎｄｓ
多态性条带
Ｎｏ．ｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ
多态性条带百分率（ＰＰＢ）
Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ（％）
特异性条带（专属类群）
Ｓｐｅｃｉｆｉｃｂａｎｄ
（Ｅｘｃｌｕｓｉｖｅｔａｘｏｎｏｒｔａｘａ）
ｐｕｍｃ２０３８ ９５～１３０ ５４ ６ ６ １００．００ １１０ｂｐ（５）
ｐｕｍｃ２２２６ ９０～９５ ６２ ２ ２ １００．００
ｐｕｍｃ２２６６ １２０～１５０ ５６ ３ ３ １００．００
ｐｕｍｃ２２７７ １５０～１７０ ５２ ２ １ ５０．００
ｐｕｍｃ２３２３ １５０～１６５ ５２ ４ ４ １００．００ １５３ｂｐ（４），１５８ｂｐ（６）
ＢＱ４７８９４９ａ １９５～２７０ ５６ ６ ６ １００．００ ２２５ｂｐ（７）
ＢＱ５３１９３６ａ １６０～１８５ ５８ ５ ５ １００．００
ＢＱ５３２６３９ｂ ９０～９５ ５４ ２ ２ １００．００
ＢＱ５３３８７２ａ ２５０～２９０ ５８ ４ ４ １００．００
ＢＱ５３７２５０ａ １４５ ５６ １ ０ ０．００ １４５ｂｐ（８）
ＣＡ０６６１１４ａ １４５～１８５ ５４ ８ ８ １００．００
ＣＡ０６６７４８ａ １７０～１９０ ６０ ５ ５ １００．００
ＣＡ０６７７８０ａ １７８～２５０ ５８ ５ ５ １００．００
ＣＡ０６８５６２ａ １４５～１９５ ５６ ３ ２ ６６．６７ １４５ｂｐ（８）
ＣＡ０６９３４３ａ ２０５～２１０ ５６ ２ ２ １００．００
ＣＡ０６９３４３ｂ ３７０～３９５ ５６ ３ ３ １００．００ ３７０ｂｐ（３）
ＣＡ０７０２０６ａ ６０～８５ ５４ ４ ３ ７５．００ ６０ｂｐ（８）
ＣＡ０７１３１８ｂ １６０～２９０ ５８ ６ ６ １００．００ ２８０ｂｐ（４）
均值 Ｍｅａｎ ４．２３ ３．９６
　括号中的数字代表的是专属类群，相应条带只为这些类群所拥有。比如２８０ｂｐ（３）表示２８０ｂｐ这条带仅出现在“３”所代表的类群里。各个数字
代表的类群分别是：１：芒与五节芒；２：荻与南荻；３：芒、五节芒、荻和南荻；４：尼泊尔芒；５：双药芒；６：红山茅；７：尼泊尔芒与双药芒；８：中国芒属植物的
全部７个类群。
　 Ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄｔｈｅｅｘｃｌｕｓｉｖｅｔａｘｏｎｏｒｔａｘａｏｎｌｙｗｈｉｃｈｐｏｓｓｅｓｓｅｄｔｈｅｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｓｐｅｃｉｆｉｃｂａｎｄ．Ｆｏｒｅｘａｍｐｌｅ，ｔｈｅ“２８０ｂｐ（３）”ｍｅａｎ
ｔｈａｔｔｈｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｂａｎｄｗｉｔｈ２８０ｂｐｓｉｚｅｗａｓｏｎｌｙｐｏｓｓｅｓｓｅｄｂｙｔｈｅｔａｘａｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄｂｙｔｈｅｎｕｍｂｅｒ“３”．Ｔｈｅｄｅｔａｉｌｅｄｅｘｃｌｕｓｉｖｅｔａｘｏｎｏｒｔａｘａｒｅ
ｐｒｅｓｅｎｔｅｄｂｙｅｖｅｒｙｆｉｇｕｒｅｗｅｒｅｇｉｖｅｎｂｅｌｏｗ．１：犕．狊犻狀犲狀狊犻狊ａｎｄ犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊；２：犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊ａｎｄ犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊；３：犕．狊犻狀犲狀狊犻狊，犕．
犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊，犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊，ａｎｄ犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊；４：犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊；５：犕．狀狌犱犻狆犲狊；６：犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊；７：犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊ａｎｄ犕．狀狌犱犻狆犲狊；
８：ａｌｔｈｅ７ｔａｘａｏｆ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊ｉｎＣｈｉｎａ．
表３　玉米犛犛犚引物与甘蔗犈犛犜－犛犛犚引物在芒属中的扩增效果对比
犜犪犫犾犲３　犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅狀犪犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犲犳犳犲犮狋狊犫犲狋狑犲犲狀犿犪犻狕犲犛犛犚狆狉犻犿犲狉狆犪犻狉狊犪狀犱狊狌犵犪狉犮犪狀犲
犈犛犜－犛犛犚狆狉犻犿犲狉狆犪犻狉狊犻狀犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊
引物类型
Ｔｙｐｅｏｆ
ｐｒｉｍｅｒｓ
引物数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｐｒｉｍｅｒｓ
扩增条带总数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｂａｎｄｓ
每对引物扩增条带均值
Ａｖｅｒａｇｅｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｂａｎｄｓｐｅｒｐｒｉｍｅｒ
多态性条带总数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ
多态性条带均值
Ａｖｅｒａｇｅｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｂａｎｄｓｐｅｒｐｒｉｍｅｒ
多态性条带百分率（ＰＰＢ）
Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆ
　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｂａｎｄｓ（％）
ＳＳＲ ３９（３８） １６６（１６５） ４．２６（４．３４） １５５ ３．９７（４．０８） ９３．３７（９３．９４）
ＥＳＴ－ＳＳＲ １３（１２） ５４（５３） ４．１５（４．４２） ５１ ３．９２（４．２５） ９４．４４（９６．２３）
　括号里的数据表示在相应引物里分别去掉在本研究的芒属材料中扩增结果无多态性的引物ｐｕｍｃ１１７０或ＢＱ５３７２５０ａ后再分析所得到的结果。
　Ｔｈｅｄａｔａｉｎｔｈｅｐａｒｅｎｔｈｅｓｅｓｍｅａｎｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅｓｕｌｔｓｉｎｔｈｅ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊ｆｏｒｍＣｈｉｎａａｆｔｅｒｇｉｖｉｎｇｕｐｔｈｅｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓｏｆｐｕｍｃ１１７０ｏｒＢＱ５３７２５０ａ
ｗｈｉｃｈｗａｓｎｏｔｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｉｎ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊ｏｆＣｈｉｎａ．
２９ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．５
图３　８０份芒属材料的犝犘犌犕犃聚类图
犉犻犵．３　犝犘犌犕犃犮犾狌狊狋犲狉犻狀犵犳犻犵狌狉犲犳狅狉狋犺犲８０犪犮犮犲狊狊犻狅狀狊犻狀犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊
　Ａ：芒犕．狊犻狀犲狀狊犻狊，Ｂ：五节芒犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊，Ｃ：荻和南荻犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊ａｎｄ犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊，Ｄ：尼泊尔芒犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊，Ｅ：双药芒犕．
狀狌犱犻狆犲狊，Ｆ：红山茅犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊，Ｇ：甜根子草犛．狊狆狅狀狋犪狀犲狌犿，Ｈ：河八王犛．狀犪狉犲狀犵犪．
３　讨论
３．１　ＳＳＲ标记的通用性
Ｈｅｒｎáｎｄｅｚ等［１０］的研究表明，７６对玉米的ＳＳＲ引物里有５７对（７５％）引物在芒属ＤＮＡ中实现可重复扩增。
使用其中的１７对引物扩增芒属的１１份材料，遗传相似度为０．３５～０．９２，结果表明玉米的微卫星引物对芒属的
通用性很高。马洪峥等［１５］的研究则表明，核心芒属的ＳＳＲ位点在双药芒组中的同源扩增比率为５２．１７％。
本研究中，这３８２对玉米ＳＳＲ引物以及１００对甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物往往都能产生扩增条带，但一些引物因
扩增条带很细弱或者在全部８４份供试材料中只产生一条带而被剔除。而且为了确保条带统计时的准确性，条带
过于复杂而无法准确判读的那些引物也被舍弃。经过这２次筛选，最后可用的引物不多，这导致了本研究中这２
种引物的通用性较低。已有研究表明ＥＳＴ－ＳＳＲ引物较普通ＳＳＲ引物的通用性效果更佳［２０］。而从本研究结果
来看，总体上甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物较玉米ＳＳＲ引物的通用性稍好一点，对揭示中国芒属种质资源的遗传多样性
更为有效。这反映了基于源自转录区的ＥＳＴ开发而来的ＥＳＴ－ＳＳＲ标记比传统ＳＳＲ标记更保守，通用性更强。
３９第２１卷第５期 草业学报２０１２年
３．２　特异性条带与芒属资源评价
当前中国芒属植物中的４个主要类群：芒、五节芒、荻和南荻是最为引人关注的，因为它们生物量大、分布广，
应用潜力大，尤其是南荻植株高大且冬季枯黄，极具应用潜力。本研究揭示的这些特异性条带将有可能为中国芒
属种质资源的评价、分子辅助育种提供可靠依据。比如，本研究表明在上述８０份芒属的供试材料中，引物ｐ
ｍｍｃ０１３２扩增条带中的１７０ｂｐ这条带是仅荻与南荻共有的条带，引物ｐｕｍｃ１５４２扩增条带中的１３０ｂｐ这条带
是仅芒与五节芒共有的条带，引物ｐｂｎｌｇ１２５扩增条带中的２８０ｂｐ、引物ｐｕｍｃ２０３６扩增条带中的１５０ｂｐ、引物
ＣＡ０６９３４３ｂ扩增条带中的３７０ｂｐ等这些条带是仅芒、五节芒、荻和南荻共有的条带。这些条带将为这些类群的
杂交种鉴定及种质资源评价提供帮助。而对于那些中国芒属植物７个种类都共有的带，可以利用它们来帮助鉴
定一些疑似材料是否属于芒属。
３．３　芒属种质资源的遗传多样性
芒属种质资源及其遗传多样性是芒属能源作物遗传改良和新品种育种的基础。对中国芒属植物遗传多样性
的评价有利于了解其遗传背景、促进有利基因发掘、鉴定最优亲本组合。本研究结果初步表明中国芒属植物种质
资源蕴含比较丰富的遗传多样性。同时表明，芒、五节芒、荻和南荻的相似性较高，相似度为０．７８０～０．９８８，说明
它们之间的遗传距离较近，遗传基础可能相对较为狭窄。而尼泊尔芒、双药芒、红山茅同这４个大家平常都比较
容易关注到的种类的遗传距离却较远。它们主要分布于西南高山地区，具有一定程度的耐寒和抗旱特性。建议
在选育适宜作为能源作物开发利用的芒属新品种时，亲本选配可以适当考虑这三者，以拓宽遗传基础，发掘有利
基因，促进中国芒属植物的遗传改良和新品种培育。
致谢：感谢美国Ｉｌｉｎｏｉｓ大学的Ｅｒｉｋ博士提供了甘蔗ＥＳＴ－ＳＳＲ引物序列。
参考文献：
［１］　ＣｌｉｆｔｏｎＢｒｏｗｎＪ，ＣｈｉａｎｇＹＣ，ＨｏｄｋｉｎｓｏｎＴＲ．Ｍｉｓｃａｎｔｈｕｓ：ｇｅｎｅｔｉｃｒｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄｂｒｅｅｄｉｎｇｐｏｔｅｎｔｉａｌｔｏｅｎｈａｎｃｅｂｉｏｅｎｅｒｇｙ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ａ］．Ｉｎ：ＶｅｒｍｅｒｒｉｓＷ．ＧｅｎｅｔｉｃＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆＢｉｏｅｎｅｒｇｙＣｒｏｐｓ［Ｍ］．ＮｅｗＹｏｒｋ：ＳｐｒｉｎｇｅｒＳｃｉｅｎｃｅ，Ｂｕｓｉｎｅｓｓ
Ｍｅｄｉａ，２００８：２７３２９４．
［２］　ＳａｎｇＴ，ＺｈｕＷＸ．Ｃｈｉｎａ’ｓｂｉｏｅｎｅｒｇｙｐｏｔｅｎｔｉａｌ［Ｊ］．ＧＣＢＢｉｏｅｎｅｒｇｙ，２０１１，３（２）：７９９０．
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犛狋狌犱狔狅狀狋犺犲狋狉犪狀狊犳犲狉犪犫犻犾犻狋狔狅犳犿犪犻狕犲犛犛犚犪狀犱狊狌犵犪狉犮犪狀犲犈犛犜－犛犛犚犿犪狉犽犲狉狊狋狅犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊（犘狅犪犮犲犪犲）
ＬＵＹｕｆｅｉ，ＪＩＡＮＧＪｉａｎｘｉｏｎｇ，ＹＩＺｉｌｉ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊ｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓａｒｅｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｔｏｂｒｅｅｄｉｔｓｎｅｗｖａｒｉｅｔｉｅｓｂｅｔｔｅｒｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｂｅｉｎｇ
ｕｔｉｌｉｚｅｄａｓｅｎｅｒｇｙｃｒｏｐ．Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｓｃｒｅｅｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｓｐｒｉｏｒｔｏｔｈｅｒｅｌｅｖａｎｔ
ｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｆｏｒ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊，ｗｅｓｔｕｄｉｅｄｔｈｅｔｒａｎｓｆｅｒａｂｉｌｉｔｙｏｆ３８２ｍａｉｚｅＳＳＲｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓａｎｄ１００ｓｕｇａｒｃａｎｅ
ＥＳＴ－ＳＳＲｐｒｉｍｅｒｓｐａｉｒｓｕｓｉｎｇｔｈｅａｃｃｅｓｓｉｏｎｓｆｒｏｍａｌｔｈｅ７ｓｐｅｃｉｅｓｏｆ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊ｉｎＣｈｉｎａ．Ｔｈｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇｉｎ
ｃｌｕｄｅｄｔｗｏｓｅｃｔｉｏｎｓ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｃｒｅｅｎｉｎｇｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｏｓｅｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓｗｈｉｃｈｗｅｒｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ
ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｏｂｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅ，ａｎｄｔｈｅＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒａｌ８４ａｃｃｅｓｓｉｏｎｓｕｓｉｎｇｔｈｅｓｅｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓ．Ｔｈｅｎｕｍ
ｂｅｒｏｆ３９（１０．２１％）ｍａｉｚｅＳＳＲｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓａｎｄ１３（１３．００％）ｓｕｇａｒｃａｎｅＥＳＴ－ＳＳＲｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ
ｔｈｒｏｕｇｈｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｈｏｓｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｂａｎｄｓｗｅｒｅｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｓｔｒｏｎｇａｎｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ，ａｎｄ
ｃｏｕｌｄｂｅｅｘａｃｔｌｙｓｃｏｒｅｄａｃｒｏｓｓａｌ８４ａｃｃｅｓｓｉｏｎｓ．Ａｔｏｔａｌｏｆ２５０ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｂａｎｄｓｗｅｒｅｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｔｈｅ５２
ｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓ，ｏｆｗｈｉｃｈ２２０ｂａｎｄｓｗｅｒｅｐｒｏｄｕｃｅｄｉｎ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊．Ｏｆｔｈｅ２２０ｂａｎｄｓ，２０６（９３．６４％）ｗｅｒｅｐｏｌｙ
ｍｏｒｐｈｉｃｗｉｔｈａｎａｖｅｒａｇｅｏｆ３．９６，ａｎｄｓｏｍｅｏｆｔｈｅｍｗｅｒｅｓｐｅｃｉｆｉｃ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｏｎｌｙｐｏｓｓｅｓｓｅｄｂｙｓｏｍｅｔａｘｏｎｏｒ
ｔａｘａｉｎｔｈｅｇｅｎｕｓ．Ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ（ＧＳ）ｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ０．５８８ｔｏ０．９８８ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅａｌ２５０ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｂａｎｄｓ．ＵＰＧＭＡｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊ｉｎＣｈｉｎａｗａｓｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｗｏｇｒｏｕｐｓｏｎｔｈｅｌｅｖｅｌ
ｏｆＧＳ＝０．６８．Ｔｈｅｆｏｒｍｅｒｃｏｎｔａｉｎｅｄ犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊，犕．狀狌犱犻狆犲狊，ａｎｄ犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊，ａｎｄｔｈｅｌａｔｔｅｒ
ｃｏｍｐｒｉｓｅｄｏｆ犕．狊犻狀犲狀狊犻狊，犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊，犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊，ａｎｄ犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊．ＯｎｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＧＳ＝
０．８２，犕．狊犻狀犲狀狊犻狊ａｎｄ犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｄｏｎｅｓｕｂｇｒｏｕｐ，ａｎｄ犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊ａｎｄ犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊
ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｄａｎｏｔｈｅｒｓｕｂｇｒｏｕｐ．ＯｎｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＧＳ＝０．８８，犕．狊犻狀犲狀狊犻狊ａｎｄ犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊ｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｗｉｔｈ
ｅａｃｈｏｔｈｅｒ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗａｓｒｉｃｈｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｍｏｎｇａｌｔｈｅｔａｘａｏｆ
犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊ｉｎＣｈｉｎａ．Ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙａｍｏｎｇ犕．狊犻狀犲狀狊犻狊，犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊，犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊，ａｎｄ犕．犾狌
狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊ｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ０．７８０ｔｏ０．９８８，ｗｈｉｃｈｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｍａｌｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｍ．
Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｌｏｎｇｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｇｒｏｕｐｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆ犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊，犕．狀狌
犱犻狆犲狊，ａｎｄ犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊，ａｎｄｔｈｅｏｔｈｅｒｇｒｏｕｐｃｏｍｐｒｉｓｅｄｏｆ犕．狊犻狀犲狀狊犻狊，犕．犳犾狅狉犻犱狌犾狌狊，犕．狊犪犮犮犺犪狉犻犳犾狅狉狌狊，
ａｎｄ犕．犾狌狋犪狉犻狅狉犻狆犪狉犻狌狊，ｗｈｉｃｈｉｍｐｌｉｅｄｔｈａｔ犕．狀犲狆犪犾犲狀狊犻狊，犕．狀狌犱犻狆犲狊，ａｎｄ犕．狆犪狀犻犮狌犾犪狋狌狊ｓｈｏｕｌｄｂｅｇｉｖｅｎ
ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｗｈｅｎｓｅｌｅｃｔｉｎｇｐａｒｅｎｔｓｉｎｔｈｅｃｏｕｒｓｅｏｆｇｅｎｅｔｉｃｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔａｎｄｂｒｅｅｄｉｎｇｏｆ犕犻狊犮犪狀狋
犺狌狊ｆｒｏｍＣｈｉｎａｉｎｏｒｄｅｒｔｏｂｒｏａｄｅｎｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｂａｓｉｓｏｆｖａｒｉｅｔｉｅｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ＳＳＲ；ＥＳＴ－ＳＳＲ；ｔｒａｎｓｆｅｒａｂｉｌｉｔｙ；犕犻狊犮犪狀狋犺狌狊；ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
５９第２１卷第５期 草业学报２０１２年