全 文 ：山羊瘤胃和粪便中厌氧真菌的分离及
发酵粗饲料能力初探
毛胜勇１，姚文１，陈勇２
（１．南京农业大学动物科技学院，江苏 南京２１００９５；２．新疆农业大学动物科学学院，新疆 乌鲁木齐８３００５２）
摘要：本研究旨在分离山羊瘤胃及粪便中的厌氧真菌，并比较其对粗饲料的降解能力。分别采集２头饲喂青干草
的南京本地山羊的瘤胃液与新鲜粪便，采用厌氧培养法，进行厌氧真菌的分离鉴定。实验从山羊瘤胃中分离到４
类厌氧真菌，分别归于犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓、犘犻狉狅犿狔犮犲狊、犗狉狆犻狀狅犿狔犮犲狊和犃狀犪犲狉狅犿狔犮犲狊属；从粪便中分离到二类厌氧真
菌，归于犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓和犘犻狉狅犿狔犮犲狊属。以稻草、麦秸、玉米秸为底物，对所分离的代表性厌氧真菌进行发酵降
解试验。结果表明，所获菌株对稻草秸的干物质降解率大于３０％，而对玉米秸的降解率低于２５％。与所分离的瘤
胃厌氧真菌相比，来源于粪便的厌氧真菌发酵上述３种底物时，所得的产气量和表观干物质消失率均较低。结果
说明，本研究分离所得的厌氧真菌对不同底物的降解能力不一致，这可能与菌株自身的理化特性及底物的营养组
成不同有关。
关键词：山羊；厌氧真菌；体外发酵
中图分类号：Ｓ８２７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４５７５９（２０１４）０４０３５７０５
犇犗犐：１０．１１６８６／ｃｙｘｂ２０１４０４４３
自Ｏｒｐｉｎ［１］首次报道反刍动物瘤胃内存在有厌氧真菌，迄今为止，已在许多反刍动物及单胃草食动物的消化
道及粪便中分离到多种厌氧真菌，共计５个属１０余个种之多［２］。大量研究表明，瘤胃真菌不仅可以通过假根以
机械方式刺穿植物细胞壁，而且可分泌高活性的纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，并以化学方式作用于一些难
降解的植物组织，如坚固的厚壁组织和维管束组织等，提高其消化率［３４］。瘤胃真菌这种能产生高活性酶的特点，
已引起包括酶制剂产业在内的研究人员的广泛兴趣。但要对其进行系统的研究，必须在获取大量菌种的前提下
才能进行，而在此方面，目前国内外许多实验室还是以瘤胃瘘管的方式通过采集瘤胃内容物进行分离，以获取菌
种，这种方式对动物的生产性能和健康带来的严重伤害是显而易见的，相比而言，以粪便作为菌源来分离厌氧真
菌可消除这些弊端，因而一直为众多学者所推崇。但迄今为止，有关粪便中的厌氧真菌是否具有与瘤胃内厌氧真
菌相似的降解粗饲料的能力却未见报道。为阐明该问题，作者分离鉴定了本地（南京郊区）山羊瘤胃液及其粪便
中的厌氧真菌，并以本地（南京郊区）稻草、麦秸及玉米秸为底物，对其降解粗饲料的能力进行了比较。
１ 材料与方法
１．１ 实验动物与培养器材
本实验于２０１２年１－１２月进行，实验重复３次。试验选用２头装有永久性瘤胃瘘管的本地山羊［（２５±３．４）
ｋｇ］。山羊日粮为青干草，单栏饲喂，自由采食与饮水。ＣＯ２ 气源采用高纯度ＣＯ２。培养管及发酵瓶选用特制耐
压玻璃试管，配有丁基胶塞和铝盖，密封良好。
１．２ 培养基配制
基础培养基、液体培养基与固体培养基参照Ｏｒｐｉｎ［１］方法配制。其中厌氧真菌分离纯化所用液体培养基以
１％（ｗ／ｖ）葡萄糖为碳源，配制滚管用的固体培养需加入２％（ｗ／ｖ）的琼脂。所有培养基均经高压灭菌（１２１℃，１５
第２３卷 第４期
Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．４
草 业 学 报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
３５７－３６１
２０１４年８月
收稿日期：２０１３０７０５；改回日期：２０１３１１０８
基金项目：新疆维吾尔自治区科技支疆项目（２０１１９１１３８）资助。
作者简介：毛胜勇（１９７３），男，四川仪陇人，副教授。
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｍａｏｓｈｅｎｇｙｏｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
ｍｉｎ）。
１．３ 瘤胃液及粪便的采集与制备
饲喂前１ｈ用真空负压装置采集瘤胃液２００ｍＬ左右，４层纱布过滤后置于充满ＣＯ２ 的发酵瓶中，而后置于
３９℃的温水中；实验同时收集新鲜粪便，装入充满ＣＯ２ 的发酵瓶中带回。
１．４ 瘤胃及粪便中厌氧真菌的分离
取瘤胃内容物１０ｍＬ及２０ｇ新鲜粪便，分别在含有抗生素（青霉素，１６００单位／ｍＬ；链霉素，１６００单位／ｍＬ）
的液体厌氧培养基中系列稀释至１０－８，用吸液泵于各稀释度分别吸取７ｍＬ注入经高压灭菌（１２１℃，１５ｍｉｎ）后
的厌氧液体培养管中（稻草浓度为０．５％，４０℃预热），每稀释度为３管，将各培养管放入恒温箱中，３９℃培养２
周。将制好的固体培养基煮沸融化后置于４０℃水浴中，选取在瘤胃及粪便厌氧真菌计数期间已用稻草浮起的培
养管，用注射器分别吸取０．０５，０．１０ｍＬ的培养液注入液化固体培养基（抗生素浓度与计数时相同）中，迅速摇匀
后于冰水中滚管，再放入３９℃的恒温培养箱中培养。经３ｄ培养后，用无菌特制接种针挑取滚管中带有琼脂的单
个典型菌落迅速移入５ｍＬ液体培养管中（３９℃预热），３９℃下培养３～４ｄ后，再次滚管，如此多次重复，直至滚管
中所有菌落形态一致。
１．５ 厌氧真菌的形态观察
采用倒置显微镜，根据菌丝体形成的孢子囊的个数，区分单中心、多中心真菌的单个菌落，同时取典型菌落的
培养液置于载玻片上，用相差显微镜直接观察瘤胃液及粪便中厌氧真菌的菌丝、孢子囊及孢子形态，照相。
１．６ 分离菌株的发酵培养
根据Ｚｈｕ［５］的方法，准确称取１．０ｇ粉碎的稻草、麦秸及玉米秸（直径小于５ｍｍ），放入容量为１６０ｍＬ的血
清瓶中，厌氧条件下装入９０ｍＬ无氧液体培养基，以丁基塑塞和铝圈密封，１２１℃下灭菌１５ｍｉｎ。试验前，每瓶按
预定比例（青霉素，１６００单位／ｍＬ；链霉素，１６００单位／ｍＬ）注入抗生素，３９℃下预热过夜，每３瓶（３个重复）为１
个处理，每处理接种１种已生长３ｄ的菌种混合悬浮液，接种量为１０ｍＬ。以不接种厌氧真菌菌液的发酵瓶为对
照；对照组的底物与培养基和处理组相同，但对照瓶注射１０ｍＬ无菌厌氧蒸馏水。所有处理和对照在３９℃下静
止培养１９６ｈ。
１．７ 发酵时产气量及发酵后培养物处理及干物质测定
产气量测定参照艾丽霞等［６］的方法。发酵结束后，各培养瓶中的培养液转移至已称重的过滤坩锅，经真空抽
滤后，放入已预热至１０５℃的烘箱内，烘至恒重；而后以对照作校正，确定稻草、麦秸及玉米秸的降解率。
１．８ 数据处理
所得数据经Ｅｘｃｅｌ初步整理后，利用ＳＰＳＳ（１５．０）单因子方差分析中ＬＳＤ法进行统计分析。数据以平均
值±标准差表示，显著性水平置于０．０５。
２ 结果与分析
２．１ 厌氧真菌的分离鉴定
利用一系列严格的厌氧技术，经过反复多次的分离纯化，从山羊瘤胃液中分离到３０株厌氧真菌，这些菌归为
４类；从粪便中分离到１５株厌氧真菌，这些菌株归属２类；归类参照 Ｈｏ和Ｂａｒｒ［２］厌氧真菌分类法。从各类菌中
选择具有代表性的菌株，在倒置显微镜及常规光学显微镜下观察所得的菌落、细胞形态和菌丝体发育状况，结果
分述如下（图１）。
Ｆ１：粪便厌氧真菌。单中心类型。菌落呈放射状，菌丝略有弯曲，较稀疏、有分叉，菌体较大；孢子多为椭圆
形，多鞭毛，鞭毛１２～１４根，孢子在固体培养基中以同心圆状形式扩散开来；孢子囊有球形、椭圆形、圆柱形；囊柄
长，与假根相连，假根系统发达，为犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓属菌。
Ｆ２：粪便厌氧真菌。单中心类型。菌落明显小于Ｆ１ 菌株，菌丝直、密；孢子呈椭圆形或球形，单鞭毛，孢子在
固体培养基中以放射状形式扩散开来；孢子囊呈球形，囊柄长，与假根相连，假根系统不发达，为犘犻狉狅犿狔犮犲狊属
菌。
８５３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．４
Ｒ１：瘤胃厌氧真菌。单中心类型。菌落呈放射状，菌丝直、较细、有分枝、在菌体周围分布均匀；孢子多为椭
圆形，多鞭毛，鞭毛７～８根，成熟孢子囊呈球形；有一明显的主根与假根相连，假根系统非常发达，为犖犲狅犮犪犾犾犻
犿犪狊狋犻狓属菌。
Ｒ２：瘤胃厌氧真菌。单中心类型。菌落小、无明显孢子囊；菌丝稀、较细、弯曲、有分枝，由中心处生长多处假
根；孢子为椭圆形，多鞭毛，鞭毛５～７根；成熟孢子囊呈球形，有一明显的主根与假根相连，假根系统较发达，为
犗狉狆犻狀狅犿狔犮犲狊属菌。
Ｒ３：瘤胃厌氧真菌。单中心类型。菌落呈放射状，菌丝直、有分枝，菌丝中有明显的主根，且较Ｒ１ 丰富；孢子
为圆形，单鞭毛，鞭毛２～４根，成熟孢子囊呈球形；有一明显“主根”直接与假根相连，由“主根”逐渐分枝，依次形
成各级较细的假根，为犘犻狉狅犿狔犮犲狊属菌。
Ｒ４：瘤胃厌氧真菌。多中心类型。孢子球形，单鞭毛，孢子囊未成熟时椭圆形、球形，成熟孢子囊呈梭形，囊
顶端有一尖端突起。菌丝体多分枝，菌丝体有粗细之分，粗菌丝含多个细胞核，菌丝呈分明分节现象。为
犃狀犪犲狉狅犿狔犮犲狊属菌。
图１ 所分离厌氧真菌菌株的形态与游动孢子形态
犉犻犵．１ 犜犺犲犿狅狉狆犺狅犾狅犵狔狅犳狋犺犲犻狊狅犾犪狋犲狊狅狉狕狅狅狊狆狅狉犲
Ｆ１Ｓ：Ｆ１的菌体形态；Ｆ１Ｍ：Ｆ１ 游动孢子形态，其余类似。Ｆ１Ｓ：ＴｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆＦ１ｉｓｏｌａｔｅｓ（×５００）；Ｆ１Ｍ：ＴｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆＦ１ｚｏｏｓｐｏｒｅ
（×５００），ｔｈｅｒｅｓｔｏｆｔｈｅｓｉｍｉｌａｒ．
２．２ 山羊瘤胃及粪便中厌氧真菌对稻草、麦秸和玉米秸降解能力的比较
选择上述各属的代表性菌株进行发酵，结果见表１。瘤胃厌氧真菌株对上述３种底物的降解能力显著高于
粪便中的厌氧真菌（犘＜０．０５）。各菌株对不同底物的降解能力不尽相同，其中４株瘤胃真菌发酵稻草后的表观
干物质降解率无显著差异（犘＞０．１０）；但 Ｒ２ 菌株对麦秸的降解能力最低，显著低于其余３株瘤胃真菌（犘＜
０．０５）；Ｒ４ 菌株对玉米秸的降解能力最低，仅１９．６％。各菌株发酵稻草的总产气量均值在１６１～２０２ｍＬ之间，
其中以Ｒ３ 的总产气量最高，Ｆ１ 最低；各菌株发酵麦秸的总产气量均值在１４７～１８０ｍＬ之间，其中以Ｒ３ 的总产
气量为最高，Ｆ２ 最低；各菌株发酵玉米秸的总产气量在１１５～１５１ｍＬ之间，其中以Ｒ１ 的总产气量为最高，Ｆ１ 最
低。
９５３第２３卷第４期 草业学报２０１４年
表１ 分离菌株对稻草、麦秸及玉米秸发酵活力的比较
犜犪犫犾犲１ 犜犺犲犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀狋狅狋犺犲狉犻犮犲狊狋狉犪狑，狑犺犲犪狋狊狋狉犪狑犪狀犱犮狅狉狀狊狋狉犪狑犳狅狉狋犺犲犻狊狅犾犪狋犲狊
菌株
Ｓｔｒａｉｎ
总产气量Ｔｏｔａｌｇａｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（ｍＬ）
稻草 Ｒｉｃｅｓｔｒａｗ 麦秸 Ｗｈｅａｔｓｔｒａｗ 玉米秸Ｃｏｒｎｓｔｒａｗ
表观干物质降解率Ａｐｐａｒｅｎｔｄｒｙｍａｔｔｅｒｌｏｓｓ（％）
稻草 Ｒｉｃｅｓｔｒａｗ 麦秸 Ｗｈｅａｔｓｔｒａｗ 玉米秸Ｃｏｒｎｓｔｒａｗ
Ｆ１ １６１．３４±１．８９ｄ １５４．７８±５．０５ｃｄ １２２．４７±４．８６ｃ ３４．２±０．１５ｂ ２５．９±０．１１ｅ １４．１±０．１８ｃ
Ｆ２ １７３．６９±６．２２ｃ １４７．３９±３．３３ｅ １１５．９０±４．４３ｄ ３５．２±０．０２ｂ ２９．３±０．０７ｄ １３．７±０．１２ｃ
Ｒ１ １８８．０４±６．９９ｂ １８０．０８±２．３４ａ １５１．２５±３．３０ａ ３７．０±０．０９ｂ ３５．０±０．０５ａ ２４．４±０．０５ａ
Ｒ２ １９２．６８±１．８４ｂ １５９．９６±４．７０ｃ １５０．５６±１．６８ａ ３７．５±０．０１ａ ３２．１±０．１０ｃ ２２．１±０．２４ａｂ
Ｒ３ ２０２．７１±６．７８ａ １８０．３３±３．６０ａ １４０．９９±２．２１ｂ ３８．６±０．０３ａ ３４．６±０．１９ｂ ２２．４±０．１０ａｂ
Ｒ４ １８７．３２±３．９８ｂ １６２．１９±２．３０ｂ １３６．３２±２．２１ｂ ３８．３±０．１１ａ ３２．７±０．１８ｃ １９．６±０．２８ｂ
注：同列数字字母不同者差异显著（犘＜０．０５）。
Ｎｏｔｅ：Ｖａｌｕｅｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（犘＜０．０５）．
３ 讨论
由于厌氧真菌的核糖体数据库信息不足，因而当前对厌氧真菌的分类依据仍主要基于孢子鞭毛数目、孢子囊
形态、菌丝和孢子囊柄的特征，而这种分类法一般仅能鉴定到属，因而本文对所分离的厌氧真菌仅鉴定到属［７８］。
Ｔｈｅｏｄｏｒｏｕ等［９］从荷斯坦奶牛粪便中分离所得的厌氧真菌皆属单中心厌氧真菌，主要包括犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓、犘犻
狉狅犿狔犮犲狊和犆犪犲犮狅犿狔犮犲狊属。Ｏｒｐｉｎ和Ｊｏｂｌｉｎ［１０］从山羊瘤胃也分离到类似于犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓、犘犻狉狅犿狔犮犲狊、犗狉狆犻
狀狅犿狔犮犲狊菌株。Ｈｏ等［１１］从山羊瘤胃内分离到一株犘犻狉狅犿狔犮犲狊狊狆犻狉犪犾犻狊。本试验从饲喂青干草的山羊粪便中分
离到２类厌氧真菌，皆为单中心，归属 犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓和犘犻狉狅犿狔犮犲狊，从瘤胃液中分离到４类厌氧真菌，分属
犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓、犘犻狉狅犿狔犮犲狊、犗狉狆犻狀狅犿狔犮犲狊和犃狀犪犲狉狅犿狔犮犲狊。各厌氧真菌的生长特性、孢子鞭毛数目、孢子囊形
态、菌丝和孢子囊柄的特征基本与上述报道相似。
厌氧真菌对底物的降解能力除与菌株本身有关外，还受培养条件、发酵底物等多种因素的影响。对菌株自身
而言，厌氧真菌的来源及地区性能影响厌氧真菌降解底物植物片段的能力［５，１２］。本试验结果表明，从粪便中分离
到的厌氧真菌对稻草、麦秸及玉米秸的降解率皆低于从瘤胃中分离所得的厌氧真菌，该结果也进一步佐证了上述
报道。其原因可能在于瘤胃真菌处于高度竞争的瘤胃微生态环境中，一直保持着较强的活力，而粪便中厌氧真菌
孢子处于休眠期，活力相对较弱，这种活力上的不同也最终导致两者在发酵底物能力上的相异。本研究表明，分
离所得的厌氧真菌对不同底物的降解率不一致，这种不一致可能与底物的结构组成及菌株自身分泌的酶类型有
关。本实验所有３种底物中，玉米秸的木质素含量最高。而有报道表明，厌氧真菌发酵不同底物时分泌的多糖降
解酶的活性与菌株本身及底物种类有关［１３］。同时其他报道也表明，许多多糖降解酶的分泌量取决于其基因型与
底物组成两方面因素［１４］。因而当同一株厌氧真菌发酵不同底物时，其产生的降解该底物的酶的活力与数量不一
致，由此出现本研究中所观察到的同一株厌氧真菌对不同底物的降解能力不一致的现象。
综上所述，本研究从山羊瘤胃与粪便中分离获得４类厌氧真菌，所获菌株对稻草具有较强的降解能力，但对
玉米秸的降解能力较低。但由于本研究主要侧重于这些菌株的分离报道与发酵粗饲料能力的初步探索，这些菌
株的酶学特性及其基因组信息等尚需进一步研究。
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ｃｅｎｔｒｉｃａｎｄｐｏｌｙｃｅｎｔｒｉｃａｎａｅｒｏｂｉｃｒｕｍｉｎａｌｆｕｎｇｉ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８９，５５：１０６６１０７３．
［１３］ ＨｏＹＷ，ＷｏｎｇＮ，ＡｂｄｕｌａｈＨ，犲狋犪犾．Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｓｏｍｅｎｅｗｓｐｅｃｉｅｓｏｆａｎａｅｒｏｂｉｃｒｕｍｅｎｆｕｎｇｉｆｒｏｍ Ｍａｌａｙｓｉａ［Ｊ］．
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ｒａｎｇｅｏｆｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ［Ｊ］．ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８７，３３（５）：４１８４２６．
犐狊狅犾犪狋犻狅狀狅犳犪狀犪犲狉狅犫犻犮犳狌狀犵犻犳狉狅犿狋犺犲狉狌犿犲狀犪狀犱犳犪犲犮犲狊狅犳犵狅犪狋犪狀犱犮狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅犳
犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀犪犮狋犻狏犻狋狔犫犲狋狑犲犲狀犻狊狅犾犪狋犲狊犻狀狏犻狋狉狅
ＭＡＯＳｈｅｎｇｙｏｎｇ１，ＹＡＯ Ｗｅｎ１，ＣＨＥＮＹｏｎｇ２
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，
Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＸｉｎｊｉａｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ８３００５２，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：ＴｈｅａｎａｅｒｏｂｉｃｆｕｎｇｉｉｎｒｕｍｅｎｆｌｕｉｄａｎｄｆａｅｃｅｓｏｆｔｗｏｌｏｃａｌｇｏａｔｓｉｎＮａｎｊｉｎｇａｒｅａｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄ．Ｔｈｅ
ｇｅｎｅｒａ犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓，犘犻狉狅犿狔犮犲狊，犗狉狆犻狀狅犿狔犮犲狊ａｎｄ犃狀犪犲狉狅犿狔犮犲狊ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｒｕｍｅｎｌｉｑｕｉｄｏｆ
ｇｏａｔ，ａｎｄｔｈｅｇｅｎｅｒａ犖犲狅犮犪犾犾犻犿犪狊狋犻狓ａｎｄ犘犻狉狅犿狔犮犲狊ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆｒｅｓｈｆａｅｃｅｓ．Ｔｈｅａｂｉｌｉｔｙｔｏｄｅｇｒａｄｅ
ｒｉｃｅｓｔｒａｗ，ｗｈｅａｔｓｔｒａｗａｎｄｃｏｒｎｓｔａｌｋｂｙｔｈｅｓｅｉｓｏｌａｔｅｓｗａｓｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｔｈｅｄｅｇｒａｄａｂｉｌｉｔｙｏｆｒｉｃｅｓｔｒａｗｂｙａｌｉ
ｓｏｌａｔｅｓｗａｓｇｒｅａｔｅｒｔｈａｎ３０％，ｗｈｉｌｅｔｈａｔｏｆｃｏｒｎｓｔｒａｗｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎ２５％．Ｗｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｓ
ｆｒｏｍｒｕｍｅｎｌｉｑｕｉｄ，ｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｂｙｓｐｅｃｉｅｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｆａｅｃｅｓｈａｄａｌｏｗｅｒｔｏｔａｌｇａｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｄｅｇｒａｄ
ａｂｉｌｉｔｙｏｆｄｒｙｍａｔｔｅｒｗｈｅｎｔｈｅｔｈｒｅｅｆｏｒａｇｅｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｏｍｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｄｅｇｒａｄ
ａｂｉｌｉｔｙｏｆｆｏｒａｇｅｂｙｔｈｅｓｅｏｒｇａｎｉｓｍｓｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｂｅｅｘｐｌａｉｎｅｄｂｙｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｈｒｅｅｓｕｂ
ｓｔｒａｔｅｓａｎｄｂｙｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｈｅｓｅｉｓｏｌａｔｅｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｇｏａｔ；ａｎａｅｒｏｂｉｃｆｕｎｇｉ；ｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ
１６３第２３卷第４期 草业学报２０１４年