全 文 ：书基于犃犉犔犘的燕麦遗传多样性研究
刘欢１，慕平２，赵桂琴１
（１．甘肃农业大学草业学院，甘肃 兰州７３００７０；２．甘肃农业大学农学院，甘肃 兰州７３００７０）
摘要：采用ＡＦＬＰ分子标记技术对来自中国、加拿大、澳大利亚和欧洲等国家的３４个有代表性的饲用燕麦品种及８
个裸燕麦品种进行遗传多样性分析，从３０对ＥｃｏＲＩ／ＭｓｅＩ引物组合中筛选出５对多态性和清晰度较高的引物组
合，共获得２６８条带，其中多态带１８５条，平均多态性检出率为６９．０％，ＥＡＧＧ／ＭＣＴＡ的扩增效率最高达７８．６％。
由Ｎｅｉ’ｓ指数（ｈ）估测，供试品种平均变异为０．１６６４，平均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计值为０．２２０６；４２个燕麦品种
间遗传相似系数为０．４８８１～０．９８８０，遗传距离的变化范围是０．０１２０～０．７１７２。通过 ＡＦＬＰ数据构建燕麦的
ＵＰＧＭＡ系统树，在遗传相似系数０．７４８水平，所有供试品种可聚为６类。皮燕麦与裸燕麦在遗传相似度０．５９处
被明显分为２类，与形态学分类结果一致。由ＡＦＬＰ揭示的品种间遗传关系与品种实际来源基本一致，品种的遗
传距离与其地理分布关系密切。
关键词：燕麦；遗传多样性；ＡＦＬＰ；聚类分析
中图分类号：Ｓ５４３＋．７０３．２；Ｑ９４３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２００８）０６０１２１０７
　 燕麦（犃狏犲狀犪狊犪狋犻狏犪）是禾本科早熟禾亚科燕麦属植物，主要分布在欧洲、北美、澳大利亚、中国等国，是一种
粮草兼用作物。我国燕麦栽培历史悠久，研究主要侧重于燕麦栽培、引种、生产性能等方面［１～４］，遗传多样性方面
的研究较少。遗传多样性是品种选育的基础，我国对燕麦遗传多样性研究主要借助形态和农艺性状、核型分析、
生化标记等方法［５～１０］，利用分子标记研究燕麦遗传多样性在国内尚未见报道。
扩增片断长度多态性（ＡＦＬＰ）以其多态性强、可靠性和重复性高，快速高效、ＤＮＡ用量少等优点，被认为是
迄今为止最有效的分子标记技术之一［１１］。目前，ＡＦＬＰ技术已广泛用于小麦（犜狉犻狋犻犮狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿）、水稻（犗狉狔狕犪
狊犪狋犻狏犪）、玉米（犣犲犪犿犪狔狊）等多种农作物和蔬菜、林木、花卉以及动物、微生物的遗传育种、遗传多样性分析、物种
亲缘关系、种质鉴定及进化分类等方面的研究［１２～１４］，并逐步渗透到草业科学领域［１５，１６］。本研究采用ＡＦＬＰ分子
标记技术对４２份燕麦的基因组ＤＮＡ进行了多态性扩增，建立了燕麦ＡＦＬＰ体系，旨在从分子水平探讨国内外
燕麦品种间的遗传距离与亲缘关系，也为我国燕麦资源的收集保存、分类鉴定与品种选育提供理论依据。
１　材料与方法
１．１　材料
试验材料选用来自中国、日本、加拿大、澳大利亚和欧洲等不同国家和地区的３４个饲用燕麦及８个裸燕麦
（犃．狀狌犱犪）品种，具体来源见表１。
１．２　基因组ＤＮＡ提取
用改良ＣＴＡＢ（ｃｅｔｙｌｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ）法提取植物总ＤＮＡ［１７］。
１．３　ＡＦＬＰ分析
ＤＮＡＴａｑ聚合酶，Ｔ４ＤＮＡ连接酶，Ｍｇ２＋，ｄＮＴＰｓ均购自ＴａＫａＲａ公司，ＡＦＬＰ引物及接头由上海生物工
程有限公司合成，接头为退火合成的双链Ｅａｄ、Ｍａｄ，选取１３条引物分别为ＥｃｏＲＩ＋（Ａ、ＡＣ、ＡＣＡ、ＡＧＧ、
ＡＡＣ、ＡＡＧ），ＭｓｅＩ＋（Ｃ、ＣＡＣ、ＣＴＡ、ＣＴＧ、ＣＡＧ、ＣＴＡ、ＣＴＣＧ），交叉配比共３０对引物组合进行预扩增与选择
性扩增。
第１７卷　第６期
Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．６
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
１２１－１２７
１２／２００８
 收稿日期：２００７１２２４；改回日期：２００８０４１４
基金项目：行业科研专项（ｎｙｈｙｚｘ０７００９０６），草业生态系统教育部重点实验室（ｃｙｇｇ２００６０４）和甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室
（２００６３）资助。
作者简介：刘欢（１９８２），女，山东招远人，硕士。
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｏｇ０７＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ
表１　试验材料及其来源
犜犪犫犾犲１　犕犪狋犲狉犻犪犾狊犪狀犱狊狅狌狉犮犲
代号Ｃｏｄｅ 种类Ｓｐｅｃｉｅｓ 拉丁名Ｌａｔｉｎｎａｍｅ 品种Ｖａｒｉｅｔｙ 来源Ｓｏｕｒｃｅ
１ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 巴燕３号Ｂａｙａｎ３ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
２ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 青引１号 Ｑｉｎｇｙｉｎ１ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
３ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 青引２号Ｑｉｎｇｙｉｎ２ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
４ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 黄燕麦 Ｙｅｌｏｗｏａｔ 甘肃Ｇａｎｓｕ，Ｃｈｉｎａ
５ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 甜燕麦Ｓｗｅａｔｏａｔ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
６ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４８５ 陕西Ｓｈａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ
７ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 冀引１号Ｊｉｙｉｎ１ 河北 Ｈｅｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ
８ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 白燕７号Ｂａｉｙａｎ７ 吉林Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ
９ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ５７ 蒙古 Ｍｏｎｇｏｌｉａ
１０ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４９ 乌克兰Ｕｋｒａｉｎｅ
１１ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４７４ 俄罗斯Ｒｕｓｓｉａ
１２ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 １４９ 俄罗斯Ｒｕｓｓｉａ
１３ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ２８ 俄罗斯Ｒｕｓｓｉａ
１４ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 初岛Ｃｈｕｄａｏ 日本Ｊａｐａｎ
１５ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４４４ 丹麦Ｄｅｎｍａｒｋ
１６ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ５３ 欧洲Ｅｕｒｏｐｅ
１７ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 １０８ 欧洲Ｅｕｒｏｐｅ
１８ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ３５３ 英国Ｅｎｇｌａｎｄ
１９ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ＴＣＯ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２０ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 Ｃａｌｉｂｒｅ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２１ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ＣＮＣ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２２ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４６０７ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２３ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４６２８ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２４ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４６３２ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２５ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ４６１７ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２６ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ＡＣ１ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２７ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ＡＣ２ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２８ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ＡＣ７ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２９ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ＡＣ５ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３０ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 ＡＣＢａｔｏｎ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３１ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 Ｎｏｖａ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３２ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 Ｒｉｇｄｏｎ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３３ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 Ｒｏｎａｌｄ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３４ 皮燕麦 犃．狊犪狋犻狏犪 Ｂｌａｃｋｂｕｔｔ 澳大利亚Ａｕｓｔｒａｌｉａ
３５ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 Ｎａｖａｎ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３６ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 ＶＯＡ２４ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３７ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 ＮＺ３５ 新西兰ＮｅｗＺｅａｌａｎｄ
３８ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 定莜１号Ｄｉｎｇｙｏｕ１ 定西Ｄｉｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ
３９ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 定莜２号Ｄｉｎｇｙｏｕ２ 定西Ｄｉｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ
４０ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 定莜６号Ｄｉｎｇｙｏｕ６ 定西Ｄｉｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ
４１ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 坝莜１号Ｂａｙｏｕ１ 河北 Ｈｅｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ
４２ 裸燕麦 犃．狀狌犱犪 白燕２号Ｂａｉｙａｎ２ 吉林Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ
２２１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．６） １２／２００８
１．３．１　基因组ＤＮＡ的双酶切　选用２种限制性内切酶ＥｃｏＲＩ／ＭｓｅＩ，反应总体系２０μＬ。水浴３７℃７ｈ、６５℃４
ｈ。酶切产物１％琼脂糖凝胶电泳检测在１００～２０００ｂｐ内为清晰的弥散带。
１．３．２　接头连接　单链人工接头稀释至５０μｍｏｌ／Ｌ，经退火合成双链，加１ＵＴ４ＤＮＡ连接酶１６℃连接过夜。
１．３．３　ＡＦＬＰ预扩增与选择性扩增反应　反应总体系２０μＬ，其中１μＬ连接产物模板ＤＮＡ，１０μｍｏｌ／ＬＥｃｏＲＩ、
ＭｓｅＩ预扩引物各０．６μＬ，离心混匀进行ＰＣＲ反应。稀释２０倍后的预扩增产物５μＬ，５０ｎｇ／μＬＥｃｏＲＩ和 ＭｓｅＩ
选扩引物各０．８μＬ，反应总体系２０μＬ，进行ＴｏｕｃｈｄｏｗｎＰＣＲ反应。
１．３．４　扩增产物检测　６％变性聚丙烯酰胺凝胶４０Ｗ 恒功率电泳。采用Ｂｒａｎｔ银染法进行显色观察［１８］，胶版
干后扫描拍照并统计数据。
１．４　数据处理
ＡＦＬＰ是显性标记，同一对引物组合扩增产物中电泳迁移率一致的条带被认为具有同源性，按照相同移位上
有扩增带记为１，无带记为０的方法记录清晰电泳谱带，得到ＡＦＬＰ表型数据矩阵。用ＮＴＳＹＳｐｃ２．１软件进行
数据处理，采用Ｎｅｉ［１９］的方法计算遗传相似系数（ｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ）犌犛＝２犖犻犼／（犖犻＋犖犼），式中犖犻和犖犼 分别为
犻和犼两材料的总等位位点数，犖犻犼为犻和犼两材料的共有等位位点数。遗传距离（ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅ）犌犇＝１－犌犛。
利用犌犇值按非加权成对群算术平均法（ＵＰＧＭＡ）进行聚类分析，建立树状图。
２　结果与分析
２．１　燕麦ＡＦＬＰ引物对筛选
本试验预扩增反应采用ＥｃｏＲＩ＋Ａ／ＭｓｅＩ＋Ｃ的引物组合，选择性扩增反应则从３０对引物组合中筛选出５
对多态性和清晰度都较高的引物组合，扩增片段的长度为１００～１５００ｂｐ，共获得清晰可见带２６８条，其中多态带
１８５条，平均每对引物组合产生３７条带，平均多态性检出率为６９．０％（表２），可检测出变种间及变种内各品种间
的变异，且表明燕麦种质间存在丰富的遗传多样性。
表２　５对犃犉犔犘引物对４２份燕麦基因组犇犖犃扩增结果
犜犪犫犾犲２　犚犲狊狌犾狋狅犳犃犉犔犘犳狉犪犵犿犲狀狋狊犪犿狆犾犻犳犻犲犱狑犻狋犺５狆狉犻犿犲狉狆犪犻狉狊
引物组合
Ｐｒｉｍｅｒｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ
多态带数
Ｎｏ．ｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｂａｎｄｓ
总带数
ＴｏｔａｌＮｏ．ｏｆｆｒａｇｍｅｎｔｓ
多态带比率
Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｆｒａｇｍｅｎｔｓ（％）
ＥＡＧＧ／ＭＣＴＡ ６６ ８４．０ ７８．６
ＥＡＡＣ／ＭＣＴＡ ４０ ６３．０ ６３．５
ＥＡＣＡ／ＭＣＴＧ ３１ ４８．０ ６４．６
ＥＡＣＡ／ＭＣＡＣ ２８ ３７．０ ７５．７
ＥＡＧＧ／ＭＣＡＧ ２０ ３６．０ ５５．６
平均数 Ａｖｅｒａｇｅ ３７ ５３．６ ６９．０
总数 Ｔｏｔａｌ １８５ ２６８．０
５对引物组合都为Ｅ＋３／Ｍ＋３组合形式，ＥＡＧＧ／ＭＣＴＡ的扩增效率最高达７８．６％（图１），ＥＡＧＧ／Ｍ
ＣＡＧ的扩增效率最低为５５．６％，说明不同的引物组合对燕麦的扩增效果差别较大。平均多态带比率为６９．０％，
此水平的多态性与大麦（犎狅狉犱犲狌犿狏狌犾犵犪狉犲）和水稻等其他自花授粉作物相一致，说明供试燕麦品种间有等位多
态性，这些多态性多来自外部种质的引进或育种亲本的选择。
通过各个引物组合产生的多态性条带，结合各条带的分子量，建立供试材料指纹图谱数据库，可以成功地应
用品种间的鉴别。在所有位点中，共有４条单一带，这些单一带可直接用于检测ＣＮＣ、３５３、ＡＣ５及４６３２这４个
品种，通过这些带展示的纯合性，可以把这些品种从供试材料中快速准确地鉴别出来。
２．２　燕麦品种的聚类分析
Ｎｅｉ相似系数是用来比较群体或个体间相似程度的度量参数，对于品种而言，平均相似系数越高，说明相似
３２１第１７卷第６期 草业学报２００８年
程度越大，遗传背景一致性越强［１９］。４２个燕麦品种间遗传相似系数均在０．４８以上，最高为０．９８８１（巴燕３号和
黄燕麦间），最低为０．４８８１（加拿大裸燕麦ＶＯＡ２４和俄罗斯皮燕麦４７４），遗传相似系数变幅较大，主要是由于
皮燕麦与裸燕麦之间差异较大。品种间的遗传距离变化范围为０．０１２０～０．７１７２。
按ＵＰＧＭＡ方法进行聚类分析，建立聚类分支树状图（图２）。在遗传相似系数为０．５９处，３４个皮燕麦品种
与８个裸燕麦品种明显分为２类。供试品种以遗传相似系数０．７４８为分类界限，聚为６类：第Ⅰ类由１０个品种
组成，且全部为亚洲地区种植的皮燕麦品种，其中日本品种初岛独自归为一亚类。巴燕３号，黄燕麦、甜燕麦为第
２亚类；青引１号、青引２号、５７、冀引１号、４８５、白燕７号为第３亚类，分别来自我国青海、陕西、湖北、吉林四省以
及蒙古。第Ⅱ类由２１个品种组成，又分为５个亚类，第１亚类包括乌克兰品种４９、俄罗斯品种４７４、２８和１４９；第
２亚类包括丹麦４４４，加拿大品种４６０７、４６２８、４６３２、４６１７，澳大利亚品种Ｂｌａｃｋｂｕｔｔ；第３亚类包括ＴＣＯ、ＡＣ７、
ＡＣＢａｔｏｎ、Ｃａｌｉｂｒｅ、ＣＮＣ、ＡＣ１、ＡＣ２，这７个品种均为加拿大品种；Ｒｉｇｄｏｎ单独归为第４亚类；欧洲５３、１０８及英
国３５３归为第５亚类；第Ⅲ类仅有１个品种，即加拿大ＡＣ５；第Ⅳ类为加拿大品种 Ｎｏｖａ；第Ⅴ类为加拿大品种
Ｒｏｎａｌｄ；以上五大类所有品种均为皮燕麦，而第Ⅵ类则包括全部裸燕麦品种。
聚类结果表明，皮燕麦与裸燕麦的遗传距离为０．４２０～０．７２２，在聚类树状图上分为两大类，进一步证实了当
今的燕麦分类系统中皮燕麦与裸燕麦分别为燕麦属的２个种的分类情况。３４个皮燕麦品种所分的五大类可能
图１　引物犈犃犌犌／犕犆犜犃扩增的燕麦犃犉犔犘图谱（犘犃犌犈）
犉犻犵．１　犃犉犔犘狆狉狅犳犻犾犲狅犳犃狏犲狀犪狑犻狋犺狆狉犻犿犲狉犈犃犌犌／犕犆犜犃（犘犃犌犈）
１～１５为皮燕麦样品，３５～４２为裸燕麦，品种名同表１１～１５：犃．狊犪狋犻狏犪ｓａｍｐｌｅｓ；３５～４２：
犃．狀狌犱犪ｓａｍｐｌｅｓ，ｎａｍｅｓｈｏｗｅｄｉｎｔａｂｌｅ１；Ｍ：ＤＮＡｍａｒｋｅｒＣ（ＢＢＩ）
４２１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．６） １２／２００８
图２　燕麦４２个品种的遗传相似性犝犘犌犕犃聚类
犉犻犵．２　犝犘犌犕犃犮犾狌狊狋犲狉犪狀犪犾狔狊犻狊犫犪狊犲犱狅狀犖犲犻’狊犵犲狀犲狋犻犮犻犱犲狀狋犻狋犻犲狊犪犿狅狀犵４２犃狏犲狀犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊
分属六倍体燕麦（２狀＝６狓＝４２）种群中具有ＡＡＣＣＤＤ染色体组的不同种，或是同一种中由于地理位置造成的远
缘关系。第Ⅰ类中的巴燕３号与黄燕麦间的遗传相似度极高，为０．９８８１。究其原因，黄燕麦是巴燕３号的杂交
亲本之一。黄燕麦是甘肃、青海等地常年种植的一个地方品种，产量较低，将其与一个引进的高产品种杂交育成
了高产且适应性强的新品种———巴燕３号。我国的几个皮燕麦品种聚为第Ⅰ大类，这些品种遗传关系较近，遗传
资源基础狭窄，急需扩大种质多样性。加拿大ＡＣ５独自归为一大类，其粒色深棕，籽粒为长纺锤形，且有稃毛，
类似野燕麦。加拿大皮燕麦品种的遗传多样性明显高于我国燕麦品种，其中几个品种单独归为不同大类，证明其
遗传背景相对复杂，多样性水平较高。应试国内外裸燕麦品种遗传相似度为０．８０～０．９７，都表现为近缘关系，进
一步证实了裸燕麦的中心起源说。
本研究还利用Ｐｏｐｇｅｎ３２软件中的Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数和Ｎｅｉ’ｓ指数分别估计了群体的遗传变异。供试品
种平均变异为０．１６６４，平均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计值为０．２２０６。３４个皮燕麦品种的平均变异为０．２２２４，平
均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计值为０．３５３９；８个裸燕麦品种的平均变异为０．０９６４，平均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计
值为０．１４４８。可见，皮燕麦的遗传多样性高于裸燕麦。
３　讨论
３．１　燕麦遗传多样性的检测
ＡＦＬＰ作为一种较新的分子标记方法，只要选择足够多且具有代表性的种、亚种、类型进行深入研究，在分析
亲缘关系、研究系统发育、种质资源利用等方面将发挥重要作用。加拿大对１８８６－２００１年育成的９６个燕麦品种
进行ＡＦＬＰ分析，１０对ＡＦＬＰ引物共产生１８９２条带，其中４４２条为多态带［２０］。多态性水平较低，品种间的遗传
关系很近，证明加拿大燕麦的遗传基础在逐渐缩小。本试验结果显示加拿大燕麦遗传多样性相对于我国尚处于
较高水平。Ｇｒｏｈ等［２１］结合ＲＦＬＰ标记绘制了２个六倍体燕麦群体的ＡＦＬＰ连锁图，８个引物对分别产生了１０２
和１２１个ＡＦＬＰ标记，其中包含了３２个连锁群，为燕麦的遗传变异研究提供了有力证据。
５２１第１７卷第６期 草业学报２００８年
ＡＦＬＰ标记多态性检测效率高的原因在于一次分析中能够检测到大量的多态位点，而不是因为每个位点具
有丰富的等位基因形式。周青平等［１０］对１０个燕麦品种酯酶同工酶分析结果表明共有１６条带，７种表型，证明繁
殖品种与引进品种存在较大差异，但其位点数量偏少，与优良基因紧密连锁的位点有限，远不如ＡＦＬＰ标记；内
蒙古王茅雁和齐秀丽［２２］利用ＲＡＰＤ标记对我国２１份燕麦材料的遗传差异及类群划分进行了研究，２２个多态性
引物共扩增出１１４条带，其中９７条带具有多态性；本试验５对引物组合共获得２６８条带，其中多态带１８５条，平
均多态带比率为６９．０％，检测到的ＡＦＬＰ标记的有效等位基因数与之相差不多，这可能是由于ＡＦＬＰ在扩增出
丰富的多态性带的同时也扩增出了大量的单态性带，使得其多态性带的百分率并没有明显提高。但平均每对引
物所产生的多态性带数（５３．６条）明显高于前者（４．４条）。典型的ＡＦＬＰ反应产物经过变性聚丙烯酰胺凝胶电
泳检测到的谱带为５０～１００条，这是其他分子标记所不及的。
本研究所用ＡＦＬＰ分子标记可靠性高，如Ｊｏｎｅｓ等［２３］采用相同材料和反应体系的ＲＡＰＤ、ＡＦＬＰ和ＳＳＲ在
不同的实验室进行重复性验证，ＲＡＰＤ很难重复，ＡＦＬＰ仅有１条带不能重复，ＳＳＲ的谱带都能重复，但其长度有
所变化。同其他分子标记比较，ＡＦＬＰ高效的扩增成百上千条可以重复的谱带，广泛应用于种质资源的遗传多样
性和亲缘关系的研究。在分子标记研究中，样品选择、各种标记的优缺点、遗传距离分析方法、采用的统计方法和
软件工具等也十分重要［２４］。本试验采用ＡＦＬＰ技术和ＮＴＳＹＳ数据分析软件，在分子水平上详细研究了供试燕
麦的遗传多样性和亲缘关系，为分子标记技术在燕麦研究上的应用奠定了基础。
３．２　燕麦遗传多样性与其地理来源的关系
试验选取来自中国、日本、加拿大、澳大利亚、欧洲、乌克兰、英国等不同国家和地区的燕麦品种，这些品种基
于ＡＦＬＰ水平的聚类结果与品种的地域来源表现出较强的相关性，遗传距离与地理分布关系密切，相邻国家的
燕麦品种间遗传距离较小，而距离远的国家燕麦品种间遗传距离大。来自中国、蒙古、日本的品种都在第Ⅰ大类
中；乌克兰、俄罗斯品种在第Ⅱ大类的同一亚类中；丹麦、加拿大、澳大利亚品种在同一亚类；欧洲、英国品种也归
为同一亚类。而来自同一国家的品种间遗传差异并不明显，以加拿大品种的遗传多样性指数最高，欧洲及中国品
种的遗传多样性指数都较低，我国供试的８个皮燕麦品种遗传相似系数极高，为０．９８８１～０．７９７６，证明国内品
种间差异小。这一结果与吴霞等［２５］的研究结果相似，即地理位置近的具有首先聚在一类的趋势，但王鸣刚等［２６］
认为样品间遗传差异与形态、地理来源差异没有必然的联系。
供试的８个裸燕麦品种，遗传相似系数为０．８０９５～０．９７６２。加拿大２个裸燕麦品种遗传相似度为０．９５２４，
与其他中国品种遗传相似度平均保持在０．８７；新西兰品种与加拿大品种遗传相似度保持在０．９１，与中国品种遗
传相似度也极高，平均在０．８５以上，并与白燕２号聚为一类。我国被认为是裸燕麦的起源中心，裸燕麦资源丰
富。我国５个裸燕麦品种遗传相似系数为０．８６９０～０．９７６２，甘肃、青海品种相似度极高，定西、河北品种遗传距
离也较近。吉林品种与其余４省遗传距离相对较远，因为吉林的裸燕麦大多来源于加拿大。
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ｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犃狏犲狀犪；ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ＡＦＬＰ；ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓ
７２１第１７卷第６期 草业学报２００８年