全 文 :书苜蓿皂甙对高脂血症大鼠胆固醇代谢及肝脏
犃犆犃犜2和犎犕犌犆狅犃狉基因表达的影响
王先科,史莹华,王成章,陈明亮,袁德地
(河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州450002)
摘要:探讨苜蓿皂甙对高脂血症大鼠胆固醇代谢及肝脏胆固醇酰基转移酶2(ACAT2),羟甲基戊二酸单酰辅酶A
还原酶(HMGCoAr)基因表达的影响。取雄性健康SpragueDawley大鼠(SD)40只,随机分为4组,分别为:正常
对照组A、高脂模型组B、苜蓿皂甙预防组C和苜蓿皂甙治疗组D。除正常对照组外,其余各组均饲喂高脂饲料,其
中预防组从第1周开始灌胃苜蓿皂甙,治疗组从第5周开始灌胃苜蓿皂甙,试验期8周。观察试验大鼠体重、肝脏
系数、血脂水平和肝脏病理变化情况,并用酶联免疫法(ELISA)和RealtimePCR技术分别检测大鼠肝脏 HMG
CoAr和ACAT2的蛋白和 mRNA表达结果。结果表明,1)苜蓿皂甙可以显著降低高脂模型大鼠体重、肝脏系数、
血清TC和低密度脂蛋白(LDLC)水平及改善肝脏脂化程度(犘<0.05)。2)苜蓿皂甙预防组和治疗组ACAT2的
蛋白和 mRNA表达量极显著低于模型组(犘<0.01),而 HMGCoAr的蛋白及 mRNA表达水平与模型组比较则差
异不显著。苜蓿皂甙通过降低肝脏ACAT2的表达,抑制机体对外源胆固醇的吸收,发挥对高脂血症的预防和治
疗作用。
关键词:苜蓿皂甙;SD大鼠;高脂血症;胆固醇代谢;ACAT2;HMGCoAr
中图分类号:S816.17 文献标识码:A 文章编号:10045759(2012)03028707
紫花苜蓿(犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪)是世界上栽培面积最大的豆科牧草[1],富含蛋白质、矿物质、维生素等营养物
质,享有“牧草之王”的美誉。大量的研究表明,苜蓿相关加工产品在动物饲料中应用可取得良好的效果[2]。苜蓿
皂甙(alfalfasaponins)是从苜蓿中提取的一种活性物质。王成章等[3]报道,在饲粮中添加一定量的苜蓿皂苷有
利于降低血清、肝脏和肌肉中的胆固醇含量,调节仔猪的血脂代谢,并能提高仔猪的抗氧化性能和免疫机能。随
着研究不断深入,人们发现苜蓿皂甙具有促进胆固醇排泄,降血脂,减轻动脉硬化等多种功能,具有独特的生物学
性质[4],是开发新型降脂药物和绿色饲料添加剂的研究热点。然而,目前苜蓿皂甙调节胆固醇代谢的作用机理尚
不明确。
胆固醇酰基转移酶(ACAT)是细胞内唯一合成胆固醇酯的酶,在细胞和生物体胆固醇代谢平衡中起非常重
要的作用。在哺乳动物细胞中存在2种基因编码的ACAT(ACAT1和ACAT2),其中ACAT2只在肝脏和小
肠细胞中表达,参与胆固醇的吸收和脂蛋白的装配[5]。Buhman等[6]对剔除ACAT2基因的小鼠(ACAT2/)分
析发现,ACAT2/的小鼠吸收胆固醇的能力下降,血液中胆固醇的含量减少,对于结石病和食物诱导的高胆固醇
血症有抵御作用。此外另一项研究显示,在动物实验中,ACAT抑制剂可减少肝细胞、小肠细胞、巨噬细胞中游
离胆固醇转化为胆固醇酯[7]。羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCoAr)是合成胆固醇的限速酶[8]。若抑
制HMGCoAr活性,则机体内源性胆固醇合成减少。因此,在临床上常用 HMGCoAr抑制剂即他汀类药物治
疗高胆固醇血症。因此,ACAT2和 HMGCoAr与机体胆固醇代谢密切相关,对维持胆固醇水平具有重要作
用。本试验通过对高脂血症大鼠灌胃苜蓿皂甙,采用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫法(ELISA)检测大鼠肝
脏组织中ACAT2和 HMGCoAr基因mRNA和蛋白表达水平,明确苜蓿皂甙对ACAT2和 HMGCoAr基因
的转录和表达的影响,进而分析其对胆固醇代谢的调节机理,为其在安全、绿色、健康畜产品生产中的广泛利用提
第21卷 第3期
Vol.21,No.3
草 业 学 报
ACTAPRATACULTURAESINICA
287-293
2012年6月
收稿日期:20110516;改回日期:20110920
基金项目:国家牧草产业技术体系建设项目(nycytx37)和国家“十二五”科技支撑计划项目(2011BAD17B04)资助。
作者简介:王先科(1983),男,河南南阳人,在读硕士。Email:xiankeman@163.com
通讯作者。Email:annysyh@126.com
供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物及材料 雄性健康SD大鼠40只,体重(200±14.27)g,购自河南省试验动物中心。所有饲料
和饮用水均经过消毒处理。苜蓿皂甙由河北省沧州市宝恩生物科技有限公司提供,总皂甙含量为51%。基础饲
料由河南省试验动物中心提供。胆固醇、猪胆盐和蛋黄粉由安徽天启化工科技有限公司提供。猪油和全脂奶粉
购于郑州成果商贸有限公司。
1.1.2 主要试剂和仪器 大鼠ACAT2和 HMGCoAr酶联免疫试剂盒:郑州天驰生物试剂有限公司。TR
Izol核酸提取试剂:宝生物(大连)有限公司。反转录PCR试剂盒:宝生物(大连)有限公司。荧光定量PCR试剂
盒:东洋纺(上海)生物科技有限公司。HITACHI7170A全自动生化分析仪:日立中国有限公司。AS620冷冻切
片机:英国珊顿公司。荧光定量PCR仪:eppendorf艾本德中国公司。台式高速冷冻离心机:艾本德中国有限公
司。DYY8C型电泳设备:北京市六一仪器厂。电泳凝胶成像分析系统:英国SYNGENE公司。
1.2 方法
1.2.1 高脂血症大鼠模型的建立 所有大鼠在适应性饲喂1周后,取尾动脉血液检测血清总胆固醇(totalcho
lesterol,TC)水平,并根据血清TC水平和体重情况进行随机分组,各组之间血清TC和体重水平无统计学差异。
采用饲喂高脂饲料的方法建立大鼠高脂模型。高脂饲料配方如下:1%胆固醇、0.1%猪胆盐、10%猪油、5%蛋黄
粉、5%的全脂奶粉,其余为基础饲料。建模时间为28d。
1.2.2 动物饲养与分组 试验在河南农业大学牧医工程学院试验动物房进行,时间从2010年7月21日—2010
年9月21日,其中预试期7d,正试期56d。动物分为4组,每组5个重复,具体情况如下:1)正常对照组A:饲喂
基础日粮,每天上午9点灌胃2mL蒸馏水。2)高脂模型组B:饲喂高脂饲料,每天上午9点灌胃2mL蒸馏水。
3)苜蓿皂甙预防组C:饲喂高脂饲料,从第1周开始,每天上午9点灌胃以240mg/kg苜蓿皂甙,连续灌胃8周。
4)苜蓿皂甙治疗组D:饲喂高脂饲料,从第5周开始,每天上午9点灌胃以240mg/kg苜蓿皂甙,连续灌胃4周。
1.2.3 血液及组织标本的采样 试验结束后,所有大鼠禁食过夜,断尾采血,3000r/min离心10min,分离出血
清分装于eppendorf管中,保存于-20℃冰箱待测。3%戊巴比妥钠0.1mL/100g腹腔注射麻醉大鼠,腹部中部
剪开口,取肝脏,吸干血迹后称重,切下肝脏右叶中部部分组织,迅速置于10%中性甲醛溶液中固定,其余部分迅
速置于液氮中冷冻,并保存于-80℃冰箱待测。
1.2.4 一般指标的测定 试验期间每周称量动物体重,计算出大鼠周增重。试验结束时,称量各组动物的肝脏
重量,并计算出肝脏系数。肝脏系数=肝脏重量/体重×100%。
1.2.5 血清脂类相关指标的测定 采用全自动生化分析仪测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度
脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)含量。
1.2.6 肝脏组织病理学观察 将1.2.2中固定液中肝脏组织取出,流水冲洗24h。然后按常规方法进行70%
~100%梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、切片(切片厚度为5μm)、贴片、烤片后,用二甲苯脱蜡、100%~
70%梯度酒精复水、苏木精染色、70%盐酸酒精分色、伊红复染后,70%~100%梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性
树胶封片,最后镜检肝脏组织结构病变。
1.2.7 ACAT2、HMGCoAr蛋白含量测定 用Elisa法测定 ACAT2、HMGCoAr蛋白含量,具体参照试剂
盒说明书。
1.2.8 ACAT2、HMGCoArmRNA表达量测定 用TRIzol核酸提取试剂提取肝细胞总RNA,测定RNA样
品含量及纯度:A260/A280=1.8~2.0,说明其纯度满足分子生物学试验的要求。在NCBI上查找大鼠 ACAT2、
HMGCoAr基因序列,然后用PrimerPrimier5软件设计引物,并由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。
以βActin作为内参。具体序列见表1。
ACAT2、HMGCoArmRNA表达分析采用RealTimePCR相对定量法测定。RealTimePCR循环条件
为:95℃2min,95℃15s,61℃20s,72℃30s(40个循环)。
882 ACTAPRATACULTURAESINICA(2012) Vol.21,No.3
表1 引物序列
犜犪犫犾犲1 犗犾犻犵狅狀狌犮犾犲狅狋犻犱犲狆狉犻犿犲狉狊
基因名称
Genename
基因库登记号
GeneBankaccessionNo.
序列
Sequence
产物
Producesize(bp)
βActin FQ234850.1 上游Sense5′GGGACCTGACAGACTACCTC3′ 121
下游AntiSense5′AAATCCAGGGCAACATAGC3′
ACAT2 AB075946.1 上游Sense5′CTCTGCTGCTGTCCATCC3′ 179
下游AntiSense5′CCAGGTGCGGTAATAGTTG3′
HMGCoAr NM_013134.2 上游Sense5′TGTCATTCCAGCCAAGGTG3′ 127
下游AntiSense5′ATGGGCGTTGTAGCCTCCT3′
1.3 统计分析
采用SPSS11.5统计学软件对所有试验结果进行
分析,用 OneWayANOVA检验进行单因素方差分
析。犘<0.05表示试验结果的统计学差异显著,犘<
0.01表示试验结果统计学差异极显著。
2 结果与分析
2.1 苜蓿皂甙对高脂模型大鼠体重和肝脏系数的影
响
各组大鼠初始体重无显著差异(表2),即在同一
水平。与正常对照A组相比较,高脂模型B组体重极
显著升高,增加幅度为9.3%(犘<0.01),肝脏系数显
著升高,增加幅度为20.6%(犘<0.05);与高脂模型B
组相比较,C组大鼠体重极显著降低,降低幅度为
5.3%(犘<0.05),D组大鼠体重有所降低,但无明显
表2 苜蓿皂甙对大鼠体重和肝脏系数的影响
犜犪犫犾犲2 犈犳犳犲犮狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀犫狅犱狔狑犲犻犵犺狋,
犾犻狏犲狉狑犲狋狑犲犻犵犺狋狅犳狉犪狋狊
组别
Group
初重
Initialweight(g)
末重
Finalweight(g)
肝脏系数
Liverwetweight(%)
A 198.18±12.69 360.50±3.75Aa 2.91±1.56a
B 209.21±17.12 393.90±5.87Bb 3.51±0.97b
C 189.06±12.67 372.93±4.36Aa 3.14±1.84ab
D 201.00±12.42 387.62±9.51Bb 3.30±1.18ab
注:同列小写字母不同表示差异显著(犘<0.05),大写字母不同表示
差异极显著(犘<0.01)。下同。
Note:Valueswithinacolumnwiththedifferentsmallettersdiffer
significantly(犘<0.05),withthedifferentcapitallettersdiffervery
significantly(犘<0.01).Thesamebelow.
差异(犘>0.05),C、D组肝脏系数比B组有所降低,但差异不显著(犘>0.05);与正常对照组A相比较,C、D组大
鼠肝脏系数无明显差异(犘>0.05)。
2.2 大鼠肝脏组织病理观察结果
2.2.1 肉眼观察结果 肉眼观察正常对照组大鼠肝脏表面颜色暗红,色泽鲜亮,边缘锐利,切面无油腻感(图
1)。高脂模型组B大鼠肝脏表面颜色发黄,质地较硬,点状凹陷,肝脏体积明显增大,包膜紧张,部分肝脏呈奶黄
色,切面油腻。苜蓿皂甙预防组和治疗组大鼠肝脏较正常组偏大,外观颜色基本正常,略有灰白小点,大部分红
润,个别淡黄,部分大鼠肝脏切面有油腻感。
2.2.2 光镜观察结果 正常对照组A大鼠肝小叶结构正常,细胞内未见脂滴(图1)。与正常对照组A比较,高
脂模型组B大鼠肝小叶结构被破坏,肝细胞脂肪变性严重,充满大、小脂滴;苜蓿皂甙预防组C大鼠肝小叶结构
正常,较少肝细胞内可见细小脂滴,肝脏脂肪变性不明显;苜蓿皂甙治疗组D大鼠肝小叶结构基本正常,大脂滴
较少,小脂滴散在分布,肝脏脂肪变性明显减轻。
2.3 苜蓿皂甙对高脂模型大鼠血清相关指标的影响
与正常对照组A比较,高脂模型组B大鼠TG水平有所升高(表3),但是差异不显著(犘>0.05),TC水平极
显著升高,增加幅度为44.0%(犘<0.01),HDLC水平显著降低,下降幅度为30%(犘<0.05),LDLC水平极显
著升高,增加幅度为91.3%(犘<0.01)。与高脂模型组B比较,C、D组大鼠TG、HDLC水平无显著差异(犘>
0.05);TC水平极显著下降,降低幅度分别为28.2%和23.6%(犘<0.01);LDLC水平极显著下降,降低幅度分
别为36.4%,29.5%(犘<0.05)。C、D组之间各指标互相比较,无显著差异(犘>0.05)。
982第21卷第3期 草业学报2012年
图1 大鼠肝脏组织病理观察结果(×20)
犉犻犵.1 犘犪狋犺狅犾狅犵犻犮犪犾狅犫狊犲狉狏犪狋犻狅狀狅犳犾犻狏犲狉狅犳狉犪狋狊(×20)
2.4 苜蓿皂甙对高脂模型大鼠肝脏 HMGCoAr
和ACAT2蛋白表达的影响
与对照组 A比较,高脂模型组B大鼠 HMG
CoAr蛋白表达量显著下降(表4),降低幅度为
4.1%(犘<0.05);与高脂模型组B比较,C、D组大
鼠 HMGCoAr蛋白表达量均有不同程度下降,其
中C组极显著下降,降低幅度为8.3%(犘<0.01),
D组下降不显著(犘>0.05);C、D组之间 HMG
CoAr蛋白表达量差异不显著(犘>0.05)。
与对照组A比较,高脂模型组B大鼠ACAT2
蛋白表达量极显著升高,升高幅度为28.4%(犘<
0.01);与高脂模型组B比较,C、D组大鼠ACAT2
蛋白表达量极显著下降,降低幅度分别为19.5%和
17.6%(犘<0.01);C、D组之间ACAT2蛋白表达
量差异不显著(犘>0.05)。
2.5 苜蓿皂甙对高脂模型大鼠肝脏 HMGCoAr
和ACAT2mRNA表达的影响
与对照组 A 比较,高脂模型组 B 大鼠肝脏
HMGCoAmRNA相对表达量极显著下降,降低幅
度为49.0%(犘<0.05);与高脂模型组B比较,C、D
组大鼠HMGCoAmRNA相对表达量有所下降,
表3 苜蓿皂甙对大鼠血清相关指标的影响(狀=10,犿犿狅犾/犔)
犜犪犫犾犲3 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀狊犲狉狌犿犻狀犱犲狓狅犳狉犪狋狊
组别
Group
甘油三酯
TG
总胆固醇
TC
高密度脂蛋白
胆固醇 HDLC
低密度脂蛋白
胆固醇LDLC
A 0.90±0.17Aa1.50±0.19Aa0.20±0.03Ab 0.23±0.06Aa
B 1.21±0.31Aa2.16±0.46Bc 0.14±0.05Aa 0.44±0.07Bc
C 0.97±0.13Aa1.55±0.18Aab0.17±0.05Aab0.28±0.04Ab
D 0.99±0.21Aa1.65±0.24Aab0.15±0.02Aa 0.31±0.03Ab
TG:Triglyceride;TC:Totalcholesterol;HDLC:Highdensitylipopro
teincholesterol;LDLC:Lowdensitylipoproteincholesterol.
表4 苜蓿皂甙对大鼠犎犕犌犆狅犃狉和犃犆犃犜2蛋白表达量的影响
犜犪犫犾犲4 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀狋犺犲狆狉狅狋犲犻狀犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀
狅犳犎犕犌犆狅犃狉犪狀犱犃犆犃犜2犻狀狉犪狋狊犾犻狏犲狉
组别
Group
羟甲基戊二酸单酰辅酶A
还原酶 HMGCoAr(U/L)
胆固醇酰基转移酶2
ACAT2(μmol/L)
A 44.83±1.31Cc 29.41±1.11Aa
B 42.97±1.01BbC 37.77±1.14Bb
C 40.39±1.23AaBb 30.39±1.11Aa
D 41.56±1.19AaBb 31.14±1.33Aa
HMGCoAr:3hydroxy3methylglutarylcoenzyme A reduction en
zyme;ACAT2:Cholesterolacyltransferase2.
092 ACTAPRATACULTURAESINICA(2012) Vol.21,No.3
但差异不显著(犘>0.05);C、D组之间差异不显著
(犘>0.05)(表5)。
与对照组 A 比较,高脂模型组 B 大鼠肝脏
ACAT2mRNA相对表达量极显著升高,增加幅度为
89.0%(犘<0.01);与高脂模型组B比较,C、D组大鼠
HMGCoAmRNA相对表达量均极显著降低,减少幅
度分别为85.7%和78.3%(犘<0.01);C、D组之间差
异不显著(犘>0.05)。
3 讨论
高脂血症是指血清中脂质成分过剩的状态,是由
于脂肪代谢或运转异常使血浆中一种或几种脂质高于
表5 苜蓿皂甙对大鼠肝脏犎犕犌犆狅犃狉和
犃犆犃犜2犿犚犖犃表达的影响
犜犪犫犾犲5 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀狋犺犲犿犚犖犃
犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳犎犕犌犆狅犃狉犪狀犱犃犆犃犜2犻狀狉犪狋狊犾犻狏犲狉
组别
Group
羟甲基戊二酸单酰辅酶A
还原酶 HMGCoArmRNA
胆固醇酰基转移酶2
ACAT2mRNA
A 1.00Bb 1.00Bb
B 0.51±0.075Aa 1.89±0.385Cc
C 0.46±0.336Aa 0.27±0.048Aa
D 0.49±0.120Aa 0.41±0.094Aa
正常而引起,常表现为血清总胆固醇、三酰甘油升高、高密度脂蛋白降低,继发肥胖、高血压、糖尿病、冠心病等。
高脂血症目前已经被广泛认为是导致动脉粥样硬化等心脑血管疾病形成的一个主要危险因子[9,10]。本研究结果
显示,高脂饲料喂养后大鼠血脂水平显著升高,表明高脂模型建立成功。
大量研究表明,一些植物提取物能够降低血脂,提高机体抗氧化能力,阻止血栓和粥样斑块的形成,从而拮抗
动脉粥样硬化的发生和发展[1115]。Wiliam[16]报道,苜蓿皂甙在哺乳动物正常的消化道中不被吸收,可降低血液
中胆固醇的含量。丛学滋等[17]报道,苜蓿皂甙1.2及2.4g/只连续饲喂高胆固醇血症的家兔,结果使家兔血清
总胆固醇明显下降,高密度脂蛋白胆固醇/总胆固醇显著提高。刘凯等[18]报道,苜蓿皂甙显著降低大鼠血清胆固
醇和低密度脂蛋白胆固醇含量。雷祖玉等[19]报道用苜蓿总甙饲喂拔益加肉鸡,肉仔鸡血清总胆固醇、甘油三酯
及低密度脂蛋白胆固醇含量极显著降低。张勇等[20]也报道,肉仔鸡日粮中添加不同水平的苜蓿总甙能够显著降
低血清中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。本试验发现,从第1周和第5周分别给予大鼠苜蓿皂甙,均能使大鼠
体重和肝脏系数下降,血清TC和LDLC水平极显著降低,同时脂肪肝症状显著减轻,与前人研究结果一致。表
明苜蓿皂甙可以有效抑制血脂升高,缓解肝脏脂质的蓄积,对高脂血症具有一定的预防和治疗作用。
肝脏是体内胆固醇代谢的重要器官,肝脏的ACAT2是 ACAT的一种形式,是参与吸收、转运和贮存胆固
醇的一个极其重要的酶,而HMGCoAr是合成胆固醇的限速酶,主要存在于肝脏内质网细胞,催化合成甲基二
羟戊酸并生成体内多种代谢产物,体内胆固醇的生化合成约2/3过程要经过此步骤。研究表明细胞内胆固醇摄
入、吸收、转运的增加,胆固醇的代谢物,如羟基化胆固醇等,将降低 HMGCoA还原酶的活性,减少体内胆固醇
的自身合成。本试验发现,模型组大鼠摄取高脂饲料后,肝脏中ACAT2mRNA及其蛋白表达量与对照组相比
显著升高,而 HMGCoArmRNA及其蛋白表达量则受到显著抑制,说明大鼠摄取胆固醇含量增加时,一方面肝
脏ACAT2表达增加,使细胞吸收外源胆固醇速度加快,另一方面肝脏 HMGCoAr表达下降,使大鼠自身胆固
醇合成受到抑制,以应对外源膳食胆固醇的增加,但细胞还是优先使用外源胆固醇[21],因此,胆固醇在动物机体
大量积累,导致血脂水平增加。
对于生物个体而言,胆固醇平衡调控发生在3个方面:合成、吸收及代谢,而细胞主要通过调节胆固醇的合
成、吸收、酯化及外流等途径之间的平衡以维持正常的胆固醇浓度。有报道指出:ACAT2对于预防高脂血症和
动脉粥样硬化,是一个有效的靶点,特异性抑制ACAT2将减少胆固醇的吸收和运输,并不影响细胞内胆固醇代
谢平衡[22]。本研究发现,苜蓿皂甙可以显著下调高脂模型大鼠肝脏ACAT2mRNA及其蛋白表达,同时进一步
下调HMGCoArmRNA及其蛋白表达,但作用不明显,表明苜蓿皂甙可以通过抑制细胞对外源胆固醇的吸收来
降低血脂水平。而对 HMGCoAr表达的抑制效果不明显可能与高脂饲料对其的抑制作用有关。
4 结论
苜蓿皂甙可以明显降低高脂血症大鼠体重、肝脏系数及血清TC、LDLC水平,同时能够显著改善大鼠脂肪
肝症状。苜蓿皂甙对机体胆固醇含量的降低作用可能是通过下调肝脏ACAT2的表达从而减少机体对外源胆
固醇的吸收来实现。苜蓿皂甙能够改善体内紊乱的脂质平衡,对高脂血症具有明显的预防和治疗作用。本研究
结果为进一步探讨苜蓿皂甙调节胆固醇代谢的作用机制奠定了基础。
192第21卷第3期 草业学报2012年
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292 ACTAPRATACULTURAESINICA(2012) Vol.21,No.3
犐狀犳犾狌犲狀犮犲狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀犮犺狅犾犲狊狋犲狉狅犾犿犲狋犪犫狅犾犻狊犿犪狀犱狋犺犲犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀狊狅犳犃犆犃犜2
犪狀犱犎犕犌犆狅犃狉犻狀狋犺犲犾犻狏犲狉狅犳犺狔狆犲狉犾犻狆犻犱犲犿犻犪狉犪狋狊
WANGXianke,SHIYinghua,WANGChengzhang,CHENMingliang,YUANDedi
(ColegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicineofHenanAgricultural
University,Zhengzhou450002,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:TheeffectofalfalfasaponinsoncholesterolmetabolismandtheexpressionsofACAT2andHMG
CoArintheliverofhyperlipidemiaratswasinvestigated.FortyhealthymaleSpragueDawley(SD)ratswere
randomlydividedintofourgroups:normal(control,A),hyperlipidemiamodel(B),alfalfasaponinspreven
tiongroup(C),alfalfasaponinstreatmentgroup(D).Exceptforthecontrols,ratswerefedahighfatdietfor
eightweeks.AlfalfasaponinswereaddedbygavagetogroupCfromthefirstweek,andtogroupDfromthe
fifthweek.Bodyweight,liverindexandserumlipidleveloftheratsweremeasured.ProteinandmRNAex
pressionsofACAT2andHMGCoArweremeasuredbyenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)andre
altimePCRmethodsrespectively.1)Thebodyweight,liverindexandserumlipidlevelofhyperlipidemiarats
weresignificantlyreduced,andthefattydegenerationandsteatosisintheliverwereamelioratedbyalfalfasap
onins.2)TheproteinandmRNAexpressionsofACAT2ingroupsCandDweresignificantlylowerthan
thoseingroupB(犘<0.01),buttherewasnosignificantdifferenceforHMGCoAr.Inconculsion,alfalfasap
oninspreventedhyperlipidemiabyreducingtheexpressionofhepaticACAT2,andbyinhibitingtheabsorption
ofexogenouscholesterol.
犓犲狔狑狅狉犱狊:alfalfasaponins;SDrats;hyperlipidemia;cholesterolmetabolism;ACAT2;HMGCoAr
392第21卷第3期 草业学报2012年