全 文 ：书分离自牧草根际四株促生菌株（犘犌犘犚）互作效应研究
张英１，２，朱颖１，姚拓１，祁娟１，荣良燕１
（１．甘肃农业大学草业学院 草业生态系统教育部重点实验室 中—美草地畜牧业可持续发展研究中心，
甘肃 兰州７３００７０；２．青海大学农牧学院草业科学系，青海 西宁８１００１６）
摘要：利用钼蓝比色、显色和Ｓａｌｋｏｗｓｋｉ比色等方法测定了筛选自苜蓿、白三叶和红三叶根际的４株优良ＰＧＰＲ菌
株间的拮抗反应、单独和混合培养菌株的溶磷和分泌植物生长素（ＩＡＡ）能力、培养液ｐＨ值和有机酸总量变化及其
彼此之间的相关性。结果表明，各菌株间无拮抗反应，可以混合使用。无机磷培养液中，菌株 Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１组合处
理有效磷增量（５３６．２ｍｇ／Ｌ）最大，Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１组合次之（４７５．６ｍｇ／Ｌ）。Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１组合菌株处理有效磷
增量呈现“１＋１＞２”的加成效应，Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１处理有效磷增量较单菌株处理时显著提高（犘＜０．０１），但未表
现“１＋１＋１＞３”的溶磷效果。有机磷培养液中，ｌｈｓ１１处理有效磷增量（１１．１１ｍｇ／Ｌ）最大，Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１组
合次之（９．２０ｍｇ／Ｌ），Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１组合有效磷增量显著高于其他组合处理。各处理菌株培养液有效磷增量
与ｐＨ值、有效磷增量与总有机酸量、ｐＨ值和总有机酸量之间存在线性相关。单菌株及菌株组合均具有分泌ＩＡＡ
的能力，分泌量在０．２１２～９．３３１μｇ／ｍＬ，Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１组合菌株培养液ＩＡＡ含量显著高于单菌株Ｈｓｇ和ｌｈｓ１１（犘＜
０．０１），并呈现“１＋１＞２”的加成效果。综合各处理的促生特性，组合 Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１和 Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１菌株间互
作效应较强，有望成为研制复合菌肥的最佳菌株组合。
关键词：溶磷菌；分泌ＩＡＡ；溶磷能力；互作
中图分类号：Ｓ５４０．１；Ｑ９４８．１２＋２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１３）０１００２９０９
　　 植物根际促生菌（ｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｎｇｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉａ，简称ＰＧＰＲ）是指自由生活在土壤或附生于植物根
际、茎叶，可促进植物生长及对矿质营养吸收和利用，产生促进植物生长的次生代谢物，抑制有害微生物的有益菌
类［１］。促生菌包括解磷、固氮和分泌植物激素的微生物；降解农药残留和有机污染物的根际微生物；预防和控制
流行性病原菌对植物侵染的微生物［２］。ＰＧＰＲ能否在植物根际成功定殖，并发挥其功效，往往受到气候、土壤性
质和土著微生物的影响［３］。微生物在田间植物根际并不是单独存在的，所以在有益微生物资源的开发利用和微
生物肥料的研究中，了解微生物之间的相互作用，将几种微生物有机地混合在一起培养，能适应较广谱的生态环
境，增加混合菌株功能的多样性，并有可能产生优于单类菌培养的效果，这对复合微生物肥料的开发利用有着重
要的意义。
近几年来，一些学者就细菌间的交互促生效果进行了些研究，如Ｅｓｉｔｋｅｎ等［４］、Ｂａｎｃｈｉｏ等［５］、Ｋａｒｌｉｄａｇ等［６］、
Ｏｒｈａｎ等［７］将混合接菌剂接种到植物（蔬菜、水果等）根际后发现能调节植物的营养平衡，促进 Ｎ、Ｐ、Ｋ和其他
（Ｍｇ、Ｃａ、Ｆｅ、Ｍｎ和Ｚｎ）营养元素吸收，促进植物生长，提高植物产量。再次验证了适合的菌株混合物能起到协
同作用，如一类微生物为另一类微生物的生长提供重要的养料和基质，或者为另一类微生物的继续生长创造了有
利条件，有的甚至依赖于其他微生物而存活［８］，一些可以促进其他细菌生长繁殖［９］。
目前，对具有不同功能的根际ＰＧＰＲ共生协作效应的研究报道较少。本研究拟开展具有固氮、溶磷和分泌
植物激素等功能的不同ＰＧＰＲ菌株之间进行单独和交叉混合培养，测定溶磷和分泌ＩＡＡ（吲哚乙酸，Ｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃ
Ａｃｉｄ）的能力，探讨菌株在溶磷和分泌ＩＡＡ时的互作效应，探求不同功能菌株的最佳组合，以期为研制ＰＧＰＲ复
合菌肥提供基础资料和理论依据。
第２２卷　第１期
Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．１
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
２９－３７
２０１３年２月
收稿日期：２０１１１１０１；改回日期：２０１１１２０６
基金项目：国家自然科学基金项目（３１２６００２５，３０９６０２６５），甘肃省农牧厅生物技术专项（ＧＮＳＷ２０１１０８），现代农业产业技术体系（ＣＡＲＳ３５）和
甘肃省教育厅科研基地重点项目（０８ｚｘ０８）资助。
作者简介：张英（１９７７），男，青海贵德人，副教授，在读博士。Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｙｉｎｇ２０１９＠１２６．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｙａｏｔｕｏ＠ｇｓａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
１　材料与方法
１．１　菌株来源
供试菌株为前期（２００８－２０１０年）在兰州、定西、酒泉及其周边地区苜蓿（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）、白三叶（犜狉犻犳狅犾犻
狌犿狉犲狆犲狀狊）和红三叶（犜狉犻犳狅犾犻狌犿狆狉犪狋犲狀狊犲）植物根际分离、筛选获得的细菌（ＰＧＰＲ菌株）（表１），这些菌株具有较
强的固氮、溶磷、分泌ＩＡＡ的能力，同时具有生长快、竞争力强等特点［１０１２］。
表１　供试菌株
犜犪犫犾犲１　犜犲狊狋犲犱狊狋狉犪犻狀狊
菌株代号ＳｔｒａｉｎＮｏ． 菌株来源Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆｓｔｒａｉｎｓ 功能Ｆｕｎｃｔｉｏｎ
Ｈｓｇ 兰州Ｌａｎｚｈｏｕ，苜蓿根际土壤Ｓｏｉｌａｄｈｅｒｉｎｇｔｏ犕．狊犪狋犻狏犪ｒｏｏｔｓ 溶磷Ｐｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ，固氮Ｎｆｉｘａｔｉｏｎ
ｌｓ１３ 酒泉Ｊｉｕｑｕａｎ，白三叶根际土壤Ｓｏｉｌａｄｈｅｒｉｎｇｔｏ犜．狉犲狆犲狀狊ｒｏｏｔｓ 溶磷Ｐｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ
ｌｈｓ１１ 兰州Ｌａｎｚｈｏｕ，红三叶根际土壤Ｓｏｉｌａｄｈｅｒｉｎｇｔｏ犜．狆狉犪狋犲狀狊犲ｒｏｏｔｓ 溶磷Ｐｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ
ｌｈｓ１４ 定西 Ｄｉｎｇｘｉ，红三叶远根土壤Ｓｏｉｌａｗａｙｆｒｏｍ犜．狆狉犪狋犲狀狊犲ｒｏｏｔｓ 溶磷Ｐｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ，分泌ＩＡＡＳｅｃｒｅｔｉｎｇＩＡＡ
　待鉴定 Ｎｏｔｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．
１．２　培养基
ＬＢ培养基［１３］：酵母粉５ｇ，蛋白胨１０ｇ，ＮａＣｌ５ｇ，琼脂２０ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，ｐＨ＝７．０。
ＰＫＯ无机磷培养基［１４］：葡萄糖１０ｇ，（ＮＨ４）２ＳＯ４０．５ｇ，ＮａＣｌ０．２ｇ，ＫＣｌ０．２ｇ，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０３ｇ，
ＭｎＳＯ４０．０３ｇ，ＦｅＳＯ４０．００３ｇ，酵母膏０．５ｇ，琼脂２０ｇ，Ｃａ３（ＰＯ４）２３ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，ｐＨ＝６．８～７．０。
蒙金娜有机磷培养基［１５］：ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０３ｇ，（ＮＨ４）２ＳＯ４０．５ｇ，ＣａＣＯ３５ｇ，ＮａＣｌ０．３ｇ，ＭｎＳＯ４·４Ｈ２Ｏ
０．０３ｇ，ＫＣｌ０．３ｇ，葡萄糖１０ｇ，卵磷脂０．２ｇ，酵母膏０．４ｇ，琼脂２０ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，ｐＨ＝７．０～７．５。
Ｋｉｎｇ培养基［１６］：ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ１．５ｇ，Ｋ２ＨＰＯ４１．１５ｇ，蛋白胨２０ｇ，甘油１５ｍＬ，蒸馏水１０００ｍＬ，ｐＨ＝
６．８。
Ｓｐｏｔ比色液［１６］：０．５ｍｏｌ／ＬＦｅＣｌ３１ｍＬ，蒸馏水５０ｍＬ，浓 Ｈ２ＳＯ４３０ｍＬ。
Ｓ２比色液［１６］：ＦｅＣｌ３４．５ｇ，１０．８ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４１Ｌ。其测定范围为５～２００μｇ／ｍＬ，一般超过１００μｇ／ｍＬ需
要稀释。
１．３　菌株拮抗反应测试
菌株间的拮抗反应测试采用牛津杯法［１７］，将一种菌在液体培养基中培养２４ｈ的菌悬液，以２％（Ｖ／Ｖ）的量
接种到发酵培养基中，２８℃、１８０ｒ／ｍｉｎ振荡培养４８ｈ；发酵液８０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，上清过０．２２μｍ滤膜，
取滤液１００μＬ滴加在含有２％ 另一种细菌的ＬＢ平板中央的牛津杯中（直径７ｍｍ），待发酵滤液扩散后置２８℃
条件下恒温培养。以无菌水作阴性对照。将供试４株细菌两两进行抑菌实验，每个处理３次重复，１ｄ后观察抑
菌圈的有无，若有抑菌圈，说明两细菌间有拮抗作用，若无抑菌圈，且细菌生长良好，则说明这两个细菌可以共存，
各菌株间没有拮抗作用，不发生拮抗反应的菌株可以混合培养，否则只能单独施用。
１．４　互作实验设计
将无拮抗反应的４株供试菌株，在ＬＢ培养液中，于２８℃，１２５ｒ／ｍｉｎ振荡培养４８ｈ后，待菌株充分生长后，
用无菌水调节各待测菌株菌悬液浓度为１×１０８ｃｆｕ／ｍＬ（波长６６０ｎｍ，ＯＤ值≥０．５）。将制备好的菌悬液按表２
的方法处理，共１６个处理。
１．５　各处理菌株溶磷能力测定
将５０ｍＬ液体ＰＫＯ无机磷培养液和蒙金娜有机磷培养液分别装入１５０ｍＬ三角瓶中，１２１℃灭菌２５ｍｉｎ，
冷却后按处理设计分别接种５００μＬ菌悬液，每个处理设３次重复。接种完后，将三角瓶置于２８℃、１６０ｒ／ｍｉｎ摇
床培养１０ｄ，之后加入已处理的活性炭１ｇ，振荡３０ｍｉｎ（１５０ｒ／ｍｉｎ）。再将培养液在１００００ｒ／ｍｉｎ、４℃离心１５
ｍｉｎ，取上清液，用钼锑抗比色法测定有效磷增量（扣除对照后的值，ｍｇ／Ｌ）［１８］，计算公式如下：
０３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．１
犘＝犓×犞犞１
其中：犘—有效磷增量；犓—从标准曲线查得显色液
的磷含量（ｍｇ／Ｌ）；犞—显色时溶液定容的体积
（ｍＬ）；犞１—显色时吸取上清液的体积（ｍＬ）。
１．６　各处理菌株培养液ｐＨ值变化测定
用酸度计测定１．５中培养１０ｄ后的各处理菌
株培养液ｐＨ值的变化情况。
１．７　各处理菌株分泌有机酸总量测定
取１．５中离心后的上清液，以酚酞为指示剂，用
０．１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ滴定各上清液，测定有机酸的总
量，用ｍｍｏｌ／Ｌ表示。
１．８　菌株分泌ＩＡＡ能力测定
１．８．１　定性测定　将５０ｍＬＫｉｎｇ培养液装于１５０
ｍＬ三角瓶，１２１℃灭菌２５ｍｉｎ，冷却后按处理设计
分别接种５００μＬ菌悬液，每个处理设３次重复。接
种后，将上述三角瓶置于２８℃，１５０ｒ／ｍｉｎ摇床培养
１２ｄ，吸取菌株培养液５０μＬ滴置于白色陶瓷板上，
同时加５０μＬＳｐｏｔ比色液，对照只在比色液中加５０
μＬ１０ｐｐｍ的植物生长激素（３吲哚乙酸）；将白色
瓷板置室温下，在１５ｍｉｎ内观察其颜色变化，颜色
表２　菌悬液的处理
犜犪犫犾犲２　犅犪犮狋犲狉犻犪犾犲狏犻狋犪狋犻狅狀犾犻狇狌犻犱狋狉犲犪狋犿犲狀狋狊
序号Ｎｏ．处理代号ＴｒｅａｔｍｅｎｔｓＮｏ． 菌种处理Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｏｆｓｔｒａｉｎｓ
１ Ａ Ｈｓｇ
２ Ｂ ｌｈｓ１４
３ Ｃ ｌｓ１３
４ Ｄ ｌｈｓ１１
５ ＡＢ Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１４
６ ＡＣ Ｈｓｇ＋ｌｓ１３
７ ＡＤ Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１
８ ＢＣ ｌｈｓ１４＋ｌｓ１３
９ ＢＤ ｌｈｓ１４＋ｌｈｓ１１
１０ ＣＤ ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１
１１ ＡＢＣ Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１４＋ｌｓ１３
１２ ＡＢＤ Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１４＋ｌｈｓ１１
１３ ＡＣＤ Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１
１４ ＢＣＤ ｌｈｓ１４＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１
１５ ＡＢＣＤ Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１４＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１
１６ ＣＫ 不接 菌 种 的 ＬＢ 液 体 培 养 基
Ｄｏｎ’ｔｐｉｃｋｓｔｒａｉｎＬＢｌｉｑｕｉｄｍｅｄｉｕｍ
变粉红者表示能分泌ＩＡＡ，颜色越深表示分泌ＩＡＡ能力越强；不变色为阴性，即不分泌ＩＡＡ。
１．８．２　定量测定　采用Ｓａｌｋｏｗｓｋｉ比色法［１９］，吸取１．８．１中培养１２ｄ菌株培养液１００００ｒ／ｍｉｎ、４℃离心１０
ｍｉｎ，取上清液１ｍＬ加１ｍＬＳ２比色液在黑暗下静置３０ｍｉｎ后，迅速用分光光度计比色（波长５３０ｎｍ）进行测
定（标准曲线采用纯的３吲哚乙酸制作）。
１．９　数据统计分析
数据处理采用ＳＰＳＳ１６．０软件，多重比较采用ＬＳＤ法。
２　结果与分析
２．１　菌株拮抗反应测试
微生物间的拮抗作用，一般是指一种微生物的生命活动或其代谢产物，抑制或干扰另一种微生物生命活动的
现象。拮抗试验是鉴定菌株间遗传差异的传统方法，是其不同遗传特性和亲和群的重要表现［２０］。本研究供试菌
株间拮抗反应测试结果表明菌株间均无拮抗反应，可用于制作混合接种液。
２．２　各处理菌株的溶磷能力
２．２．１　溶解无机磷能力　以ＰＫＯ无机磷培养基中磷酸三钙为唯一磷源，对各处理的有效磷增量进行了测定，
结果表明，单菌株处理有效磷增量为１４．６８～３０７．６１ｍｇ／Ｌ，各处理有效磷增量差异显著（犘＜０．０５）（表３），其中
Ｃ处理的有效磷增量最大，为３０７．６１ｍｇ／Ｌ；２菌株组合处理中，ＡＤ处理的有效磷增量最大，为５３６．２６ｍｇ／Ｌ，另
外，ＡＢ、ＡＤ、ＢＣ、ＢＤ处理的有效磷增量均显著高于单菌株处理的有效磷增量，且大于２菌株单独接种时有效磷
增量之和（犘＜０．０５），呈现“１＋１＞２”的溶磷效果，而ＡＣ、ＣＤ处理的有效磷增量均显著高于单菌株处理的有效磷
增量，但均未表现“１＋１＞２”的溶磷效果；３菌株和４菌株组合处理中除ＡＢＤ处理外，其余各处理的有效磷增量
均显著高于单菌株处理的有效磷增量，但均未表现“１＋１＋１＞３”或“１＋１＋１＋１＞４”的溶磷效果。说明没有拮抗
作用的各菌株混合培养，大部分组合能显著提高有效磷的增量，但所起到的作用也不完全是加成效应。
２．２．２　溶解有机磷能力　有机磷是土壤中磷元素的重要来源之一，约占土壤中全部磷元素的３０％～５０％。因
１３第２２卷第１期 草业学报２０１３年
此微生物对有机磷的转化也是土壤中磷元素的重要来
源。本研究中各处理菌株都具有一定的溶解有机磷能
力（表４），有效磷增量总体不高，为２．５０～１１．１１
ｍｇ／Ｌ，为无机磷有效磷增量的２％，其中：单菌株Ｃ处
理有效磷增量最小（２．５０ｍｇ／Ｌ），与其他处理差异极
显著（犘＜０．０１），Ｄ 处理有效磷增量最大（１１．１１
ｍｇ／Ｌ），与其他处理差异显著（犘＜０．０５）；组合处理
ＢＤ有效磷增量较Ｄ和Ｂ处理时低（犘＜０．０５），组合
ＡＣＤ处理的有效磷增量（９．２０ｍｇ／Ｌ）较高，但小于单
菌株Ｄ处理，其余各处理有效磷增量均处于２菌株单
独培养有效磷增量值之间，各组合处理的有效磷增量
均没有表现加成效应。说明菌株组合培养，对有机磷
的溶磷能力不一定会提高，这可能是菌株溶解有机磷
的能力和溶磷机理均与培养的条件等有关。
２．３　有效磷增量与ｐＨ的关系
ｐＨ值是衡量溶液酸碱性的尺度，也是反映微生
物溶磷的影响因素之一。各处理菌株培养１０ｄ后，培
养液ｐＨ 值都明显降低，且较对照差异显著（犘＜
０．０１）。在ＰＫＯ培养液中有效磷增量大于４００ｍｇ／Ｌ
的４个处理的ｐＨ值集中于３．１６～４．６１（表３），在蒙
金娜培养液中有效磷增量大于８ｍｇ／Ｌ的６个处理的
ｐＨ值集中于５．７４～６．７７（表４），说明各处理菌株在
培养的过程中均能分泌一些酸类物质使ｐＨ 值降低。
对ＰＫＯ和蒙金娜培养液有效磷增量与ｐＨ值间的相
关性 分 析 结 果 表 明，ＰＫＯ 培 养 液 的 犢有效磷增量 ＝
－１２５．７７犡ｐＨ＋９０８．７５（犚２＝０．５２５７），有效磷增量与
ｐＨ间呈线性相关（图１）（犘＜０．０１）；蒙金娜培养液的
犢有效磷增量＝－４．０３０５犡ｐＨ＋３２．８５１（犚２＝０．２８２４），有
效磷增量与ｐＨ间也呈现线性相关（图２）（犘＜０．０５），
说明培养液ｐＨ值降低对各处理菌株溶磷作用存在一
定的相关性。
表３　各处理菌株在犘犓犗培养液中有效
磷增量、狆犎值及有机酸总量的变化
犜犪犫犾犲３　犃狏犪犻犾犪犫犾犲犻狀犮狉犲犪狊犲犱狆犺狅狊狆犺狅狉狌狊，狆犎犪狀犱狋狅狋犪犾狅狉犵犪狀犻犮
犪犮犻犱狅狀犘犓犗犮狌犾狋狌狉犲犿犲犱犻狌犿犫狔犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋狊
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
ｐＨ 有效磷增量
Ａｖａｉｌａｂｌｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ
ｉｎｃｒｅｍｅｎｔ（ｍｇ／Ｌ）
有机酸总量
Ｔｏｔａｌｏｒｇａｎｉｃ
ａｃｉｄ（ｍｍｏｌ／Ｌ）
ＣＫ ７．２１±０．４３ａＡ ０．００ｈＥ １．１３±０．２７ｅＥ
Ｂ ５．８４±０．４３ｂＢ １４．６８±０．２４ｇＤ ８．５３±１．０１ｄＣ
Ｃ ５．０２±０．８４ｃＣ ３０７．６１±２．１６ｅＤ１０．４７±０．７８ｃＣ
ＢＣ ４．９４±０．３１ｃＣ ３７９．３２±２．７４ｅＣ１１．２７±０．８６ｃＣ
ＢＣＤ ４．８７±０．３１ｃＣ ３５５．８３±２．１９ｅＣ１２．６７±０．５１ｃＣ
Ｄ ４．７５±０．１８ｃＣ ２０７．４４±１．６３ｇＤ１３．６０±０．６９ｃＢ
ＡＣ ４．７２±０．１６ｄＣ ３０３．８２±４．１２ｆＤ １３．３３±０．５３ｃＢ
ＡＤ ４．６１±０．２４ｄＣ ５３６．２６±４．６２ａＡ１２．９３±１．０４ｃＢ
ＣＤ ４．６０±０．１７ｄＣ ３７４．２２±１．５４ｅＣ１３．４７±１．２２ｃＢ
ＡＢＤ ４．５７±０．１３ｄＣ １７７．８１±１．８３ｇＤ１３．０７±０．５４ｃＢ
ＡＢＣ ４．４７±０．１９ｄＣ ３８１．４３±２．３２ｅＣ１６．６７±１．３１ｃＢ
ＡＢ ４．３６±０．１４ｄＣ ４６３．３４±２．７８ｃＢ １７．６０±０．７４ｂＢ
ＢＤ ４．３０±０．２５ｄＣ ３７６．８５±２．２６ｅＣ１６．２０±０．９３ｃＢ
ＡＣＤ ４．０９±０．２１ｅＣ ４７５．６２±３．１２ｂＢ１６．８７±０．８４ｃＢ
Ａ ３．９５±０．０４ｅＣ ２８３．１７±２．３４ｆＤ ２０．３３±０．６３ａＡ
ＡＢＣＤ ３．１６±０．２７ｆＤ ４１２．２６±３．５２ｄＣ１８．３３±０．３７ｂＢ
　注：Ａ：菌株 Ｈｓｇ；Ｂ：菌株ｌｈｓ１４；Ｃ：菌株ｌｓ１３；Ｄ菌株ｌｈｓ１１。同列不
同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５）；不同大写字母表示差异极显著
（犘＜０．０１）。下同。
　Ｎｏｔｅ：Ａｉｎｄｉｃａｔｅｓｒｈｉｚｏｂｉｕｍ，Ｂｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈｅｓｔｒａｉｎｓｏｆｌｈｓ１４，Ｃｉｎｄｉ
ｃａｔｅｓｔｈｅｓｔｒａｉｎｓｏｆｌｓ１３，Ｄｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈｅｓｔｒａｉｎｓｏｆｌｈｓ１１．Ｉｎａｓａｍｅ
ｃｏｌｕｍｎｍｅａｎｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｅｔｔｅｒｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｔ
０．０５ｌｅｖｅｌ；ｍｅａｎｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃａｐｉｔａｌｌｅｔｔｅｒｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ａｔ０．０１ｌｅｖｅｌ．Ｔｈｅｓａｍｅａｓｆｏｌｏｗ．
２．４　有效磷增量与有机酸总量的关系
许多微生物在生命代谢活动中常常会分泌有机酸，测定各处理菌株培养液的有机酸总量（表３），结果表明，
处理菌株在ＰＫＯ培养液中生长１０ｄ后均能分泌有机酸，各处理与对照（１．１３ｍｍｏｌ／Ｌ）差异显著，有机酸总量为
８．５３～２０．３３ｍｍｏｌ／Ｌ，其中Ａ处理有机酸总量最高，为２０．３３ｍｍｏｌ／Ｌ，ＡＢＣＤ处理有机酸总量次之，为１８．３３
ｍｍｏｌ／Ｌ。分析有机酸总量与培养液有效磷增量间的相关性表明，犢有效磷增量＝１９．４８５犡有机酸总量＋６４．１２７（犚２＝
０．３３７３），培养液有效磷增量与有机酸总量间呈线性相关（图３）（犘＜０．０５），但相关性较弱。Ａ处理的有机酸总
量最高，但有效磷增量（２８３．１７ｍｇ／Ｌ）并非最高，而ＡＢＣＤ处理有机酸总量次之，有效磷增量（４１２．２６ｍｇ／Ｌ）却
高于Ａ处理１２９．１ｍｇ／Ｌ。其结果表明有效磷增量与有机酸总量间存在一定的相关性，但有效磷增量并不完全
由总有机酸量来决定，可能也与分泌的有机酸的种类有关，尤其是多微生物共同作用时，微生物的溶磷机理更加
复杂，是多种因素共同作用的结果。
２３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．１
图１　溶磷量与狆犎值的相关性（犘犓犗培养液）
犉犻犵．１　犚犲犾犪狋犻狅狀狊犺犻狆狊犫犲狋狑犲犲狀犘狊狅犾狌犫犻犾犻狕犪狋犻狅狀犪狀犱
狆犎狏犪犾狌犲（犘犓犗犮狌犾狋狌狉犲犿犲犱犻狌犿）
图２　溶磷量与狆犎值的相关性（蒙金娜培养液）
犉犻犵．２　犚犲犾犪狋犻狅狀狊犺犻狆狊犫犲狋狑犲犲狀犘狊狅犾狌犫犻犾犻狕犪狋犻狅狀犪狀犱
狆犎狏犪犾狌犲（犕狅狀犵狅犾犻犪犑犻狀犮狌犾狋狌狉犲犿犲犱犻狌犿）
２．５　有机酸总量与ｐＨ的关系
微生物生命活动过程中会分泌有机酸，但有机酸
的种类较复杂，菌株培养过程中分泌的有机酸是否对
培养液ｐＨ值的降低起决定作用，对各处理在ＰＫＯ培
养液中的有机酸总量与ｐＨ 值（表３）进行相关性分
析，结果表明，ＹｐＨ＝－０．１８１７Ｘ有机酸总量＋７．１７４８（犚２
＝０．８８９４），ｐＨ值的变化与有机酸总量间相关性显著
（犘＜０．０１）（图４）。Ａ处理有机酸总量最高（２０．３３
ｍｍｏｌ／Ｌ），培养液的ｐＨ 值（３．９５）较对照ＣＫ（７．２１）
显著降低，但并非最低，而 ＡＢＣＤ处理有机酸总量次
之（１８．３３ｍｍｏｌ／Ｌ），培养液的ｐＨ值（３．１６）最低。结
果表明有机酸总量与ｐＨ 值的变化存在线性相关，这
可能与菌株分泌的有机酸的种类和数量有关，另外可
能与菌株协同作用的影响也有一定的关系。
２．６　各处理菌株分泌ＩＡＡ能力
测定各处理菌株分泌ＩＡＡ 的结果可知（表５），
Ｓｐｏｔ试剂比色测定，除Ｄ处理颜色基本没有变化外，
其他处理均有颜色变化，说明除Ｄ处理，其他各处理
都能分泌一定量ＩＡＡ，进一步用Ｓ２试剂定量测定，其
结果与采用Ｓｐｏｔ试剂基本一致，各处理差异显著
（犘＜０．０５），各处理分泌ＩＡＡ 量为０．２１２～９．３３１
μｇ／ｍＬ。单菌株Ｂ处理颜色变化较明显，分泌ＩＡＡ量
表４　各处理菌株在蒙金娜培养液中有效
磷增量和狆犎值的变化
犜犪犫犾犲４　犃狏犪犻犾犪犫犾犲犻狀犮狉犲犪狊犲犱狆犺狅狊狆犺狅狉狌狊犪狀犱狆犎狅狀犕狅狀犵狅犾犻犪
犑犻狀犮狌犾狋狌狉犲犿犲犱犻狌犿犫狔犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋狊
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
ｐＨ 有效磷增量Ａｖａｉｌａｂｌｅ
ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｉｎｃｒｅｍｅｎｔ（ｍｇ／Ｌ）
ＣＫ ７．００±０．０７ａＡ 　　　０．００ｇＥ
ＣＤ ６．８８±０．６２ｂＡ ３．２８±０．７６ｆＥ
ＢＣＤ ６．８０±０．６２ｂＡ ５．８９±０．１７ｅＤ
Ｄ ６．７７±０．３７ｂＡ １１．１１±０．２６ａＡ
Ｂ ６．７５±０．１７ｂＡ ８．６４±０．５８ｃＡ
ＢＤ ６．７４±０．４４ｂＡ ５．１８±０．３８ｆＤ
ＢＣ ６．６５±０．３４ｂＡ ７．０２±０．２６ｄＣ
Ａ ６．６３±０．２４ｂＢ ６．８８±０．６７ｄＣ
Ｃ ６．５７±０．２１ｂＢ ２．５０±０．４３ｇＥ
ＡＢＣＤ ６．４２±０．６７ｄＣ ７．８６±０．２２ｄＢ
ＡＢＤ ６．３５±０．３７ｄＣ ８．２９±０．９２ｄＢ
ＡＢＣ ６．２４±０．２８ｅＤ ７．４４±０．５４ｄＢ
ＡＢ ６．１３±０．４２ｆＤ ７．０２±０．５５ｄＣ
ＡＣＤ ６．０５±０．４１ｆＤ ９．２０±０．８９ｂＡ
ＡＣ ５．８９±０．２２ｇＥ ９．１３±０．６３ｂＡ
ＡＤ ５．７４±０．２７ｈＥ ８．５７±０．４９ｃＡ
也最高（９．３３１μｇ／ｍＬ）。组合处理菌株分泌ＩＡＡ量差异显著，其中：ＢＤ处理分泌ＩＡＡ量较高（９．１５２μｇ／ｍＬ），
ＡＤ处理分泌ＩＡＡ量（６．８８７μｇ／ｍＬ）较菌株Ａ处理分泌ＩＡＡ量（３．６２４μｇ／ｍＬ）和Ｄ处理分泌ＩＡＡ量（０．２１２
μｇ／ｍＬ）显著提高（犘＜０．０１），且表现出“１＋１＞２”的加成效果，其他菌株组合处理，分泌ＩＡＡ量在２菌株单独培
养时分泌ＩＡＡ量之间。说明菌株混合培养，不一定都能提高某种菌株分泌ＩＡＡ的活力，组合菌株分泌ＩＡＡ能
力可能与多种因素有关。
３３第２２卷第１期 草业学报２０１３年
图３　溶磷量与有机酸总量的相关性（犘犓犗培养液）
犉犻犵．３　犚犲犾犪狋犻狅狀狊犺犻狆狊犫犲狋狑犲犲狀犘狊狅犾狌犫犻犾犻狕犪狋犻狅狀犪狀犱
狅狉犵犪狀犻犮犪犮犻犱狊（犘犓犗犮狌犾狋狌狉犲犿犲犱犻狌犿）
图４　狆犎值与有机酸总量的相关性（犘犓犗培养液）
犉犻犵．４　犚犲犾犪狋犻狅狀狊犺犻狆狊犫犲狋狑犲犲狀狆犎狏犪犾狌犲犪狀犱
狅狉犵犪狀犻犮犪犮犻犱狊（犘犓犗犮狌犾狋狌狉犲犿犲犱犻狌犿）
３　讨论
Ｇｌｉｃｋ［２１］和Ｂａｓｈａｎ等［２２］认为用植物促生菌菌剂
接种植物是一种有效促进植物生长、提高作物产量的
方法，ＰＧＰＲ可通过各种代谢途径来促进植物生长，如
固氮、溶磷、产生植物激素、合成铁载体或提高对植物
病原菌的生物控制等。以往对ＰＧＰＲ的分离、筛选和
固氮、溶磷能力等功效的测定，优良菌株的种类鉴定，
研制单菌株接菌剂，并对植物生长特性和品质的影响
等方面开展了大量的研究，取得了一定的成果［２３，２４］。
近年来，有些学者研究了混合接种剂对植物的促生作
用，结果表明对植物的促生作用效果显著，如Ｅｓｉｔｋｅｎ
等［４］采用 犘狊犲狌犱狅犿狅狀犪狊ＢＡ８ 和 犅犪犮犻犾犾狌狊ＯＳＵ１４２
菌株，单独和混合接种欧洲甜樱桃（犘狉狌狀狌狊犪狏犻狌犿），
结果表明，树干的横断面积增加，甜樱桃的重量增加，
嫩枝条长度增加，并使叶片中的Ｎ、Ｐ、Ｋ、Ｆｅ、Ｍｎ和Ｚｎ
的含量增加。Ｏｒｈａｎ等［７］采用犅犪犮犻犾犾狌狊Ｍ３和犅犪犮犻犾
犾狌狊ＯＳＵ１４２混合接种剂接种木莓（犚狌犫狌狊狊狑犻狀犺狅犲犻），
产量增加７４．９％，茎长增加１５．０％，叶片中的Ｎ、Ｐ、
Ｋ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｍｎ和Ｚｎ含量增加，土壤中有效磷的
含量从１．５５ｍｇ／ｋｇ增加到４．７１ｍｇ／ｋｇ。Ｋａｒｌｉｄａｇ
等［６］采用 犅犪犮犻犾犾狌狊 Ｍ３、犅犪犮犻犾犾狌狊 ＯＳＵ１４２ 和 犕犻
犮狉狅犫犪犮狋犲狉犻狌犿ＦＳ０１菌株，单独和混合接种苹果（犕犪犾狌狊
犱狅犿犲狊狋犻犮犪）５年后，产量增加２６．０％～８８．０％，水果
表５　各处理在犓犻狀犵培养基分泌犐犃犃浓度
犜犪犫犾犲５　犆狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳犐犃犃狊犲犮狉犲狋犲犳狉狅犿
狋狉犲犪狋犿犲狀狋狊犫犪犮狋犲狉犻犪狅狀犓犻狀犵犮狌犾狋狌狉犲
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
显色反应
Ｓｐｏｔｔｅｓｔ
ＩＡＡ的量
ＩＡＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（μｇ／ｍＬ）
Ｂ ＋＋ ９．３３１ａＡ
ＢＤ ＋＋ ９．１５２ａＡ
ＡＢＣ ＋＋ ８．０１９ｂＡ
Ｃ ＋＋ ７．７５１ｃＢ
ＡＢＤ ＋＋ ７．２４５ｄＢ
ＡＣＤ ＋ ７．０９６ｄＣ
ＡＤ ＋ ６．８８７ｄＣ
ＢＣ ＋ ６．４８５ｅＤ
ＡＢＣＤ ＋ ６．３８０ｅＤ
ＡＣ ＋ ５．３２３ｆＥ
ＡＢ ＋ ４．９０５ｆＥ
ＢＣＤ ＋ ４．０１１ｆＥ
Ａ ＋ ３．６２４ｆＦ
ＣＤ ＋ ３．３４１ｆＦ
Ｄ － ０．２１２ｇＧ
ＣＫ － ０．０００ｇＧ
　注：“＋”表示浅粉红；“＋＋”表示粉红。
　Ｎｏｔｅ：“＋”ｍｅａｎｓｌｉｇｈｔｐｉｎｋ，“＋＋”ｍｅａｎｓｐｉｎｋ．
重量增加１３．９％～２５．５％，枝条长度增加１６．４％～２９．６％，枝条直径增加１５．９％～１８．４％。ＰＧＰＲ菌株单独和
混合接种都能促进植物的生长和产量的增加，但混合接种的效果更好。植物根际存在有益菌群的同时，也存在许
多病原菌［２５２８］，使得植物产量降低，造成了经济损失，目前，生防菌剂的研究与应用逐步成为热点，本研究中所用
菌株对病原菌的生防性能有待进一步研究。
本研究对４株优良ＰＧＰＲ菌株进行不同组合处理，测定各处理的溶磷能力，有些菌株混合比单菌株表现更
４３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．１
好的功效，如本研究的组合ＡＤ（Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１）、ＡＣＤ（Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１）等处理，也有菌株混合后功效降低，如组
合ＣＤ（ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１）等处理。综合分析各菌株组合溶解无机磷和有机磷结果发现，具有优良特性的菌株组合处
理，并不是都能表现出良好的加成效应，也不是组合菌株越多越好，这是因为菌株间交互作用受多种因素综合的
作用：一方面可能是各菌株本身菌体差异较大［２９］，多菌株同时接种后，存在营养和空间的竞争；另一方面相对单
独培养，共同培养会导致生理代谢物质的差异，不能排除彼此产生的分泌物对其他菌株溶磷效果的抑制作用；第
三，磷是微生物生长繁殖的必需营养元素之一，在溶磷菌和固氮菌的培养过程中，将消耗一部分可溶性磷构建微
生物细胞［３０］。同时采用Ｓｐｏｔ和Ｓ２试剂定性、定量测定各处理分泌ＩＡＡ的能力，除组合ＡＤ（Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１）处理
外，大部分菌株组合处理分泌ＩＡＡ量为２菌株单独培养时分泌ＩＡＡ量之间。说明菌株混合培养，可能提高某种
菌株分泌ＩＡＡ的活力，同时抑制另一菌株活力，另外菌株分泌ＩＡＡ能力与培养环境及代谢途径等多种因素有
关，并且，这些菌株分离自不同生境植物根际，当它们混合培养后，可能有一个相互适应的过程，或者由于生境的
差异，使菌株组合不能表现出良好的促生作用，其相关的作用机理尚需进一步研究。
微生物溶磷机理非常复杂，有些微生物溶磷主要是质子起作用，有些主要是有机酸起作用，而有些菌株则２
种机制都存在，还有些菌株由于生长过程中产生其他的螯合物质，从而导致磷矿粉的溶解［３１］。Ｎａｒｓｉａｎ和
Ｐａｔｅｌ［３２］、Ｉｌｍｅｒ和Ｓｃｈｉｎｎｅｒ［３３］研究表明溶磷量和培养介质ｐＨ值之间缺乏相关性，但Ｐａｕｌ和Ｓｕｎｄａｒａ［３４］、康贻
军等［３５］、冯瑞章等［３６］和王光华等［３７］报道二者之间存在显著的线性相关关系。本研究发现，菌株培养液有效磷增
量与ｐＨ值、有效磷增量与有机酸总量、有机酸总量与ｐＨ值之间都存在线性相关关系，表明溶磷菌分泌有机酸
的溶磷作用，但溶磷菌把磷酸盐从难溶状态转化为可溶状态是一个复杂的过程，并且溶磷菌株之间溶磷机制存在
多样性，溶磷菌溶磷的机理、磷酸酶的作用、释放Ｈ＋的作用、蛋白质的作用等有待进一步研究。
筛选出的ＡＤ（Ｈｓｇ＋ｌｈｓ１１）、ＡＣＤ（Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１）组合处理较其他组合处理具有较好的互作协同作用，
表现出良好的互作效能，可作为复合微生物肥料生产的潜在优良菌株组合作一步研究，本研究采用的菌株正在进
行鉴定，研究这些菌株在植物根际的定殖能力和实际促生效果将成为进一步工作的重点。
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犾狌犿犫狉犪狊犻犾犲狀狊犲ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｉｎｔｏｄｉｓｔｕｒｂｅｄＵｒｂａｎＤｅｓｅｒｔｓｏｉｌ［Ｊ］．ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９９，４５：４４１４５１．
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６３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．１
犐狀狋犲狉犪犮狋犻狅狀狊狅犳犳狅狌狉犘犌犘犚狊犻狊狅犾犪狋犲犱犳狉狅犿狆犪狊狋狌狉犲狉犺犻狕狅狊狆犺犲狉犲
ＺＨＡＮＧＹｉｎｇ１，２，ＺＨＵＹｉｎｇ１，ＹＡＯＴｕｏ１，ＱＩＪｕａｎ１，ＲＯＮＧＬｉａｎｇｙａｎ１
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＧａｎｓｕＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＧｒａｓｓｌａｎｄ
ＥｃｏｓｙｓｔｅｍＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＳｉｎｏＵ．Ｓ．ＣｅｎｔｅｒｓｆｏｒＧｒａｚｉｎｇｌａｎｄＥｃｏｓｙｓｔｅｍＳｕｓｔａｉｎａｂｉｌｉｔｙ，
Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｒａｓｓｌａｎｄＳｃｉｅｎｃｅ，Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄ
ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙＣｏｌｅｇｅ，ＱｉｎｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｉｎｇ８１００１６，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：ＦｏｕｒＰＧＰＲｓ（ｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｎｇｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉａ）ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｓｃｒｅｅｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅｒｈｉｚｏ
ｓｐｈｅｒｅｓｏｆ犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪，犜狉犻犳狅犾犻狌犿狉犲狆犲狀狊ａｎｄ犜狉犻犳狅犾犻狌犿狆狉犪狋犲狀狊犲．Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｒｅａｃｔｉｏｎｓ，ｔｈｅａｂｉｌｉｔｙｏｆ
ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇｐｈｏｓｐｈａｔｅａｎｄｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＩＡＡ （ＩｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃＡｃｉｄ）ｂｙｓｔｒａｉｎｓｉｎｂｏｔｈｓｉｎｇｌｅａｎｄｃｏｍｐｏｕｎｄ
ｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｏｇｅｔｈｅｒｗｉｔｈｔｈｅｐＨｖａｌｕｅｓｏｆｃｕｌｔｕｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓａｎｄｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄ．Ｔｈｅａ
ｂｉｌｉｔｙｔｏｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｐｈｏｓｐｈａｔｅａｎｄｐｒｏｄｕｃｅＩＡＡｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｍｏｌｙｂｄｅｎｕｍｂｕｌｅａｎｄＳａｌｋｏｗｓｋｉｃｏｌｏｒｉｍｅ
ｔｒｙ．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｉｔｙｏｆｉｓｏｌａｔｅｄｂａｃｔｅｒｉａｌｓｔｒａｉｎｓｗａｓａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗａｓｎｏａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ
ｒｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｉｎｓｓｏｔｈａｔｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓｃｏｕｌｄｂｅｕｔｉｌｉｚｅｄ．Ｉｎａｂｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｃｕｌｔｕｒｅ
ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅＨｓｇ＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｈａｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎｃｒｅｍｅｎｔｏｆｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ（５３６．２ｍｇ／Ｌ），
ｗｈｉｌｅｔｈｅＨｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｗａｓｓｅｃｏｎｄ（４７５．６ｍｇ／Ｌ）．Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｉｎｃｒｅｍｅｎｔｓ
ｇａｖｅａｄｄｉｔｉｏｎａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆ“１＋１＞２”ｉｎＨｓｇ＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓ．ＥｆｆｅｃｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎＨｓｇ＋
ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇｓｔｒａｉｎｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｓｔ（犘＜０．０１），ｂｕｔｔｈｅｒｅｗａｓｎｏａｄｄｉ
ｔｉｏｎａｌｅｆｆｅｃｔｗｉｔｈ“１＋１＋１＞３”Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓ．Ｉｎｏｒｇａｎｉｃｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｃｕｌｔｕｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ，
ｔｈｅｌｈｓ１１ｓｔｒａｉｎｈａｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｉｎｃｒｅｍｅｎｔ（１１．１１ｍｇ／Ｌ），ａｎｄＨｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１ｃｏｍ
ｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓｗａｓｓｅｃｏｎｄ（９．２０ｍｇ／Ｌ）．ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｉｎｃｒｅｍｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅＨｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１ｃｏｍ
ｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｉｎｏｔｈｅｒｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｌｉｎｅａｒｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｅｆｆｅｃ
ｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｉｎｃｒｅｍｅｎｔａｎｄｐＨｖａｌｕｅ，ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｉｎｃｒｅｍｅｎｔａｎｄｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄ，ｐＨ
ｖａｌｕｅａｎｄｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄ．Ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｉｎｓａｎｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓｂｏｔｈｈａｄｔｈｅａｂｉｌｉｔｙｔｏｐｒｏｄｕｃｅ
ＩＡＡ，ｂｅｔｗｅｅｎ０．２１２－９．３３１ｍｇ／Ｌ．ＴｈｅＩＡＡｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅＨｓｇ＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎ
ｔｈａｔｏｆｔｈｅｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｉｎＨｓｇｏｒｌｈｓ１１ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ（犘＜０．０１），ｂｏｔｈｏｆｗｈｉｃｈｐｒｅｓｅｎｔｅｄａ“１＋１＞２”ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ
ｅｆｆｅｃｔ．Ｃｏｎｓｉｄｅｒｔｈｅｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ，ｔｈｅＨｓｇ＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓａｎｄ
Ｈｓｇ＋ｌｓ１３＋ｌｈｓ１１ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｓｈａｄｂｅｔｔｅｒｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｓｏｔｈｅｙｈａｖｅｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｔｏｄｅｖｅｌｏｐｔｈｅｏｐ
ｔｉｍａｌｃｏｍｐｏｕｎｄｓｔｒａｉｎｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａ；ｐｒｏｄｕｃｉｎｇＩＡＡ；ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ；ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ
７３第２２卷第１期 草业学报２０１３年