全 文 ：书犇犗犐：１０．１１６８６／犮狔狓犫２０１４３３７ 犺狋狋狆：／／犮狔狓犫．犾狕狌．犲犱狌．犮狀
王瑜，刘怡，周彬彬，袁庆华，张丽，潘龙其．苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究．草业学报，２０１５，２４（７）：１５５１６２．
ＷａｎｇＹ，ＬｉｕＹ，ＺｈｏｕＢＢ，ＹｕａｎＱＨ，ＺｈａｎｇＬ，ＰａｎＬＱ．Ａｎｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆａｌｆａｌｆａｃｕｌｔｉｖａｒｓｔｏ犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿ａｎｄ犘犺狅犿犪ｌｅａｆｓｐｏｔ
ｄｉｓｅａｓｅｓ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１５，２４（７）：１５５１６２．
苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究
王瑜１，刘怡１，周彬彬１，袁庆华１，张丽１，２，潘龙其１，２
（１．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京１００１９３；２．甘肃农业大学草业学院，甘肃 兰州７３００７０）
摘要：为探明不同紫花苜蓿品种对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性，本研究采用温室内孢子悬浮液喷雾接种
法，对来自国内外的４０个苜蓿品种进行了苗期抗病性鉴定和评价，同时，对接种浓度进行研究。研究结果表明，随
着孢子悬浮液浓度的升高，１０个品种匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的病情指数均呈现逐渐升高的趋势，匍柄霉叶
斑病的适宜接种浓度为１×１０５～１×１０６ 个孢子／ｍＬ，茎点霉叶斑病的适宜接种浓度为１×１０６ 个孢子／ｍＬ。在１×
１０６ 个孢子／ｍＬ的接种浓度下，４０个苜蓿品种匍柄霉叶斑病的病情指数为３．３３～３５．８３，茎点霉叶斑病的病情指数
为１３．０７～５２．２７，品种间均存在显著差异（犘＜０．０５）。从中筛选出抗匍柄霉叶斑病品种１４份，其中，高抗品种１份
（公农２号），中抗品种１３份；从中筛选出抗茎点霉叶斑病品种１份，为来自美国的中抗品种润布勒。
关键词：紫花苜蓿；匍柄霉叶斑病；茎点霉叶斑病；抗病性　　
犃狀犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲狉犲狊犻狊狋犪狀犮犲狅犳犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊狋狅犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犪狀犱犘犺狅犿犪犾犲犪犳
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ＷＡＮＧＹｕ１，ＬＩＵＹｉ１，ＺＨＯＵＢｉｎＢｉｎ１，ＹＵＡＮＱｉｎｇＨｕａ１，ＺＨＡＮＧＬｉ１，２，ＰＡＮＬｏｎｇＱｉ１，２
１．犐狀狊狋犻狋狌狋犲狅犳犃狀犻犿犪犾犛犮犻犲狀犮犲狅犳犆犃犃犛，犅犲犻犼犻狀犵１００１９３，犆犺犻狀犪；２．犆狅犾犾犲犵犲狅犳犌狉犪狊狊犾犪狀犱犛犮犻犲狀犮犲，犌犪狀狊狌犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻
狋狔，犔犪狀狕犺狅狌７３００７０，犆犺犻狀犪
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｆｏｒｔｙａｌｆａｌｆａ（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）ｃｕｌｔｉｖａｒｓｗｅｒｅｃｏｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍＣｈｉｎａａｎｄａｂｒｏａｄａｎｄｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｗｉｔｈ
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１３．０７ｔｏ５２．２７．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅ４０ｃｕｌｔｉｖａｒｓ（犘＜０．０５）．Ｆｏｕｒｔｅｅｎｃｕｌｔｉｖａｒｓ
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ｅｒａｔｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏ犘犺狅犿犪ｌｅａｆｓｐｏｔ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ａｌｆａｌｆａ（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）；犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿ｌｅａｆｓｐｏｔ；犘犺狅犿犪ｌｅａｆｓｐｏｔ；ｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
第２４卷　第７期
Ｖｏｌ．２４，Ｎｏ．７
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
２０１５年７月
Ｊｕｌｙ，２０１５
收稿日期：２０１４０８２０；改回日期：２０１４１２２５
基金项目：“十二五”国家科技支撑计划课题（２０１１ＢＡＤ１７Ｂ０１）和公益性行业（农业）科研专项经费项目（２０１３０３０５７）资助。
作者简介：王瑜（１９８１），女，山东威海人，助理研究员。Ｅｍａｉｌ：ｙｕｗａｎｇ９９＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
通讯作者Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．Ｅｍａｉｌ：ｙｕａｎｑｉｎｇｈｕａ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
紫花苜蓿（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）是全世界最重要的豆科牧草，因其具有品质优良、适口性好、饲用形式多样、饲
用价值高和良好的生态效应，被冠以“牧草之王”的美称［１３］。近年来，随着我国苜蓿种植面积的进一步扩大，苜蓿
病害问题也日趋严重，已成为制约苜蓿产业发展的重要因素之一［４］。其中，苜蓿叶部病害是引起草场退化、草产
量减少、草产品质量下降的重要原因［５］。苜蓿匍柄霉叶斑病（犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿ｌｅａｆｓｐｏｔ）又称苜蓿轮斑病，是由匍柄
霉（犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犫狅狋狉狔狅狊狌犿）引起的叶部病害。该病广泛发生于美国、澳大利亚、新西兰等国家，在我国的华北、
东北与西北等苜蓿主产区也有该病发生的记录，已同锈病、霜霉病、褐斑病并列为中国普遍发生、危害较重的叶部
病害［６９］。匍柄霉叶斑病发生严重时会导致叶片大量脱落，荚果生长期缩短，种子产量降低５０％，叶片中香豆醇
含量显著增高［１０］。
苜蓿茎点霉叶斑病又称春季黑茎与叶斑病（ｓｐｒｉｎｇｂｌａｃｋｓｔｅｍａｎｄｌｅａｆｓｐｏｔ），是由苜蓿茎点霉（犘犺狅犿犪
犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊ｖａｒ．犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊）引起的叶部病害。该病是一种广泛发生的世界性病害，在我国的吉林、甘肃、内
蒙古、河北、陕西等地均有发现［１１１２］。苜蓿茎点霉叶斑病发生严重时使苜蓿干草产量减产４０％～５０％，种子产量
减产３０％，在生长季中期和后期，此病常发生非常严重，对许多大叶型品种（如新疆的和阗苜蓿、沙湾苜蓿、布尔
津苜蓿，以及从美国和苏联引进的许多品种）危害很大，株发病率可高达８０％～１００％［１１］。
选用抗病品种是苜蓿病害防治最为经济有效的方法，对苜蓿霜霉病［１３］与褐斑病［１４］等叶部病害，国内已有研
究者进行了抗病种质材料筛选研究。对匍柄霉叶斑病［６，１５１６］与茎点霉叶斑病［１７］国外已有研究者针对国外苜蓿品
种进行了抗病性鉴定与评价，国内则仅有研究者进行了匍柄霉叶斑病［１８１９］的抗病性评价，针对茎点霉叶斑病的抗
性评价鉴定尚无报道。本研究通过温室内孢子悬浮液喷雾接种法，对来自国内外的４０个苜蓿品种分别进行匍柄
霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗病性鉴定与评价，以筛选抗病品种，为我国苜蓿种植中抗病品种的选择与抗病育种
提供参考依据。
１　材料与方法
１．１　供试材料
苜蓿品种：本试验所用４０个苜蓿品种（表１）由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草种质资源研究室提
供，其中，来自国外的品种２４个，来自国内的品种１６个。
供试菌株：匍柄霉与苜蓿茎点霉菌种分别采自内蒙古阿鲁科尔沁旗田园牧歌草业公司生产基地与吉林农业
科学院试验基地，经室内分离纯化扩繁及致病性鉴定后，接种于ＰＤＡ培养基上，４℃保存备用。
１．２　研究方法
１．２．１　育苗　　试验于２０１４年３－８月在中国农业科学院北京畜牧兽医研究所廊坊基地进行。将苜蓿种子用
０．１％ 升汞消毒３～５ｍｉｎ，无菌水冲洗４次，之后放在消毒培养皿的滤纸上，加适量灭菌水以保持种子吸水膨胀。
将培养皿放入２０℃培养箱内，待种子发芽至幼根长到１ｃｍ长时移植到装有灭菌草炭与壤土（１∶１）的塑料盘中，
塑料盘规格为６０ｃｍ×４５ｃｍ×１５ｃｍ（长×宽×高）。移植时，每个塑料盘划分为１０行，每行种植１个品种（１０
株／行），每品种３个重复，２５℃温室内培养６周后进行接种。
１．２．２　接种方法　　采用孢子悬浮液喷雾接种法。分别配制浓度为１×１０７，１×１０６ 和１×１０５ 个孢子／ｍＬ的分
生孢子悬浮液，在２ｈ内用喉头喷雾器将其均匀喷洒在苜蓿叶片上，每盘用量为４０ｍＬ，覆盖黑色塑料薄膜以确
保１００％相对空气湿度，２３℃黑暗保湿２４ｈ，之后移去塑料薄膜，２５℃温室内正常管理。１２ｄ后进行病情调查。
随机选择４（阿伯罗Ⅱ）、８（定襄）、１２（呼图壁）、１６（雷西斯）、２０（南特）、２４（切罗克）、２８（泰安）、３２（焉耆）、３６
（印第安）、４０（费纳尔）等１０个品种进行３个浓度孢子悬浮液喷雾接种，根据病情指数筛选适宜的接种浓度。之
后，利用筛选出的适宜接种浓度对４０份材料进行接种。
１．２．３　病情调查　　对每株苜蓿每个叶片的病情级别进行调查，根据小叶病斑占叶面积的百分比对叶片进行病
害分级。
匍柄霉叶斑病的分级标准为，０级：无病斑；１级：小叶病斑面积占叶面积的１％～５％；２级：小叶病斑面积占
叶面积的５％～１５％；３级：小叶病斑面积占叶面积的１５％～２５％；４级：小叶病斑面积占叶面积的２５％以上。
６５１ 草　业　学　报 第２４卷
　　茎点霉叶斑病的分级标准为，０级：无病斑；１
级：小叶病斑占叶面积的１％～５％；２级：小叶病斑
占叶面积的５％～１５％；３级：小叶病斑占叶面积的
１５％～２５％；４级：小叶病斑占叶面积的２５％～
３５％；５级：小叶病斑占叶面积的３５％以上。
计算各品种的发病率和病情指数，每品种３次
重复，每重复统计１０株。
发病率（％）＝（病株数／总株数）×１００
病情指数＝ ∑
（各级病叶数×该级代表值）
调查总叶片数×最重级别代表值×１００
１．２．４　抗病级别划分　　根据各品种苜蓿的病情
指数分别对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗病
级别进行划分，分级标准为：病情指数＜５为高抗；
５≤病情指数≤１５为中抗；１５＜病情指数≤２５为中
感；病情指数＞２５为高感。
１．３　数据处理
利用ＳＰＳＳ１９．０软件进行数据统计分析，用
Ｄｕｎｃａｎ法进行差异显著性分析。
２　结果与分析
２．１　孢子悬浮液浓度的筛选
３个孢子悬浮液浓度下，１０个品种间匍柄霉叶
斑病的病情指数均存在显著差异（犘＜０．０５），随着
孢子悬浮液浓度的升高，各品种的病情指数均呈现
升高的趋势（图１）。当孢子悬浮液浓度为１×１０５
个孢子／ｍＬ时，１０个品种匍柄霉叶斑病的病情指
数为４．６７～２８．３３；当孢子悬浮液浓度为１×１０６
个孢子／ｍＬ时，病情指数为７．５０～３５．８３；当孢子
悬浮液浓度为１×１０７ 个孢子／ｍＬ时，病情指数为
３６．６７～６６．６７，该浓度下１０个品种的病情指数普
遍较高，均表现为高度感病，不利于区分抗感材料。
因此，１×１０５～１×１０６ 个孢子／ｍＬ为匍柄霉叶斑
病适宜的接种浓度，本试验后期采用１×１０６ 个孢
子／ｍＬ。
随着孢子悬浮液浓度的升高，各品种茎点霉叶
斑病的病情指数也呈现升高的趋势（图２）。当孢
子悬浮液浓度为１×１０５ 个孢子／ｍＬ时，１０个品种
茎点霉叶斑病的病情指数为１４．９３～２１．３３，各材
料间无显著差异；当孢子悬浮液浓度为１×１０６ 个
孢子／ｍＬ时，病情指数为２０．００～３９．２０，材料间存
在显著差异（犘＜０．０５）；当孢子悬浮液浓度为１×
１０７ 个孢子／ｍＬ时，病情指数为３０．６７～６６．１３，材
表１　苜蓿品种及来源
犜犪犫犾犲１　犃犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊犪狀犱狋犺犲犻狉狉犲狊狅狌狉犮犲狊
编号
Ｃｏｄｅ
品种
Ｃｕｌｔｉｖａｒ
来源地
Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ
１ １０２号 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｎｏ．１０２ 苏联ＳｏｖｉｅｔＵｎｉｏｎ
２ 龙牧８０３犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＬｏｎｇｍｕＮｏ．８０３黑龙江 Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ
３ Ｃ／Ｗ５犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｃ／Ｗ５ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
４ 阿伯罗Ⅱ犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＡｐｏｌｏⅡ 联合国粮食及农业组织ＦＡＯ
５ 阿罗特 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ａｌｏｕｅｔｔｅ 联合国粮食及农业组织ＦＡＯ
６ 博维 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｂｏｖｉｓｓ 加拿大Ｃａｎａｄａ
７ 氮素 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｎｉｔｒｏ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
８ 定襄 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｄｉｎｇｘｉａｎｇ 山西Ｓｈａｎｘｉ
９ 法金内 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｆａｇｉｎｉｎ 澳大利亚 Ａｕｓｔｒａｌｉａ
１０ 阜康 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｆｕｋａｎｇ 新疆Ｘｉｎｊｉａｎｇ
１１ 公农２号 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＧｏｎｇｎｏｎｇＮｏ．２陕西Ｓｈａｎｘｉ
１２ 呼图壁 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｈｕｔｕｂｉ 新疆Ｘｉｎｊｉａｎｇ
１３ 霍呐伊 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｈｏｎｅｏｙｅ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
１４ 兰格勒 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｌａｎｇｒｅｏ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
１５ 劳拉 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｌａｕｒａ 联合国粮食及农业组织ＦＡＯ
１６ 雷西斯 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒｅｓｉｓ 丹麦Ｄｅｎｍａｒｋ
１７ 罗佑玛 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒｈｉｚｏｍａ 加拿大Ｃａｎａｄａ
１８ 米蒂奥 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｍｅｔｅｏｒ 联合国粮食及农业组织ＦＡＯ
１９ 莫欧佩６９犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｍｏａｐａ６９ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
２０ 南特 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｎａｎｔｅ 澳大利亚 Ａｕｓｔｒａｌｉａ
２１ 帕拉维沃 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＰａｒａＷｅａｖｅｒ 澳大利亚 Ａｕｓｔｒａｌｉａ
２２ 皮克斯塔 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＰｉｃｋＳｔａｒ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２３ 乾果 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｑｉａｎｇｕｏ 陕西Ｓｈａｎｘｉ
２４ 切罗克 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｃｈｅｒｏｋｅｅ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
２５ 润布勒 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒａｍｂｌｅｒ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２６ 蔏瓦 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒｕｏｗａ 澳大利亚 Ａｕｓｔｒａｌｉａ
２７ 萨帕斯 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｓｕｒｐａｓｓ 联合国粮食及农业组织ＦＡＯ
２８ 泰安 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｔａｉａｎ 兰州Ｌａｎｚｈｏｕ
２９ 维勒 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｖｅｉｌｅｒ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３０ 咸阳 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｘｉａｎｙａｎｇ 陕西Ｓｈａｎｘｉ
３１ 兴平 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｘｉｎｇｐｉｎｇ 兴平Ｘｉｎｇｐｉｎｇ
３２ 焉耆 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙａｎｓｈｉ 新疆Ｘｉｎｊｉａｎｇ
３３ 阳高 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙａｎｇｇａｏ 山西Ｓｈａｎｘｉ
３４ 伊犁 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙｉｌｉ 新疆Ｘｉｎｊｉａｎｇ
３５ 沂阳 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙｉｙａｎｇ 陕西Ｓｈａｎｘｉ
３６ 印第安 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｉｎｄｉａｎ 印度Ｉｎｄｉａ
３７ 秘鲁 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｐｅｒｕ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
３８ 芋县 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙｕｘｉａｎ 河北 Ｈｅｂｅｉ
３９ 长武 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｃｈａｎｇｗｕ 陕西Ｓｈａｎｘｉ
４０ 费纳尔 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｖｅｒｎａｌ 美国 Ａｍｅｒｉｃａ
　注：ＦＡＯ为联合国粮食及农业组织的简称。
　Ｎｏｔｅ：ＦＡＯｉｓｔｈｅａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｏｆＦｏｏｄａｎｄＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ．
７５１第７期 王瑜　等：苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究
图１　匍柄霉孢子悬浮液不同接种浓度对１０个苜蓿品种病情指数的影响
犉犻犵．１　犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻狀狅犮狌犾犪狋犻狅狀犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳犛．犫狅狋狉狔狅狊狌犿狊狆狅狉犲狊
狊狌狊狆犲狀狊犻狅狀狅狀犱犻狊犲犪狊犲犻狀犱犲狓狅犳狋犲狀犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊
　同一孢子悬浮液浓度下的不同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５）。下同。Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｅｔｔｅｒｓｕｎｄｅｒｔｈｅｓａｍｅｓｐｏｒｅｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｈｏｗｓｉｇｎｉｆ
ｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ（犘＜０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
图２　茎点霉孢子悬浮液不同接种浓度对１０个苜蓿品种病情指数的影响
犉犻犵．２　犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻狀狅犮狌犾犪狋犻狅狀犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳犘．犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊狏犪狉．犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊
狊狆狅狉犲狊狊狌狊狆犲狀狊犻狅狀狅狀犱犻狊犲犪狊犲犻狀犱犲狓狅犳狋犲狀犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊
　
料间也存在显著差异（犘＜０．０５），但该浓度下１０个品
图３　４０个苜蓿品种匍柄霉与茎点霉叶斑病
病情指数的频率分布
犉犻犵．３　犇犻狊狋狉犻犫狌狋犻狅狀狅犳犱犻狊犲犪狊犲犻狀犱犲狓狅犳犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犪狀犱
犘犺狅犿犪犾犲犪犳狊狆狅狋犻狀犳狅狉狋狔犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊
　
种的病情指数也普遍较高，均表现为高度感病，不利于
区分抗感材料。因此，茎点霉叶斑病的适宜接种浓度
为１×１０６ 个孢子／ｍＬ。
２．２　对匍柄霉叶斑病的抗病性
４０份材料间匍柄霉叶斑病的病情指数存在显著
差异（犘＜０．０５），发病率亦存在显著差异（犘＜０．０５）
（表２）。病情指数的变化范围为３．３３～３５．８３，发病率
的变化范围为１３．３３％～９６．６７％，表明不同品种苜蓿
材料对匍柄霉叶斑病的抗性存在较大差异。根据频率
分布图（图３）可知，病情指数小于５的高抗材料有１
份；病情指数为５～１５的中抗材料有１３份；病情指数
为１５～２５的中感材料有１４份；病情指数大于２５的高
８５１ 草　业　学　报 第２４卷
表２　４０个苜蓿品种匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的病情分级
犜犪犫犾犲２　犈狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳犳狅狉狋狔犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊狉犲狊犻狊狋犪狀犮犲狋狅犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犪狀犱犘犺狅犿犪犾犲犪犳狊狆狅狋
编号
Ｃｏｄｅ
品种
Ｃｕｌｔｉｖａｒ
匍柄霉叶斑病犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿ｌｅａｆｓｐｏｔ
发病率
Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆ
ｄｉｓｅａｓｅ（％）
病情指数
Ｄｉｓｅａｓｅ
ｉｎｄｅｘ
抗病级别
Ｇｒａｄｅｏｆｄｉｓｅａｓｅ
ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
茎点霉叶斑病犘犺狅犿犪ｌｅａｆｓｐｏｔ
病情指数
Ｄｉｓｅａｓｅ
ｉｎｄｅｘ
抗病级别
Ｇｒａｄｅｏｆｄｉｓｅａｓｅ
ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
１ １０２号 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｎｏ．１０２ ５３．３３±５．５５ １６．６７±２．５８ 中感 ＭＳ ３２．４０±２．７２ 高感 ＨＳ
２ 龙牧８０３犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＬｏｎｇｍｕＮｏ．８０３ ５３．３３±５．２８ １７．５０±１．６６ 中感 ＭＳ ２３．３３±２．３１ 中感 ＭＳ
３ Ｃ／Ｗ５犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｃ／Ｗ５ ３０．００±１．３２ １０．００±０．６１ 中抗 ＭＲ ３２．８０±２．３１ 高感 ＨＳ
４ 阿伯罗Ⅱ 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＡｐｏｌｏⅡ ７０．００±６．００ ２７．５０±２．６１ 高感 ＨＳ ４１．０７±４．１７ 高感 ＨＳ
５ 阿罗特 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ａｌｏｕｅｔｔｅ ５０．００±３．３２ １５．００±０．３８ 中抗 ＭＲ １７．８７±１．０１ 中感 ＭＳ
６ 博维 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｂｏｖｉｓｓ ７３．３３±５．７７ ３４．１７±２．２０ 高感 ＨＳ １７．０７±１．０８ 中感 ＭＳ
７ 氮素 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｎｉｔｒｏ ６０．００±７．２３ ２２．５０±１．３３ 中感 ＭＳ ５１．２０±５．３９ 高感 ＨＳ
８ 定襄 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｄｉｎｇｘｉａｎｇ ４０．００±３．７０ １４．１７±１．４４ 中抗 ＭＲ ３２．００±２．０１ 高感 ＨＳ
９ 法金内 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｆａｇｉｎｉｎ ８６．６７±５．７８ ３２．５０±４．３３ 高感 ＨＳ ２５．００±０．９３ 中感 ＭＳ
１０ 阜康 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｆｕｋａｎｇ ３６．６７±２．２８ １５．００±１．００ 中抗 ＭＲ ５０．６７±５．０１ 高感 ＨＳ
１１ 公农２号 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＧｏｎｇｎｏｎｇＮｏ．２ １３．３３±１．５３ ３．３３±０．０３ 高抗 ＨＲ ３０．８０±３．０３ 高感 ＨＳ
１２ 呼图壁 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｈｕｔｕｂｉ ７６．６７±８．５５ ３０．８３±２．４１ 高感 ＨＳ ３１．６０±４．８２ 高感 ＨＳ
１３ 霍呐伊 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｈｏｎｅｏｙｅ ６３．３３±５．３５ ２２．５０±１．０１ 中感 ＭＳ ２２．６７±２．０１ 中感 ＭＳ
１４ 兰格勒 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｌａｎｇｒｅｏ ４６．６７±３．２８ １３．３３±０．８７ 中抗 ＭＲ ４１．５３±４．２３ 高感 ＨＳ
１５ 劳拉 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｌａｕｒａ ６０．００±７．３２ ２０．８３±３．０２ 中感 ＭＳ ５０．６７±７．０２ 高感 ＨＳ
１６ 雷西斯 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒｅｓｉｓ ６３．３３±６．３５ ２０．８３±４．２０ 中感 ＭＳ ３９．２０±２．７７ 高感 ＨＳ
１７ 罗佑玛 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒｈｉｚｏｍａ ２３．３３±２．４７ ７．５０±０．３３ 中抗 ＭＲ ４０．１３±６．２２ 高感 ＨＳ
１８ 米蒂奥 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｍｅｔｅｏｒ ８０．００±９．２７ ３４．１７±１．８１ 高感 ＨＳ ３９．２０±６．９３ 高感 ＨＳ
１９ 莫欧佩６９犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｍｏａｐａ６９ ８０．００±６．１９ ２９．１７±０．８４ 高感 ＨＳ ４８．５３±３．３２ 高感 ＨＳ
２０ 南特 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｎａｎｔｅ ５６．６７±３．０６ １９．１７±１．４１ 中感 ＭＳ ２５．００±４．２３ 中感 ＭＳ
２１ 帕拉维沃 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＰａｒａＷｅａｖｅｒ ３３．３３±５．７７ ８．３３±１．４４ 中抗 ＭＲ ５０．１３±８．３３ 高感 ＨＳ
２２ 皮克斯塔 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．ＰｉｃｋＳｔａｒ ５６．６７±８．２８ １８．３３±３．８２ 中感 ＭＳ ３０．４０±１．４５ 高感 ＨＳ
２３ 乾果 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｑｉａｎｇｕｏ ６３．３３±５．８６ ２５．８３±１．８８ 高感 ＨＳ １７．８７±２．７２ 中感 ＭＳ
２４ 切罗克 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｃｈｅｒｏｋｅｅ ９６．６７±８．５７ ３５．８３±３．７８ 高感 ＨＳ ３０．８０±０．９２ 高感 ＨＳ
２５ 润布勒 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒａｍｂｌｅｒ ３０．００±６．０６ ７．５０±０．５４ 中抗 ＭＲ １３．０７±１．０７ 中抗 ＭＲ
２６ 蔏瓦 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｒｕｏｗａ ３６．６７±２．３５ １４．１７±１．０７ 中抗 ＭＲ １５．４７±０．８６ 中感 ＭＳ
２７ 萨帕斯 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｓｕｒｐａｓｓ ６３．３３±３．５８ ２０．００±２．５０ 中感 ＭＳ ３０．８０±２．０２ 高感 ＨＳ
２８ 泰安 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｔａｉａｎ ７０．００±１０．００ ２５．８３±３．８２ 高感 ＨＳ ４０．１３±１．２２ 高感 ＨＳ
２９ 维勒 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｖｅｉｌｅｒ ２６．６７±１．８２ ６．６７±０．５１ 中抗 ＭＲ ２４．００±３．２１ 中感 ＭＳ
３０ 咸阳 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｘｉａｎｙａｎｇ ８０．００±２．５６ ２７．５０±１．５６ 高感 ＨＳ ５１．２０±５．２３ 高感 ＨＳ
３１ 兴平 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｘｉｎｇｐｉｎｇ ３０．００±４．３２ １０．００±０．６１ 中抗 ＭＲ ２３．３３±１．１５ 中感 ＭＳ
３２ 焉耆 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙａｎｓｈｉ ３０．００±１．５７ ７．５０±０．９０ 中抗 ＭＲ ５２．２７±４．２１ 高感 ＨＳ
３３ 阳高 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙａｎｇｇａｏ ５３．３３±６．５５ １５．８３±１．２０ 中感 ＭＳ １６．５３±０．７２ 中感 ＭＳ
３４ 伊犁 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙｉｌｉ ６６．６７±５．１７ ２４．１７±２．２２ 中感 ＭＳ １７．３３±２．４３ 中感 ＭＳ
３５ 沂阳 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙｉｙａｎｇ ４０．００±８．０３ １１．６７±１．２９ 中抗 ＭＲ ２４．００±４．５８ 中感 ＭＳ
３６ 印第安 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｉｎｄｉａｎ ６３．３３±５．７８ １８．３３±２．８９ 中感 ＭＳ ３２．４０±１．３９ 高感 ＨＳ
３７ 秘鲁 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｐｅｒｕ ６０．００±７．３２ ２４．１７±３．１０ 中感 ＭＳ ３０．４０±６．０４ 高感 ＨＳ
３８ 芋县 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｙｕｘｉａｎ ８０．００±１０．５１ ３０．００±４．５６ 高感 ＨＳ １６．２７±３．０６ 中感 ＭＳ
３９ 长武 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｃｈａｎｇｗｕ ７０．００±９．５５ ２５．８３±１．４４ 高感 ＨＳ ４８．５３±５．０８ 高感 ＨＳ
４０ 费纳尔 犕．狊犪狋犻狏犪ｃｖ．Ｖｅｒｎａｌ ５０．００±３．０６ １５．８３±２．２７ 中感 ＭＳ ３０．４０±５．３３ 高感 ＨＳ
犉值犉ｖａｌｕｅ ４．０８３ ３．９９８ １．７０６
差异显著性Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ０．０００ ０．０００ ０．０２２
　ＨＲ：高抗 Ｈｉｇｈｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ＭＲ：中抗 Ｍｅｄｉｕｍｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ＨＳ：高感 Ｈｉｇｈｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ；ＭＳ：中感 Ｍｅｄｉｕｍｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ．
９５１第７期 王瑜　等：苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究
感材料有１２份。由此可见，４０份材料中，只有２．５％（１份）的材料为高抗材料，有３２．５％（１３份）的材料为中抗
材料，其余６５．０％（２６份）均为感病材料。高抗匍柄霉叶斑病材料为来自陕西的公农２号。
２．３　对茎点霉叶斑病的抗病性
４０份材料间茎点霉叶斑病的病情指数存在显著差异（犘＜０．０５）（表２），发病率均为１００％，无差异。病情指
数的变化范围为１３．０７～５２．２７，表明不同品种苜蓿材料对茎点霉叶斑病的抗性也存在较大差异。根据频率分布
图（图３）可知，病情指数小于５的高抗材料有０份；病情指数为５～１５的中抗材料有１份；病情指数为１５～２５的
中感材料有１４份；病情指数大于２５的高感材料有２５份。由此可见，４０份材料中无高抗材料，只有２．５％（１份）
的材料为中抗材料，其余９７．５％（３９份）均为感病材料。中抗茎点霉叶斑病材料为来自美国的润布勒。
３　讨论与结论
３．１　接种浓度
北美苜蓿协会（ＮＡＡＩＣ）于１９９１年曾提出苜蓿品种对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病抗病性的测定标准，包
括苜蓿幼苗培养、菌株培养、接种方法与条件、病害分级等方面（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎａａｉｃ．ｏｒｇ／ｓｔｄｔｅｓｔｓ）。其中，菌液浓
度的高低是接种成败的关键，各种病害接种评价中使用的菌液浓度不尽相同。在ＮＡＡＩＣ的标准中，匍柄霉叶斑
病的建议浓度为１×１０４～５×１０４ 个孢子／ｍＬ，茎点霉叶斑病的建议浓度为１×１０６～４×１０６ 个孢子／ｍＬ。
在本研究的匍柄霉叶斑病接种鉴定中，当孢子悬浮液浓度为１×１０５～１×１０６ 个孢子／ｍＬ时，１０个品种的病
情指数为４．６７～４５．８３，材料间存在显著差异，可以区分抗感材料，为适宜的接种浓度。当孢子悬浮液浓度为１×
１０７ 个孢子／ｍＬ时，１０份材料的病情指数普遍偏高，均表现为高度感病，不利于区分抗感材料，且浪费菌源。张
静妮［１８］在对苜蓿进行匍柄霉叶斑病接种鉴定的过程中发现，５×１０５～１×１０６ 个孢子／ｍＬ为适宜的接种浓度，本
研究的结果与此基本一致。
在茎点霉叶斑病的接种鉴定中，当孢子悬浮液浓度为１×１０５ 个孢子／ｍＬ时，１０个品种的病情指数间无显著
差异；当孢子悬浮液浓度为１×１０６ 与１×１０７ 个孢子／ｍＬ时，１０个品种间均存在显著差异（犘＜０．０５），但在１×
１０７ 个孢子／ｍＬ浓度时，１０个品种的病情指数普遍较高，均表现为高度感病，不利于区分抗感材料。因此，茎点
霉叶斑病的适宜接种浓度为１×１０６ 个孢子／ｍＬ，与ＮＡＡＩＣ建议的浓度一致，另外，ＣａｓｔｅｌＭｉｌｅｒ等［１７］研究茎点
霉在抗感紫花苜蓿种质材料植株内的侵染与扩展时所采用的接种浓度为１．２×１０６～１．６×１０６ 个孢子／ｍＬ，本研
究的结果与此也基本一致。
３．２　抗病品种筛选
本研究从４０份苜蓿种质材料中筛选出高抗匍柄霉叶斑病材料１份，为来自陕西的公农２号，中抗材料１３份
（５份国内材料，８份国外材料），中感材料１４份（４份国内材料，１０份国外材料），高感材料１２份（６份国内材料，６
份国外材料）。其中，来自国内的１６份材料中，高抗材料占６．２５％，中抗材料占３１．２５％，中感材料占２５．０％，高
感材料占３７．５％；来自国外的２４份材料中，高抗材料占０％，中抗材料占３３．３３％，中感材料占４１．６７％，高感材
料占２５．００％。表现为抗病的１４份材料分别为：公农２号，Ｃ／Ｗ５，阿罗特，定襄，阜康，兰格勒，罗佑玛，帕拉维
沃，润布勒，蔏瓦，维勒，兴平，焉耆，沂阳。Ｂｏｒｇｅｓ等［１５］通过对不同苜蓿属匍柄霉叶斑病抗性的研究发现犕犲犱犻
犮犪犵狅犮犪狀犮犲犾犾犪狋犪，野苜蓿（犕．犳犪犾犮犪狋犪），犕．犮狅犲狉狌犾犲犪和犕．犺犲犿犻犮狔犮犾犪等４个苜蓿属均高抗匍柄霉叶斑病，而紫花
苜蓿则均表现为感病。Ｌｕｃａｓ等［１６］曾于１９７３年通过田间与室内的接种鉴定，从４个紫花苜蓿品种中筛选出
Ａｐａｌａｃｈｅｅ具有较好的匍柄霉叶斑病抗性。国内的研究者中，张静妮［１８］通过对５０个紫花苜蓿品种的室内接种鉴
定筛选出抗匍柄霉叶斑病品种３个，分别为公农１号，庆阳，ＢＬ２０１（品系）。黄宁［１９］则通过对４４个品种的离体
叶接种鉴定筛选出公农２号、ＢＬ２０１（品系）等１５个高抗品种。本研究中公农２号也表现为高抗，与黄宁［１９］的研
究结果一致，表明试验结果可靠，可将其作为匍柄霉叶斑病抗病种质资源加以发掘利用。
经茎点霉接种鉴定发现４０份紫花苜蓿种质材料的发病率均为１００％，所有植株均呈现不同程度的染病状
态，病情指数为１３．０７～５２．２７。从４０份材料中筛选出中抗材料１份，为来自美国的润布勒，中感材料１４份（７份
国内材料，７份国外材料），高感材料２５份（９份国内材料，１６份国外材料）。其中，来自国内的１６份材料均表现
０６１ 草　业　学　报 第２４卷
为感病，中感材料占４３．７５％，高感材料占５６．２５％；来自国外的２４份材料中，中抗材料占４．１６％，中感材料占
２９．１７％，高感材料占６６．６７％。综合而言，只有来自美国的润布勒具茎点霉中等抗性，其余材料均表现为感病。
ＮＡＡＩＣ公布的茎点霉叶斑病抗病对照品种为“ＰＬＰｈＲ”和“Ｒａｍｓｅｙ”，感病对照品种为“Ｒａｎｇｅｒ”和“Ｌａｈｏｎｔａｎ”。
品种的抗病性除取决于自身外，还受各种因素的影响，因此，在通过温室试验筛选得到抗病品种后，还需要在
后期进行大田自然环境下的跟踪试验［２０］。
犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊：
［１］　ＺｈａｎｇＺＦ，ＮａｎＺＢ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎａｌｆａｌｆａｂａｃｔｅｒｉａｌｄｉｓｅａｓｅｓ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１４，２３（４）：３３０３４２．
［２］　ＹｕｅＹＨ，ＱｉＸ，ＷａｎｇＹＲ，犲狋犪犾．Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅｏｆ３５犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪ｖａｒｉｅｔｉｅｓａｔｔｈｅ１０ｔｈｙｅａｒａｆｔｅｒｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ．Ａｃｔａ
ＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１４，２３（１）：５８６４．
［３］　ＴｉａｎＣＸ，ＺｈａｎｇＹＭ，ＷａｎｇＫ，犲狋犪犾．ＴｈｅａｎａｔｏｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎａｌｆａｌｆａｔｏｓａｌｉｎｉｔｙａｌｋａｌｉｎｉｔｙｓｔｒｅｓｓｏｆＮａＨＣＯ３．
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２６１ 草　业　学　报 第２４卷