全 文 ：书犇犗犐：１０．１１６８６／犮狔狓犫２０１４３５５ 犺狋狋狆：／／犮狔狓犫．犾狕狌．犲犱狌．犮狀
陈钊，梁新平，侯扶江，田苗苗，张红瑞，余莹，管永卓，王成章，严学兵．不同放牧强度下垂穗披碱草遗传多样性分析．草业学报，２０１５，２４（８）：１５９
１６５．
ＣｈｅｎＺ，ＬｉａｎｇＸＰ，ＨｏｕＦＪ，ＴｉａｎＭ Ｍ，ＺｈａｎｇＨＲ，ＹｕＹ，ＧｕａｎＹＺ，ＷａｎｇＣＺ，ＹａｎＸＢ．Ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ犈犾狔犿狌狊狀狌狋犪狀狊ｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｇｒａｚｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｉｅｓ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１５，２４（８）：１５９１６５．
不同放牧强度下垂穗披碱草遗传多样性分析
陈钊１，梁新平１，侯扶江２，田苗苗１，张红瑞１，余莹１，管永卓１，王成章１，严学兵１
（１．河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州４５０００２；２．兰州大学草地农业科技学院，草地农业生态系统国家重点实验室，甘肃 兰州７３００２０）
摘要：放牧对草地植物种群遗传与进化产生重要影响，本研究利用ＳＳＲ分子标记对４个不同放牧强度下垂穗披碱
草种群遗传多样性进行研究，试验地选择在甘肃省甘南自治州玛曲县的阿孜试验站，利用８对多态性强的ＳＳＲ引
物对不同放牧压力下４个居群的８００个个体基因组进行检测，每个位点的有效等位基因数在１．２２６７～１．９９７６之
间。利用ｐｏｐｇｅｎｅ分析发现不放牧垂穗披碱草种群遗传多样性最高，在３种不同放牧地，中等放牧强度的遗传多样
性指数较高，其次为重牧，最后为轻度放牧。在不同放牧干扰下的４个垂穗披碱草种群的遗传分化系数为０．５１６８，
基因流Ｎｍ＝０．２３３７，说明４个种群的遗传变异主要发生在种群之间。从种质资源保护角度来讲，不放牧对于垂穗
披碱草种质资源的保护是有利的；从草地利用角度，中等放牧强度比较合理。
关键词：遗传多样性；基因流；放牧强度；ＳＳＲ；披碱草　　
犌犲狀犲狋犻犮犱犻狏犲狉狊犻狋狔狅犳犈犾狔犿狌狊狀狌狋犪狀狊狌狀犱犲狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋犵狉犪狕犻狀犵犻狀狋犲狀狊犻狋犻犲狊
ＣＨＥＮＺｈａｏ１，ＬＩＡＮＧ ＸｉｎＰｉｎｇ１，ＨＯＵ ＦｕＪｉａｎｇ２，ＴＩＡＮ ＭｉａｏＭｉａｏ１，ＺＨＡＮＧ ＨｏｎｇＲｕｉ１，ＹＵ Ｙｉｎｇ１，
ＧＵＡＮＹｏｎｇＺｈｕｏ１，ＷＡＮＧＣｈｅｎｇＺｈａｎｇ１，ＹＡＮＸｕｅＢｉｎｇ１
１．犆狅犾犾犲犵犲狅犳犃狀犻犿犪犾牔 犞犲狋犲狉犻狀犪狉狔犛犮犻犲狀犮犲，犎犲狀犪狀犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犣犺犲狀犵狕犺狅狌４５０００２，犆犺犻狀犪；２．犆狅犾犾犲犵犲狅犳犘犪狊狋狅狉犪犾
犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犲犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅犵狔，犔犪狀狕犺狅狌犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犛狋犪狋犲犓犲狔犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔狅犳犌狉犪狊狊犾犪狀犱犃犵狉狅犲犮狅狊狔狊狋犲犿狊，犔犪狀狕犺狅狌７３００２０，
犆犺犻狀犪
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｇｒａｚｉｎｇｃａｎｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｈｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｇｅｎｅｔｉｃｓａｎｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｇｒａｓｓｌａｎｄｐｌａｎｔｓｐｅｃｉｅｓ．Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅ
ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｇｒａｚｉｎｇａｎｄｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｏｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｄｇｅｎｅｆｌｏｗ，ｗｅｕｓｅｄＳＳＲ
ｍａｒｋｅｒｓｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ犈犾狔犿狌狊狀狌狋犪狀狊．ＴｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｔａｔｉｏｎｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｉｓｂａｓｅｄａｔＡｚｉ，
ｉｎＭａｑｕＣｏｕｎｔｙｉｎｔｈｅＧａｎｎａｎｒｅｇｉｏｎｏｆＧａｎｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅ．Ｔｈｅｇｒａｚｉｎｇｌａｎｄｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｌｅｖｅｌｓａｃ
ｃｏｒｄｉｎｇｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒａｚｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｉｅｓ．ＥｉｇｈｔｐａｉｒｓｏｆＳＳＲｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｍｏｎｇ
８００ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｐｌａｎｔｓｆｒｏｍｔｈｅｆｏｕｒｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒａｚｉｎｇｐｒｅｓｓｕｒｅｓ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｕｍｂｅｒｏｆａｌ
ｌｅｌｅｓｐｅｒｌｏｃｕｓｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ１．２２６７ｔｏ１．９９７６．Ｗｅｆｏｕｎｄｔｈａｔｍａｔｅｒｉａｌｓｕｎｄｅｒｍｏｄｅｒａｔｅｇｒａｚｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｙｈａｄ
ｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎｄｅｘ，ｆｏｌｏｗｅｄｂｙｔｈｅｈｅａｖｙａｎｄｔｈｅｎｌｉｇｈｔｇｒａｚｉｎｇｌｅｖｅｌｓ．Ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａ
ｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒａｚｉｎｇｌｅｖｅｌｓｉｓ０．５１６８．Ｔｈｉｓｓｕｇｇｅｓｔｓｔｈａｔｇｅｎｅｔｉｃｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｆｏｕｒｐｏｐｕｌａ
ｔｉｏｎｓｅｘｉｓｔｓｍａｉｎｌｙａｍｏｎｇｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｉｎｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｎｏｇｒａｚｉｎｇｏｒｅｎｃｌｏｓｕｒｅｉｓｅｆｆｅｃｔｉｖｅｆｏｒｔｈｅｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ
ｏｆ犈．狀狌狋犪狀狊ｇｅｎｅｔｉｃｒｅｓｏｕｒｃｅｓ．Ｆｏｒｇｒａｓｓｌａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｍｏｄｅｒａｔｅｇｒａｚｉｎｇｉｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｏｐｔｉｍａｌ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ｇｅｎｅｆｌｏｗ；ｇｒａｚｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｙ；ＳＳＲ；犈犾狔犿狌狊
第２４卷　第８期
Ｖｏｌ．２４，Ｎｏ．８
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
２０１５年８月
Ａｕｇ，２０１５
收稿日期：２０１４０８２１；改回日期：２０１４１２０１
基金项目：国家自然科学基金项目（３０９０１０５１，３１１７２２４９）资助。
作者简介：陈钊（１９９０），男，河南滑县人，硕士。Ｅｍａｉｌ：７４０５１５５４７＠ｑｑ．ｃｏｍ
通讯作者Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．Ｅｍａｉｌ：ｙｘｂｂｊｚｚ＠１６３．ｃｏｍ
草地生态系统是我国最大的绿色屏障，是生态环境的基础，草地对于维护生态平衡，改善生态环境，以及保护
人类生存和发展都起着至关重要的作用［１］。我国草地面积占国土总面积的４２％，达到４亿ｈｍ２。其中可利用的
大约为３亿ｈｍ２，占国土总面积的１／３。但是近年来由于人们对草原不合理的开发和利用，导致我国草原已经出
现了不同程度的退化。其中，不合理的放牧是导致草原退化的主要原因［２］。在相同的气候条件下，放牧干扰因子
对草原植物的影响可以超越不同地段其他环境条件的影响，成为影响草原植物群落关系主要影响因子［３］。在放
牧过程中，家畜可以通过选择性采食，直接影响某些甚至是某一类植物的种群结构，从而影响或者改变群落结
构［４］。放牧强度还会影响到牧区土壤理化性质和土壤热量的流动［５］。改变草地群落组成，草地初级生产力并非
随着放牧强度的增加而线性下降［６］。适当的放牧会对草地造成正面的干扰可促进草地物种多样性，加强草地的
生产力和群落的稳定性［７］。物种多样性是地球上生物赖以生存的基础，是生物可以适应不同的环境，不断进化和
繁衍的物质基础。种群的遗传多样性与种群的进化潜力和对环境的适应性有着密切的联系。遗传多样性是地球
上物种多样性的核心和物质基础，也是生物多样性的重要组成部分，更是地球生态系统中各种群落之间可以不断
进行物质循环和能量流动的核心。现有的研究多集中在个体和种群水平上的种群动态和物种功能特征，以及在
群落水平上的结构及系统功能的影响［８９］。研究物种的遗传多样性可以从分子角度对物种的种群变化进行深入
的探讨。
遗传多样性的研究伴随着分子化学、分子遗传学等学科的迅速发展，科学家可以从不同的层次、不同的角度
用不同的技术对物种的遗传信息和生物性状进行研究和推测。近年来分子标记是较为常见的一种方法。ＳＳＲ
（ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ，简单序列重复）标记以其多态性高，操作方便，数量丰富和稳定性强等众多优点成为一
种较为理想的分子标记方法。ＳＳＲ在基因组中较为均匀地分布，容易检测，在实验操作过程中进行ＰＣＲ（ｐｏｌｙ
ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，聚合酶链式反应）扩增时对模板ＤＮＡ的要求不高，只要有少量的ＤＮＡ模板就能进行高
通量的分析［１０］。目前，国内外学者已经将ＤＮＡ分子标记技术应用在了多花黑麦草等牧草育种工作中［１１］。可以
用来揭示居群之间、品种之间或是个体之间遗传的多样性，重复性较好，近年来逐渐取代了 ＲＦＬＰ（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ
ｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，限制性内切酶片段长度多态性），ＩＳＳＲ（ｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ，简单重复
序列区间扩增多态）等分子标记［１２］。
垂穗披碱草 （犈犾狔犿狌狊狀狌狋犪狀狊）主要分布于我国宁夏，甘肃，新疆，内蒙古等省区，抗寒性强，粗蛋白含量较高，
属于多年生疏丛型优质牧草［１３１４］，是草地群落系统的重要组成部分，有着重要的经济价值和生态意义。本实验主
要利用分子标记的手段通过对不同放牧强度下垂穗披碱草种群遗传多样性的研究来深入了解放牧与种群进化潜
力，分化程度及基因流动的关系。为确定合理有效的放牧方式及治理高寒草地的退化提供一定的依据。
１　材料与方法
１．１　试验地概况及设计
本试验是在甘肃省甘南自治州玛曲县的阿孜试验站进行。玛曲县位于黄河上游，甘肃、四川和青海三省的结
合部，在青藏高原的东北缘。并位于３３°０６′３０″－３４°３０′１５″Ｎ，１００°４５′４５″—１０２°２９′００″Ｅ，海拔３５００ｍ左右。是
黄河中下游地区的天然自然屏障［１５］，年降水量约为６２０ｍｍ，全年的平均日照时数为２５８０ｈ，１月温度最低是
－８．７℃，７月温度达到最高是１１．３℃。年均温仅为１．２℃，≥１０℃积温持续时期仅有２个月多，此地属于典型高
原大陆性气候。植被属于高寒草原类型，全县的草地类型为高寒草甸草地和山地草甸草地［１６］。根据放牧强度的
不同，４个草场进行不同强度放牧处理已达３年，把放牧地分为４种强度的放牧地：封育草地不进行放牧作为对
照（ｃｏｎｔｒｏｌ，ＣＫ），放牧强度为４只羊／ｈｍ２ 是轻度放牧（ｌｉｇｈｔｇｒａｚｉｎｇ，ＬＧ），放牧强度为８只羊／ｈｍ２ 是中度放牧
（ｍｅｄｉｕｍｇｒａｚｉｎｇ，ＭＧ），放牧强度为１６只羊／ｈｍ２ 是重度放牧（ｈｉｇｈｇｒａｚｉｎｇ，ＨＧ），轮牧周期是４５ｄ，放牧期是７
ｄ左右。在每一个放牧小区随机采收成熟的种子穗８０个（实验种植４０株），单株的植物距离不小于５ｍ（防止采
集到同一植株不同个体即克隆单株），每一个种子穗放入一个信封中标记，在烘箱中５０℃烘干（防止部分种子过
潮不利于携带）带回实验室。
０６１ 草　业　学　报 第２４卷
１．２　实验方法
将垂穗披碱草种子在烘箱中５０～５５℃的温度处理，大约５～６ｄ的时间以打破种子的休眠作用。然后将种子
种在一次性花盆中，浇水，在未发芽前以光照２５℃１８ｈ，黑暗２０℃６ｈ用光照培养箱培养，种子发芽后以光照２６℃
１２ｈ，黑暗２０℃１２ｈ进行培养。幼苗在１个月左右时即可长至两叶一心，此时的幼苗就可以用于ＤＮＡ的提取。
表１　本研究中所用犛犛犚引物序列
犜犪犫犾犲１　犜犺犲狊犲狇狌犲狀犮犲犳狅狉犛犛犚狆狉犻犿犲狉狊狌狊犲犱犻狀狋犺犻狊狊狋狌犱狔
引物
Ｐｒｉｍｅｒ
重复单元
Ｒｅｐｅａｔｍｏｔｉｆ
序列
Ｓｅｑｕｅｎｃｅ（５′→３′）
最佳退火温度Ｏｐｔｉｍｕｍ
ａｎｎｅａｌｉｎｇｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（℃）
ＥＣＧＴ３６ （ＧＴ）１８ ＴＣＡＣＡＧＡＧＴＧＡＴＴＡＣＡＴＧＣＧＡＣＡＴＧＴＡＡＣＴＧＧＡＧＴＣＧＡＧＣ ５４
ＥＡＧＡ１０４ （ＡＧ）４（ＧＡ）１４ ＡＧＣＣＡＧＡＣＡＣＡＡＧＴＧＡＣＴＡＴＧＧＡＣＴＡＣＧＧＴＣＣＡＴＡＧＡＴＡＧＴＡＴＣＴ ５４
ＥＣＧＡ１１４ （ＴＣ）１５ ＣＴＴＡＴＡＴＣＴＴＧＴＧＧＧＴＴＡＴＣＡＴＧＡＴＣＴＧＡＴＡＣＧＴＧＡＣＡＴＣＴＣＡ ５２
ＥＣＧＡ２２ （ＣＴ）２１ ＧＡＡＧＧＴＧＡＣＴＡＧＧＴＣＣＡＡＣＡＴＡＧＴＣＴＣＧＧＴＣＡＧＧＣＴＣ ５２
ＥＡＧＡ１０１ （ＴＣ）２２ ＧＡＴＧＡＴＧＴＣＡＡＴＡＴＧＣＴＧＣＡＡＴＡＧＧＣＣＡＧＡＣＴＴＡＴＧＡＡＣＡＣＴＡＴＴ ５３
ＥＡＧＡ１３ （ＧＡ）２７ ＡＣＡＣＡＣＴＧＡＧＡＣＴＧＣＴＴＴＧＴＣＡＴＧＣＧＡＡＧＧＴＴＧＡＧＴＴＡＴＧＣＴ ５４
ＥＡＧＡ１０３ （ＧＡ）２１ ＧＡＣＴＧＣＴＡＡＡＣＴＡＡＣＡＡＣＡＡＡＡＣＴＡＴＣＴＣＡＣＡＣＴＧＧＣＴＣＡＴＧＴＣ ５５
ＥＡＧＡ１０２ （ＴＣＣＣ）２（ＴＣ）２１（ＡＣ）１０ ＣＡＣＡＡＣＣＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＴＴＣＡＡＣＡＴＴＣＡＡＡＴＴＴＧＧＣＡＧＡＣ ５５
　　本实验提取垂穗披碱草的基因组用的是经过改进
后的 ＣＴＡＢ（ｃｅｔｙｌｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｒｎｂｒｏｍｉｄｅ，十六
烷基三甲基溴化铵）法［１７］，通过分光光度计和琼脂糖
跑胶来鉴别提取基因组的纯度。将提取的基因组进行
ＰＣＲ反映，ＰＣＲ体系为２０μＬ体系。模板为１μＬ，引
物各１μＬ，ｄｄＨ２Ｏ为７μＬ，ｍｉｘ为１０μＬ［１０ｍｍｏｌ／Ｌ
Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ＝８．３），５０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ，１．５ｍｍｏｌ／Ｌ
ＭｇＣｌ２，２５０μｍｏｌ／ＬＤＮＴＰ，０．０５Ｕ／μＬＰｏｌｙｍｅｒａｓｅ］。
ＰＣＲ反应程序为９４℃预变性４ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，退
火温度在５０～５５℃之间４０ｓ，７２℃延伸３０ｓ，７２℃延伸
１０ｍｉｎ，循环数为３６。本实验引物具体信息如表１和
表２。将ＰＣＲ扩增产物首先用１％琼脂糖凝胶电泳，
确定ＰＣＲ扩增产物存在，然后再用６％聚丙烯酰胺凝
胶进行电泳。
１．３　数据分析
经过银染后的聚丙烯酰胺胶可以直接在观片灯下
读取，ＳＳＲ是共显性标记，可以根据条带的类型直接
读出基因型为杂合或者是纯合，基因类型用ＡＡ，ＢＢ，
ＡＢ来标记，形成原始数据，每一对等位基因视为一个
多态性位点（图１）。遗传多样性指数（有效等位基
因［１８］、Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数［１９］、有效种群大小、Ｎｅｉ’ｓ
指数）及基因流［Ｎｍ＝ＧｅｎｅｆｌｏｗｅｓｔｉｍａｔｅｄｆｒｏｍＦｓｔ
＝０．２５（１－Ｆｓｔ）／Ｆｓｔ］采用ＰｏｐｇｅｎｅＶ．１．３２进行分
析。
表２　犛犛犚－犘犆犚位点遗传多态性
犜犪犫犾犲２　犛犛犚－犘犆犚犵犲狀犲狋犻犮狆狅犾狔犿狅狉狆犺犻狊犿犾狅犮犻犻狀
犱犻犳犳犲狉犲狀狋犈犾狔犿狌狊狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊
位点
Ｌｏｃｕｓ
片段长度
Ｓａｍｐｌｅ
ｓｉｚｅ
（ｂｐ）
有效等位基因
Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｕｍｂｅｒ
ｏｆａｌｅｌｅ
（ｎｅ）［１８］
Ｓｈａｎｎｏｎ信息
指数Ｓｈａｎｎｏｎ
ｉｎｄｅｘ
（Ｉ）［１９］
基因流指数
Ｇｅｎｅｆｌｏｗ
ｉｎｄｅｘ
（Ｎｍ）
Ａ１ １４９６ １．９７７９ ０．６８７６ ２０．７０７８
Ａ２ １５７８ １．９３４７ ０．６７６２ ０．３８７６
Ａ３ ７９８ １．９７７０ ０．６８７３ ０．０４１１
Ｌ１ １０５６ １．５５３７ ０．５４１７ ０．１６０２
Ｌ２ ７０６ １．４１１３ ０．４６６９ ０．１００８
Ｌ３ ７９２ １．８９１２ ０．６６４１ ０．０９７１
ＡＡ１ ８５８ １．９９７６ ０．６９２５ ０．１８６９
ＡＡ２ ３７０ １．８３７６ ０．６４８３ ０．２０５６
Ｆ１ ３９８ １．２２６７ ０．３３１７ ０．０１２８
Ｆ２ １４４８ １．３５９４ ０．４３４３ ４．２６４５
Ｍ１ １５９８ １．８７８７ ０．６６０５ １．９４２９
Ｇ１ ３９８ １．９８５５ ０．６８９５ ０．０３６７
Ｇ２ ８９８ １．１５６２ ０．２６１０ ０．００９３
Ｎ１ １４９９ １．３７９５ ０．４４７３ ３．８１８２
Ｋ１ ９９８ ２．００００ ０．６９３１ ０．２０６８
Ｋ２ １１７８ １．０３９８ ０．０９６２ ０．０１６４
平均值 Ｍｅａｎ ９７２ １．６６２９ ０．５４２４ ０．２３３７
１６１第８期 陈钊　等：不同放牧强度下垂穗披碱草遗传多样性分析
图１　部分垂穗披碱草犔犌组犛犛犚－犘犆犚扩增结果
犉犻犵．１　犘犃犆犌犵犲犾狑犻狋犺狉犲狊狌犾狋狊狅犳犛犛犚－犘犆犚犫犪狀犱狊犳狉狅犿犔犌犻狀犱犻犳犳犲狉犲狀狋犈犾狔犿狌狊狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊
２　结果与分析
２．１　ＳＳＲ－ＰＣＲ扩增位点遗传多样性分析
种群遗传多样性的研究，通常是以Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数，有效等位基因数等来衡量其水平。本研究通过ＳＳＲ－
ＰＣＲ的引物筛选试验，挑选出的８对引物共扩增出１６个位点，引物ＥＣＧＴ３６对应Ａ１到Ａ３，ＥＡＧＡ１０４对应Ｌ
１到Ｌ３，ＥＣＧＡ１１４对应ＡＡ１和ＡＡ２，ＥＣＧＡ２２对应Ｆ１和Ｆ２，ＥＡＧＡ１０１对应 Ｍ１，ＥＡＧＡ１３对应Ｇ１和
Ｇ２，ＥＡＧＡ１０３对应Ｎ１，ＥＡＧＡ１０４对应Ｋ１和Ｋ２。每对引物检测出的位点数不同，其中引物ＥＣＧＴ３６，ＥＡ
ＧＡ１０４扩增出的位点最多，检测到３个位点；ＥＡＧＡ１０１和ＥＡＧＡ１０３扩增出的位点最少，检测到１个位点（图
１）。所有位点的多态性均为１００％，说明实验材料的遗传多态性较为丰富。扩增片段的长度在３７０～１５９８ｂｐ之
间，位点ＥＡＧＡ１０１的 Ｍ１扩增片段最大为１５９８ｂｐ，ＡＡ２（ＥＣＧＡ１１４）扩增片段最小为３７０ｂｐ。利用８对ＳＳＲ
引物对不同放牧压力下４个居群的８００个个体遗传多样性进行检测，每个位点的有效等位基因数在１．２２６７～
１．９９７６之间，其中位点ＡＡ１的有效等位基因数最高是２．００００，最低的是Ｋ２，为１．０３９８（表２）。
２．２　遗传多样性分析
在不同放牧压力下的４个垂穗披碱草居群通过ＳＳＲ－ＰＣＲ扩增出条带的多态性随着放牧压力的增大呈下
降的趋势，对照组的多态性最高为１００％，在重度放牧干扰下的垂穗披碱草的位点多态性比率为４３．７５％，是４个
居群中最低的一组。有效等位基因数（Ｎｅ），Ｎｅｉ’ｓ遗传多样性（Ｈ）和Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数（Ｉ）表现出一致性，在不
放牧条件下均表现出最高的趋势，Ｎｅ是１．７１００，Ｈ是０．３９１９，Ｉ是０．５７０２。在放牧条件下，中度放牧干扰下垂穗
披碱草的Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数及有效等位基因数最高，即在中度放牧条件干扰下的垂穗披碱草种群的进化潜力及
基因的多样性都是最高。轻度放牧的有效等位基因数和Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数是最低的（表３）。与对照组相比，ＬＧ
组，ＭＧ组和 ＨＧ组的 Ｎｅｉ’ｓ遗传多样性（Ｈ）和Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数（Ｉ）分别降低了４２．３％，２２．０％，２３．８％，
３７．７％，１８．６％ 和１９．４％。在放牧地中，中等放牧强度的遗传多样性指数较高，其次为重牧，最后为轻度放牧。
这说明放牧干扰会明显地影响到垂穗披碱草的遗传多样性，对于垂穗披碱草的进化和生存有着较大的干扰作用。
不放牧条件下有利于垂穗披碱草遗传多样性的维持，在草地放牧条件下，中度放牧对于维持垂穗披碱草的遗传多
样性是最有利的。
２６１ 草　业　学　报 第２４卷
２．３　遗传相似性和遗传距离的分析
不同居群间的遗传距离和遗传相似性可以反映
出各居群间的亲缘关系以及遗传背景的差异性，遗
传距离和遗传相似性呈负相关性，遗传距离越大，说
明居群间的亲缘关系越远，遗传相似性也就越低，反
之亦然。由表４可以看出，中度放牧区和轻度放牧
区的遗传相似度最大，为０．７９０１，重度放牧和中度
放牧的遗传相似性最小，为０．５２４４。轻度放牧和对
照组的遗传相似度是０．７４４６，重度放牧和对照组的
遗传相似度是０．６９１３，重度放牧和轻度放牧的遗传
相似系数是０．５９６５。重度放牧和对照组的遗传相似
度是０．５５４４。
在不同放牧强度干扰下的垂穗披碱草，重度放
牧和中度放牧的遗传距离最大，为０．６４５６，轻度放
牧和中度放牧的遗传距离最小，为０．２３５６，对照组
与轻度放牧的遗传距离是０．２９４９，对照组与中度放
牧的遗传距离是０．３６９１，对照组与重度放牧组的遗
传距离是０．５８９９，轻度放牧组与重度放牧组的遗传
距离是０．５１６６。
根据遗传距离，对不同放牧压力下的垂穗披碱
草材料的ＳＳＲ数据进行聚类分析，构建了垂穗披碱
草的ＵＰＧＭＡ系统树（图２）。从聚类分析图上可以
看出，轻度放牧和中度放牧先聚为一类，然后与对照
组聚为一类，最后与重度放牧聚为一类。
表３　不同放牧条件下垂穗披碱草的遗传多样性指数
犜犪犫犾犲３　犘狅狆狌犾犪狋犻狅狀犵犲狀犲狋犻犮犱犻狏犲狉狊犻狋狔狅犳犈．狀狌狋犪狀狊
狌狀犱犲狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋犵狉犪狕犻狀犵犻狀狋犲狀狊犻狋犻犲狊
居群
Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
条带多态性比率
Ｐｅｒｃｅｎｔｏｆ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ
ｌｏｃｉ（％）
有效等位基因
Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ
ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ａｌｅｌｅ（Ｎｅ）
Ｎｅｉ’ｓ遗传
多样性
Ｎｅｉ’ｓｉｎｄｅｘ
（Ｈ）
Ｓｈａｎｎｏｎ信息
指数Ｓｈａｎｎｏｎ
ｉｎｄｅｘ
（Ｉ）
ＣＫ １００．００ １．７１００ ０．３９１９ ０．５７０２
ＬＧ ８１．２５ １．３６９７ ０．２２６０ ０．３５５１
ＭＧ ５６．２５ １．５０６９ ０．３０５６ ０．４６４３
ＨＧ ４３．７５ １．５０３２ ０．２９８７ ０．４５９８
合计Ｔｏｔａｌ １００．００ １．６６２９ ０．３６９２ ０．５４２４
表４　不同放牧强度干扰下垂穗披碱草种群
遗传距离和遗传相似性
犜犪犫犾犲４　犐狀狋犲狉狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊犵犲狀犲狋犻犮犱犻狊狋犪狀犮犲犪狀犱犵犲狀犲狋犻犮狊犻犿犻犾犪狉犻狋狔
狅犳犈．狀狌狋犪狀狊狌狀犱犲狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋犵狉犪狕犻狀犵犻狀狋犲狀狊犻狋狔
居群
Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
对照组
Ｃｏｎｔｒｏｌ
轻度放牧
Ｌｉｇｈｔｇｒａｚｉｎｇ
中度放牧
Ｍｅｄｉｕｍｇｒａｚｉｎｇ
重度放牧
Ｈｉｇｈｇｒａｚｉｎｇ
ＣＫ  ０．７４４６ ０．６９１３ ０．５５４４
ＬＧ ０．２９４９  ０．７９０１ ０．５９６５
ＭＧ ０．３６９１ ０．２３５６  ０．５２４４
ＨＧ ０．５８９９ ０．５１６６ ０．６４５６ 
　上三角为Ｎｅｉ’ｓ遗传相似性，下三角为Ｎｅｉ’ｓ遗传距离。Ｎｅｉ’ｓｇｅｎｅｔｉｃｉ
ｄｅｎｔｉｔｙ（ａｂｏｖｅｄｉａｇｏｎａｌ）ａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅ（ｂｅｌｏｗｄｉａｇｏｎａｌ）．
图２　不同放牧条件种群的聚类分析
犉犻犵．２　犆犾狌狊狋犲狉犻狀犵狅犳狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊狌狀犱犲狉
犱犻犳犳犲狉犲狀狋犵狉犪狕犻狀犵犻狀狋犲狀狊犻狋狔
　
２．４　遗传分化系数和基因流分析
不同放牧压力下的４个垂穗披碱草种群间的遗
传分化系数Ｆｓｔ为５１．６８％，不同居群总的遗传分
化系数为０．４０１８，种群间的基因流为０．２３３７（表
５）。说明种群间的基因流较小，即种群间的遗传变
异较大。不同居群的遗传分化有５１．６８％发生在种
群之间，本实验的结果符合垂穗披碱草是自花授粉
植物的特质。Ｎｅｉ［２０］认为：自花授粉的植物种群
间的基因流Ｎｍ＜１。
３　讨论
不同放牧强度下垂穗披碱草种群的遗传多样性
结果表明，在放牧条件下，中度放牧干扰下种群遗传
多样性最高，其次是重度放牧，轻度放牧条件下种群
的遗传多样性最低。物种遗传多样性的高低可以反
映该物种或种群对环境的适应能力以及本身的进化
表５　处理组间的遗传分化系数与基因流
犜犪犫犾犲５　犌犲狀犲狋犻犮犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀犮狅犲犳犳犻犮犻犲狀狋犪狀犱犵犲狀犲
犳犾狅狑犪犿狅狀犵犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋狊
项目
Ｉｔｅｍ
片段长度
Ｓａｍｐｌｅｓｉｚｅ（ｂｐ）
遗传分化
系数Ｆｉｔ
遗传分化
系数Ｆｓｔ（％）
基因流指数
Ｎｍ
均值 Ｍｅａｎ ９７２ ０．４０１８ ５１．６８ ０．２３３７
潜力和该种群的稳定性。物种的遗传多样性越高，其对环境变化的适应性就越强［２１］。这一结果与前人的研究结
果较为相似［２２２３］，蒙旭辉等［２２］的研究表明在中度放牧条件下放牧群落的多样性指数要显著地高于其他放牧干扰
３６１第８期 陈钊　等：不同放牧强度下垂穗披碱草遗传多样性分析
群落，中度放牧强度最为适宜草地群落类型。殷国梅等［２４］的研究表明在不同的放牧强度干扰下，适度放牧可以
使群落保持较高的密度和盖度，群落较为稳定，既可保证草地有一定的载畜量，又可以保持草地群落的稳定性。
本实验结果说明放牧干扰对种群的遗传多样性有着明显的影响并且在中度放牧条件下有利于维持物种的进化潜
力和稳定性。这一结果也符合“中度干扰理论”［２４２５］。原因可能是由于在重度放牧条件下，家畜的反复啃食会严
重影响垂穗披碱草植株的正常生长，植物本身不能进行正常的开花，结果，导致植物个体间及种群内的基因流动
较小。放牧强度的差异进而导致群落中优势种群的地位发生逐渐的变化［２６］。而在轻度放牧条件下，由于牲畜的
选择性采食可能会降低垂穗披碱草在群落中的地位，群落中不同物种的竞争压力影响到垂穗披碱草本身的遗传
多样性。轻牧条件下，家畜携带种子造成的基因流动较小，导致轻度放牧的遗传多样性最低。对照组的遗传多样
性最高这一结果可能与试验地本身的封育时间有关。适宜的放牧强度能够维持较高的地上生物量。不同强度的
放牧干扰对物种多样性的影响不同，适度放牧可以增加群落的多样性，而长期的过度放牧或者完全不放牧都将
导致群落多样性降低［２７］。
本研究的４个在不同放牧强度干扰条件下的垂穗披碱草种群的遗传分化系数为５１．６８％，基因流 Ｎｍ＝
０．２３３７，说明４个种群的遗传变异主要发生在种群之间。基因流较小，说明４个种群间很少发生基因流动，这一
方面可能与垂穗披碱草本身是自花授粉有关。种群之间很难通过花粉传播发生基因流动。另一方面也说明放牧
干扰可以明显地影响到植物种群的遗传变化，基因流是影响自然植物种群间遗传变异的关键因素。种群间高的
基因流可以降低物种的遗传分化并保持其完整性。在植物种群中，基因流一般通过种子或花粉进行传播，适量基
因流可以有效地促进居群地方性适应以及多样化［２８］。本实验中的基因流较低，低水平的基因流可以促进居群
对环境的适应性，进而造成种群之间的遗传分化。高水平的基因流可以防止居群的分化。
犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊：
［１］　ＷａｎｇＱ，ＹａｎｇＪＰ．ＤｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｄｅｘｓｙｓｔｅｍｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｓａｆｅｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅｇｒａｓｓｌａｎｄ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｉｌａｎｄＷａｔｅｒ，２００８，
（６）：２７３１．
［２］　ＷｕＧＬ，ＤｕＧＺ．Ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎｏｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｄｅｇｒａｄｅｄａｌｐｉｎｅｇｒａｓｓｌａｎｄｅｃｏｓｙｓｔｅｍｏｆ
ＱｉｎｇｈａｉＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕ．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｔｕｒｅ，２００７，２９（３）：１５９１６４．
［３］　ＬｉＪＨ，ＬｉＺＱ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｒａｚｉｎｇｏｎｇｒａｓｓｌａｎｄｐｌａｎｔｓ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２００２，１１（１）：４１１．
［４］　ＤｉａｚＳ，ＬａｖｏｒｅｌＳ，ＭｃｌｎｔｙｒｅＳＵＥ，犲狋犪犾．Ｐｌａｎｔｔｒａｉｔｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏｇｒａｚｉｎｇａｇｌｏｂａｌｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．ＧｌｏｂａｌＣｈａｎｇｅＢｉｏｌｏｇｙ，２００７，
１３（２）：３１３３４１．
［５］　ＧａｎＬ，ＰｅｎｇＸ，ＰｅｔｈＳ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｒａｚｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｎｓｏｉｌｔｈｅｒｍａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｈｅａｔｆｌｕｘｕｎｄｅｒ犔犲狔犿狌狊犮犺犻狀犲狀狊犻狊ａｎｄ
犛狋犻狆犪犵狉犪狀犱犻狊ｖｅｇｅｔａｔｉｏｎｉｎＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａ，Ｃｈｉｎａ．ＳｏｉｌａｎｄＴｉｌａｇｅＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１２，１１８：１４７１５８．
［６］　ＹａｎｇＳＪ，ＬｉＴ，ＧａｎＹＭ，犲狋犪犾．Ｉｍｐａｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｕｓｅｐａｔｔｅｒｎｓａｎｄｄｅｇｒｅｅｓｏｆｇｒａｓｓｌａｎｄｕｓｅｏｎｖｅｇｅｔａｔｉｏｎｃａｒｂｏｎｓｔｏｒａｇｅｉｎ
ｔｈｅＡｂａｇｒａｓｓｌａｎｄｐａｓｔｏｒａｌａｒｅａ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１４，２３（３）：３２５３３２．
［７］　ＹｕａｎＪＬ，ＪｉａｎｇＸＬ，ＨｕａｎｇＷＢ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｒａｚｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｙａｎｄｇｒａｚｉｎｇｓｅａｓｏｎｏｎｐｌａｎｔｓｐｅｃｉｅｓｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎａｌｐｉｎｅ
ｍｅａｄｏｗ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２００４，１３（３）：１６２１．
［８］　ＧｒｉｍｅＪＰ．Ｃｏｎｔｒｏｌｏｆｓｐｅｃｉｅｓｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎｈｅｒｂａｃｅｏｕｓｖｅｇｅｔａｔｉｏｎ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭａｎａｇｅｍｅｎｔ，２００５，４０（１）：１２４
１３８．
［９］　ＳｔｅｒｎｂｅｒｇＭ，ＧｕｔｍａｎＭ，ＰｅｒｅｖｏｌｏｔｓｋｙＡ，犲狋犪犾．ＶｅｇｅｔａｔｉｏｎｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｇｒａｚｉｎｇｍａｎａｇｅｍｅｎｔｉｎａＭｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａｎｈｅｒｂａｃｅｏｕｓ
ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ：ａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｇｒｏｕｐａｐｐｒｏａｃｈ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｐｐｌｉｅｄＥｃｏｌｏｇｙ，２０００，３７（２）：２２４２３７．
［１０］　ＱｉａｎＸＪ．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓｐｅｃｉｆｉｃＳＳＲＭａｒｋｅｒｓｆｒｏｍ犅狉犪狊狊犻犮犪狉犪狆犪［Ｄ］．Ｗｕｈａｎ：ＨｕａｚｈｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉ
ｖｅｒｓｉｔｙ，２００９．
［１１］　ＷａｎｇＳＦ，ＨｕａｎｇＬＫ，ＺｈａｎｇＸＱ，犲狋犪犾．ＴｈｅｇｅｎｅｔｉｃｖａｒｉａｔｉｏｎｒｅｖｅａｌｅｄｂｙＳＳＲｍａｒｋｅｔｉｎｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄｉｎｇｇｒｏｕｐｓｏｆａｎｎｕａｌ
ｒｙｅｇｒａｓｓａｆｔｅｒｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｍａｓｓｓｅｌｅｃｔｉｏｎ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１４，２３（５）：３４５３５１．
［１２］　ＦａｎｇＸＹ，ＷｕＷＲ，ＴａｎｇＪＬ，犲狋犪犾．ＤＮＡＭａｒｋＡｓｓｉｓｔｅｄＢｒｅｅｄｉｎｇｆｏｒＣｒｏｐ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＳｃｉｅｎｃｅＰｒｅｓｓ，２００１．
［１３］　ＹｕａｎＣＧ．ＴｈｅｈｉｇｈｑｕａｌｉｔｙｆｏｒａｇｅｏｎＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕ犈．狀狌狋犪狀狊．Ｐｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅ＆ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙ，２００５，１０：６２．
［１４］　ＺｈｏｕＹＨ，ＺｈｅｎｇＹＬ，ＹａｎｇＪＬ，犲狋犪犾．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓａｍｏｎｇｔｅｎ犈犾狔犿狌狊ｓｐｅｃｉｅｓｂａｓｅｄｏｎｒａｎｄｏｍａｍｐｌｉｆｉｅｄ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ．ＡｃｔａＰｈｙｔｏｔａｘｏｎｍｉｃａＳｉｎｉｃａ，１９９９，３７（５）：４２５４３２．
［１５］　ＬｉＷＬ，ＸｕｅＺＺ，ＧｕｏＳＭ，犲狋犪犾．ＶｅｇｅｔａｔｉｏｎｃｏｖｅｒａｇｅｃｈａｎｇｅｓａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｄｒｉｖｉｎｇｆｏｒｃｅｓｉｎＭａｑｕｃｏｕｎｔｒｙｂａｓｅｄｏｎ
３Ｓｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＬａｎｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ），２０１０，（１）：８５９０．
４６１ 草　业　学　报 第２４卷
［１６］　ＤｏｎｇＧＳ．ＳｔｕｄｙｏｎｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｍｅｔｈｏｄｓｔｏｃｏｎｔｒｏｌｒｏｄｅｎｔｓｉｎｇｒａｓｓｌａｎｄｉｎＭａｑｕｃｏｕｎｔｒｙ．ＱｉｎｇｈａｉＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅ，２００４，（２）：
１１１３．
［１７］　ＬｉｕＱＬ．ＴｈｅＳｔｕｄｙｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｈｙｌｏｇｅｎｙａｎｄＥｖｏｌｕｔｉｏｎｆｏｒ犈犾狔犿狌狊Ｌ［Ｄ］．Ｓｈａｎｇｈａｉ：ＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００５．
［１８］　ＫｉｍｕｒａＭ，ＣｒｏｗＪＦ．Ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆａｌｅｌｅｓｔｈａｔｃａｎｂｅｍａｉｎｔａｉｎｅｄｉｎａｆｉｎｉｔｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９６４，４９（４）：７２５．
［１９］　ＬｅｗｏｎｔｉｎＲＣ．Ｔｈｅｐｒｏｂｌｅｍｏｆｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ．ＨａｒｖｅｙＬｅｃｔｕｒｅｓ，１９７３，７０：１２０．
［２０］　ＮｅｉＭ．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｅｎｅｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎｓｕｂｄｉｖｉｄｅｄｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，１９７３，７０
（１２）：３３２１３３２３．
［２１］　ＪｉＷＺ，ＳｕＢ．ＴｈｅＰｒｉｎｃｉｐｌｅａｎｄＭｅｔｈｏｄｏｆｔｈｅＳｔｕｄｙｏｆＧｅｎｅｔｉｃＤｉｖｅｒｓｉｔｙ［Ｍ］．Ｈａｎｇｚｈｏｕ：ＺｈｅｊｉａｎｇＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｐｒｅｓｓ，１９９９．
［２２］　ＭｅｎｇＸＨ，ＬｉＸＬ，ＸｉｎＸＰ，犲狋犪犾．Ｓｔｕｄｙｏｎｃｏｍｍｕｎｉｔｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｄｉｖｅｒｓｉｔｙｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒａｚｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｎ
犔犲狔犿狌狊犮犺犻狀犲狀狊犻狊Ｔｚｖｅｌ．ｍｅａｄｏｗｓｔｅｐｐｅｏｆＨｕｌｕｎｂｅｉｅｒ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，１９９６，５（３）：２８３３．
［２３］　ＷａｎｇＤＬ，ＬｕＸＬ，ＬｕｏＷＤ．Ａｎａｌｙｓｉｓｔｏｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒａｚｉｎｇｄｅｎｓｉｔｙｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｒａｎｇｅｌａｎｄｖｅｇｅｔａｔｉｏｎ．Ａｃｔａ
ＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，１９９６，５（３）：２８３３．
［２４］　ＹｉｎＧＭ，ＬｉｕＹＺ，ＡＬＴ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｓｔｕｄｙａｂｏｕｔｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆ犃犵犿狆狔狉狅狀Ｇａｅｒｔｈ．ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＰｒａｔａｃｕｌ
ｔｕｒａｅ，２００６，１８（１）：１５．
［２５］　ＦｏｓｔｅｒＢＬ，ＧｒｏｓｓＫＬ．Ｓｐｅｃｉｅｓｒｉｃｈｎｅｓｓｉｎａｓｕｃｃｅｓｓｉｏｎａｌｇｒａｓｓｌａｎｄ：ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｎｉｔｒｏｇｅｎｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔａｎｄｐｌａｎｔｌｉｔｔｅｒ．Ｅｃｏｌｏｇｙ，
１９９８，７９（８）：２５９３２６０２．
［２６］　ＮｏｙＭｅｉｒＩ．Ｃｏｍｐｅｎｓａｔｉｎｇｇｒｏｗｔｈｏｆｇｒａｚｅｄｐｌａｎｔｓａｎｄｉｔｓｒｅｌｅｖａｎｃｅｔｏｔｈｅｕｓｅｏｆｒａｎｇｅｌａｎｄｓ．ＥｃｏｌｏｇｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９３，
３（１）：３２３４．
［２７］　ＬｉｕＴ，ＧａｎＹＭ，ＺｈａｎｇＨＸ．ＡｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅｓｔｏｃｋｉｎｇｃａｐａｃｉｔｙｕｎｄｅｒｇｒｏｕｐｈｏｕｓｅｈｏｌｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｎｔｈｅＨｏｎｇ
ｙｕａｎｇｒａｓｓｌａｎｄｓｉｎｎｏｒｔｈｗｅｓｔｅｒｎＳｉｃｈｕａｎ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１４，２３（３）：１９７２０４．
［２８］　ＱｕＲＺ，ＨｏｕＬ，ＬｖＨＬ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｇｅｎｅｆｌｏｗｏｆｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｇｅｎｅｔｉｃｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｈｅｒｅｄｉｔａｓ，２００４，２６（３）：３８０３８２．
参考文献：
［１］　王强，杨京平．我国草地退化及其生态安全评价指标体系的探索．水土保持学报，２００８，（６）：２７３１．
［２］　武高林，杜国祯．青藏高原退化高寒草地生态系统恢复和可持续发展探讨．自然杂志，２００７，２９（３）：１５９１６４．
［３］　李金花，李镇清．放牧对草原植物的影响．草业学报，２００２，１１（１）：４１１．
［６］　杨树晶，李涛，干友民，等．阿坝牧区草地不同利用方式与程度对植被碳含量的影响．草业学报，２０１４，２３（３）：３２５３３２．
［７］　袁建立，江小蕾，黄文冰，等．放牧季节及放牧强度对高寒草地植物多样性的影响．草业学报，２００４，１３（３）：１６２１．
［１０］　钱晓菊．白菜染色体特异性ＳＳＲ分子标记的开发［Ｄ］．武汉：华中农业大学，２００９．
［１１］　王绍飞，黄琳凯，张新全，等．连续混合选择下多花黑麦草杂交群体的ＳＳＲ多样性变化．草业学报，２０１４，２３（５）：３４５３５１．
［１２］　方宣钧，吴为人，唐纪良，等．作物 ＤＮＡ标记辅助育种［Ｍ］．北京：科学出版社，２００１．
［１３］　袁春光．青藏高原野生优质牧草：垂穗披碱草．草业与畜牧，２００５，（１０）：６２．
［１４］　周永红，郑有良，杨俊良，等．１０种披碱草属植物的ＲＡＰＤ分析及其系统学意义．植物分类学报，１９９９，３７（５）：４２５４３２．
［１５］　李文龙，薛中正，郭述茂，等．基于３Ｓ技术的玛曲县草地植被覆盖度变化及其驱动力．兰州大学学报：自然科学版，２０１０，
（１）：８５９０．
［１６］　董高生．玛曲县鼠害草地综合治理途径的研究．青海草业，２００４，（２）：１１１３．
［１７］　刘全兰．小麦族披碱草属（犈犾狔犿狌狊Ｌ．）的分子系统发育与进化研究［Ｄ］．上海：复旦大学，２００５．
［２１］　季维智，宿兵．遗传多样性研究的原理与方法［Ｍ］．杭州：浙江科学技术出版社，１９９９．
［２２］　蒙旭辉，李向林，辛晓平，等．不同放牧强度下羊草草甸草原群落特征及多样性分析．草地学报，２００９，１７（２）：２３９２４４．
［２３］　王德利，吕新龙，罗卫东．不同放牧密度对草原植被特征的影响分析．草业学报，１９９６，５（３）：２８３３．
［２４］　殷国梅，刘永志，阿拉塔，等．“蒙农杂种”冰草的生物学特性初探．内蒙古草业，２００６，１８（１）：１５．
［２７］　刘焘，干友民，张洪轩．川西北红原草地在联户经营下的适宜载畜量研究．草业学报，２０１４，２３（３）：１９７２０４．
［２８］　曲若竹，侯林，吕红丽，等．群体遗传结构中的基因流．遗传，２００４，２６（３）：３８０３８２．
５６１第８期 陈钊　等：不同放牧强度下垂穗披碱草遗传多样性分析