全 文 ：书燕麦种质资源遗传多样性犐犛犛犚研究
刘欢１，慕平２，赵桂琴１
（１．甘肃农业大学草业学院 草业生态系统教育部重点实验室 中－美草地畜牧业可持续发展研究中心，
甘肃 兰州７３００７０；２．甘肃农业大学农学院，甘肃 兰州７３００７０）
摘要：采用ＩＳＳＲ分子标记技术对来自中国、加拿大、美国和欧洲等国家的４２个有代表性的饲用燕麦品种及６个裸
燕麦品种进行遗传多样性分析。筛选出８个引物共扩增出多态性带１４４条，多态性条带比率（ＰＰＢ）为８６．１％。由
Ｎｅｉ’ｓ指数（ｈ）估测，应试皮燕麦、裸燕麦品种平均变异分别为０．２０３６和０．２０１５，平均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计值
为０．３２５９和０．３０５８；４８个燕麦品种间遗传相似系数为０．５８３３～０．９４１７，遗传距离的变化范围是０．０６０１～
０．５３９０。结果表明燕麦具有较丰富的遗传多样性，且皮燕麦的遗传多样性高于裸燕麦。根据ＩＳＳＲ数据进行了聚
类分析和主成分分析，可将４８份燕麦材料分为五大类，来源相同的品种大致聚在一类，呈现出一定的地域性分布
规律。皮燕麦与裸燕麦在遗传相似度０．６６处被明显分为２类，与形态学及其他标记分类结果一致，由ＩＳＳＲ揭示
的品种间遗传关系与品种实际来源基本一致。
关键词：燕麦；遗传多样性；ＩＳＳＲ；聚类分析；主成分分析
中图分类号：Ｓ５１２．６０３；Ｑ９４３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１２）０４０１１６０９
　　燕麦（犃狏犲狀犪）属禾本科（Ｇｒａｍｉｎｅａｅ）、燕麦族（Ａｖｅｎｅａｅ）、燕麦属（犃狏犲狀犪），是世界各地广泛栽培种植的一种
重要粮食兼饲草、饲料作物［１］。燕麦具有抗旱、耐冷、耐瘠薄等优良性状和很高的营养及保健价值，主要栽培种分
为有稃和裸粒两大类型。世界各国以有稃型为主，其中最主要的是普通栽培燕麦，又称饲用燕麦（犃．狊犪狋犻狏犪），而
我国是裸燕麦（犃．狀狌犱犪）的起源中心，裸燕麦产量约占燕麦总产量的９０％以上［２］。
我国燕麦尽管栽培历史悠久，但对燕麦的研究主要侧重于燕麦栽培、引种、生产性能比较等方面［３５］。目前，
我国对燕麦种质资源的分子遗传学研究还远不够完善，主要借助于同功酶等生化标记方法［６，７］，在国内外有利用
ＲＡＰＤ（ｒａｎｄｏｍｌｙａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ，随机扩增的多态性 ＤＮＡ）、ＲＦＬＰ（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，限制性片段长度多态性）以及ＡＦＬＰ（ａｍｐｌｉｆｉｅｄｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，扩增片段长度
多态性）等分子标记对燕麦遗传差异、品种鉴定和图谱构建等方面进行研究，但利用ＩＳＳＲ（ｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅ
ｒｅｐｅａｔｓ，简单重复序列区间）标记法研究燕麦遗传多样性尚未见报道［８１２］。
遗传多样性不仅表现在表型性状上的差别，更重要的是表现在蛋白质、染色体和ＤＮＡ水平上的差异。分子
标记的发展为从ＤＮＡ水平检测品种及品系间的遗传多样性提供了有利的工具。ＩＳＳＲ技术是由Ｚｉｅｔｋｉｅｗｉｃｚ
等［１３］创建的一种新型的微卫星类分子标记技术，其采用锚定ＳＳＲ（ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｓ，简单重复序列）策
略，对简单重复序列间的遗传信息进行多态性扩增。ＩＳＳＲ综合了其他分子标记高多态性、可重复性、低成本易操
作以及无需知道基因组序列优点，目前已广泛应用于多种作物和部分牧草的品种鉴定、系统分类、遗传多样性检
测、基因定位和遗传图谱构建等研究中［１４１６］。因此，本研究利用ＩＳＳＲ标记方法对所收集的４８份国内外主要燕
麦栽培品种进行遗传多样性和亲缘关系分析，研究不同品种之间的遗传差异，分析其遗传背景，为燕麦的遗传改
良奠定基础。
１　材料与方法
１．１　试验材料
试验材料选用来自中国、日本、加拿大、澳大利亚和欧洲等不同国家和地区的４２个饲用燕麦及６个裸燕麦品
１１６－１２４
２０１２年８月
　　　草　业　学　报　　　
　　　ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ　　　
第２１卷　第４期
Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．４
收稿日期：２０１１０５１６；改回日期：２０１１０８０４
基金项目：现代农业产业技术体系（ＣＡＲＳ０８Ｃ）和农业行业专项（２０１００３０２３）资助。
作者简介：刘欢（１９８２），女，山东招远人，讲师，在读博士。Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｈｕａｎｅｒ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｏｇ０７＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ
种，具体来源见表１。
１．２　基因组ＤＮＡ提取
参试资源材料于培养皿中播种，室温下２５～３０℃，出苗后８～１０ｄ（材料预处理：供试植株暗培养２～３ｄ），每
份材料随机取１０～１５个单株的幼嫩叶片０．５ｇ，等量混合，采用改良ＣＴＡＢ（ｃｅｔｙｌｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ）
法提取植物总ＤＮＡ［１７］。
表１　试验材料及其来源
犜犪犫犾犲１　犕犪狋犲狉犻犪犾狊犪狀犱狊狅狌狉犮犲狊
代号Ｃｏｄｅ 种类Ｓｐｅｃｉｅｓ 品种Ｖａｒｉｅｔｙ 来源Ｓｏｕｒｃｅ
１ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 青引１号Ｑｉｎｇｙｉｎ１ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
２ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 青引２号Ｑｉｎｇｙｉｎ２ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
３ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ４６２８ 加拿大Ｃａｎａｄａ
４ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 Ｃａｌｉｂｒｅ 加拿大Ｃａｎａｄａ
５ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 初岛Ｃｈｕｄａｏ 日本Ｊａｐａｎ
６ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ＣＮＣ 加拿大Ｃａｎａｄａ
７ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 Ｂｌａｃｋｂｕｔｔ 澳大利亚Ａｕｓｔｒａｌｉａ
８ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 巴燕３号Ｂａｙａｎ３ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
９ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 黄燕麦Ｙｅｌｏｗｏａｔ 甘肃Ｇａｎｓｕ，Ｃｈｉｎａ
１０ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 丹麦４４４Ｄｅｎｍａｒｋ４４４ 丹麦Ｄｅｎｍａｒｋ
１１ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ５７ 蒙古 Ｍｏｎｇｏｌｉａ
１２ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ３５３ 英国Ｅｎｇｌａｎｄ
１３ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ４７４ 俄罗斯Ｒｕｓｓｉａ
１４ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ５３ 欧洲Ｅｕｒｏｐｅ
１５ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ２４９ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
１６ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 白燕７号Ｂａｉｙａｎ７ 吉林Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ
１７ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 甜燕麦Ｓｗｅｅｔｏａｔ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
１８ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ２８ 前苏联ＵＳＳＲ
１９ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ４６０７ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２０ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ４６１７ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２１ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ４６３２ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２２ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ４６４１ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２３ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ４６０９ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２４ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ２３７ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
２５ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ９７ 芬兰Ｆｉｎｌａｎｄ
２６ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ２５２ 加拿大Ｃａｎａｄａ
２７ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 青永久３０Ｑｉｎｇｙｏｎｇｊｉｕ３０ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
２８ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ３０４ 瑞典Ｓｗｅｄｅｎ
２９ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 青永久７０９Ｑｉｎｇｙｏｎｇｊｉｕ７０９ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
３０ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 青选１８Ｑｉｎｇｘｕａｎ１８ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
３１ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ３１６ 前苏联ＵＳＳＲ
３２ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 １８１ 俄罗斯Ｒｕｓｓｉａ
３３ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 青永久１９８Ｑｉｎｇｙｏｎｇｊｉｕ１９８ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
３４ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 青永久９６Ｑｉｎｇｙｏｎｇｊｉｕ９６ 青海Ｑｉｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ
３５ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 科燕１号 Ｋｅｙａｎ１ 内蒙古ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａ，Ｃｈｉｎａ
７１１第２１卷第４期 草业学报２０１２年
　续表１　Ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ
代号Ｃｏｄｅ 种类Ｓｐｅｃｉｅｓ 品种Ｖａｒｉｅｔｙ 来源Ｓｏｕｒｃｅ
３６ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 冀引１号Ｊｉｙｉｎ１ 河北 Ｈｅｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ
３７ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 Ｒｏｎａｌｄ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３８ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ＡＣ１１３１ 加拿大Ｃａｎａｄａ
３９ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ＡＣ１０３８ 加拿大Ｃａｎａｄａ
４０ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 ９８ＡＳ１３０２ 加拿大Ｃａｎａｄａ
４１ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 石燕麦Ｓｈｉｏａｔ 美国Ａｍｅｒｉｃａ
４２ 皮燕麦犃．狊犪狋犻狏犪 Ｙ６１００５ 四川Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｃｈｉｎａ
４３ 裸燕麦犃．狀狌犱犪 定莜２号 Ｄｉｎｇｙｏｕ２ 定西Ｄｉｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ
４４ 裸燕麦犃．狀狌犱犪 定莜６号 Ｄｉｎｇｙｏｕ６ 定西Ｄｉｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ
４５ 裸燕麦犃．狀狌犱犪 白燕２号Ｂａｉｙａｎ２ 吉林Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ
４６ 裸燕麦犃．狀狌犱犪 蒙燕８６３７Ｍｅｎｇｙａｎ８６３７ 内蒙古ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａ，Ｃｈｉｎａ
４７ 裸燕麦犃．狀狌犱犪 晋燕１号Ｊｉｎｙａｎ１ 山西Ｓｈａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ
４８ 裸燕麦犃．狀狌犱犪 ＶＯＡ３ 加拿大Ｃａｎａｄａ
１．３　燕麦ＩＳＳＲ反应体系的优化建立及引物筛选
ＩＳＳＲ引物是根据加拿大哥伦比亚大学公布的１００个引物序列，选出４８个交由上海生工合成，进一步筛选引
物用于燕麦ＩＳＳＲ。将筛选引物分别在小麦（犜狉犻狋犻犮狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿）［１８］、野生大麦（犎狅狉犱犲狌犿狏狌犾犵犪狉犲）［１９］和乌拉尔
甘草 （犌犾狔犮狔狉狉犺犻狕犪狌狉犪犾犲狀狊犻狊）［２０］的ＩＳＳＲ反应体系和反应程序下进行扩增，通过预试验，建立了一套燕麦ＩＳＳＲ
分析的优化反应体系及反应程序。即：２５μＬ反应体系中含有，１８．３μＬｄｄＨ２Ｏ，２．５μＬ１０×ｂｕｆｆｅｒ，２．０μｍｏｌ／Ｌ
Ｍｇ２＋，２５０μｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ，１．５ＵＴａｑＤＮＡ聚合酶，０．３μｍｏｌ／Ｌ引物，１０ｎｇＤＮＡ模板。反应程序为：９４℃预变
性３ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，５５℃退火３０ｓ，７２℃延伸１ｍｉｎ，共３４个循环；７２℃延伸５ｍｉｎ，４℃保温。
１．４　ＰＣＲ扩增及电泳检测
ＰＣＲ扩增在ＴｈｅｒｍｏＨｙｂａｉｄＰＣＲ仪上进行。扩增产物在８％变性聚丙烯酰胺凝胶４０Ｗ 恒功率电泳。采
用Ｂｒａｎｔ银染法进行显色观察［２１］，胶版干后扫描拍照、统计数据。
１．５　数据统计及分析
ＩＳＳＲ通常被认为是显性标记，同一对引物组合扩
增产物中电泳迁移率一致的条带被认为具有同源性，
按照相同移位上有扩增带记为１，无带的记为０的方
法记录清晰电泳谱带，得到的ＩＳＳＲ表型数据矩阵。
用ＮＴＳＹＳ２．１及Ｇｅｎｅｐｏｐ软件进行数据处理，采用
Ｎｅｉ（１９８７）方法计算遗传相似系数（ｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ）
犌犛＝２犖犻犼／（犖犻＋犖犼），式中，犖犻和犖犼分别为犻和犼
两材料的总等位位点数，犖犻犼为犻和犼两材料的共有
等位位点数。遗传距离（ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅ）犌犇＝１－
犌犛。利用ＧＤ值按非加权成对算术平均法（ＵＰＧＭＡ）
进行聚类分析，建立树状图［２２］。
２　结果与分析
２．１　燕麦ＩＳＳＲ引物筛选
燕麦ＩＳＳＲ反应体系的构建最终借鉴了小麦ＩＳ
ＳＲ研究，经反复试验摸索出了效果较好的ＰＣＲ扩增
体系，并从４８个引物中筛选出８个重复性好，特异性
高，扩增效果好，电泳图清晰的引物（表２），扩增片段
表２　８个犐犛犛犚引物对４８份燕麦基因组犇犖犃扩增结果
犜犪犫犾犲２　犜犺犲狉犲狊狌犾狋狅犳犐犛犛犚犳狉犪犵犿犲狀狋狊犪犿狆犾犻犳犻犲犱
狑犻狋犺８狆狉犻犿犲狉狊犻狀４８狅犪狋狊
编号
Ｐｒｉｍｅｒ
序列
Ｓｅｑｕｅｎｃｅ
（５′３′）
多态带数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ
总带数
Ｔｏｔａｌｎｕｍｂｅｒ
ｏｆｆｒａｇｍｅｎｔｓ
多态带比率
Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｆｒａｇｍｅｎｔｓ（％）
ＵＢＣ８４５ （ＣＴ）８ＲＧ ２３ ２６ ８８．４
ＵＢＣ８４４ （ＣＴ）８ＲＣ ２２ ２５ ８８．０
ＵＢＣ８４８ （ＣＡ）８ＲＧ ２０ ２３ ８７．０
ＵＢＣ８２３ （ＴＣ）８Ｃ ２０ ２２ ９０．９
ＵＢＣ８５６ （ＡＣ）８ＹＡ １２ １４ ８５．７
ＵＢＣ８３５ （ＡＧ）８ＹＣ １０ １３ ７６．９
ＵＢＣ８２５ （ＡＣ）８Ｔ ９ １１ ８１．８
ＵＢＣ８７５ （ＣＴＡＧ）４ ８ １０ ８０．０
平均数Ａｖｅｒａｇｅ １５．５ １８ ８６．１
总数 Ｔｏｔａｌ １２４ １４４
　Ｒ＝（Ａ，Ｇ）；Ｙ＝（Ｃ，Ｔ）．
８１１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．４
的长度在２００～２０００ｂｐ，共获得清晰可见带１４４条，其中多态带１２６条，平均每个引物产生１８条带，平均多态性
检出率为８６．１％，说明供试燕麦种质间有较高等位多态性，这些多态性多来自外部种质的引进或育种亲本的选
择，可检测出变种间及种内各品种间的变异。
ＩＳＳＲ鉴定标记在所用的ＩＳＳＲ引物中，以引物ＵＢＣ８４５和ＵＢＣ８４４区分４８个材料的效果较为明显，即使是
亲缘关系很近的材料，也可根据其指纹将其分开（图１）。如亲缘关系很近的青引１号和青引２号品种在２个引
物的扩增图谱上都有各自的特异性条带；而所有皮燕麦品种在４５０ｂｐ处均比裸燕麦品种多出１条多态带，这说
明ＩＳＳＲ标记在燕麦指纹图谱建立和种间及种内鉴定中具有较好的效果。
图１　引物犝犅犆８４５（上图）、犝犅犆８４４（下图）扩增的燕麦犐犛犛犚图谱（犘犃犌犈）
犉犻犵．１　犐犛犛犚狆狉狅犳犻犾犲狅犳狅犪狋狑犻狋犺狆狉犻犿犲狉犝犅犆８４５（狌狆狆犲狉犳犻犵狌狉犲）犪狀犱犝犅犆８４４（犫犲犾狅狑犳犻犵狌狉犲），狉犲狊狆犲犮狋犻狏犲犾狔（犘犃犌犈）
　１～４２为皮燕麦样品，４３～４８为裸燕麦，品种名同表１。１－４２：ｃｏｖｅｒｅｄｏａｔｓａｍｐｌｅｓ；４３－４８：ｎａｋｅｄ
ｏａｔｓａｍｐｌｅｓ，ｎａｍｅｓｈｏｗｅｄｉｎｔａｂｌｅ１；Ｍ：ＤＮＡｍａｒｋｅｒⅤ （ＢＢＩ）．
不同的引物对燕麦的扩增效果差别较大，８个筛选出的引物中，有７个二核苷酸重复序列，１个四核苷酸重复
序列，说明在植物中二核苷酸微卫星比三核苷酸和四核苷酸微卫星更普遍，其中２个（ＣＴ）ｎ重复序列引物为
ＵＢＣ８４５和ＵＢＣ８４４，其多态性比率分别达８８．４％和８８．０％，且扩增谱带最为清晰（图１）。所以在燕麦ＩＳＳＲ研
究中，设计二核苷酸引物更好些，且燕麦基因组中（ＣＴ）ｎ重复序列较多。尽管（ＡＴ）ｎ 在植物中含量最多，但所筛
引物中并无含（ＡＴ）ｎ引物，说明这样的引物容易自连导致不能扩增出条带。
２．２　燕麦品种的聚类分析
Ｎｅｉ相似系数是用来比较群体或个体间相似程度的度量参数，平均相似系数越高，说明相似程度越大，遗传
背景一致性越强［２２］。４８个燕麦品种间遗传相似系数均在０．５８以上，最高为０．９４１７（青选１８和３１６），最低为
０．５８３３（加拿大裸燕麦ＶＯＡ３和蒙古皮燕麦５７），遗传相似系数变幅较大，主要是由于皮燕麦与裸燕麦之间差
异较大。品种间的遗传距离变化为０．０６０１～０．５３９０。
按ＵＰＧＭＡ方法进行聚类分析，建立聚类分支树状图（图２）。结果表明，利用ＩＳＳＲ标记能将４８份燕麦完
全区分开。在遗传相似系数为０．６６处，４２个皮燕麦品种与６个裸燕麦品种明显分为２类，这说明ＩＳＳＲ标记种
间或亚种间的界线十分明显。供试品种以遗传相似系数０．７８３为分类界限，聚为５类：第Ⅰ类由２０个品种组成，
来自我国青海和湖北的皮燕麦品种青引１号、青引２号、２４９、冀引１号、加拿大品种Ｒｏｎａｌｄ为第１亚类；巴燕３
９１１第２１卷第４期 草业学报２０１２年
号、黄燕麦、甜燕麦为第２亚类；吉林品种白燕７号独自归为一亚类。青选１８、３１６、青９６、青１９８、１８１、青３０、２３７、
青２５２、３０４、青９７、７０９为第４亚类，此亚类多数为我国青海品种，此外有３个品种分别来自俄罗斯、瑞典和芬兰。
第Ⅱ类由１９个品种组成，多数都是国外品种，又分为４个亚类，第１亚类包括４６２８、４６０７、４６１７、４６３２、Ｃａｌｉｂｒｅ、
ＣＮＣ、科燕１号、ＡＣ１１３１、ＡＣ１０３８、４６４１、４６０９；其中除科燕１号外，均为加拿大品种；第２亚类包括澳大利亚品
种Ｂｌａｃｋｂｕｔｔ、丹麦品种４４４；第３亚类包括蒙古品种５７、俄罗斯品种４７４和２８、英国品种３５３、欧洲品种５３；日本
品种初岛独自归为一亚类。第Ⅲ类仅有２个品种，即９８ＡＳ１３０２、美国石燕麦，且二者各归为一个亚类。四川品种
Ｙ６１００５与其他材料间的遗传分化最大，单独聚为一类（第Ⅳ类）；以上四大类所有品种均为皮燕麦，而第Ⅴ类则
包括全部裸燕麦品种。
图２　燕麦４８个品种基于犐犛犛犚的遗传相似性犝犘犌犕犃聚类图
犉犻犵．２　犝犘犌犕犃犮犾狌狊狋犲狉犪狀犪犾狔狊犻狊犫犪狊犲犱狅狀犐犛犛犚犵犲狀犲狋犻犮犻犱犲狀狋犻狋犻犲狊犪犿狅狀犵４８狅犪狋犮狌犾狋犻狏犪狉狊
　　聚类结果表明，皮燕麦与裸燕麦的遗传距离在０．５８～０．７６，在聚类树状图上分为两大类，进一步证实了当今
的燕麦分类系统中皮燕麦与裸燕麦分别为燕麦属的２个种的分类情况。４８个燕麦品种所分的五大类可能分属
六倍体燕麦（２ｎ＝６ｘ＝４２）种群中具有ＡＡＣＣＤＤ染色体组的不同种，或是同一种中由于地理位置造成的远缘关
系。我国的几个皮燕麦品种聚为第Ⅰ大类，这些品种遗传关系较近，遗传资源基础狭窄，加拿大品种Ｒｏｎａｌｄ与青
引１号、青引２号、２４９、冀引１号归为一亚类，证明我国多数皮燕麦品种为引进品种，且这几个品种与Ｒｏｎａｌｄ亲
缘关系较近，但这些品种是否引自Ｒｏｎａｌｄ则无法断定。第Ⅰ类第２亚类中的高产且适应性强的新品种巴燕３号
与甘肃、青海的地方品种黄燕麦间的遗传相似度极高，为０．９２５０，这与ＡＦＬＰ标记对燕麦遗传多样性研究中分
析的２个品种遗传相似度为０．９８８１的结果极为相似，且聚类结果完全一致，进一步证明了黄燕麦是巴燕３号的
０２１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．４
杂交亲本之一，且说明ＩＳＳＲ和ＡＦＬＰ标记均是品种遗传关系鉴定的可靠方法。在４８个燕麦种质中，川草四号
（Ｙ６１００５）燕麦表现出了特异性，与其他种质的遗传距离远，单独聚为第Ⅳ类。其粒色深棕，籽粒细小纺锤形，发
芽率极低，应对种质性状和遗传特性进行进一步研究。从图中可以看出，加拿大、澳大利亚皮燕麦品种的遗传多
样性稍高于我国燕麦品种，而美国皮燕麦品种单独归为不同亚类，证明其遗传背景相对复杂，多样性水平极高。
供试国内外裸燕麦品种遗传相似度在０．８０８３～０．９３３３，都表现为近缘关系，进一步证实了裸燕麦的中心起源
说。
本研究还利用Ｐｏｐｇｅｎ３２软件中的Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数和Ｎｅｉ’ｓ指数分别估计了群体的遗传变异。供试品
种平均变异为０．２３１３，平均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计值为０．３６９０。４２个皮燕麦品种的平均变异为０．２０３６，平
均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计值为０．３２５９；６个裸燕麦品种的平均变异为０．２０１５，平均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计
值为０．３０５８。可见，皮燕麦的遗传多样性高于裸燕麦。
２．３　燕麦品种的主成分分析
对４８份燕麦种质的ＩＳＳＲ标记的原始矩阵进行主成分分析，并根据第１、第２主成分进行作图，所形成的各
燕麦材料的位置分布如图３所示，位置相靠近者表示关系密切，远离者表示关系疏远。
将位置靠近的燕麦材料划归在一起，可将供试材料分成５个组，结果表明，主成分分析结果与聚类分析结果
基本一致，在聚类图中各品种间的遗传多样性较高，因此主成分分析图中个别品种也较为分散，主成分分析结果
更直观地表明了不同燕麦材料之间的亲缘关系。
图３　燕麦４８个品种基于犐犛犛犚表型的犘犆犃分析
犉犻犵．３　犜犺犲狆狉犻狀犮犻狆犪犾犮狅狅狉犱犻狀犪狋犲犪狀犪犾狔狊犻狊犫犪狊犲犱狅狀犐犛犛犚狆犪狋狋犲狉狀狊犪犿狅狀犵４８狅犪狋犮狌犾狋犻狏犪狉狊
３　讨论
３．１　燕麦遗传多样性的ＩＳＳＲ检测
本研究是利用ＩＳＳＲ技术来研究国内外燕麦品种的遗传多样性，通过ＰＣＲ扩增的多态性差异所统计的遗传
相似系数，能反应不同材料间的遗传距离及关系，也可以作为遗传育种的辅助手段，对杂交品种的选育和育成品
种的杂种优势进行初步估测，提高育种效率。试验中８个ＩＳＳＲ标记在４８份燕麦材料中共产生１４４条扩增带，其
１２１第２１卷第４期 草业学报２０１２年
中８６．１％的扩增片段能够揭示材料间的遗传差异，表明燕麦品种间遗传相似系数和遗传距离的变化范围很大，
具有丰富的遗传基础。这一点在国内外多种分子标记对燕麦种质资源的相关研究中都得到验证，这些标记都能
产生各自有效的多态性条带，但多态性水平和检测水平各不相同。如王茅雁和齐秀丽［７］利用ＲＡＰＤ标记对我国
２１份燕麦材料的遗传差异及类群划分的研究中，２２个多态性引物共扩增出１１４条带，其中８５．１％具有多态性。
Ｏ’Ｄｏｎｏｕｇｈｕｅ等［２３］根据ＲＦＬＰｓ对北美８３份栽培燕麦和大麦品种进行了遗传分析和品种鉴定，４６个ｃＤＮＡ多
态性克隆检测到２７８条带，其中７３．７％是多态性带。Ｐａｌ和Ｓａｎｄｈｕ［２４］用ＲＦＬＰ分析燕麦属１３个种间存在４１％
的多态性。Ｌｉ等［２５］用ＳＳＲ对燕麦建立遗传图谱，研究表明４４条引物中６２％的引物能够检测燕麦种间的多态
性，３６％能够检测燕麦品种间的多态性，品种间多态带比率为５７％。刘欢等［１０］采用ＡＦＬＰ分析４２份燕麦材料遗
传多样性，筛选出的５对引物组合共获得２６８条带，平均多态性检出率为６９．０％。这些差异可能是由于材料选
择和研究方法的不同造成的。此外，ＩＳＳＲ标记每一个简并碱基代表２～３个碱基，提供了许多机会被不同的基因
组筛选。因而，同一套引物可以用于不同的物种，而且ＩＳＳＲ可以更好地揭示物种间的多态性。本研究发现燕麦
ＩＳＳＲ的多态性极高，但其ＩＳＳＲ引物的有效数目远远低于水稻 （犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪）和小麦，４８条ＩＳＳＲ引物，仅有８
条引物（占１６．７％）能够得到清晰扩增产物。而在小麦中，Ｎａｇａｏｋａ和Ｏｇｉｈａｒａ［２６］发现１００条ＩＳＳＲ引物中３３条
（占３３％）能产生清晰的扩增产物；Ｊｏｓｈｉ等［２７］在水稻ＩＳＳＲ研究中发现６０％的引物能产生清晰条带。这可能是
由于物种的基因型差异所致。在检测技术上，本研究采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，相比较常规的琼脂糖凝胶电泳而
言，操作过程稍显复杂，但分离小片段ＤＮＡ效果好，分辨率极高，ＰＣＲ扩增所得产物在２００～２０００ｂｐ，基因型间
的差异仅为几个ｂｐ，且无需采用有毒性的溴化乙锭染色，用银染法即可得到清晰、重复性好而多态性高的电泳图
谱，进一步增加了试验结果的稳定性和可靠性。综合分析，利用ＩＳＳＲ可以获得清晰且多态性高的燕麦电泳图
谱，该技术比ＲＦＬＰ、ＳＳＲ、ＲＡＰＤ等技术更多地揭示基因组中的多态性，可应用于大批量样品的研究，应用于燕
麦遗传多样性研究及不同材料的ＤＮＡ水平识别也是可靠的。另外，燕麦是自花授粉植物，利用ＩＳＳＲ标记分析
的准确性明显高于异花授粉植物，只要选择足够多且具有代表性的种、亚种、类型进行深入研究，可以在分析亲缘
关系、研究系统发育、种质资源利用等方面发挥重要作用。
当然ＩＳＳＲ技术也存在着一些不足。例如用ＩＳＳＲ标记数据计算遗传相似系数时可能会出现偏差，因为它同
样可能像ＲＡＰＤ那样在一个位置上出现的条带并不是来自基因组上的同一区域，只不过正好碰巧片段长度相
等［２８］。此外，ＩＳＳＲ大部分情况下是显性标记，不能区分纯合体与杂合体，进行两倍体或多倍体物种的种群多样
性研究时，数据分析方法还需不断改进［２９］。
３．２　燕麦遗传多样性与其地理来源的关系
试验选取来自中国、加拿大、美国、澳大利亚、欧洲、日本、乌克兰等不同国家和地区的燕麦品种，这些品种遗
传多样性丰富，遗传背景差异相对显著，可以直接应用到以后的杂交优势亲本选育中去。ＩＳＳＲ分析结果从ＤＮＡ
水平揭示品种间的差异和相关性，基于ＩＳＳＲ水平的聚类分析及主成分分析结果与品种的地域来源表现较强的
相关性，遗传距离与地理分布关系密切，各国或不同地理区间的ＩＳＳＲ变异较大，各品种间差异较明显，欧氏距离
相差大；而来自同一国家的品种间遗传差异并不明显，以美国品种的遗传多样性最高，与其遗传距离最近品种间
遗传相似系数为０．７８３３；加拿大、欧洲及中国品种的遗传多样性指数都相对较低，我国供试的１６个皮燕麦品种
遗传相似系数极高，在０．８４１７～０．９３３３，说明国内品种间差异小。原因可能是美国地理气候条件丰富，燕麦的
起源和进化状况差异较大，育种手段和研究方法多样，故遗传多样性较明显。而其他几个国家及地区地理气候条
件相近，育种方法单一，此方面研究稍微落后，故燕麦遗传差异相对较小。ＩＳＳＲ在一定程度上能较好的反映出燕
麦品种间亲缘关系的远近。从聚类图可以得出两点，一个是属于同种、同组的不同材料首先聚在一起，然后再与
其他组的材料聚在一起，另外一点表现为明显的地域规律，即地理来源相同的材料首先聚在一起。我国的多数皮
燕麦品种都聚在第Ⅰ大类，其中青海的多数品种、甘肃品种为一亚类，吉林的品种单独归为一亚类；第Ⅱ大类多数
由国外皮燕麦品种组成，其中第１亚类中除科燕１号外，均为加拿大品种，澳大利亚、丹麦品种为一亚类，蒙古、俄
罗斯、欧洲品种也归为同一亚类，日本品种初岛独自归为一亚类；第Ⅲ大类包括加拿大、美国的２个品种；第Ⅳ类
为我国四川品种，而第Ⅴ类则包括全部裸燕麦品种。这一结果与范彦等［３０］的研究结果相似，即地理位置近的具
２２１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．４
有首先聚在一类的趋势，品种（系）间呈现出一定的地域性分布规律。但孙群等［３１］研究结果表明乌拉尔甘草组群
的划分与其生态地域性没有明显关系，认为样品间遗传差异与形态、地理来源差异没有必然的联系。聚类图中可
看出有些品种并未与同一地区或具有亲缘关系的品种聚为一类，这可能是由于选育过程中存在相互引种的关系，
或是多个亲本复合杂交以及多向选择产生了较大的遗传变异所致。也可能是由于长期种植后，自然条件及栽培
环境等的变化所产生的基因变异，种质的相互渗透而形成。
供试６个裸燕麦品种遗传相似度在０．８０８３～０．９３３３，加拿大裸燕麦品种与其他中国品种遗传相似度平均
保持在０．８３，与吉林裸燕麦遗传距离最近，因为吉林的裸燕麦大多来源于加拿大；我国被认为是裸燕麦的起源中
心，供试的５个国内裸燕麦品种遗传相似系数在０．８５００～０．９３３３，其中定西、内蒙古品种遗传距离较近，其次是
山西品种，吉林品种与其余几省的品种遗传距离相对较远，表明我国燕麦地方品种遗传基础广阔，在基因型表现
特异性的同时又有较强的地域性。
参考文献：
［１］　郭本兆．中国植物志［Ｍ］．第九卷，第三分册．北京：科学出版社，１９８７．
［２］　杨海鹏，孙泽民．中国燕麦［Ｍ］．北京：农业出版社，１９８９．
［３］　张耀生，赵新全，周兴民．高寒牧区三种豆科牧草与燕麦混播的试验研究［Ｊ］．草业学报，２００１，１０（１）：１３１９．
［４］　李凤霞，张德罡，姚拓．燕麦根际促生菌特性研究［Ｊ］．草业学报，２００５，１４（１）：５８６２．
［５］　吴娜，卜洪震，曾昭海，等．灌溉定额对夏播裸燕麦产量和品质的影响［Ｊ］．草业学报，２０１０，１９（５）：２０４２０９．
［６］　周青平，石德军，杨力军．几种高产燕麦品种酯酶同功酶分析［Ｊ］．中国草地，２００２，２４（４）：１５１８．
［７］　王茅雁，齐秀丽．利用ＲＡＰＤ标记研究燕麦属不同种的遗传差异［Ｊ］．华北农学报，２００４，１９（４）：２４２８．
［８］　赵桂琴，慕平，魏黎明．饲用燕麦研究进展［Ｊ］．草业学报，２００７，１６（４）：１１６１２５．
［９］　ＳｏｌａｎｏＲ，ＨｕｅｒｏｓＧ，ＦｏｍｉｎａｙａＡ，犲狋犪犾．Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｒｅｐｅａｔｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅｓｉｎｓｐｅｃｉｅｓｏｆｔｈｅｇｅｎｕｓ犃狏犲狀犪［Ｊ］．Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ
ａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９２，８３：６０２６０７．
［１０］　刘欢，慕平，赵桂琴．基于ＡＦＬＰ的燕麦遗传多样性研究［Ｊ］．草业学报，２００８，１７（６）：１２１１２７．
［１１］　ＳｏｕｚａＥ，ＳｏｒｒｅｌｓＭＥ．Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓａｍｏｎｇ７０ＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａｎｏａｔｇｅｒｍｐｌａｓｍｓ：Ｉ．Ｃｌｕｓｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓｕｓｉｎｇｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｃｈａｒ
ａｃｔｅｒｓ［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，１９９１，３１：５９９６０５．
［１２］　ＳｉｍＳ，ＣｈａｎｇＴ，ＣｕｒｌｅｙＪ，犲狋犪犾．ＣｈｒｏｍｏｓｏｍａｌｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇｔｈｅｒｙｅｇｒａｓｓｇｅｎｏｍｅｆｒｏｍｔｈｅＴｒｉｔｉｃｅａｅ，ｏａｔ，
ａｎｄｒｉｃｅｇｅｎｏｍｅｓｕｓｉｎｇｃｏｍｍｏｎｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓＲＦＬＰｐｒｏｂｅｓ［Ｊ］．ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，２００５，１１０：１０１１１０１９．
［１３］　ＺｉｅｔｋｉｅｗｉｃｚＥ，ＲａｆａｌｓｋｉＡ，ＬａｂｕｄａＤ．Ｇｅｎｏｍｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇｂｙｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ（ＳＳＲ）ａｎｃｈｏｒｅｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅ
ａｃｔｉｏｎａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，１９９４，２０：１７６１８３．
［１４］　魏臻武．利用ＳＳＲ，ＩＳＳＲ和ＲＡＰＤ技术构建苜蓿基因组ＤＮＡ指纹图谱［Ｊ］．草业学报，２００４，１３（３）：６２６７．
［１５］　冯亮亮，唐红，李毅，等．甘肃红砂不同种群遗传多样性的ＩＳＳＲ分析［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（１）：１２５１３０．
［１６］　ＭａｔｌａｇａＤ，ＫａｒｏｌｙＫ．ＬｏｎｇｔｅｒｍｇｒａｚｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｏｎｇｅｎｅｔｉｃｖａｒｉａｔｉｏｎｉｎＩｄａｈｏｆｅｓｃｕｅ［Ｊ］．ＲａｎｇｅＭａｎａｇｅｍｅｎｔ，２００４，５７：２７５
２７８．
［１７］　王关林，方宏筠．植物基因工程原理与技术［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９８：５９８．
［１８］　张立荣，刘大群，徐大庆，等．小麦ＩＳＳＲ分析初探［Ｊ］．河北农业大学学报，２００４，２７（１）：１０１３．
［１９］　张韬，聂洪丽，陈颖晓，等．野生大麦ＩＳＳＲＰＣＲ反应体系的正交优化研究［Ｊ］．安徽农业科学，２００７，３５（３２）：１０２４８
１０２４９．
［２０］　佟汉文，孙群，吴波，等．乌拉尔甘草ＩＳＳＲＰＣＲ反应体系优化研究［Ｊ］．中国农学通报，２００５，２１（４）：７０７４．
［２１］　刘世新．实用生物组织学技术［Ｍ］．北京：科学出版社，２００３：２２２２２４．
［２２］　ＮｅｉＭ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆａｖｅｒａｇｅｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅｆｒｏｍａｓｍａｌｎｕｍｂｅｒｏｆｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９７８，８９：
５８３５９０．
［２３］　Ｏ’ＤｏｎｏｕｇｈｕｅＬＳ，ＳｏｕｚａＥ，ＴａｎｋｓｌｅｙＳＤ，犲狋犪犾．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓａｍｏｎｇＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａｎｏａｔｃｕｌｔｉｖａｒｓｂａｓｅｄｏｎｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ
ｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，１９９４，３４：１２５１１２５８．
［２４］　ＰａｌＮ，ＳａｎｄｈｕＪＳ．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅａｎｄＲＦＬＰｄｅｒｉｖｅｄＰＣＲｍａｒｋｅｒｓｉｎｏａｔ［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｃｉ
３２１第２１卷第４期 草业学报２０１２年
ｅｎｃｅ，２００２，４２：９１２９１８．
［２５］　ＬｉＣＤ，ＲｏｓｓｎａｇｅｌＢＧ，ＳｃｏｌｅｓＧＪ．Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｏａｔｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅｍａｒｋｅｒｓａｎｄｔｈｅｉｒｕｓｅｉｎｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ
ａｍｏｎｇ犃狏犲狀犪ｓｐｅｃｉｅｓａｎｄｏａｔｃｕｌｔｉｖａｒｓ［Ｊ］．ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，２０００，１０１：１２５９１２６８．
［２６］　ＮａｇａｏｋａＴ，ＯｇｉｈａｒａＹ．ＡｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙｏｆｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｉｎｗｈｅａｔｆｏｒｕｓｅＤＮＡａｓｍａｒｋｅｒｓｉｎ
ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｔｏＲＦＬＰａｎｄＲＡＰＤｍａｒｋｅｒｓ［Ｊ］．ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９７，９４：５９７６０２．
［２７］　ＪｏｓｈｉＳＰ，ＧｕｐｔａＶＳ，ＡｇｇａｒｗａｌＲＫ，犲狋犪犾．Ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐａｓｒｅｖｅａｌｅｄｂｙｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅ
ｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ（ＩＳＳＲ）ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｉｎｔｈｅｇｅｎｕｓ犗狉狔狕犪［Ｊ］．ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，２０００，１００：１３１１１３２０．
［２８］　ＳａｎｃｈｅｚＭＰ，ＤａｖｉｌａＪＡ，ＬｏａｒｃｅＹ，犲狋犪犾．Ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｐｒｉｍｅｒｓｕｓｅｄｉｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｔｏ
ｓｔｕｄｙｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎｂａｒｌｙ［Ｊ］．Ｇｅｎｏｍｅ，１９９６，３９（１）：１１２１１７．
［２９］　ＫｏｓｍａｎＥ，ＬｅｏｎａｒｄＫＪ．Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓｆｏｒｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｓｉｎｓｔｕｄｉｅｓｏｆｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓｂｅｔｗｅｅｎｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ
ｆｏｒｈａｐｌｏｉｄ，ｄｉｐｌｏｉｄ，ａｎｄｐｏｌｙｐｌｏｉｄｙｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＥｃｏｌｏｇｙ，２００５，１４（２）：４１５４２４．
［３０］　范彦，李芳，张新全，等．扁穗牛鞭草种质遗传多样性的ＩＳＳＲ分析［Ｊ］．草业学报，２００７，１６（４）：７６８１．
［３１］　孙群，佟汉文，吴波，等．不同种源乌拉尔甘草形态和ＩＳＳＲ遗传多样性研究［Ｊ］．植物遗传资源学报，２００７，８（１）：５６６３．
犃狊狋狌犱狔狅狀犵犲狀犲狋犻犮犱犻狏犲狉狊犻狋狔狅犳犃狏犲狀犪犵犲狉犿狆犾犪狊犿狉犲狊狅狌狉犮犲狊犱犲狋犲犮狋犲犱犫狔犐犛犛犚
ＬＩＵＨｕａｎ１，ＭＵＰｉｎｇ２，ＺＨＡＯＧｕｉｑｉｎ１
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＧａｎｓｕＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＧｒａｓｓｌａｎｄ
Ｅｃｏｓｙｓｔｅｍ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ；ＳｉｎｏＵ．Ｓ．ＣｅｎｔｅｒｆｏｒＧｒａｚｉｎｇｌａｎｄＥｃｏｓｙｓｔｅｍ
Ｓｕｓｔａｉｎａｂｉｌｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ，Ｇａｎｓｕ
ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ４２犃狏犲狀犪狊犪狋犻狏犪ｖａｒｉｅｔｉｅｓａｎｄ６犃狏犲狀犪狀狌犱犪ｖａｒｉｅｔｉｅｓｆｒｏｍＣｈｉｎａ，Ｃａｎａｄａ，Ａｍｅｒ
ｉｃａ，Ｅｕｒｏｐｅａｎｄｏｔｈｅｒｃｏｕｎｔｒｉｅｓｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｕｓｉｎｇｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ（ＩＳＳＲ）ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｓ．
Ｅｉｇｈｔｐｒｉｍｅｒｓｄｅｔｅｃｔｅｄ１４４ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｂａｎｄｓ，ａｎｄｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｆｒａｇｍｅｎｔｗａｓ８６．１％．Ｂａｓｅｄ
ｏｎＮｅｉ’ｓｉｎｄｅｘ，ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｖａｒｉａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆ犃．狊犪狋犻狏犪ａｎｄ犃．狀狌犱犪ｗｅｒｅ０．２０３６ａｎｄ０．２０１５，ａｎｄｏｆ
ｔｈｅＳｈａｎｎｏｎｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎｄｅｘｗｅｒｅ０．３２５９ａｎｄ０．３０５８，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆａｌｃｕｌｔｉｖａｒｓ
ｗａｓ０．５８３３－０．９４１７，ａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅｗａｓ０．０６０１－０．５３９０ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇａｒｉｃｈｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ犃狏犲狀犪，
ｗｉｔｈ犃．狊犪狋犻狏犪ｖａｒｉｅｔｉｅｓｈａｖｉｎｇａｈｉｇｈｅｒｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｔｈａｎｔｈａｔｏｆ犃．狀狌犱犪ｖａｒｉｅｔｉｅｓ．Ｂａｓｅｄｏｎｃｌｕｓｔｅｒａｎｄ
ｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｎａｌｙｓｅｓｏｆｔｈｅＩＳＳＲｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇｄａｔａ，ｔｈｅ４８ｖａｒｉｅｔｉｅｓｃｏｕｌｄｂｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ５ｇｒｏｕｐｓ．Ｉｎ
ｍｏｓｔｃａｓｅｓ，ａｃｃｅｓｓｉｏｎｓｆｒｏｍｔｈｅｓａｍｅｃｏｎｔｉｎｅｎｔｗｅｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｅｄｉｎｔｏｔｈｅｓａｍｅｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕ
ｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎ犃．狊犪狋犻狏犪ａｎｄ犃．狀狌犱犪ｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｗｏｇｒｏｕｐｓａｔ０．６６，ｗｈｉｃｈｗａｓｉｎａｃｃｏｒｄ
ａｎｃｅｗｉｔｈｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｎｄｏｔｈｅｒｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｒｅｖｅａｌｅｄ
ｂｙＩＳＳＲｗａｓｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｗｉｔｈｔｈａｔｆｒｏｍｏｔｈｅｒｓｏｕｒｃｅｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犃狏犲狀犪；ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ＩＳＳＲ；ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓ；ｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓ
４２１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．４