全 文 ：书高粱棕色中脉基因犫犿狉６的遗传分析
和犛犛犚标记定位
李杰勤，王丽华，詹秋文，范军成
（安徽科技学院植物科学学院，安徽 凤阳２３３１００）
摘要：高粱棕色突变体的叶片中脉是棕色的，此类突变体能使家畜难以消化的木质素含量降低４０％～６０％，从而大
幅度提高了家畜对高粱秸秆的消化率。利用高粱棕色中脉材料Ｎ５９２（ｂｍｒ６类型）和白色中脉（Ｓａ）进行杂交和自
交，构建Ｆ２ 分离群体，Ｆ１ 表现为白色中脉，Ｆ２ 白棕分离比符合３∶１，说明棕色中脉基因受一对等位基因控制，表现
为隐性遗传。用已知定位到连锁群上的微卫星标记对棕色中脉基因进行了连锁分析，发现１个与棕色中脉
（ｂｍｒ６）基因连锁的微卫星标记，连锁距离为４．２ｃＭ，初步将该基因定位于第７连锁群。
关键词：高粱；ｂｍｒ６；ＳＳＲ；基因定位
中图分类号：Ｓ５１４．０３；Ｑ９４３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１０）０５０２７３０５
　 高粱（犛狅狉犵犺狌犿犫犻犮狅犾狅狉）是禾本科一年生草本植物，因其具有抗旱、耐涝、耐盐碱和适应性强等特性，是世界
第五大粮食作物，同时又是一种优质饲料作物［１３］。棕色中脉（Ｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂ，ｂｍｒ）是指叶脉和茎秆木质部呈棕
灰或红棕色的自然或化学突变体。研究发现［４］，叶片中脉颜色与木质素含量和组成有着密切关系。一般认为总
木质素含量和木质素单体的组成比例对细胞壁的可消化性影响较大［５］。在饲用高粱及高粱－苏丹草（犛狅狉犵犺狌犿
狊狌犱犪狀犲狀狊犲）杂交种中，棕色中脉与传统的白色中脉品种相比，其叶和秸秆中家畜可消化的纤维素和半纤维素含量
增加，而难以消化的木质素含量降低４０％～６０％，极大地提高了叶和秸秆的适口性，各种放牧家畜特别喜食，同
样的饲喂量可获得更高的效益。因此利用棕色中脉突变体来改善饲用高粱及高粱－苏丹草杂交种品质引起了各
国研究者的广泛关注。
１９２４年，棕色中脉突变体首先在玉米（犣犲犪犿犪狔狊）中被发现，接着在高粱、珍珠粟（犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿犪犿犲狉犻犮犪狉狌犿）
等作物中陆续被发现［６，７］。高粱中的棕色中脉类型较多，目前已经报道的类型有１９种，其中既有自然突变体也有
化学突变体［８］。在这些类型中，最重要的主要有ｂｍｒ６、ｂｍｒ１２和ｂｍｒ１８三种类型［９，１０］。因为这３种类型的可
消化率远高于其他类型，因此应该是与木质素合成有关的基因发生突变的结果。等位分析证明ｂｍｒ１２和ｂｍｒ
１８是等位基因，ｂｍｒ６和ｂｍｒ１２位于不同的染色体上［１１］。日前，ｂｍｒ１２和ｂｍｒ１８基因已经克隆，但ｂｍｒ６基
因定位还未见相关报道。
本研究利用从美国引进的高粱棕色中脉材料（ｂｍｒ６类型）与白色中脉材料的杂交Ｆ２ 分离群体，分析了高粱
棕色中脉基因ｂｍｒ６的遗传特点，并利用分子标记对ｂｍｒ６进行了基因定位，为进一步对ｂｍｒ６基因的克隆和
利用打下基础。
１　材料与方法
１．１　试验材料
棕色中脉材料Ｎ５９２是由美国Ｎｅｂｒａｓｋａ－Ｌｉｎｃｏｌｎ大学提供。Ｎ５９２是由Ｎ１２１（ｂｍｒ６）与ＲｏｘＯｒａｎｇｅ进行
多代回交选育而成。
第１９卷　第５期
Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．５
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
２７３－２７７
２０１０年１０月
 收稿日期：２００９１１２５；改回日期：２００９１２２５
基金项目：科技部农业科技成果转化资金项目（Ｎｏ：２００８ＧＢ２Ｃ３００１２５），国家自然科学基金（Ｎｏ：３１０７１４７０），安徽省“１１５”产业创新团队资助
（Ｎｏ：皖人才办［２００９］２号），国家科技支撑计划项目（Ｎｏ：２００８ＢＡＤＢ３Ｂ１０），安徽省高校学科拔尖人才基金（Ｎｏ：教秘人［２００５］７９
号）和安徽科技学院稳定人才专项（Ｎｏ：ＺＲＣ２００９２３６）资助。
作者简介：李杰勤（１９８０），男，四川宜宾人，硕士。Ｅｍａｉｌ：ｗｌｈｌｊｑ＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者。
１．２　定位群体的构建
将高粱棕色中脉材料Ｎ５９２分别和白色中脉材料Ｓａ和Ｓ７２２分别进行杂交，获得Ｆ１ 代。将Ｆ１ 植株单穗进
行套袋自交，获得Ｆ２ 代分离群体。２００８年将该群体种植在安徽科技学院农场中，种植密度为行距５０ｃｍ，株距
３０ｃｍ，常规肥水管理。
１．３　定位亲本叶中脉组织切片
在能辨别棕色中脉和白色中脉性状的６叶期，取Ｎ５９２和Ｓａ的叶中脉，徒手切片，切片置于载玻片上，加入１
滴间苯三酚／盐酸试剂（２ｍｏｌ／Ｌ盐酸，１％ 间苯三酚，溶于９５％乙醇），室温放置１ｍｉｎ后，观察拍照。
１．４　χ
２ 测验
利用公式χ
２
犮＝∑
（｜犗－犈｜－０．５）２
犈
对２个杂交Ｆ２ 群体的棕色中脉和白色中脉的株数进行测验，理论比率为
３∶１。式中，犗为观测值，犈为理论值。
１．５　ＤＮＡ提取
在６叶期对Ｆ２ 单株的棕色中脉单株进行统计，并取幼嫩叶片。同时取Ｎ５９２和Ｓａ双亲的幼嫩叶片，并做好
编号标记。
ＤＮＡ的提取方法，参照Ｂｒｏｗｎ等［１２］的方法，取嫩叶片０．５ｇ，加液氮研磨成粉末，加５００ｍＬ提取液（６５℃）
摇匀，６５℃温浴３０ｍｉｎ；加２０μＬＫＡＣ（预冷），冰浴２０ｍｉｎ，禁止摇动；加４００μＬ氯仿／异戊醇（２４∶１）摇匀，
１００００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ；取上清液于离心管中，加入预冷的无水乙醇；吸出位于液面上白色絮状物ＤＮＡ，之后
用７０％的乙醇冲洗２次，加无水乙醇脱水１次，保存。
１．６　ＳＳＲ反应体系
采用２５μＬ体系：１０×Ｂｕｆｆｅｒ（无 Ｍｇ
２＋）２．０μＬ，ＭｇＣｌ２２．０μＬ（２５ｍｍｏｌ／Ｌ），引物：前引物１．０μＬ（１０
μｍｏｌ／Ｌ），后引物１．０μＬ（１０μｍｏｌ／Ｌ），ｄＮＴＰ２．０μＬ（２５ｍｍｏｌ／Ｌ），模板ＤＮＡ２．０μＬ（５０ｎｇ／μＬ），双蒸水１４．８
μＬ。
１．７　ＳＳＲ标记分析
选取均匀分布在高粱１０个连锁群上的１７１对ＳＳＲ引物进行ＰＣＲ扩增。ＳＳＲ引物为ｔｘｐ系列，具体名称和
分布见表１，引物序列参考网站ｗｗｗ．ｇｒａｍｅｎｅ．ｏｒｇ。ＳＳＲ引物全部由ｂｉｏｓｉｎｏ公司合成。
表１　高粱犛犛犚引物名称及分布
犜犪犫犾犲１　犜犺犲犛犛犚犿犪狉犽犲狉狊狀犪犿犲犪狀犱犱犻狊狋狉犻犫狌狋犻狅狀狅狀犛．犫犻犮狅犾狅狉犾犻狀犽犪犵犲犵狉狅狌狆
连锁群Ｌｉｎｋａｇｅ 引物名称 Ｍａｒｋｅｒｓｎａｍｅ
Ａ ｔｘｐ１１，ｔｘｐ３２，ｔｘｐ４３，ｔｘｐ４６，ｔｘｐ５８，ｔｘｐ６１，ｔｘｐ７１，ｔｘｐ７５，ｔｘｐ７９，ｔｘｐ８５，ｔｘｐ８８，ｔｘｐ１４９，ｔｘｐ１６２，ｔｘｐ２０４，ｔｘｐ２０８，ｔｘｐ２１３，ｔｘｐ２２９，
ｔｘｐ２４８，ｔｘｐ２７９，ｔｘｐ２８４，ｔｘｐ３０２，ｔｘｐ３１６，ｔｘｐ３１９，ｔｘｐ３２３，ｔｘｐ３２５，ｔｘｐ３３５，ｔｘｐ３４０，ｔｘｐ３５０，ｔｘｐ３５７
Ｂ ｔｘｐ１，ｔｘｐ３，ｔｘｐ４，ｔｘｐ７，ｔｘｐ８，ｔｘｐ１９，ｔｘｐ２５，ｔｘｐ５０，ｔｘｐ５５，ｔｘｐ５６，ｔｘｐ６３，ｔｘｐ７２，ｔｘｐ８０，ｔｘｐ８４，ｔｘｐ９６，ｔｘｐ１００，ｔｘｐ１７９，ｔｘｐ１９７，
ｔｘｐ２０１，ｔｘｐ２０７，ｔｘｐ２１１，ｔｘｐ２１４，ｔｘｐ２８３，ｔｘｐ２８６，ｔｘｐ２９６，ｔｘｐ２９７，ｔｘｐ２９８，ｔｘｐ３１５，ｔｘｐ３４８
Ｃ ｔｘｐ９，ｔｘｐ１６，ｔｘｐ３１，ｔｘｐ３３，ｔｘｐ３４，ｔｘｐ３８，ｔｘｐ４８，ｔｘｐ５９，ｔｘｐ６９，ｔｘｐ７０，ｔｘｐ９８，ｔｘｐ１１４，ｔｘｐ１８３，ｔｘｐ２０５，ｔｘｐ２１５，ｔｘｐ１１６，ｔｘｐ２１８，
ｔｘｐ２２８，ｔｘｐ２３１，ｔｘｐ２６６，ｔｘｐ２８５，ｔｘｐ３３６
Ｄ ｔｘｐ１２，ｔｘｐ２１，ｔｘｐ２４，ｔｘｐ４１，ｔｘｐ５１，ｔｘｐ６０，ｔｘｐ７７，ｔｘｐ８１，ｔｘｐ１０９，ｔｘｐ１３１，ｔｘｐ１７７，ｔｘｐ２１２，ｔｘｐ３２７，ｔｘｐ３２８，ｔｘｐ３４３
Ｅ ｔｘｐ１４，ｔｘｐ１５，ｔｘｐ２３，ｔｘｐ３０，ｔｘｐ６５，ｔｘｐ９１，ｔｘｐ９４，ｔｘｐ１１２，ｔｘｐ１１３，ｔｘｐ１１５，ｔｘｐ３３８，ｔｘｐ２２５，ｔｘｐ２６２，ｔｘｐ２６８，ｔｘｐ２９９，ｔｘｐ３０３
Ｆ ｔｘｐ６，ｔｘｐ４５，ｔｘｐ５７，ｔｘｐ９５，ｔｘｐ９７，ｔｘｐ１０１，ｔｘｐ１０４，ｔｘｐ１２７，ｔｘｐ１４５，ｔｘｐ１７６，ｔｘｐ２１９，ｔｘｐ２６５，ｔｘｐ２７４，ｔｘｐ３１７
Ｇ ｔｘｐ３６，ｔｘｐ４０，ｔｘｐ９２，ｔｘｐ９９，ｔｘｐ１３９，ｔｘｐ１５６，ｔｘｐ１５９，ｔｘｐ１６８，ｔｘｐ２２７，ｔｘｐ２７８，ｔｘｐ２９５，ｔｘｐ３１２
Ｈ ｔｘｐ１８，ｔｘｐ２８，ｔｘｐ４７，ｔｘｐ１０５，ｔｘｐ１４４，ｔｘｐ２１０，ｔｘｐ２５０，ｔｘｐ２７３，ｔｘｐ２９２，ｔｘｐ２９４，ｔｘｐ３２１，ｔｘｐ３５４
Ｉ ｔｘｐ１０，ｔｘｐ６７，ｔｘｐ１０７，ｔｘｐ２３０，ｔｘｐ２５８，ｔｘｐ２８７，ｔｘｐ２８９，ｔｘｐ３２４，ｔｘｐ３３９，ｔｘｐ３５５，ｔｘｐ３５８
Ｊ ｔｘｐ９０，ｔｘｐ１２９，ｔｘｐ１６４，ｔｘｐ１４１，ｔｘｐ２１７，ｔｘｐ２７０，ｔｘｐ３０９，ｔｘｐ３２０，ｔｘｐ３３１，ｔｘｐ３５３，ｔｘｐ３３７
４７２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１０） Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．５
１．８　ＰＣＲ扩增
ＰＣＲ反应按如下程序进行：９４℃预变性５ｍｉｎ，９４℃变性４５ｓ，５５℃退火４５ｓ，７２℃延伸１ｍｉｎ循环３６次，
７２℃延伸７ｍｉｎ，４℃保存。反应完成后，加入２．０μＬ的溴酚蓝，３％的琼脂糖凝胶电泳，溴化乙啶（ＥＢ）染色，凝胶
成像系统（ＰＣＲ）拍照。
１．９　遗传作图
将在亲本间有差异的ＳＳＲ引物对隐性群体进行ＰＣＲ扩增，将与母本条带一致的个体赋值为０，与父本一致
的为１，双带为２。将群体基因型数据归类，用Ｅｘｐ３．０ｂ作图软件进行连锁分析［１３］，采用Ｋｏｓａｍｂｉ函数将重组值
转换为遗传图距。
２　结果与分析
２．１　Ｎ５９２和Ｓａ的叶中脉表型及其组织切片
普通高粱叶中脉有４种颜色，即白色、绿色、黄色和浅灰色。Ｎ５９２为浅棕色，Ｓａ为白色。两者在颜色上差别
较大，但衰老叶片的叶色中脉都为白色。因此，在收获棕色中脉的饲用高粱要早于普通饲用高粱，以便于减少营
养损失。
图１　犖５９２和犛犪叶中脉组织切片
犉犻犵．１　犜犺犲犿犻犱狉犻犫犺犻狊狋狅犾狅犵犻犮犪犾狊犲犮狋犻狅狀
间苯三酚是一种用来检测植物组织中木质素的常
用试剂。木质素能和间苯三酚／盐酸试剂产生红色的
化合物。因此，如果组织中红色越深则说明木质素含
量越高，纤维素和半纤维素含量则相应降低。Ｎ５９２的
红色比Ｓａ要浅得多（图１），而且Ｎ５９２被染红的主要
分布在韧皮部，而Ｓａ则在髓部、韧皮部、木质部及表皮
都被染成了红色。这也说明Ｓａ的木质素含量要远高
于Ｎ５９２。
２．２　高粱棕色中脉基因的遗传行为分析
以Ｎ５９２分别与Ｓａ和Ｓ７２２进行杂交，获得的Ｆ１
代，叶脉表现全为白色中脉，这表明棕色中脉基因为隐
性遗传。将Ｆ１ 代进行套袋自交，获得的Ｆ２ 代分离群
体。Ｆ２ 分离群体中，白色中脉和棕色中脉分离符合１
对等位基因的分离规律（表２）。通过χ
２ 测验，说明棕
色中脉ｂｍｒ６受１对隐性等位基因控制。
２．３　Ｎ５９２和Ｓａ引物筛选
由于Ｎ５９２和Ｓａ杂交Ｆ２ 群体在数量上和χ
２ 测
验的结果都优于 Ｎ５９２和Ｓ７２２，因此选择了 Ｎ５９２和
Ｓａ杂交Ｆ２ 群体为定位群体。选择了１７１对ＳＳＲ标记
表２　高粱棕色中脉基因的χ２ 测验
犜犪犫犾犲２　犜犺犲χ２狋犲狊狋狅犳狊狅狉犵犺狌犿犫狉狅狑狀犿犻犱狉犻犫犵犲狀犲
组合
Ｃｒｏｓｓ
Ｆ２中脉颜色及株数Ｆ２ｃｏｌｏｒ
ａｎｄｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ（株Ｐｌａｎｔｎｕｍｂｅｒ）
棕色
Ｂｒｏｗｎ
白色
Ｗｈｉｔｅ
总数
Ｔｏｔａｌ
χ２　
３∶１
χ２０．０５ χ
２
０．０１
Ｎ５９２／Ｓ７２２ ６２ １４３ ２０５ ２．７３ ３．８４ ６．６３
Ｎ５９２／Ｓａ １２２ ３９８ ５２０ ０．５８ ３．８４ ６．６３
　χ２０．０５，１＝３．８４．
对定位群体亲本进行了ＰＣＲ扩增，Ｎ５９２和Ｓａ两个亲本间的ＳＳＲ标记进行了多态性筛选。在扩增的１７１对引
物中，２４对能够揭示亲本间的多态性（图２），多态性频率为１４．１％。
图２　定位亲本间多态性引物筛选
犉犻犵．２　犛犮狉犲犲狀犻狀犵狅犳犛犛犚犿犪狉犽犲狉狊犻狀狆犪狉犲狀狋狊
５７２第１９卷第５期 草业学报２０１０年
图３　犛犛犚标记狋狓狆２９５在犉２ 隐性群体中的部分扩增结果
犉犻犵．３　犃犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳狋狓狆２９５犻狀犉２狉犲犮犲狊狊犻狏犲狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀
２．４　共分离标记的筛选
图４　棕色中脉基因在高粱第７号连锁群上的遗传图
犉犻犵．４　犜犺犲犵犲狀犲狋犻犮犿犪狆狅犳犫犿狉６犵犲狀犲狅狀犛．犫犻犮狅犾狅狉犾犻狀犽犪犵犲犵狉狅狌狆７
应用在双亲间表现多态性的２４对差异标记，对
１２２个Ｆ２ 棕色中脉单株进行ＰＣＲ扩增（图３）。对标
记和基因进行了连锁性分析，发现位于第１连锁群的
ＳＳＲ标记ｔｘｐ２９５与目的基因连锁。经 Ｍａｐｍａｋｅｒ分
析，用Ｋｏｓａｍｂｉ函数将重组值转换为遗传图距，连锁
距离为４．２ｃＭ。因ｔｘｐ２９５位于第７连锁群（表１），初
步将该基因定位于第７连锁群上（图４）。
本研究采用基因定位方法来对ｂｍｒ６基因进行
了初步定位，为进一步的基因精细定位奠定了基础。
同样的方法也在高粱棕色中脉基因ｂｍｒ２６的定位上
被采用［１４］。利用已有的分子图谱对基因进行初步定位，再以这一标记为基点，进行加密探针，可以大大的缩小标
记选择的范围，为目标基因精细定位打下基础［１５］。本研究利用已公布的高粱分子图谱中的ＳＳＲ标记，将棕色中
脉基因直接定位到已知连锁群上，为进一步筛选引物和该基因精细定位打下了基础，同时也为利用分子标记辅助
选择进行棕色中脉品种的选育创造了条件。
参考文献：
［１］　常金华，夏雪岩，张丽，等．高粱抗蚜基因的遗传分析和ＳＳＲ标记定位［Ｊ］．草业学报，２００６，１５（２）：１１３１１８．
［２］　程序．能源牧草堪当未来生物能源之大任［Ｊ］．草业学报，２００８，１７（３）：１５．
［３］　韩天文，张建全．５个苏丹草品种酯酶同工酶比较研究［Ｊ］．草业科学，２００９，２６（１０）：９７１０２．
［４］　ＣｈｅｒｎｅｙＪＨ，ＣｈｅｒｎｅｙＤＪＲ，ＡｋｉｎＤＥ，犲狋犪犾．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂ，ｌｏｗｌｉｇｎｉｎｍｕｔａｎｔｓｆｏｒｉｍｐｒｏｖｉｎｇｆｏｒａｇｅｑｕａｌｉｔｙ［Ｊ］．
ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＡｇｒｏｎｏｍｙ，１９９１，４６：１５７１９８．
［５］　ＢａｒｒｉｅｒｅＹ，ＲａｌｐｈＪ，ＭｅｃｈｉｎＶ，犲狋犪犾．ＧｅｎｅｔｉｃａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｂａｓｉｓｏｆｇｒａｓｓｃｅｌｗａｌｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｄｅｇｒａｄａｂｉｌｉｔｙＩＩ．Ｌｅｓｓｏｎｓ
ｆｒｏｍｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂｍｕｔａｎｔｓ［Ｊ］．ＣｏｍｐｔｅｓＲｅｎｄｕｓＢｉｏｌｏｇｉｅｓ，２００４，３２７：８４７８６０．
［６］　ＪｏｒｇｅｎｓｏｎＲＬ．Ｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂｉｎｍａｉｚｅａｎｄｉｔｓｌｉｇｎａｇｅｒｅｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＡｍｅｒｉｃａｎＳｏｃｉｅｔｙｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ，１９３１，２３：５４９５５７．
［７］　邰书静，张仁和，史俊通，等．不同玉米品种秸秆饲用品质的研究［Ｊ］．草业学报，２００９，１８（５）：８０８５．
［８］　ＰｏｒｔｅｒＫＳ，ＡｘｔｅｌＪＤ，ＬｅｃｈｔｅｎｂｅｒｇＶＬ，犲狋犪犾．Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ，ｆｉｂｅｒｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｄｒｙｍａｔｔｅｒｄｉｓａｐｐｅａｒａｎｃｅｏｆｃｈｅｍ
ｉｃａｌｙｉｎｄｕｃｅｄｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂ（ｂｍｒ）ｍｕｔａｎｔｓｏｆｓｏｒｇｈｕｍ［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｉｅｎｃｅ，１９７８，１８：２０５２０９．
［９］　ＰｅｄｅｒｓｅｎＪＦ，ＦｕｎｎｅｌＤＬ，ＴｏｙＪＪ，犲狋犪犾．Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｓｅｖｅｎｆｏｒａｇｅｓｏｒｇｈｕｍｇｅｎｅｔｉｃｓｔｏｃｋｓｎｅａｒｉｓｏｇｅｎｉｃｆｏｒｔｈｅｂｒｏｗｎ
ｍｉｄｒｉｂｇｅｎｅｓｂｍｒ６ａｎｄｂｍｒ１２［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，２００６，４６：４９０４９１．
［１０］　ＯｌｉｖｅｒＡＬ，ＰｅｄｅｒｓｅｎＪＦ，ＧｒａｎｔＲＪ，犲狋犪犾．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｓｏｒｇｈｕｍｂｍｒ６ａｎｄｂｍｒ１２ｇｅｎｅｓＩ．ｆｏｒａｇｅｓｏｒｇｈｕｍ
ｙｉｅｌｄａｎｄｑｕａｌｉｔｙ［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，２００５，４５（６）：２２３４２２３９．
［１１］　ＰｉｌｏｎｅｌＣ．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｃｉｎｎａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｏｆｌｉｇｎｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎ犛狅狌犺狌犿犫犻犮狅犾狅狉Ｌ．Ｍｏｅｎｃｈ［Ｊ］．
Ｐｌａｎｔａ，１９９１，１８５：５３８．
［１２］　ＢｒｏｗｎＳＭ，ＨｏｐｋｉｎＡ，ＭｉｔｃｈｅｌＭＬ，犲狋犪犾．Ｍｕｌｔｉｐｌｅｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｔｈｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｓ
（ＳＳＲ）ｉｎｓｏｒｇｈｕｍ［犛狅狉犵犺狌犿犫犻犮狅犾狅狉Ｌ．ｍｏｅｎｃｈ］［Ｊ］．ＴｈｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９３，９３：１９０１９８．
［１３］　ＬｅｎｄｅｒＥＳ，ＧｒｅｅｎＰ，ＡｂｒａｈａｍｓｏｎＪ．Ｍａｐｍａｋｅｒ：Ａｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｕｔｅｒｆｏｒｃｏｎｓｔｒｃｔｉｎｇｐｒｉｍａｒｙｇｅｎｅｎｔｉｃｓｌｉｎｋａｇｅｍａｐｓｏｆ
６７２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１０） Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．５
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｄｎａｔｕｒａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９８７，１：１７４１８２．
［１４］　ＶｏｇｌｅｒＲＫ，ＴｅｓｓｏＴＴ，ＪｏｈｎｓｏｎＫＤ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆａｌｅｌｉｃｖａｒｉａｔｉｏｎｏｎｆｏｒａｇｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂｓｏｒｇｈｕｍｍｕ
ｔａｎｔｓｗｉｔｈｒｅｄｕｃｅｄｃａｆｆｅｉｃａｃｉｄＯｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．ＡｆｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙＲｅｓｅａｒｃｈ，２００９，３（３）：７０
７６．
［１５］　郑轶琦，刘建秀．草坪草分子遗传图谱的构建与应用研究进展［Ｊ］．草业学报，２００９，１８（１）：１５５１６２．
犌犲狀犲狋犻犮犪狀犪犾狔狊犻狊犪狀犱犿犪狆狆犻狀犵狑犻狋犺犛犛犚犿犪狉犽犲狉狊狅犳狋犺犲犫狉狅狑狀犿犻犱狉犻犫
犵犲狀犲犫犿狉６犻狀犛狅狉犵犺狌犿犫犻犮狅犾狅狉
ＬＩＪｉｅｑｉｎ，ＷＡＮＧＬｉｈｕａ，ＺＨＡＮＱｉｕｗｅｎ，ＦＡＮＪｕｎｃｈｅｎｇ
（Ｃｏｌｅｇｅｏｆｐｌａｎｔｓｉｃｅｎｃｅａｎｄｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＡｎｈｕｉＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｅｎｇｙａｎｇ２３３１００，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｅｍｕｔａｎｔｓ，ｗｈｉｃｈｐｒｏｄｕｃｅｄｂｒｏｗｎｌｅａｆｍｉｄｒｉｂｓ，ｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｌｉｇｎｉｎｂｙ４０％ｔｏ６０％ｃｏｍ
ｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｖａｒｉｅｔｉｅｓ．Ｔｈｉｓｌｏｗｌｉｇｎｉｎｃｏｎｔｅｎｔｌａｒｇｅｌｙｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅｒａｔｅｏｆｄｉｇｅｓｔｉｏｎｉｎｌｉｖｅｓｔｏｃｋ．ＴｈｅＦ２
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｈｙｂｒｉｄｏｆＮ５９２（ｂｍｒ６）ａｎｄＳａ（ｗｈｉｔｅｍｉｄｒｉｂ）ｔｏｍａｐｔｈｅｂｍｒ６ｇｅｎｅ．
Ｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｗｈｉｔｅａｎｄｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂｓｗａｓ３ｔｏ１ｉｎｔｈｅＦ２ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｅｂｍｒ６ｇｅｎｅｉｓａｓｉｎｇｌｅ
ｒｅｃｅｓｓｉｖｅｇｅｎｅ．Ｕｓｉｎｇ１７１ＳＳＲｍａｒｋｅｒｓａｎｄＦ２ｒｅｃｅｓｓｉｖｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，ｏｎｅＳＳＲ（ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｓ）ｍａｒｋｅｒ
（ｔｘｐ２９５）ｔｈａｔｌｉｎｋｅｄｗｉｔｈｔｈｅｂｍｒ６ｇｅｎｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄａｎｄｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅｗａｓ４．２ｃＭ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ
ｂｍｒ６ｇｅｎｅｗａｓｍａｐｐｅｄｔｏｔｈｅｓｅｖｅｎｔｈｌｉｎｋａｇｅｇｒｏｕｐｏｆｓｏｒｇｈｕｍｂｅｃａｕｓｅｔｈｅｔｘｐ２９５ｍａｒｋｅｒｗａｓｌｏｃａｔｅｄｏｎｔｈｉｓ
ｌｉｎｋａｇｅｇｒｏｕｐ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犛狅狉犵犺狌犿犫犻犮狅犾狅狉；ｂｒｏｗｎｍｉｄｒｉｂｇｅｎｅ（ｂｍｒ６）；ＳＳＲ；ｇｅｎｅｍａｐｐｉｎｇ
７７２第１９卷第５期 草业学报２０１０年