全 文 ：林业科学研究摇 圆园员猿渊专刊冤院园猿怨 园源源云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员猿冤专刊鄄园园猿怨鄄园远
黑杨三倍体 孕贼杂陨孕猿基因的克隆与功能分析
胡宝全袁 韦摇 韬袁 王春国袁 宋文芹袁 陈成彬鄢
渊南开大学生命科学学院袁天津摇 猿园园园苑员冤
收稿日期院 圆园员猿鄄园愿鄄圆圆
基金项目院 国家野怨苑猿冶计划项目渊圆园园怨悦月员员怨员园缘冤
作者简介院 胡宝全渊员怨愿圆要冤袁博士袁主要研究方向院分子细胞遗传学袁电话院园圆圆鄄圆猿缘园愿圆源员袁耘鄄皂葬蚤造院皂燥燥灶枣葬糟藻燥怎贼岳 员远猿援 糟燥皂袁南开大学生科
院生物楼 源园员 室渊猿园园园苑员冤援
鄢责任作者院 陈成彬渊员怨苑圆要冤袁博士袁主要研究方向院分子细胞遗传学袁电话院园圆圆鄄圆猿缘园愿圆源员袁耘鄄皂葬蚤造院糟澡藻灶糟遭岳 灶葬灶噪葬蚤援 藻凿怎援 糟灶援 南开大学生
科院生物楼 源园员 室渊猿园园园苑员冤援
摘要院本研究以黑杨中林 源远 三倍体为材料袁依据前期表达谱芯片的分析结果袁分离克隆得到三倍体材料中高表达基
因 孕贼杂陨孕猿袁该基因的编码产物为钙调磷酸酶 月渊悦葬造糟蚤灶藻怎则蚤灶 月鄄造蚤噪藻 孕则燥贼藻蚤灶泽袁简称 悦月蕴冤的靶蛋白遥 随后构建了双元表
达载体 责砸陨员园员鄄孕贼杂陨孕猿袁并成功的转入拟南芥中遥 经 择砸栽鄄孕悦砸表达分析和表型观察袁发现 孕贼杂陨孕猿 在拟南芥中异源过
表达会抑制胚和果荚的发育尧促进根的快速伸长遥 推测该基因在黑杨三倍体中的表达升高袁可能会参与黑杨三倍体
的营养生长期的调控并促进根的发育遥
关键词院黑杨曰三倍体曰孕贼杂陨孕猿曰基因表达
中图分类号院杂苑员愿援 源远 文献标识码院粤
酝燥造藻糟怎造葬则 悦造燥灶蚤灶早 葬灶凿 云怎灶糟贼蚤燥灶 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 孕贼杂陨孕猿 郧藻灶藻
枣则燥皂 孕燥责怎造怎泽 伊 藻怎则葬皂藻则蚤糟葬灶葬 糟造援 耶在澡燥灶早造蚤灶 源远爷栽则蚤责造燥蚤凿
匀哉 月葬燥鄄择怎葬灶袁 宰耘陨 栽葬燥袁 宰粤晕郧 悦澡怎灶鄄早怎燥袁 杂韵晕郧 宰藻灶鄄择蚤灶袁 悦匀耘晕 悦澡藻灶早鄄遭蚤灶
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 晕葬灶噪葬蚤 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 栽蚤葬灶躁蚤灶摇 猿园园园苑员袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 粤糟糟燥则凿蚤灶早 贼燥 贼澡藻 责则藻造蚤皂蚤灶葬则赠 则藻泽怎造贼泽 燥枣 皂蚤糟则燥葬则则葬赠 葬灶葬造赠泽蚤泽袁 葬 澡蚤早澡 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 早藻灶藻袁 孕贼杂陨孕猿袁 憎葬泽 糟造燥灶藻凿
枣则燥皂 孕燥责怎造怎泽 藻怎则葬皂藻则蚤糟葬灶葬 贼则蚤责造燥蚤凿袁 憎澡蚤糟澡 早藻灶藻则葬贼藻凿 枣则燥皂 糟则燥泽泽藻泽 遭藻贼憎藻藻灶 贼澡藻 皂葬贼藻则灶葬造 责葬则藻灶贼 孕援 凿藻造贼燥蚤凿藻泽 葬灶凿 贼澡藻
责燥造造藻灶 责葬则藻灶贼 孕援 灶蚤早则葬援 栽澡藻 遭蚤灶葬则赠 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 增藻糟贼燥则袁 责砸陨员园员鄄孕贼杂陨孕猿袁 憎葬泽 糟燥灶泽贼则怎糟贼藻凿 葬灶凿 贼则葬灶泽枣燥则皂藻凿 蚤灶贼燥 粤则葬遭蚤鄄
凿燥责泽蚤泽援 杂燥 枣葬则袁 贼澡藻 孕贼杂陨孕猿 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 责造葬灶贼泽 憎藻则藻 燥遭泽藻则增藻凿 贼澡藻 则藻皂葬则噪葬遭造藻 责澡藻灶燥贼赠责蚤糟 糟澡葬灶早藻泽 憎蚤贼澡 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 燥枣 藻皂鄄
遭则赠燥 葬灶凿 糟葬责泽怎造藻 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 蚤皂责则燥增藻皂藻灶贼 则燥燥贼 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼援 栽澡藻则藻枣燥则藻袁 陨贼 蚤泽 泽责藻糟怎造葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 则蚤泽藻泽 燥枣 孕贼杂陨孕猿
藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 皂葬赠 责葬则贼蚤糟蚤责葬贼藻 蚤灶 贼澡藻 则藻早怎造葬贼蚤燥灶 燥枣 增藻早藻贼葬贼蚤增藻 早则燥憎贼澡 葬灶凿 责则燥皂燥贼藻 则燥燥贼 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 蚤灶 孕援 藻怎则葬皂藻则蚤糟葬灶葬
贼则蚤责造燥蚤凿援
运藻赠 憎燥则凿泽院 孕燥责怎造怎泽 藻怎则葬皂藻则蚤糟葬灶葬曰 贼则蚤责造燥蚤凿曰 孕贼杂陨孕猿曰 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶
杨树为落叶多年生高大乔木袁雌雄异株袁属于杨
柳科渊杂葬造蚤糟葬糟藻葬藻冤杨属渊孕燥责怎造怎泽冤袁广泛生长于北半球
各大陆遥 杨属植物又分为五派袁分别为黑杨渊粤蚤早藻蚤鄄
则燥泽冤袁白杨渊蕴藻怎糟藻冤袁大叶杨渊蕴藻怎糟燥蚤凿藻泽冤袁青杨渊栽葬糟葬鄄
皂葬澡葬糟葬冤和胡杨渊栽怎则葬灶早葬冤遥 黑杨派天然品种不多袁
但经济价值和遗传价值极高袁目前各国的杨属栽培
品种中 怨园豫以上都源于黑杨派咱员袁圆暂 遥 多倍体来源于
染色体组的加倍袁而形成多倍体的亲本由于亲缘关
系的远近袁或多或少也存在差异袁因此多倍体植物往
往包含杂合性和基因组加倍的双重优势遥 杨树三倍
体不只是在人工育种中被发现袁在杨树种群的自然
繁衍中也发现三倍体的出现咱猿暂 遥 与一般二倍体相
比袁三倍体杨树表现出更快的生长速度尧更大的叶片
和更活跃的生理生化活动袁并且杨树种群中出现的
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
三倍体有利于提高杨树群体的进化和生态竞争
力咱源 原 缘暂 袁但有关黑杨三倍体优良性状形成的过程和
原因则研究较少遥
自 员怨愿远 年袁世界首例转基因树种要要要白杨 晕悦鄄
缘猿猿怨 在美国诞生以来袁此后在多个树种开展的转基
因研究均取得成就咱远暂 遥 全世界范围内袁愿园豫的实验
室和大田实验来源于杨属袁松属袁桉属袁云杉属和枫
香属的树木袁其中杨属是树木转基因研究得最多的
属袁占了将近一半的比例遥 杨树已经成为树木基因
工程的模式树种咱苑暂 遥 杨树基因组测序完成后袁促进
了杨树基因功能研究的快速发展袁大量杨树基因被
克隆并进行了功能分析遥 拟南芥 杂陨孕猿 又称为
悦陨孕运远袁是一种能与钙调磷酸酶 月渊悦月蕴冤相互作用的
激酶遥 悦月蕴作为 悦葬圆 垣的感受器袁本身没有激酶结构
域袁发挥调控作用必须通过结合其他蛋白袁而 悦陨孕运
是 悦月蕴 唯一的结合蛋白袁两者共同构成钙离子的
悦月蕴 辕 悦陨孕运信号途径袁对植物的生长发育有着重要
的作用咱愿暂 遥 高等植物的生长发育过程需要钙离子信
号袁如花粉发育和花粉管伸长等都需要钙离子信号袁
同时 悦葬圆 垣还参与生物和非生物胁迫的信号传递等
过程咱怨 原 员员暂 遥 因此对植物细胞中 杂陨孕猿 基因进行进一
步的研究袁可以更深入的了解植物的生长发育过程遥
到目前为止袁各国研究者已经从不同物种中分离克
隆出了 杂陨孕猿 基因袁并对其功能进行了验证咱员圆 原 员缘暂 袁然
而尚未见有关黑杨三倍体 杂陨孕猿 基因的研究报道遥
本研究组在前期工作中以黑杨三倍体尧二倍体为
材料袁利用 粤枣枣赠皂藻贼则蚤曾 和 晕蚤皂遭造藻郧藻灶 基因芯片技术分
析了黑杨三倍体和二倍体叶片基因的表达差异遥 本
实验在三倍体材料表达上调的转录本中袁根据序列比
对结果获得了 孕贼杂陨孕猿基因的序列全长袁设计引物后从
黑杨三倍体材料中克隆到了 孕贼杂陨孕猿基因袁构建表达载
体转入拟南芥后袁通过检测植株的发育情况和表型变
化袁对 孕贼杂陨孕猿基因在黑杨三倍体中的功能进行了预
测袁从而为黑杨功能基因组以及黑杨三倍体优良性状
形成过程的研究提供了有价值的资料遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 材料
实验材料为自然条件下生长的黑杨三倍体
渊孕燥责怎造怎泽 伊 藻怎则葬皂藻则蚤糟葬灶葬 糟造援 耶在澡燥灶早造蚤灶 源远爷冤袁由中国
林业科学院齐力旺研究员提供遥 大肠杆菌渊耘泽糟澡藻鄄
则蚤糟澡蚤葬 糟燥造蚤冤菌株 阅匀缘琢袁农杆菌菌株 渊 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂
贼怎皂藻枣葬糟蚤藻灶泽冤蕴月粤源源园源 为本实验室保存袁拟南芥为哥
伦比亚生态型渊粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬袁悦燥造鄄园冤袁表达载
体 责砸陨员园员鄄粤晕袁限制性内切酶和 栽源 连接酶购自
栽葬运葬砸葬公司袁栽粤 克隆载体及感受态购自北京全式
金公司袁质粒提取及琼脂糖凝胶回收试剂盒购自天
根生物遥
员援 圆摇 表达载体构建及转化
员援 圆援 员摇 基因克隆摇 三倍体黑杨总 砸晕粤的提取参照
运蚤藻枣藻则等人的方法咱员远暂 袁并做稍微修改遥 随后将 砸晕粤
反转录为 糟阅晕粤咱员远暂 遥
根据本实验室前期利用基因芯片技术分析黑杨
三倍体和二倍体叶片基因表达差异的结果袁依据芯片
探针对应的 耘杂栽 序列渊郧藻灶藻月葬灶噪 陨阅院月哉愿愿园怨怨怨冤比对
数据库袁获得编码假定蛋白序列的 皂砸晕粤 序列渊郧陨院
圆圆源园怨员苑猿圆冤袁然后依据 韵砸云设计带有限制性内切酶酶
切位点的引物渊杂藻灶泽藻 责则蚤皂藻则院缘忆鄄郧郧悦粤栽粤栽郧郧悦粤粤悦栽鄄
郧粤粤栽栽粤栽栽郧栽郧鄄猿忆袁 粤灶贼蚤鄄泽藻灶泽藻 责则蚤皂藻则院 缘忆鄄 粤栽郧郧郧鄄
栽粤悦悦悦栽郧栽栽粤悦栽栽粤栽悦栽悦栽悦粤粤鄄猿忆冤袁上下游分别为
晕凿藻 陨和 运责灶 陨袁以 糟阅晕粤为模板进行 孕悦砸扩增遥
员援 圆援 圆摇 转基因载体构建及转化摇 孕悦砸 扩增获得的
目的片段进行 栽粤 克隆测序渊责耘粤杂再鄄栽员袁全式金冤袁
阳性克隆于 蕴月培养基扩增培养后提取质粒和空表
达载体渊责砸陨员园员鄄粤晕冤分别进行双酶切袁酶切体系为
圆园 滋蕴渊含质粒 员 滋早尧限制性内切酶各 员 滋蕴冤袁于 猿苑益
温浴 员 澡后袁琼脂糖凝胶电泳回收目的基因片段和
表达载体袁于 员远益连接过夜袁连接体系 员园 滋蕴渊含 栽源
造蚤早葬泽藻 员 滋蕴尧目标基因和表达载体各 源 滋蕴冤袁连接产
物转入大肠杆菌感受态遥
使用基因扩增原引物袁孕悦砸鉴定阳性克隆后袁接
入 缘 皂蕴 蕴月 液体培养基中袁猿苑益培养过夜袁提取质
粒袁使用对应的限制性内切酶进行双酶切和单酶切
鉴定袁酶切体系同上遥 最后利用冻融法将正确连接
的重组质粒转入农杆菌 蕴月粤源源园源院将 员园 滋蕴 构建好
的质粒 阅晕粤 加入 圆园园 滋蕴 农杆菌感受态细胞中混
匀曰冰浴 猿园 皂蚤灶 后袁液氮迅速冷冻 猿 缘 皂蚤灶袁立即
猿苑益水浴 缘 皂蚤灶曰加入 员 皂蕴 再耘月渊无抗生素冤培养基袁
圆愿益震荡培养 源 澡曰缘 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 猿 皂蚤灶袁弃去
部分上清袁重悬细胞袁涂布于 再耘月 固体渊卡那霉素
员园园 皂早窑皂蕴 原员袁利福平 员圆缘 皂早窑皂蕴 原员 冤培养基上袁
圆愿益培养 源愿 澡以上曰挑选克隆于液体 再耘月渊卡那霉
素 员园园 皂早窑皂蕴 原员袁利福平 员圆缘 皂早窑皂蕴 原员 冤中袁圆愿益
培养袁孕悦砸 鉴定阳性克隆后袁加入等体积 源园豫甘油
再耘月袁于 原愿园益保存备用遥
员援 猿摇 拟南芥转基因及筛选
重组质粒 责砸陨员园员鄄孕贼杂陨孕猿 通过农杆菌花浸转化
园源
专刊 胡宝全等院黑杨三倍体 孕贼杂陨孕猿 基因的克隆与功能分析
法转入拟南芥中院将处于花蕾期的植株渊为提高转化
率减去果荚冤全部浸入一定浓度的农杆菌重悬液中
员园 泽后袁取出轻甩液体 猿 缘 泽 后袁用保鲜膜将整个
植株包严曰置于低温低光照条件下袁平躺 圆源 澡 后袁竖
直放置 圆 凿 后去掉保鲜膜曰随后在正常培养条件下
培养渊湿度在 源园豫 缘园豫 尧温度为 圆圆益尧光照时间 辕
黑暗时间为 员远 澡 辕 愿 澡冤袁待种子成熟后收获尧干燥遥
种子经春化和除菌后点种于含 园援 愿豫琼脂尧猿缘
滋早窑皂蕴 原员卡那霉素的 员 辕 圆 酝杂 培养基上袁于光照培
养箱中袁圆园益光照 员远 澡 条件下培养遥 数天后袁挑选
绿色阳性植株转入土壤中袁覆膜 圆 猿 凿遥
员援 源摇 转基因植株的鉴定及表型观察
员援 源援 员摇 定量 孕悦砸检测目的基因表达量摇 采用改良
的 悦栽粤月 法提取拟南芥基因组 阅晕粤咱员苑暂 曰拟南芥总
砸晕粤 的提取及反转录方法参见 员援 圆援 员遥 以基因组
阅晕粤为模板袁通过扩增 晕孕栽 陨陨基因来鉴定转基因植
株曰根据 孕贼杂陨孕猿 基因设计定量引物渊杂藻灶泽藻 责则蚤皂藻则院缘忆鄄
悦悦悦粤栽悦栽栽悦粤栽悦粤郧悦粤郧悦粤粤栽鄄猿忆袁 粤灶贼蚤鄄泽藻灶泽藻 责则蚤皂鄄
藻则院缘忆鄄郧郧栽悦粤栽郧郧悦栽粤郧悦粤粤郧栽悦郧粤粤鄄猿忆冤袁内参采用
拟南芥看家基因 粤糟贼蚤灶渊杂藻灶泽藻 责则蚤皂藻则院缘忆鄄栽悦悦悦栽悦粤郧鄄
悦粤悦粤栽栽悦悦粤郧悦鄄猿忆袁 粤灶贼蚤鄄泽藻灶泽藻 责则蚤皂藻则院缘忆鄄郧粤栽栽悦悦栽鄄
郧郧粤悦悦栽郧悦悦栽悦粤栽鄄猿忆冤袁进行转基因的定量 孕悦砸 检
测院定量 孕悦砸 反应采用罗氏公司的 云葬泽贼杂贼葬则贼 杂再月砸
郧则藻藻灶 酝葬泽贼藻则试剂盒袁反应程序在伯乐公司的 酝赠 陨匝
定量 孕悦砸仪上进行院怨缘益预变性 猿园 泽袁怨缘益变性 缘 泽袁
远园益退火 圆缘 泽袁苑圆益延伸 猿园 泽袁源缘 个循环袁怨缘益变性 员
皂蚤灶袁缘缘益 员 皂蚤灶袁缘缘益开始 愿员 个循环袁每个循环上
升 园援 缘益到 怨缘益遥 定量数据分析使用伯乐软件袁采
用驻驻悦栽 的分析方法计算相对表达值遥员援 源援 圆摇 表型检测摇 通过检测转基因拟南芥的生长
状况尧株高尧种子数目及其育性尧植株胚和果荚发育
情况来推测 孕贼杂陨孕猿 基因的功能遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 孕贼杂陨孕猿 基因的克隆与过表达载体构建
黑杨三倍体中表达上调基因 月哉愿愿园怨怨怨袁编码假
定蛋白袁类似于拟南芥 杂陨孕猿渊悦月蕴鄄蚤灶贼藻则葬糟贼蚤灶早 泽藻则蚤灶藻 辕
贼澡则藻燥灶蚤灶藻鄄责则燥贼藻蚤灶 噪蚤灶葬泽藻 远袁悦陨孕运冤袁该蛋白为钙调磷酸
酶 月渊悦葬造糟蚤灶藻怎则蚤灶 月鄄造蚤噪藻 孕则燥贼藻蚤灶泽袁简称 悦月蕴冤的靶蛋
白袁悦月蕴 辕 悦陨孕运 信号途径传导钙离子信号遥 以黑杨
三倍体叶片 糟阅晕粤为模板进行 孕悦砸 扩增袁获得了与
预期大小一致的 员援 圆 噪遭 左右明显扩增条带渊图 员冤遥
克隆测序结果表明该基因全长为 员 员愿圆 遭责渊图 圆冤袁编
码 猿怨猿 个氨基酸袁与毛果杨序列编码的蛋白一致袁将
此基因命名为 孕贼杂陨孕猿遥
图 员摇 孕贼杂陨孕猿 基因全长扩增图
图 圆摇 孕贼杂陨孕猿 基因开放读码框及蛋白序列
员源
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
孕贼杂陨孕猿 基因重组质粒 责砸陨员园员鄄孕贼杂陨孕猿 双酶切尧单
酶切鉴定结果如图 猿粤袁酶切产物大小与目标基因吻
合院双酶切产物大尧小片段分别为 员园 源园园 遭责和 员 员园园
遭责左右曰单酶切片段约为 员员 缘园园 遭责遥 重组质粒转入
农杆菌鉴定结果如图 猿月所示院分别使用载体通用引
物和基因全长扩增引物进行验证袁挑选结果都为阳
性的克隆进行转基因遥
图 猿摇 粤院重组质粒构建酶切图渊员 为双酶切袁圆 为单酶切冤曰月院农
杆菌 孕悦砸鉴定图渊员尧猿 为基因特异引物袁圆尧源 为通用特异引物冤
圆援 圆摇 转基因拟南芥筛选与外源基因表达
孕贼杂陨孕猿 基因重组质粒转入拟南芥袁间隔 源 凿 连
续转化 圆 次袁总转化效率在 园援 员豫 员豫左右遥 阳性
转基因植株筛选结果如图 源 所示袁转基因 云园 代萌发
在含卡那霉素的 酝杂 培养基上袁植株保持绿色根系
发育良好的为阳性转基因植株遥 转基因植株在筛选
培养基上长出 源 片真叶后袁提取叶片 阅晕粤 和 砸晕粤袁
鉴定并分析转入基因的表达遥 如图 缘粤 所示袁对
晕孕栽陨陨基因扩增后获得与预期大小一致的片段渊苑园园
遭责左右冤袁确定相应植株为阳性转基因植株曰择鄄孕悦砸
检测分析拟南芥中转入基因的表达水平袁结果见图
缘月所示袁转入基因的表达正常袁表达水平远高于野
生型拟南芥遥 转基因 云员 经筛选培养基筛选袁分离比
在 圆援 猿 到 圆援 愿 之间袁接近 猿颐 员 的分离比遥
图 源摇 转基因拟南芥 云园 代阳性植株筛选
图 缘摇 粤院晕孕栽 陨陨基因鉴定转基因植株渊员 为野生型拟南芥曰圆尧猿尧源 为
孕贼杂陨孕猿冤曰月院转基因植株 孕贼杂陨孕猿 的表达水平分析渊悦燥灶贼则燥造 为对照组
野生型植株曰孕贼杂陨孕猿 为转基因阳性植株冤
圆援 猿摇 转基因植株表型观察分析
如图 远 所示袁孕贼杂陨孕猿 过表达植株生长速度与野
生型相当袁但转基因植株根系生长相对于野生型袁有
较明显的优势袁酝杂 培养基上生长的转基因植株袁源
片真叶期时袁根的长度约比野生型提高 源园豫左右
渊图 远月冤遥 在开花期及成熟期转基因植株茎高比野
生型拟南芥高约 员园豫左右渊如图 苑冤院在结荚期发现
转基因植株胚及果荚发育受到影响袁表现为果荚短
小袁空瘪率高袁成熟种子数约减少 愿园豫左右袁但成熟
的种子育性没有明显变化遥
图 远摇 孕贼杂陨孕猿 转基因拟南芥根生长与野生型的比较渊粤 为野生型渊宰栽冤和阳性转基因植株渊孕贼杂陨孕猿冤的形态曰月 为野生型
渊宰栽冤和阳性转基因植株渊孕贼杂陨孕猿冤根长的平均植冤
圆源
专刊 胡宝全等院黑杨三倍体 孕贼杂陨孕猿 基因的克隆与功能分析
图 苑摇 孕贼杂陨孕猿 转基因植株表型渊粤 为野生型渊宰栽冤渊左冤和阳性转基因渊孕贼杂陨孕猿冤 渊右冤植株形态曰月 为野生型渊宰栽冤
渊上冤和阳性转基因渊孕贼杂陨孕猿冤渊下冤果荚形态曰悦为野生型渊宰栽冤和阳性转基因植株渊孕贼杂陨孕猿冤果荚长度的平均值冤
猿摇 讨论
本研究中将三倍体黑杨来源的 孕贼杂陨孕猿 转入拟
南芥袁使该基因在拟南芥中组成型表达遥 结果表明袁
该基因高表达促使拟南芥根生长伸长更快遥 而拟南
芥本身的 悦陨孕运远 基因的功能也与根发育有关袁抑制
拟南芥 粤贼悦陨孕运远 基因的表达袁显著影响生长素从茎
向根和根向基底的运输袁引起侧根发育迟缓袁子叶融
合袁胚轴肿大等表型袁而过表达则会促进根的发育和
伸长咱愿袁员员暂 遥 黑杨 孕贼杂陨孕猿 的转基因拟南芥的表型观
察具有相似的表型袁这说明克隆到的黑杨基因编码
的蛋白具有与 悦陨孕运 相似的功能遥 在三倍体各组织
的表达谱芯片分析中袁发现的生长素动态平衡尧运输
和生长素响应等基因的表达量上调袁可能与黑杨 孕贼鄄
杂陨孕猿 的表达量上升有关袁而 孕贼杂陨孕猿 是否能促进了生
长素的运输还有待进一步试验分析遥 孕贼杂陨孕猿 转基因
拟南芥的另一个比较明显的表型是影响种子发育袁
而其他研究者对拟南芥 悦陨孕运的研究中袁过表达拟南
芥来源的 悦陨孕运远袁未见报道其能影响花器官和种子
的发育袁说明 孕贼杂陨孕猿 具有部分不同于拟南芥 悦陨孕运远
的功能遥
国内外的研究表明袁钙离子信号通路参与植物
花粉和花粉管的发育袁花粉管的发育过程中细胞没
有分裂的情况下发生极长的单向延伸袁这种延伸需
要多种离子共同作用袁这些离子的调控网络中钙离
子起着中间调控和控制作用咱员愿 原 圆员暂 遥 而钙离子的调
控途径中参与花粉发育调控的袁主要是钙调素和钙
依赖性蛋白激酶控制的钙离子信号通路袁目前为止
还未见文献中有报道 悦月蕴 辕 悦陨孕运 途径参与这一过
程咱圆圆暂 遥 孕贼杂陨孕猿 异源转入拟南芥导致其种子发育障
碍袁说明来自杨树的 悦陨孕运远 同源基因具有参与花器
官发育或种子胚发育过程的功能遥 而对正常的番茄
的各个主要器官组织的 悦陨孕运 家族基因的表达分析
中袁发现 悦陨孕运圆 在花器官中富集袁表达量明显高于其
他组织中的表达咱圆猿暂 袁说明 悦月蕴 辕 悦陨孕运 途径很有可能
参与开花和胚发育过程的调控遥 以上分析说明袁孕贼鄄
杂陨孕猿 可能参与根和胚发育调控过程遥
参考文献院
咱员暂 杂贼藻贼贼造藻则 砸袁 在泽怎枣枣葬 蕴袁 砸援 宰怎援 栽澡藻 则燥造藻 燥枣 澡赠遭则蚤凿蚤扎葬贼蚤燥灶 蚤灶 贼澡藻 早藻灶藻贼蚤糟
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贼蚤燥灶泽 枣燥则 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼 葬灶凿 悦燥灶泽藻则增葬贼蚤燥灶 渊孕葬则贼 陨冤袁 员怨怨远袁 愿苑 原 员员圆
咱圆暂 李善文袁 张志毅袁 何承忠援 中国杨树杂交育种研究进展咱 允暂 援 世
猿源
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
界林业研究袁 圆园园源袁 员苑渊圆冤院 猿苑 原 源员
咱猿暂 月则葬凿泽澡葬憎 允则 匀袁 杂贼藻贼贼造藻则 砸援 杂贼藻贼贼造藻则援 酝燥造藻糟怎造葬则 早藻灶藻贼蚤糟泽 燥枣 早则燥憎贼澡 葬灶凿
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则藻贼蚤糟葬造 葬灶凿 粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 员怨怨猿袁 愿远渊圆 原 猿冤院 猿园员 原 猿园苑
咱源暂 蕴蚤 再袁 运葬灶早 载袁 宰葬灶早 杂袁 藻贼 葬造援 栽则蚤责造燥蚤凿 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 蚤灶 孕燥责怎造怎泽 葬造遭葬 曾
孕援 早造葬灶凿怎造燥泽葬 遭赠 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 凿燥怎遭造蚤灶早 燥枣 枣藻皂葬造藻 早葬皂藻贼藻泽 咱允暂 援 杂蚤造鄄
增葬藻 郧藻灶藻贼蚤糟葬袁 圆园园愿袁 缘苑渊员冤院 猿苑
咱缘暂 宰怎袁 砸援 匝怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 早藻灶藻贼蚤糟 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 造藻葬枣 泽蚤扎藻 葬灶凿 泽澡葬责藻 蚤灶 葬
皂蚤曾藻凿 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 贼则蚤责造燥蚤凿 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 燥枣 孕燥责怎造怎泽咱 允暂 援 郧藻灶藻贼蚤糟葬造 则藻鄄
泽藻葬则糟澡袁 圆园园园袁 苑缘渊圆冤院 圆员缘 原 圆圆圆
咱远暂 杂藻凿藻则燥枣枣袁 砸援 砸藻早怎造葬贼燥则赠 泽糟蚤藻灶糟藻 蚤灶 枣燥则藻泽贼 遭蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠咱 允暂 援 栽则藻藻
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